GB 23200.103-2016 （代替 SN∕T 2574-2010）食品安全国家标准 蜂王浆中双甲脒及其代谢产物残留量的测定 气相色谱-质谱法.pdf

ICS点击此处添加 ICS 号点击此处添加中国标准文献分类号中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准GBGB 23200.1032016代替SN/T 25742010食品安全国家标准蜂王浆中双甲脒及其代谢产物残留量的测定气相色谱-质谱法National food safety standardsDetermination of amitraz and its metabolites residues in royal jellyGas chromatography - mass spectrometry2016-12-18 发布2017-06-18 实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会中华人民共和国农业部发布国家食品药品监督管理总局GB 23200.1032016I前前言言本标准代替SN/T 2574-2010 进出口蜂王浆中双甲脒及其代谢产物残留量检测方法气相色谱-质谱法。本标准与SN/T 2574-2010相比，主要变化如下：标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式；标准名称中“进出口蜂王浆”改为“蜂王浆”；标准范围中增加“其它食品可参照执行”。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN/T 2574-2010。GB 23200.10320161食品安全国家标准食品安全国家标准蜂王浆中双甲脒及其代谢产物残留量的测定蜂王浆中双甲脒及其代谢产物残留量的测定 气相色谱气相色谱- -质谱法质谱法1 1范围范围本标准规定了蜂王浆中双甲脒及其代谢产物残留量的气相色谱-质谱测定及确证方法。本标准适用于蜂王浆中双甲脒及其代谢产物残留量的测定和确证，其它食品可参照执行。2 2规范性引用文件规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 3原理原理样品经酸水解，碱化后用正己烷-乙醚（2+1，体积比）混合溶剂提取，酸、碱液-液分配净化，气相色谱-质谱测定和确证，外标法定量。4 4试剂和材料试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为 符合GB/T 6682中规定的一级水。4.14.1试剂试剂4.1.1正己烷（C6H14）：色谱纯。4.1.2乙醚（C4H10O）：色谱纯。4.1.3丙酮（C3H6O）：色谱纯。4.1.4氯化钠（NaCl）：650 灼烧4 h，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。4.24.2溶液配制溶液配制4.2.1盐酸溶液（2.0 mol/L）：用移液管移取90 mL盐酸，加水稀释定容至500mL。4.2.2氢氧化钠溶液（10 mol/L）：称取40 g氢氧化钠, 加水溶解定容至100mL。4.34.3标准品标准品4.3.1双甲脒（amitraz, C19H23N3， ，CAS No： 33089-61-1,分子量为293）标准物质：纯度99%。4.3.22,4-二甲基苯胺（2,4-Dimethyl aniline, C8H11N， ，CAS No 95-68-1，分子量为121）标准物质：纯度99%。4.44.4标准溶液配制标准溶液配制4.4.1双甲脒标准溶液： 准确称取适量的双甲脒标准物质， 用丙酮配成浓度为100 g/mL的标准储备液。根据需要用丙酮稀释至适当浓度的标准工作液。保存于4冰箱内。4.4.22,4-二甲基苯胺标准溶液：准确称取适量的2,4-二甲基苯胺标准物质，用丙酮配成浓度为100g/mL的标准储备液。根据需要用丙酮稀释至适当浓度的标准工作液。保存于4冰箱内。5 5仪器和设备仪器和设备5.1气相色谱-质谱仪：配有电子轰击源（EI） 。5.2分析天平：感量 0.01 g 和 0.0001 g。5.3旋涡混合器。5.4离心机：转速大于 5 000 r/min。5.5套式恒温器：50200。5.6全玻璃回流装置。6 6试样制备与保存试样制备与保存取代表性样品约 500g，将其用力搅拌均匀，装入洁净容器内，密封，并标明标记，将试样于-18C冷冻保存。GB 23200.10320162在抽样和制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。注：以上样品取样部位按GB 2763附录A执行。7 7分析步骤分析步骤7.17.1 水解水解称取 4 g 试样(精确到 0.01 g)于 100 mL 烧瓶中，加 15 mL 盐酸溶液（4.5） ，于旋涡混合器上混匀。装上回流冷凝装置，120加热回流 2 h, 停止加热，在室温下继续通冷却水 15min，移至冰浴中冷却15min。7 7. .2 2提取和净化提取和净化将水解液转移到 50 mL 具塞离心管中，先加 10 mL 正己烷-乙醚（2+1，体积比）混合溶剂，再加 4mL 氢氧化钠溶液，涡旋混匀，在冰浴中冷却 5min，以 4000 r/min 离心 3 min。将上层有机相转移到另一 50 mL 具塞离心管中。水相用 210 mL 正己烷-乙醚（2+1，体积比）混合溶剂萃取 2 次。合并上层有机相。 用 25 mL 盐酸溶液萃取 2 次， 合并盐酸提取液并定容至 10mL， 分取 5mL 盐酸提取液于 10 mL具塞离心管中。加 2 mL 正己烷-丙酮（2+1，体积比）混合溶剂，2 mL 氢氧化钠溶液萃取 1 次，离心分层，上层有机相供气相色谱-质谱测定，外标法定量。7 7.3.3测定测定7 7.3.1.3.1气相色谱气相色谱- -质谱质谱参考参考条件条件a)色谱柱：DB-5ms 石英毛细管柱，30 m0.25 mm （i.d）0.25 m，或相当者；b)色谱柱温度：50保持 2 min，以 10/min 的升温速率升至 160，保持 1 min， 以 30/min的升温速率升至 320， 保持 5min；c)载气：氦气，纯度大于等于 99.999%，流速：1.0 mL/min；d)进样量：2 L；e)进样方式：脉冲不分流进样，脉冲压力 25 psi, 0.75 min 后开阀；f)溶剂延迟时间：8 min；g)进样口温度：250；h)接口温度：280；l)溶剂延迟时间：8 min；j)离子源：电子轰击源（EI） ；k)电离能量：70 eV；l)测定方式：选择离子监测方式；m)选择离子及相对丰度：见表 1。表 12，4-二甲基苯胺的选择离子和相对丰度选择离子(m/z)121（定量）12077相对丰度(%)10085.221.37.3.27.3.2定量测定定量测定根据样液中 2，4-二甲基苯胺含量的情况，选定与样液中 2，4-二甲基苯胺浓度相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中 2，4-二甲基苯胺响应值应在仪器测定的线性范围内。标准工作溶液和样液等体积穿插进样测定。在上述色谱条件下，2，4-二甲基苯胺的保留时间约为 10.0 mim，标准品的总离子流图参见附录 A 中图 A.1。7 7.3.3.3.3定性测定定性测定对标准溶液及样液均按 7.3.1 规定的条件进行测定， 如果样液与标准溶液在相同的保留时间有峰出现，则对其进行质谱确证，在扣除背景后的样品谱图中，所选择离子全部出现，同时所选择的离子的离子丰度比与标准品相关离子的相对丰度一致，波动范围符合表 2 的最大容许偏差之内（见表 2） ，可判定样品中存在 2，4-二甲基苯胺。被确证的样品可判定为 2，4-二甲基苯胺阳性检出。2，4-二甲基苯胺标准品的质谱图参见附录 A 中图 A.2。表表 2 2质谱相对离子丰度最大容许偏差质谱相对离子丰度最大容许偏差相对离子丰度（%基峰）50 %20 %至 50 %10 %至 20 %10 %容许的相对误差10 %15 %20 %50 %7 7.4.4空白试验空白试验GB 23200.10320163除不加试样外，均按上述测定步骤进行。8 8结果计算和表述结果计算和表述用色谱数据处理软件或按式（1）计算试样中双甲脒的残留含量：1.21 AcVX =（1）ASm式中：1.21由 2，4-二甲基苯胺分子量换算为双甲脒分子量的转换系数：X 试样中双甲脒残留量，单位为毫克每千克（mg/kg） ；A 样液中 2，4-二甲基苯胺的峰面积；c 标准工作液中 2，4-二甲基苯胺的浓度，单位为微克每毫升（g/mL） ；V 最终样液定容体积，单位为毫升（mL） ；AS标准工作液中 2，4-二甲基苯胺峰面积；m 最终样液所代表的试样量，单位为克（g） 。注：计算结果须扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。9 9精密度精密度9.1在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录C的要求。9.2在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录D的要求。1010定量限和回收率定量限和回收率10.110.1定量限定量限本方法的定量限为：0.01 mg/kg。1010.2.2回收率回收率本方法的回收率见附录 B。GB 23200.10320164附附 录录A A（资料性附录）（资料性附录）色谱图和质谱图色谱图和质谱图图 A.12，4-二甲基苯胺标物质的总离子流色谱图（浓度为 0.01 g/mL）图 A.22，4-二甲基苯胺标准物质的质谱图GB 23200.10320165附附录录 B B（资料性附录）（资料性附录）样品的添加浓度及回收率的实验数据样品的添加浓度及回收率的实验数据表表B.1B.1 样品的添加浓度及回收率的实验数据样品的添加浓度及回收率的实验数据化合物添加浓度/(mg/kg)回收率/%精密度/%双甲脒0.0176.7%88.29.80.0276.9 88.010.20.0578.490.49.0GB 23200.10320161附附录录 C（规范性规范性附录）附录）实验室内实验室内重复性要求重复性要求表表C.1 实验室内实验室内重复性要求重复性要求被测组分含量被测组分含量mg/kg精密度精密度%0.001360.0010.01320.010.1220.1118114GB 23200.10320162附附录录 D（规范性规范性附录）附录）实验室间实验室间再现性要求再现性要求表表D.1 实验室间实验室间再现性要求再现性要求被测组分含量被测组分含量mg/kg精密度精密度%0.001540.0010.01460.010.1340.1125119