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印染（2023 No.8）ASE-UPLC-MS/MS法测定医用口罩中10种可迁移性荧光增白剂覃冬杰1，叶月华2()1.柳州市质量检验检测研究中心，广西 柳州 545006；2.广西壮族自治区医疗器械检测中心，广西 南宁 530031摘要：建立了加速溶剂萃取（ASE）-超高效液相色谱（UPLC）-串联质谱法（MS/MS）测定医用口罩中10种可迁移性荧光增白剂的方法。样品采用ASE前处理，萃取溶剂为70%DMF,80 静态萃取5 min，循环2次。采用Poroshell 120Phe-Hex（2.1 mm100 mm，1.9 m）为色谱柱，乙腈和0.1%甲酸-5 mmol/L乙酸铵溶液为流动相，梯度洗脱，ESI为离子源电离，MRM模式检测。结果表明：10种荧光增白剂在各自范围内呈良好的线性关系（r0.998 3），检出限为0.013.20 mg/kg，定量限为0.0310.00 mg/kg，平均回收率为80.8%98.9%，RSD为1.8%5.2%。该方法快速、简便、准确度高，适用于医用口罩中荧光增白剂的检测。关键词：测试；荧光增白剂；ASE；UPLC-MS/MS；医用口罩中图分类号：TS197文献标志码：C文章编号：1000-4017（2023）08-0066-03Determination of 10 transportable fluorescent whitening agents in medical face masksby ASE-UPLC-MS/MSQIN Dongjie1,YE Yuehua2 1.Liuzhou Quality Inspection and Testing Research Center,Liuzhou 545006,China;2.Guangxi Testing Center for Medical Device,Nanning 530031,ChinaAbstract:A method is established for the determination of 10 transportable fluorescent whitening agents inmedical masks using accelerated solvent extraction(ASE)-ultra high performance liquid chromatography(UPLC)-tandem mass spectrometry(MS/MS)method.The samples is pretreated with ASE,in which the extraction solvent is 70%DMF,and the extraction is static at 80 for 5 min and cycled twice.The samples aredetected using Poroshell 120 Phe-Hex(2.1 mm 100 mm,1.9 m)as the chromatographic column,acetonitrileand 0.1%formic acid-5 mmol/L ammonium acetate solution as mobile phase gradient elution,ESI as ionsource,and MRM mode.The results show that the 10 fluorescent whitening agents have a good linear relationship within their respective ranges(r0 998 3),detection limit is 0.01-3.20 mg/kg,quantitative limit is 0.03-10.00 mg/kg,average recovery rate is 80.8%-98.9%,RSD is 1.8%-5.2%.This method is fast,simple,and highlyaccurate,and is suitable for the detection of fluorescent whitening agents in medical masks.Key words:testing;fluorescent whitening agents;ASE;UPLC-MS/MS;medical mask医用口罩作为疫情防控的有效物资，在防止病毒传播上，发挥着重要作用1-2。荧光增白剂（FWA）是一种荧光染料，可吸收光线中不可见的紫外光，并发出可见的蓝光，在视觉上起到亮白增艳的作用，因而被广泛应用于纺织品、造纸以及塑料制品行业3-4。研究发现，荧光增白剂被人体吸收后，会影响人体免疫力以及伤口的愈合能力，甚至还有潜在的致癌风险5。如若长期佩戴含有荧光增白剂的口罩，荧光增白剂则会随皮肤迁移至人体内，危害健康。现行的医用口罩标准中并未对荧光增白剂做出规定。鉴于此，准确测定医用口罩中荧光增白剂的含量，对保障人体健康，具有十分重要的意义。目前，检测荧光增白剂的方法主要有紫外分光光度法6、荧光分光光度法7、高效液相色谱法8和高效液相色谱-串联质谱法9。其中，紫外分光光度法和荧光分光光度法只能对荧光增白剂的总量进行测定，而不能进行定性；高效液相色谱法易受基质干扰，在进行多成分测定时，难以分离或分析时间较长；高效液相色谱-串联质谱法采用保留时间和特征离子对对样品进行定性和定量分析，灵敏度及准确度较高，在多成分测定分析中，已成为主流分析方法。荧光增白剂的提取方式主要有超声提取及振荡提取10-11，但存在耗时长、提取效率低的缺陷。加速溶剂萃取（ASE）具有溶剂用量少、提取时间短、操作简便等优点，在环境、食品、药品检测领域应用较为广泛12-14，而在医用口罩领域应用较少。本文采用加速溶剂萃取，联合超高效液相色谱-串联质谱法对医用口罩中10种荧光增白剂进行测定，为有关部门对医用口罩的监管以及相关标准的制定提供技术支持。收稿日期：2023-04-04；修回日期：2023-07-10作者简介：覃冬杰（1986），男，硕士，副主任药师，从事药品及医疗器械质量控制研究。E-mail：。通信作者：叶月华（1984），女，硕士，副主任药师，从事医疗器械设备采购与管理。E-mail：。66ASE-UPLC-MS/MS法测定医用口罩中10种可迁移性荧光增白剂印染（2023 No.8）1试验部分1.1试剂与仪器试剂10 种荧光增白剂标准品 C.I.71、C.I.85、C.I.113、C.I.135、C.I.140、C.I.162、C.I.199、C.I.220、C.I.351、C.I.367（纯度均大于98%，北京百灵威科技有限公司），甲醇（色谱纯，美国Fisher公司），二甲基甲酰胺（DMF，分析纯，上海国药集团化学试剂有限公司），超纯水（自制）仪器1290-6460型高效液相色谱-质谱联用仪（美国安捷伦科技有限公司），APLE-3000型加速溶剂萃取仪（北京吉天仪器有限公司），Milli-Q型纯水系统（美国密理博公司），BSA224S-CW型电子天平（德国赛多利斯股份有限公司）1.2测试方法1.2.1标准溶液的配制准确称取C.I.71、C.I.85、C.I.113和C.I.351适量，用70%DMF溶液溶解并定容至1 mg/mL的标准储备液；准确称取 C.I.135、C.I.140、C.I.162、C.I.199、C.I.220 和C.I.367适量，用三氯甲烷溶解并定容至1 mg/mL的标准储备液，各储备液于04 下避光保存。1.2.2样品溶液的制备取有代表性的样品，剪成约5 mm5 mm碎片。准确称取1 g，置于加速溶剂萃取仪中萃取（萃取溶剂为70%DMF、萃取温度80、静态萃取时间5 min、循环次数2次、冲洗体积 60%、吹扫时间100 s），萃取液定容至50 mL，用0.22 m微孔滤膜过滤，即得。1.2.3仪器条件色谱柱 Poroshell 120 Phe-Hex（2.1 mm100 mm，1.9 m）；柱温30；流速0.3 mL/min；进样量1 L；流动相A为乙腈，B为0.1%甲酸-5 mmol/L乙酸铵溶液。梯度洗脱：05 min，10%30%A；512 min，30%70%A；1217 min，70%90%A；1721 min，90%10%A。电化学喷雾离子源（ESI）；多反应监测模式（MRM）检测；雾化气温度：340；雾化器流速 6 L/min，喷雾电压：310 kPa。各成分质谱参数见表1。表110种荧光增白剂质谱参数Table 1MS parameters of 10 fluorescent whitening agents荧光增白剂C.I.71C.I.85C.I.113C.I.135C.I.140C.I.162C.I.199C.I.220C.I.351C.I.367电离模式-+-+母离子m/z879.2827.3915.1291.3242.1242.3355.1537.3258.0363.1子离子m/z569.3*/649.2623.0*/543.4667.1*/586.4185.1*/107.0204.1*/203.1185.1*/127.0267.0*/250.9309.2*/197.0226.1*/194.1270.1*/321.0碎裂电压/V150130140135140120250100100150碰撞能量/eV70/7060/6565/7030/6035/5520/4028/3512/1015/1540/60注：“*”为定量离子。2结果与讨论2.1提取条件优化2.1.1提取溶剂的选择首先采用甲醇、乙腈、氯仿、DMF和水分别作为提取溶剂，考察各荧光增白剂的提取效果。结果表明，DMF作为提取溶剂时，各成分回收率最高。进一步比较不同体积分数的DMF溶液对提取效果的影响，结果见表2。表2不同体积分数DMF对10种荧光增白剂的提取率Table 2Yields of 10 fluorescent whitening agents with DMF ofdifferent concentrations荧光增白剂C.I.71C.I.85C.I.113C.I.135C.I.140C.I.162C.I.199C.I.220C.I.351C.I.367不同提取溶剂回收率/%30%DMF7075707477688076706950%DMF8386838885778381808370%DMF93948899978510386909490%DMF85888186897689847780100%DMF77817382827081757374表2表明，当DMF体积分数为70%时，提取回收率最高，故选择70%DMF溶液作为提取溶剂。2.1.2提取温度的选择提取温度对提取效果的影响见表3。表3不同提取温度对10种荧光增白剂的影响Table 3Effects of different temperatures on yields of 10 fluorescent whitening agents荧光增白剂C.I.71C.I.85C.I.113C.I.135C.I.140C.I.162C.I.199C.I.220C.I.351C.I.367不同提取温度回收率/%50 7377708078767969778160 8284788787838975848870 8889829290849380879280 93948899978510386909490 86878390908091788286表3表明：当温度小于80 时，各成分的回收率随提取温度的增加而增大；温度为80 时，各成分的回收率为最大值；继续升高温度，回收率下降。因此，后续试验选择80 作为提取温度。67印染（2023 No.8）2.1.3提取时间和循环次数的选择分别考察了不同提取时间和循环次数对提取效果的影响。结果表明，提取时间对提取效果的影响不大。循环提取3次，前2次萃取液均能检出荧光增白剂，而第3次萃取液则未检出。最终选择提取时间5min，循环次数2次。2.2分析条件的优化2.2.1色谱条件的优化比较了色谱柱 Eclipse Plus C18（2.1 mm100 mm，3.5 m）和 Poroshell 120 Phe-Hex（2.1 mm100 mm，1.9 m）对10种荧光增白剂的分离效果。结果表明，2种不同类型的色谱柱均能对10种荧光增白剂进行分离，但 Eclipse Plus C18（2.1 mm100 mm，3.5 m）的分析时间较长，且C.I.85和C.I.113存在拖尾现象，出峰时间较早，易出现溶剂效应，而 Poroshell 120 Phe-Hex（2.1 mm100 mm，1.9 m）对10种荧光增白剂有较好的分离效果。比较了甲醇-水、乙腈-水、乙腈-0.1%甲酸溶液和乙腈-0.1%甲酸-5mmol/L乙酸铵溶液等不同流动相系统，结果表明，采用乙腈-0.1%甲酸-5mmol/L乙酸铵溶液作为流动相时，各成分有最佳峰形，响应值最高。2.2.2质谱条件的优化采用Scan模式分别对10种荧光增白剂进行一级质谱全扫描，找出相应的母离子，优化 Fragmentor 电压，使各成分响应值最高；二级质谱通过优化CE值，选取2个稳定且响应值较高的离子作为定性和定量子离子。2.3基质效应的评价以阴性样品提取液作为基质液，以70%DMF溶液作为溶剂，分别绘制混合基质标准曲线和溶剂标准曲线，以各成分基质标准曲线和溶剂标准曲线的斜率比评价基质效应。当基质效应值在80%120%时，则认为基质效应不明显，可忽略。结果表明，各成分的基质效应值在87%99%，基质干扰较小，采用溶剂标准曲线即可进行准确定量分析。2.4方法学的考察2.4.1线性方程与检出限准确量取各单标储备液，用70%DMF溶液配制成混合标准系列溶液，进样，测定，以各成分浓度为横坐标，峰面积为纵坐标建立线性方程，以3倍和10倍信噪比所对应的浓度计算方法的检出限和定量限，结果见表4。表410种荧光增白剂线性方程及检出限、定量限Table 4Linear equations,limits of detection and limits of quantification of 10 fluorescent whitening agents荧光增白剂C.I.71C.I.85C.I.113C.I.135C.I.140C.I.162C.I.199C.I.220C.I.351C.I.367线性方程Y=18 589X-147Y=18 795X-236Y=15 418X+258Y=16 765X-223Y=17 864X-575Y=17 919X+26Y=20 365X-878Y=19 226X-1069Y=15 364X-92Y=17 334X-96线性范围/（ngmL-1）1002 0002004 0002004 0001201201002 0001202004 000120120相关系数0.999 20.998 90.999 50.999 60.998 70.999 00.999 10.999 90.998 50.998 3检出限/（mgkg-1）1.203.102.400.010.021.700.023.200.010.02定量限/（mgkg-1）4.009.007.000.030.055.000.0510.000.030.05由表4可知，各成分在相应范围内呈现良好的线性关系，线性范围广、灵敏度高。2.4.2精密度与回收率在阴性样品中分别添加低、中、高3种水平的混合标准溶液，每个水平平行制备6份加标样品溶液，进样，测定，计算精密度与回收率，结果表5。表510种荧光增白剂精密度与回收率（n=6）Table 5The precisions and recoveries of 10 fluorescent whitening agents（n=6）荧光增白剂C.I.71C.I.85C.I.113C.I.135C.I.140C.I.162C.I.199C.I.220C.I.351C.I.367添加水平/（mgkg-1）低10.020.020.00.10.110.00.120.00.10.1中50.0100.0100.00.50.550.00.5100.00.50.5高100.0200.0200.01.01.0100.01.0200.01.01.0回收率/%低84.380.885.988.689.290.381.792.586.883.4中88.685.186.387.094.593.390.692.790.388.8高92.693.495.894.696.995.595.098.994.793.5RSD/%低5.24.62.84.53.35.14.65.24.72.9中3.32.63.14.23.53.22.52.21.92.4高3.41.92.32.92.72.22.61.82.32.5由表5可知，方法具有良好的精密度与准确度。2.5样品的测定以建立的方法对市售30批医用口罩进行测定，其中有2批次检出C.I.71，质量分数分别为157 mg/kg和244 mg/kg，1批次检出C.I.85，质量分数为33 mg/kg。3结论本研究建立了以加速溶剂萃取为前处理，联合超高效液相色谱-串联质谱对医用口罩中10种可迁移性荧光增白剂的测定方法，该方法快速、简便、准确度高，适用于医用口罩中荧光增白剂的检测。（下转第73页）68微波辅助萃取-UPLC-MS/MS法测定纺织品中有机锡化合物印染（2023 No.8）混合标准溶液，每个加标浓度点平行制备7份样品溶液，在上述优化条件下，测得不同浓度下的加标回收率和相对标准偏差，结果见表8。表8三种有机锡化合物的回收率和精密度Table 8The average recoveries and precision of the method化合物三苯基氯化锡三丁基氯化锡三甲基氯化锡加入水平/（mgL-1）0.020.020.02平均回收率/%89.785.288.5RSD/%5.46.24.8加入水平/（mgL-1）0.20.20.2平均回收率/%93.593.794.1RSD/%3.75.13.4加入水平/（mgL-1）222平均回收率/%98.896.797.5RSD/%0.91.51.0由表8可知，在3个添加水平下，TBT、TPhT、TMT的平均回收率分别为 89.7%98.8%、85.2%96.7%、88.5%97.5%；相对标准偏差为0.9%6.2%，表明本方法具有良好的准确性和精密度。2.5实际样品测定抽取 20 批次纺织样品，分别按本方法和 GB/T20385.12021 纺织品 有机锡化合物的测定 第一部分：衍生化气相色谱-质谱法 进行前处理及色谱分析，均未检测到上述3种有机锡化合物。3结论采用微波辅助萃取技术对纺织品中的有机锡化合物进行提取，UPLC-MS/MS法测定萃取液，考察了方法的线性范围、相关系数、检出限、回收率及精密度等参数，证明该方法不需要经过繁琐的衍生化过程，简化了样品处理步骤，灵敏度高，可用于纺织品中多种有机锡化合物的同时测定。参考文献：1黄龙.纺织品中有机锡化合物测定的不确定度评定J.印染，2017，43（20）：44-48.2于文佳，卫碧文，张雅婷，等.DLLME-ESI-MS/MS快速筛查轻纺消费品中有机锡J.印染，2016，42（17）：42-46.3邓爱华，庞晋山，彭晓俊，等.气相色谱/双柱双检测器测定塑料制品中10种有机锡J.分析测试学报，2015，34（1）：35-42.4邵秋荣，孟昭建，王秀嫔.微波辅助提取样品-正相液相色谱法测定面粉中有机锡化合物J 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