BTF3在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其与PINCH的相关性.pdf

:4162 胡洁,等BTF3 在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其与 PINCH 的相关性BTF3 在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其与 PINCH 的相关性胡洁,高峰,王云静,修小斐,王大维1河北医科大学第三医院口腔颌面外科；病理科，河北石家庄0 50 0 0 0【摘要】目的：探讨基础转录因子3（basic transcription factor3,BTF3）在口腔鳞状细胞癌（oral squamouscellcarcinoma,OSCC)组织中的表达及其与PINCH的相关性。方法：采用免疫组织化学法检测 BTF3在7 3对 OSCC组织及相邻癌旁正常组织(45例伴淋巴结转移）中的表达,并通过肿瘤基因组图谱（the Cancer Ge-nome Atlas,TCGA)数据库分析 BTF3、PINCH 在 OSCC 组织及相邻癌旁正常组织中的表达以验证免疫组织化学检测结果。分析 BTF3表达与患者年龄、性别、肿瘤分化程度及淋巴结转移等临床病理参数的关系及其与PINCH在OSCC中表达的相关性。结果：免疫组织化学检测结果显示,BTF3在OSCC 组织中的表达明显高于相邻癌旁正常组织（6 0.2 7%Vs39.73%,P=0.013）；T CG A 数据库分析显示，OSCC组织中BTF3、PINCH 的阳性表达率均显著高于二者在相邻癌旁正常组织中的阳性表达率。在 OSCC 中,BTF3 在淋巴结转移组中的阳性表达率明显高于其在无淋巴结转移组中的阳性表达率(7 1.11%vs42.86%,P=0.016)；BTF3在低分化组OSCC中的阳性表达率明显高于其在高分化组OSCC中的阳性表达率（7 1.43%vs45.16%,P=0.023）;BT F3的表达与患者性别、年龄、肿瘤大小和部位无相关性（P0.05）;BT F3和PINCH在OSCC中的表达呈正相关（r=0.286,P=0.015）。结论：BTF3与OSCC的发生、发展及淋巴结转移有关，有望成为判断OSCC发生、发展及预测淋巴结转移的潜在分子标志物,其机制可能与PINCH正协同作用有关。【关键词】BTF3;PINCH;口腔鳞状细胞癌；免疫组织化学;TCGA数据库【中图分类号】R739.8【文章编号】16 7 2-4992-(2 0 2 3)2 2-416 2-0 5Expression of BTF3 in oral squamous cell carcinoma tissues and its correlation withPINCHHU Jie,GAO Feng”,WANG Yunjing,XIU Xiaofei?,WANG DaweilDepartment of Oral and Maxillofacial Surgery;Department of Pathology,the Third Hospital of Hebei Medical University,Hebei Shiji-azhuang 050000,China.Abstract)Objective:To investigate the expression of basic transcription factor 3(BTF3)and its correlation withPINCH in oral squamous cell carcinoma(OSCC)tissues.Methods:The expression of BTF3 in 73 pairs of OSCC car-cinomas and adjacent normal tissues(45 cases with lymph node metastasis)was detected by immunohistochemistry.The expression of BTF3 and PINCH in OSCC cancer and adjacent normal tissues was analyzed by the Cancer GenomeAtlas(TCGA)database to verify the results of immunohistochemistry.To analyze the relationship between BTF3 ex-pression and clinicopathological parameters such as age,gender,tumor differentiation and lymph node metastasis ofpatients and its correlation with PINCH expression in OSCC.Results:The results of immunohistochemistry showedthat the expression of BTF3 in OSCC cancer tissues was significantly higher than that in adjacent normal tissues(60.27%vs 39.73%,P=0.013).TCGA database analysis showed that the positive expression rates of BTF3 andPINCH in OSCC cancer tissues were significantly higher than that of both in adjacent normal tissues.In OSCC,thepositive expression rate of BTF3 in the lymph node metastasis group was significantly higher than that in the no lymphnode metastasis group(71.11%vs 42.86%,P=0.016).The positive expression rate of BTF3 in the hypodfferenti-ated OSCC group was significantly higher than that in the highly differentiated OSCC group(71.43%vs 45.16%,P=0.023).BTF3 expression did not correlate with patient gender,age,tumour size and site(P 0.05).BTF3 and【收稿日期】2023 03 15【修回日期】2023 07 24【基金项目】河北省财政厅资助临床医学优秀人才培养项目（编号：冀卫办科教【2 0 2 1 1号）【作者简介】胡洁（19 9 6 一），女，陕西渭南人，医师，在读硕士，主要从事口腔颌面部恶性肿瘤相关研究。E-mail：18 39 2 6 7 9 2 38 16 3.c o m【通信作者】王大维（197 3一），男，河北高阳人，主任医师，硕士生导师，博士，主要从事口腔颌面部恶性肿瘤相关研究。Ema i l:d a v i 6 7 8 【文献标识码】AD0I:10.3969/j.issn.1672-4992.2023.22.012现代肿瘤医学2 0 2 3年11月第31卷第2 2 期PINCH expression in OSCC were positively correlated(r=0.286,P=0.015).Conclusion:BTF3 is correlated withthe tumorigenesis,development and lymph node metastasis of OSCC,and may be a potential molecular marker for de-termining the occurrence and development of OSCC and predicting lymph node metastasis,and its mechanism may berelated to the positive synergistic effect of PINCH.Key words BTF3,PINCH,oral squamous cell carcinoma,immunohistochemistry,TCGA database基础转录因子3（basic transcription factor3,BTF3）是RNA聚合酶II的转录因子，可通过与RNA聚合酶II结合成稳定的复合物后，作为近端启动子元件（如TATAbox和CAAT box序列)的转录起始因子而发挥转录作用1-4。研究提示,BTF3 在结直肠癌、前列腺癌等多种恶性肿瘤中的表达比其在相邻正常组织中的表达显著增加,可能通过促进肿瘤细胞增殖、调控细胞周期及细胞调亡等机制,在恶性肿瘤的发生发展过程中发挥重要调节作用5-8 ,但BTF3在口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及其与患者临床病理特征之间的关系尚未见报导。PINCH是一种参与整合素和生长因子信号转导的黏着斑蛋白,在人体多种组织中均有广泛表达，参与细胞的增殖、迁移、黏附等过程,在乳腺癌、结直肠癌等恶性肿瘤的间质中表达上调,与肿瘤转移相关9-。我们课题组前期研究结果表明,PINCH在OSCC肿瘤浸润边缘的间质中的表达量比其在肿瘤内部间质中的表达量明显增加，这提示,PINCH可能参与了OSCC 的侵袭和转移过程12 。本研究旨在采用TCGA数据库和免疫组织化学法检测BTF3和PINCH在OSCC中的表达，分析BTF3与OSCC患者临床病理特征的相关性，寻找新的OSCC的分子生物学标志物,并通过分析BTF3与PINCH在 OSCC 中表达的相关性,探讨BTF3在OSCC发生发展过程中的作用机制。1资料与方法1.1患者资料与标本本实验共选择OSCC组织及相邻癌旁正常组织7 3对，标本均来自我院病理科2 0 16 2 0 2 1年的存档蜡块。患者均于我院口腔颌面外科住院进行手术治疗。其中男性37 例，女性36 例；舌癌31例,颊癌18 例,牙龈癌2 4例;年龄30 7 8岁；伴发淋巴结转移者45例，无淋巴结转移者2 8 例；高分化者31例，低分化者42 例（根据WHO对OSCC分化程度的分类,将本实验OSCC组织分类为高分化、中分化、低分化和未分化，为统计方便,将高分化、中分化归为高分化组，将低分化和未分化归为低分化组）。所有标本均经2 位副高以上职称的病理科医生复查确诊。纳入标准：患者术前未接受任何放疗或化疗；所有切除的组织均经医院病理科诊断病理类型为 OSCC;患者不合并全身其他部位恶性肿瘤。样本收集均获得患者知情同意并签署书面知情同意书。1.2试剂与实验方法石蜡包埋组织作5m连续切片，常规HE染色和免疫组织化学ABC染色。抗BTF3蛋白多克隆抗体（1:2 0 0,SantaCruz Biotechnology,Inc,Santa Cruz,CA,USA),兔抗人 PINCH蛋白多克隆抗体由REARDENA博士惠赠（美国加利福尼亚大学病理科），二抗、三抗购自福建迈新生物试剂有限公司。MODERN ONCOLOGY,Nov.2023,VOL.31,No.22内源性过氧化物酶，依次滴加一抗（抗BTF3抗体浓度1：200；抗PINCH蛋白抗体浓度1:5）、二抗、三抗，DAB显色，苏木精复染,常规脱水、透明、封片。用磷酸盐缓冲盐水（PBS溶液）代替一抗作空白对照。1.3肿瘤基因组图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库分析肿瘤基因组图谱（the Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库（https:/portal.gdc.cancer.gov/）由美国国家癌症研究所和国家人类基因组研究所共同创办，该数据库收集整理了各类癌症有关的数据,是一个大型的癌症研究参考数据库。为了进一步验证本研究免疫组织化学检测结果的可靠性,本研究还从TCGA数据库检索并下载提取OSCC相关的mRNA转录本数据信息，于该数据库下载32 对OSCC组织及相邻癌旁正常组织共6 4个文件,探讨BTF3、PINCH 基因在OSCC癌组织中的表达。1.4结果判读在不了解临床病理或生物学数据的情况下，切片染色结果由两名病理科医生独立进行显微镜检查和评估。BTF3免疫组织化学染色阳性以细胞胞质中出现棕黄色颗粒为主，PINCH染色阳性以细胞胞浆中出现棕黄色颗粒为主,根据阳性细胞所占比例分为阴性（无染色，或阳性染色的细胞百分比5%）、弱阳性（5%染色阳性的细胞的百分比2 5%）、阳性(2 5%50%的细胞染色阳性）。为方便统计学计算，将阴性和弱阳性归为阴性,将阳性和强阳性归为阳性。如有争议,则对争议切片由两位研究者分别再次评估，对结果仍不能统一者，由两位研究者使用双头显微镜重新检查，直到达到一致评分。1.5统计学分析数据采用SPSS 22.0(SPSS软件,Inc.，A r mo n k,NY）进行分析,并使用Prism8.0版本进行绘图。采用检验和t检验分析BTF3、PI NC H 在OSCC组织中的表达情况，并分析BTF3与 OSCC 患者临床病理参数的相关性,双侧P值 0.0 5认为差异有统计学意义。BTF3和PINCH在OSCC组织中表达的相关性分析采用Spearman相关性分析。2结果2.1免疫组织化学法检测BTF3及PINCH在 OSCC组织及相邻癌旁正常组织中的表达免疫组织化学法检测结果提示,BTF3主要表达在肿瘤细胞的胞质中（见图1A、B）,PI NC H 主要表达在肿瘤间质细胞的胞浆中（见图1C、D）,BT F3在OSCC组织中的阳性表达率明显高于其在相邻癌旁正常组织中的阳性表达率，二者差异有统计学意义(6 0.2 7%vs39.73%,P=0.013,见表1)。:4163:Modern Oncology 2023,31(22):4162-4166免疫组织化学过程：切片脱蜡水化,3%H,02甲醇灭活.4164:胡洁,等BTF3 在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其与 PINCH 的相关性A图 1BTF3 及 PINCH 在癌及相邻癌旁正常组织中的表达(IHC 400)A:BTF3 在相邻癌旁正常组织中的表达;B:BTF3 在癌组织中的表达;C:PINCH在相邻癌旁正常组织中的表达;D:PINCH在癌组织中的表达。Fig.1 The expression of BTF3 and PINCH in tumor tissues and adjacent normal tissues(IHC 400)A:Expression of BTF3 in adjacent normal tissues.B:Expression of BTF3 in tumor tissues.C:Expression of PINCH in adjacent normal tissues.D:Ex-pression of PINCH in tumor tissues:表1BTF3在OSCC 组织和相邻癌旁正常组织中的表达n(%）Tab.1The expression of BTF3 in OSCC tissues and adjacent normal tis-suesn(%)TissusOsCC tissuesNormal para-cancerous tissues注：*P0.05,表示差异具有统计学意义。Note:*P0.05,indicating a statistically significant difference.2.2TCGA数据库中 BTF3、PINCH 在OSCC组织及相邻癌旁正常组织中的表达我们进一步使用 TCGA数据库验证了 BTF3、PINCH 在OSCC 癌组织（n=32）及相邻癌旁正常组织（n=32)中的表达水平,结果表明,与相邻癌旁正常组织相比,BTF3、PI NCH在OSCC 癌组织中的表达水平明显升高,差异具有统计学意义(P均 0.0 1,见图2)。10BTF3*86420图 2 BTF3、PINCH 在 OSCC 组织及相邻癌旁正常组织中的表达*P0.01，*P 0.0 0 1,表示差异具有统计学意义。Fig.2Expression of BTF3,PINCH in OSCC tissues and adjacent normaltissues*P0.01,*P0.05,见表2)。BTab.2 The relationship between BTF3 expression and clinicopathologicalvariablesn(%)BTF3 positivenexpression7344(60.27)7329(39.73)5PINCH*20OSCCNormalD表 2 BTF3表达与 OSCC 患者临床病理特征的关系n(%)BTF3 positivePGroup0.013*GenderMaleFemaleAge(years)5050SitesGingivalTongueBuccalSizes(cm)2.52.5Lymph node metastasisPositiveNegativeDegree of differentiationWell-differentiationPoor-differentiation注：*P0.05,表示差异具有统计学意义。Note:*P0.05,indicating a statistically significant difference.2.4BTF3与PINCH在OSCC中的相关性分析在7 3例 OSCC 组织中,BTF3表达阳性的44例中,有2 8OSCCNormaln37364033243118304345283142例 PINCH表达阳性,BTF3 表达阴性的 2 9 例中,有 19 例PINCH表达阴性,Spearman 相关性分析结果表明,BTF3 和PINCH表达呈正相关,差异具有统计学意义（r=0.286,P=0.015)(见表3)。表 3OSCC中 BTF3和PINCH表达的相关性nTab.3The correlation between BTF3 and PINCH expression in OSCCnBTF3PositiveNegativeTotal3讨论目前关于OSCC的发生机制尚未完全明确，研究认为OSCC 是遗传因素与环境因素共同作用的结果13-1。目前手术、放化疗等治疗手段虽然不断进步，但OSCC多数发现Pexpression0.27120(54.05)24(66.67)26(65.00)18(54.55)14(58.33)17(54.84)13(72.22)19(63.33)25(58.14)32(71.11)12(42.86)14(45.16)30(71.43)PINCHPositiveNegative2816101938350.3640.4740.6550.016*0.023*Total442973现代肿瘤医学2 0 2 3年11月第31卷第2 2 期较晚，易发生淋巴结转移和远处转移，患者的5年生存率较低14.18 ,因此,对 OSCC 深人研究，寻找新的分子标志物,提高早期诊断率至关重要19。BTF3 是RNA 聚合酶 II 的转录因子,是 II 型启动子启动转录所必需的2 0 。研究表明,BTF3 的异常表达与膀胱癌、下咽部鳞癌、前列腺癌、乳腺癌等多种癌症的发生发展密切相关2 1-2 4 3.1 BTF3与 OSCC的发生LIU等2 5 的研究发现,BTF3在胃癌中的表达水平较相邻正常组织明显增加，沉默BTF3后细胞周期停滞于S期和Gz/M 期,癌细胞调亡率升高,认为过表达的 BTF3可能通过诱导细胞周期停滞、抑制细胞调亡参与胃癌的发生。郝璐等5 研究BTF3对膀胱癌细胞生物学功能的影响发现,BTF3在膀胱癌细胞中的表达高于其在正常细胞中的表达,敲低BTF3后促进了癌细胞的调亡,认为其与膀胱癌的发生有关。WANG等2 6 发现,BTF3的表达与体外乳腺癌细胞的增殖和迁移有关,其可能的机制是BTF3通过调控IRF7激活NK细胞和 T细胞浸润,诱导癌细胞转移。另一项关于 BTF3 与肝癌的研究发现,BTF3可能通过FOXM1/GLUT1（叉头盒M1蛋白/葡萄糖转运蛋白1)轴促进肝癌细胞的增殖,从而诱导肝癌的发生,这表明BTF3 与肝癌的发生有关2 7 。本研究我们采用免疫组织化学法检验其在组织水平的表达,也发现BTF3在 OSCC 癌组织中的表达水平较其在相邻癌旁正常组织中的表达水平明显升高,此外,我们在TCGA数据库中进一步验证,数据分析结果与免疫组织化学检测结果一致,这表明 BTF3 的高表达可能与 OSCC 的发生过程有关。综合上述研究结果，我们认为过表达的BTF3可能抑制细胞调亡,诱导细胞周期停滞,从而使上皮细胞不断增殖,进而促进 OSCC的发生，但是关于BTF3在 OSCC发生过程中的具体分子机制，目前尚未明确，我们将在后续研究中加大样本量、结合细胞功能实验等进一步探讨。3.2 BTF3 与 OSCC的分化WANG等7 分析 BTF3 与结直肠癌患者临床病理参数相关性发现,BTF3 的表达升高与患者组织分化程度有关,即BTF3在高分化的结直肠癌中的表达明显高于其在低分化结直肠癌中的表达，另外还发现，BTF3与NF=kB、RA D 50、MRE11、NBS1、A EG-1等肿瘤相关基因正相关,认为BTF3可能通过复杂的信号通路调节结直肠癌的分化。杜丹等2 2 分析BTF3 与膀胱癌患者临床病理参数的相关性发现,肿瘤分化程度越低者,膀胱癌组织中BTF3 的表达量越高,这一结果证实,BTF3与膀胱癌的分化程度有关,他们认为,在膀胱癌中高表达的BTF3可能通过激活信号通路参与疾病的分化，但具体的作用机制并未进一步阐明。我们分析了 BTF3与 OSCC 患者临床病理参数的相关性,也发现BTF3 与 OSCC,患者的肿瘤分化程度有关,即BTF3在低分化OSCC组织中的表达较其在高分化 OSCC组织中的表达明显升高,BTF3可能通过某种信号传导通路调控下游基因表达，促使口腔肿瘤干细胞向成熟的鳞状细胞分化,参与OSCC的分化过程。3.3BTF3与OSCC的淋巴结转移ZHANG等2 3 分析BTF3与下咽部鳞癌患者淋巴结转移的相关性,发现 BTF3表达升高与患者淋巴结转移正相关,即BTF3在有淋巴结转移的下咽部鳞癌患者中的表达较无淋巴结转移的下咽部鳞癌患者高,但并未对其作用机制进一步阐MODERN ONCOLOGY,Nov.2023,VOL.31,No.22述。杜丹等2 2 分析 BTF3 与膀胱癌患者临床病理参数的相关性发现,BTF3的表达与患者淋巴结转移相关,BTF3在有淋巴结转移的膀胱癌患者中的表达较无淋巴结转移的膀胱癌患者高,可能与某种信号通路有关，但并未进一步阐明。我们分析BTF3在OSCC中的表达水平与患者淋巴结转移的关系时,也发现BTF3与患者的淋巴结转移相关,即BTF3在淋巴结转移的OSCC 患者中的表达较无淋巴结转移的OSCC患者高,与ZHANG 等2 3 结论一致。核因子kB(nuclear factor kB,NF-kB)2,2 作为 BTF3 的靶基因之一,可通过调节血管内皮细胞生长因子受体-3（vascular endo-thelial cell growth factor receptor-3,VECFR-3)28、环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2)29的表达促进肿瘤淋巴管生成。这提示,BTF3可能通过参与信号转导通路、调控靶基因表达,介导肿瘤淋巴管生成，从而促进 OSCC 患者发生淋巴结转移。3.4BTF3与PINCH在OSCC中表达的相关性研究表明,PINCH与口腔癌、乳腺癌、结直肠癌等恶性肿瘤患者发生淋巴结转移具有相关性,其机制可能与PINCH通过调节COX-2的表达促进肿瘤淋巴管生成有关10-12.30 O而BTF3也通过调控NF=kB间接调节COX-2的表达水平2,2 3,进而促进肿瘤淋巴管生成，通过参与信号转导通路促进OSCC患者发生淋巴结转移。我们之前的研究表明,PINCH 在 OSCC 肿瘤浸润边缘的间质中的表达量比其在肿瘤内部间质中的表达量明显增加，本次研究采用TCGA数据库及免疫组织化学检测法再次验证了这一结果,即 PINCH在 OSCC 癌组织中的表达水平较其在相邻癌旁正常组织中的表达升高。Spearman相关性分析结果表明,PINCH和 BTF3在 OSCC组织中的表达呈正相关。以上结果提示,BTF3可能通过参与某种信号传导通路与PINCH在OSCC的发生发展中发挥正协同作用,通过调节VEGFR-3、C O X-2 等基因表达介导肿瘤淋巴管生成,从而促使OSCC发生和转移。综上,BTF3与OSCC的发生、发展及淋巴结转移有关，有望成为判断OSCC发生发展及预测淋巴结转移的潜在分子标志物，其机制可能与PINCH发挥正协同作用有关。1KANNO M,CHALUT C,ECLY JM,et al.Genomic structure of theputative BTF3 transcription factor JJ.Gene,1992,117(2):219-228.2KUSUMAWIDJAJA G,KAYED H,GIESE N,et al.Basic transcrip-tion factor 3(BTF3)regulates transcription of tumor-associatedgenes in pancreatic cancer cells J.Cancer Biol Ther,2007,6(3):367 376.3ZHENG X,BLACK D,CHAMBON P,et al.Sequencing and expres-sion of complementary DNA for the general transcription factorBTF3J.Nature,1990,344(6266):556-559.4PARVIN JD,SHYKIND BM,MEYERS RE,et al.Multiple sets ofbasal factors initiate transcription by RNA polymerase IIJ.J BiolChem,1994,269(28):18414-18421,5郝璐，刘璐，陈曦，等.敲低BTF3基因表达对膀胱癌细胞T24生物学功能的影响J现代肿瘤医学,2 0 19,2 7（18）：319 1-3194.HAO L,LIU L,CHEN X,et al.Effect of knocking down BTF3 geneexpression on the biological function of T24 in bladder cancer cellsJ.Modern Oncology,2019,27(18):3191-3194.6JJEON YJ,BANG W,CHO JH,et al.Kahweol induces apoptosis by:4165.【参考文献】:4166:suppressing BTF3 expression through the ERK signaling pathway innon-small cell lung cancer cells J.Int J Oncol,2016,49(6):22942302.7WANG CJ,FRANBERGH-KARLSON H,WANG DW,et al.Clin-icopathological significance of BTF3 expression in colorectal cancerJ.Tumour Biol,2013,34(4):2141-2146.8SYMES AJ,EILERTSEN M,MILLAR M,et al.Quantitative analy-sis of BTF3,HINT1,NDRG1 and ODC1 protein over-expressionin human prostate cancer tissueJ.PLoS One,2013,8(12):e84295.9 张钰，朱振龙，杨艳红，等.PINCH2PINCH 蛋白家族新成员J.临床与实验病理学杂志,2 0 0 7,2 3(2）:2 13-2 15.ZHANG Y,ZHU ZL,YANG YH,et al.New members of thePINCH2-PINCH protein family JJ.J Clin Exp Pathol,2007,23(2):213-215.10李芳,赵增仁,田延锋，等.PINCH mRNA在乳腺癌中的表达意义及其与Nup88的相关性研究J.中国现代医学杂志，2014,24(27):42-45.LI F,ZHAO ZR,TIAN YF,et al.The significance of PINCHmRNA expression in breast cancer and its correlation with Nup88J.China Journal of Modern Medicine,2014,24(27):42-45.11 王春华,石岩.结肠癌与PINCH和环氧合酶2 蛋白的相关性J.中国肿瘤临床与康复,2 0 15,2 2(3):2 7 6-2 7 8.WANG CH,SHI Y.Correlation of colon cancer with PINCH andcyclooxygenase 2 protein J.Chinese Journal of Clinical Oncologyand Rehabilitation,2015,22(3):276-278.12 张金廷,李庆星,王大维，等.PINCH蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达及其临床意义J.中国肿瘤临床,2 0 0 7,34（2 0)：1157-1159.ZHANG JT,LI QX,WANG DW,et al.Expression of PINCH pro-tein in oral squamous cell carcinoma and its clinical significanceJ.Chinese Jourmal of Clinical Oncology,2007,34(20):1157-1159.13 邵小钩,朱乔,刘有，等.咀嚼槟榔与口腔鳞癌的相关临床病理学因素分析J.上海口腔医学,2 0 2 1,30（3）：2 6 8-2 7 2.SHAO XJ,ZHU Q,LIU Y,et al.Analysis of clinicopathologicalfactors associated with betel nut chewing and oral squamous carci-nomaJ.Shanghai Journal of Stomatology,2021,30(3):268-272.14 CIRALDI L,LEONCINI E,PASTORINO R,et al.Alcohol and ciga-rette consumption predict mortality in patients with head and neckcancer:a pooled analysis within the International Head and NeckCancer Epidemiology（INH A NCE）Co n s o r t i u m J.A n n o n c o l,2017,28(11):2843 2851.15 CHI AC,DAY TA,NEVILLE BW.Oral cavity and oropharyngealsquamous cell carcinoma-an updateJ.CA Cancer J Clin,2015,65(5):401-421.16 翟哲,穆森,张瑞敏.牙周致病菌与口腔鳞状细胞癌之间关系的研究进展J.现代肿瘤医学,2 0 19,2 7（16）：2 97 6-2 97 9.ZHAI Z,MU S,ZHANG RM.The relationship between periodontalpathogenic bacteria and oral squamous cell carcinoma J.ModernOncology,2019,27(16):29762979.17朱乔，邵小钧，超学，等.海南人咀嚼槟榔引起的口腔鳞状细胞癌ceRNA网络分析J.现代肿瘤医学,2 0 2 1,2 9（0 4）：57 3579.ZHU Q,SHAO XJ,NING CX,et al.Identifcation of miRNA,ln-cRNA and mRNA-associated ceRNA networks and potential bio-marker for oral squamous cell carcinoma with betel quid chewingin Hainan J.Modern Oncology,2021,29(04):573-579.胡洁,等BTF3 在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其与 PINCH 的相关性18 CRAMER J,BURTNESS B,LE QT,et al.The changing therapeu-tic landscape of head and neck cancer J.Nat Rev Clin Oncol,2019,16(11):669-683.19边勤疆，多力昆吾甫尔.5种肿瘤标志物联合检测在口腔鳞状细胞癌中的诊断价值J.现代肿瘤医学,2 0 2 0,2 8（19)：3330-3333.BIAN QJ,Duolikun Wufuer.Diagnostic value of combined de-tection of five tumor markers in oral squamous cell carcinoma J.Moderm Oncology,2020,28(19):3330-3333.20PAPAVASSILIOU KA,PAPAVASSILIOU AG.Transcription factordrug targets J.J Cell Biochem,2016,117(12):2693-2696.21HU J,SUN F,CHEN W,et al.BTF3 sustains cancer stem-likephenotype of prostate cancer via stabilization of BMII J.J ExpClin Cancer Res,2019,38(1):227.22杜丹,黄贵闽，曹贵华，等.膀胱癌组织miR-361-5p、BT F3表达变化及临床意义J.国际泌尿系统杂志,2 0 2 3,43（1：58-62.DU D,HUANG GM,CAO CH,et al.Changes of miR-361-5pand BTF3 expression in bladder cancer tissues and its clinical sig-nificance J.International Journal of Urology and Nephrology,2023,43(1):58-62.23ZHANG Y,GROSS N,LI Z,et al.Upregulation of BTF3 affectsthe proliferation,apop