维生素c含量测定方法综述ppt.pptx

,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,维生素c含量测定方法综述ppt,维生素c含量测定方法综述ppt,第1页,摘要,当前研究维生素,C,测定方法报道较多，如滴定法、光度分析法、高效液相色谱法等，各种方法各有特点。尤其是高效液相色谱法是多年来发展较快一个方法。本文对多年来相关维生素,C,测定方法进行了综述。,维生素c含量测定方法综述ppt,第2页,关键词,维生素,C,滴定法,光度分析法,高效液相色普法等,维生素c含量测定方法综述ppt,第3页,概述,维生素,C,是可溶于水无色结晶，是一个分子结构最简单维生素。维生素,C,有防治坏血病功效，所以在医药上常把它叫做抗坏血酸。维生素,C,能保持巯基酶活性和谷胱甘肽还原状态，起解毒作用等。其广泛存在于植物组织中，新鲜水果、蔬菜，尤其是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑橘等食品中含量尤为丰富。准确测定维生素,C,含量，对饮食健康、医疗保健都含有十分主要意义。多年来报道测定方法主要有滴定法、光度法、高效液相色谱法等。,维生素c含量测定方法综述ppt,第4页,维生素,C,结构式,维生素,C,：六碳多羟基内酯,维生素c含量测定方法综述ppt,第5页,测定方法,滴定法测定,维生素,C,分光光度测,定维生素,C,高效液相色谱法,测定维生素,C,维生素c含量测定方法综述ppt,第6页,1,滴定法测定维生素,C,1.1 2,，,6,一二氯靛酚法,1.2,微量滴定法,维生素c含量测定方法综述ppt,第7页,2,6-,二氯酚靛酚滴定法测定维生素,C,含量,其能还原,2,6-,二氯酚靛酚染料。,维生素,C,含有还原性烯二醇基，咱们经过氧化还原滴定来测定维生素,C,维生素c含量测定方法综述ppt,第8页,2,，,6-,二氯靛酚法,原理,2,，,6-,二氯靛酚是一个染料，其氧化型在,酸性,介质中为,红色,，,碱性,介质中为,蓝色,，与,Vc,反应后，生成无色还原型酚亚胺，所以，在酸性条件下，用,2,，,6-,二氯靛酚滴定至溶液显,玫瑰红色,，即为终点；无需另加指示剂。,维生素c含量测定方法综述ppt,第9页,2,，,6-,二氯靛酚法,方法,取本品适量（约相当于Vc50mg），用适量水溶解，置100ml量瓶中，加,偏磷酸-醋酸试液,20ml,再用水稀释置刻度，摇匀；,精密量取稀释液适量（约相当于Vc2mg）置50ml锥形瓶中,加,偏磷酸-醋酸试液,5ml,用,2,6-二氯靛酚滴定液,滴定,至溶液显,玫瑰红色,并连续5s不褪；,空白试验：,取偏磷酸-醋酸试液5.5ml，加水15ml，用2，6-二氯靛酚滴定液滴定。,计算：,(V-V,0,),F,T,W,W,标示量,标示量,%=,反应摩尔比,100,维生素c含量测定方法综述ppt,第10页,维生素,C 2,6-,二氯酚靛酚 维生素,C 2,6-,二氯酚靛酚,（还原型）（氧化型，粉红色）（氧化型）（还原型）,+,+,=,2,6-,二氯酚靛酚染料钠盐在水溶液中显蓝色，在酸性溶液中呈红色，被还原后红色消失。,维生素c含量测定方法综述ppt,第11页,碘量法,原理：,因为维生素,C,分子中烯二醇基有极强还原性，能被碘氧化，用碘滴定,VC,EC,6,H,6,O,6,/C,6,H,8,O,6,=0.18 ,EI,2,/I,-,=0.535,终点：,淀粉为指示剂，溶液出现稳定蓝色即为终点,反应式：,维生素c含量测定方法综述ppt,第12页,碘量法,碘浓度由已知浓度,N,a,2,S,2,O,3,标准溶液标定,反应式：,计算式：,Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc)*100%,维生素c含量测定方法综述ppt,第13页,碘量法,注意！,测定时：加,HAC,使溶液呈弱酸性,原因,:,(1),Vc,还原性很强，在空气中很轻易被氧化，在碱性介质中更甚,(2)I2,在碱性介质中会发生歧化反应,加,HAC,可降低,VC,副反应，防止试验误差,维生素c含量测定方法综述ppt,第14页,电位滴定法,原理,：依据滴定过程中电池电动势改变来确定反应终点,.,Pt,为指示电极，甘汞作参比电极,E,池,E,+,-E,-,+E,液接电位,EI,2,/I,-,+k(,常数,),维生素c含量测定方法综述ppt,第15页,电位滴定法,原理,(,详细来说,:),伴随滴定剂加入，因为发生化学反应，待测离子浓度将不停改变；,从而指示电极电位发生对应改变；,造成电池电动势发生对应改变；,计量点附近离子浓度发生突变；引发电位突变，所以由测量工作电池电动势改变就能确定终点。,维生素c含量测定方法综述ppt,第16页,电位滴定法,右图：电位滴定法基础仪器装置,计算式：,(,与碘量法相同,),Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc)*100%,优点：,处理了滴定分析中碰到有色或浑浊溶液时无法指示终点问题,维生素c含量测定方法综述ppt,第17页,2,分光光度测定维生素,C,2.1 2,，,4,一二硝基苯肼分光光度法,2.2,钼蓝比色法,2.3,其它方法,维生素c含量测定方法综述ppt,第18页,2,，,4,一二硝基苯肼分光光度法,原理：,维生素,C,在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸,反应式：,维生素c含量测定方法综述ppt,第19页,2,，,4,一二硝基苯肼分光光度法,pH5,脱氢抗坏血酸内环开裂，形成二酮古洛糖酸,二酮古洛糖酸,维生素c含量测定方法综述ppt,第20页,2,4,一二硝基苯肼分光光度法,脱氢抗坏血酸，二酮古洛糖酸均能和,2,，,4,二硝基苯肼生成可溶于硫酸脎,脎在,500nm,波长有最大吸收,脎结构：,维生素c含量测定方法综述ppt,第21页,分光光度法,样品溶液与,VC,标准溶液按上述方法一样处理,500nm,处测吸光度,下列图：,721,型分光光度计,维生素c含量测定方法综述ppt,第22页,钼蓝比色法,马占玲等用钼蓝比色法测定青椒中还原型维生素,C,含量基础原理和方法。测定波长,839 nm,，维生素,C,含量在,0,004,0,024 mg,mL,范围内呈线性关系，回收率为,97,2,。该方法简单、快速、准确。,维生素c含量测定方法综述ppt,第23页,钼蓝比色法,逯家辉等提出了一个测定维生素,C,新方法，它是基于,Folin B,试剂与抗坏血酸在,pH=3,三氯乙酸酸性介质中反应生成脱氢抗坏血酸，反应产物在,910 nm,波优点有最大吸光度进行定量分析。该方法线性范围为,0,50,0g,mL,，相关系数,r=0,999 86,，回收率为,98,12,102,15,。,维生素c含量测定方法综述ppt,第24页,差示旋光法,原理,方法,结果,维生素,C,片在不一样,PH,值溶液中旋光度有显著差异，而片剂辅料旋光度保持不变,差示旋光法消除辅料影响，直接测出该制剂含量,讨论,与,维生素c含量测定方法综述ppt,第25页,差示旋光法,方法,TEXT,1,）标准溶液配制,准确称取维生素,C,精制品,5.0g,，乙二胺四乙酸钠,0.37g,置于,100mL,容量瓶中,用新沸冷却蒸馏水溶解,加水到指定刻度,配制成,50mg/mL,维生素,C,标准溶液。,TEXT,原理,方法,结果,讨论,与,维生素c含量测定方法综述ppt,第26页,差示旋光法,2,）比旋光度与溶液,pH,值关系,量取,10.0mL,维生素,C,标准液于,50mL,量瓶中,用水稀释至,50mL,。测定溶液,pH,及旋光度,然后逐次分批加入氢氧化钠固体,(,每次约,50mg),每次溶解后,测定一次溶液,pH,及其旋光度,得到维生素,C,溶液,pH,及旋光度关系,原理,方法,结果,讨论,与,维生素c含量测定方法综述ppt,第27页,差示旋光法,选定,pH,为,2.2,和,6.2,维生素c含量测定方法综述ppt,第28页,差示旋光法,2）差示旋光度与溶液浓度关系,吸收2.0、4.0、8.0、16.0、20.0mL维生素C标准液各两份,分别置于50mL容量瓶,一份用,pH2.2盐酸盐缓冲液,定容；一份用,pH6.2磷酸盐缓冲液,定容，静置3min后,用220mm测定管，以前者为空白，测定后者差示旋光度(a)。,文件结果,：线性方程为,a=0 205*C+005，r=09964,原理,方法,结果,讨论,与,维生素c含量测定方法综述ppt,第29页,差示旋光法,3）辅料干扰试验,取混合辅料20mg(淀粉、硬脂酸镁、E,D,TA、糊精等按处方百分比混匀)两份,分别置于50mL容量瓶,一份用,pH2.2盐酸盐缓冲液,定容,一份用,pH6.2磷酸盐缓冲液,定容,滤去不溶物,滤液在两种pH值测定差示旋光度。,文件结果,：辅料差示旋光度为零，说明辅料对维生素C含量测定不干扰。,原理,方法,结果,讨论,与,维生素c含量测定方法综述ppt,第30页,差示旋光法,4）稳定性试验,同一测试样品，在120min内，每隔3min测定一次差示旋光度。,文件结果,：差示旋光度基础不变,原理,方法,结果,讨论,与,维生素c含量测定方法综述ppt,第31页,差示旋光法,5,）回收率试验,精密称取维生素,C,精制品,500.0mg,两份，分别置于,50mL,容量瓶中，各加入,20mg,辅料，分别用盐酸盐缓冲液及磷酸盐缓冲液配制成,50mL,溶液，测定差示旋光度。,文件结果,：平均回收率为,97.8,，,变异系数,cv,为,1.03,原理,方法,结果,讨论,与,维生素c含量测定方法综述ppt,第32页,差示旋光法,方法,TEXT,6,）样品测定,取维生素,C,片剂,10,片，称重研碎后分别用盐酸盐缓冲液及磷酸盐缓冲液配制成,50mL,溶液,(,相当于含,Vc 20mg/mL),，滤去不溶物，测定滤液差示旋光度，依据回归方程计算其含量。,TEXT,原理,讨论,方法,结果,与,维生素c含量测定方法综述ppt,第33页,差示旋光法,方法,TEXT,1）维生素易被氧化,空气及水中氧均可使其氧化分解，配制溶液时使用,新沸冷却水,同时加人,EDTA作为稳定剂,；,2）样品测定时，片剂个别物质不能完全溶解，必须,过滤,除去，然后测定滤液差示旋光度。,TEXT,原理,讨论,方法,结果,与,维生素c含量测定方法综述ppt,第34页,3,高效液相色谱法测定维生素,C,3.1 HYPERSILC8,色谱柱法,3.2 VenusilXBPC18,柱法,3.3,其它方法,维生素c含量测定方法综述ppt,第35页,HYPERSILC8,色谱柱法,采取,HYPERSILC 8,色谱柱，用,0,1,低浓度草酸作流动相，陈昌云等采取,0,05 mol,L,磷酸二氢钾缓冲液：甲醇,=80,：,20(v,v),作流动相。流速为,1,0mL,min,，二极管阵列检测器，检测波长为,254 nm,。,维生素c含量测定方法综述ppt,第36页,3.2 VenusilXBPC18,柱法,系统采取,VenusilXBPC18,柱,(4,6x250 mm,，,5g),，用,0,2,偏磷酸水溶液作为流动相，流速,1 ml,min,，检测波长,240 nm,；维生素,C,浓度在,0,1-1,0 mg,mL,范围内有良好线性关系。该方法回收率,99,89,，标准偏差,0,91,，操作简便、灵敏、可靠,维生素c含量测定方法综述ppt,第37页,薄层扫描法,原理,维生素,C,含有 较强,还原性,，可使,蓝色,染料,2,，,6-,二氯靛酚钠定量地还原成无色酚亚胺，而本身被氧化成去氢抗坏血酸，利用此特征进行薄层扫描法测定含量。,维生素c含量测定方法综述ppt,第38页,薄层扫描法,操作方法与结果,（,1,）试纸制备,2,6-,二氯靛酚钠,(DCP-Na),溶于无水乙醇配成,0.05%,DCP-Na,乙醇溶液，,滤纸在盛有,DCP-Na,乙醇溶液展开缸中浸渍,3min,，边浸边摇展开缸，使滤纸均匀着色，充分被染料溶液所饱和。取出悬挂于暗处，晾干后，马上放入干燥器中避光保留，备用。,维生素c含量测定方法综述ppt,第39页,薄层扫描法,（,2,）缓冲溶液配制,称取柠檬酸水合物,10g,，放入,1000ml,容量瓶中，加入,1M,氢氧化钠,420ml,，并用蒸馏水稀释至刻度，此溶液,pH,应为,3.5,。不然，用酸或碱调整,pH,值，保留于冰箱中。,维生素c含量测定方法综述ppt,第40页,薄层扫描法,3,）扫描条件确定,在制备染料试纸上定量点上维生素,C,对照品进行扫描，维 生素,C,在,290nm,处有最大吸收，,420nm,处无吸收,，故选择,1,=290nm,，,2,=420nm,双波长反射式锯齿扫描。,原理,方法,结果,讨论,与,维生素c含量测定方法综述ppt,第41页,薄层扫描法,4,）线性试验,4.1,）对照品溶液配制,精密称取维生素,C,标准品,100mg,，用缓冲溶液配成,lmg/ml,标准溶液。精密称取维生素,C,标准溶液,1,、,2,、,3,、,4,、,5ml,，分别置于,10ml,容量瓶中，用缓冲溶液稀释至刻度。,4.2,）测定,用,5,l,定量毛细管，分别吸收上述溶液各,5,l,，点于试纸上。点样后晾干，并将试纸 固定在,20cm20cm,玻璃板上，放入薄层扫描仪。测定,A,积分值,(,峰面积,),作为纵坐标,Y,，点样量为横 坐标,X,，得一直线方程,Y=15692X+130225,，,r=0,9991,原理,方法,结果,讨论,与,维生素c含量测定方法综述ppt,第42页,薄层扫描法,方法,TEXT,5,）样品含量测定,取维生素,C,片,10,片，研细，精密称取平均片重一片粉末，放入,100ml,容量瓶中，加入缓冲液至刻度，振摇，使维生 素,C,溶解，放置、澄清，用吸液管取,3ml,移至,10ml,容量瓶中，用缓冲液稀释至刻度。用,5,l,定量毛细管点样品溶液与不一样浓度标准液于同一试纸上，然后扫描 测定峰面积，由工作曲线法计算维生素,C,片中维生素,C,含量。,TEXT,原理,方法,结果,讨论,与,维生素c含量测定方法综述ppt,第43页,薄层扫描法,6,）回收率试验,精密称取维生素,C,对照品,20mg,，其它原辅料适量，置,10ml,容量瓶中，加缓冲液稀释至刻度，振摇，滤过，弃初滤液。分别吸收续滤液与对照品维生 素,C,液各,5,l,点于同一试纸上，按上述条件进行扫描测定。,维生素c含量测定方法综述ppt,第44页,薄层扫描法,点样时各点间距应大于,10mm,，扫描测不定时波长可做少许变动，但每次测定必须固定同一测定波长,点样量 在,3,8,l,之间线性关系很好，当点样量为,10,l,，线性关系较差,。,原理,方法,结果,讨论,与,维生素c含量测定方法综述ppt,第45页,结束语,总之，维生素,C,测定方法很多，各种方法各有特点，常见滴定法方法简单，但在滴定有色物质终点不易判断，分光光度法操作费时，高效液相色谱法是当前发展较快一个方法，方法灵敏，选择性好，有很好发展前景。毛细管电泳,n51,是近几年新兴分析方法，含有效率高、分析时间短、样品处理简单等特点，但有待于深入完善。,维生素c含量测定方法综述ppt,第46页,参考文件,1,吴春艳水果中维生素,C,含量测定及比较,J,武汉理工大学学报，,2oo7,，,29(3),：,9091,2,王元秀，庄海燕微量滴定法测定猕猴桃中维生素,C,含量,J1,济南大学学报,(,自然科学版，,，,15(4),：,374,，,3,张颖，等不一样产地枸杞子中维生素,C,含量测定,J,中国医院药学杂志，,，,24(8),：,500501,4,袁叶飞，甄汉深，欧贤红分光光度法测定大枣中维生素,C,含量,J,安徽中医学院学报，,，,25(2),：,40-41,5,马占玲，等青椒中还原型维生素,C,含量测定,J,渤海大学学报,(,自然科学版,),，,，,27(2),：,111-113,维生素c含量测定方法综述ppt,第47页,参考文件,6,逯家辉，等,F0lin B,分光光度法测定蔬菜中维生素,C,含量,J,分析检测，,2oo5,，,26(8),：,171172,7,王艳颖，等高效液相色谱法测定草莓中维生素,C,含量,J,大连大学学报，,，,27(2),：,2122,8,姜波，范圣第，刘长建，花艳红菠萝中维生素,C,高效液相色谱分析,J,大连民族学院学报，,，,5(1),：,5253,9,刘长建青椒中维生素,C,高效液相色谱分析,J,大连轻工业学院学报，,，,23(3),：,229230,10,陈昌云，李小华，刘莉莉高效液相色谱法测定蜜柚中维生素,C,含量,J,化工时刊，,2oo7,，,21(8),：,1921,维生素c含量测定方法综述ppt,第48页,参考文件,11,王爱月，张向兵，李发生高效液相色谱法测定食品及保健品中维生素,C,含量研究,J】,中国卫生检验杂志，,，,16(10),：,1175-1176,12,雍莉，等高效液相色谱法快速测定保健食品和果蔬中,VitCJ,当代预防医学，,，,32(3),：,247248,13,胡志群，王惠聪，胡桂兵高效液相色谱测定荔枝果肉中糖、酸和维生素,CJ,果树学报，,，,22(5),：,582,14,张秀梅，等高效液相色谱法测定菠萝果实维生素,C,含量,J,福建果树，,2oo7,，,140(1),：,2021,15,杨建洲，张荣莉毛细管区带电泳分析果蔬中维生素,C,含量,J,分析化学，,2oo2,，,30(1),：,120,维生素c含量测定方法综述ppt,第49页,