基于柱前衍生-高效液相色谱-荧光法检测橙汁中的醛类小分子.pdf

收稿日期:2 0 2 2-0 3-2 5 修回日期:2 0 2 2-0 4-2 6基金项目:武汉预防医学科研专项(MY 1 9 M 0 1);湖北省卫健委2 0 1 9年度预防专项重大项目(W J 2 0 1 9 H 3 0 3)*通讯作者:林亚维,女,博士,副教授,研究方向:色谱及质谱分析.E-m a i l:l i n y a w e i 2 0 1 2w h u t.e d u.c n第3 9卷第3期V o l.3 9 N o.3分 析 科 学 学 报J OUR NA LO FANA L Y T I C A LS C I E N C E2 0 2 3年6月J u n e 2 0 2 3D O I:1 0.1 3 5 2 6/j.i s s n.1 0 0 6-6 1 4 4.2 0 2 3.0 3.0 1 4基于柱前衍生-高效液相色谱-荧光法检测橙汁中的醛类小分子王成圣,刘 冉,徐 静,黄露杰,辛国林,王培珂,林亚维*(武汉理工大学化学化工与生命科学学院,湖北武汉4 3 0 0 7 0)摘 要:醛类化合物是果汁中一类重要的风味物质。本研究以一种新型羟氨类荧光试剂4-羟氨基丁基-7-甲氧基-香豆素(HAMC)为醛类衍生试剂,发展了一种基于硝酮化反应的柱前衍生方法。该方法实现了1 3种醛类小分子在C 1 8柱上的基线分离且检测限低至0.2n m o l/L。利用该方法结合高效液相色谱-荧光检测(H P L C-F L D)成功从橙汁样品中检测出糠醛、5-羟甲基糠醛、甲醛、乙醛及庚醛。该方法灵敏度高、准确性好且无需固相萃取等复杂前处理,在复杂基质的醛类物质分析中具有良好的应用前景。关键词:醛;硝酮化;荧光衍生;高效液相色谱;4-羟氨基丁基-7-甲氧基-香豆素中图分类号:O 6 5 7.7+2 文献标识码:A 文章编号:1 0 0 6-6 1 4 4(2 0 2 3)0 3-3 4 3-0 6醛类小分子广泛存在于食品原材料中1,2,并且食品加工与储存过程中也会产生大量的醛类物质3,4。如S o a r e s等人5在热带水果检测出5-羟甲基糠醛(HM F),并且其含量会随着热加工而显著升高。S e r r a n o等人6在多种果汁(橙子、菠萝、苹果等)中检测出脂肪醛与芳香醛,如丙醛、戊醛、苯甲醛等。值得注意的是,醛类小分子作为一种重要的风味物质7-9,对人体健康有一定的危害。甲醛、乙醛被列为一级致癌物,其他醛类小分子也与多种疾病,如阿兹海默病、癌症等有着紧密的相关性。因此如何对食品中的醛类物质进行准确的定性、定量分析,对于食品质量监控以及健康风险评估方面具有十分重要的研究意义1 0,1 1。现有醛类化合物检测中通常采用色谱法和质谱法,但由于醛类小分子极性大、亲水性强且无生色团或荧光团,因此通常需要对其进行衍生化以改善其仪器响应。常用的醛类衍生化试剂有肼类化合物,如2,4-二硝基苯肼(D N P H)1 2或丹磺酰肼1 3,它们能与醛基发生缩合反应生成较为稳定的腙类衍生产物。另外,o-取代羟氨类试剂也可与醛类反应,生成肟式衍生产物。如在气相色谱-质谱(G C-M S)检测中,常用o-取代羟氨类试剂o-(2,3,4,5,6五氟苄基)羟氨盐酸盐(P F B HA)对醛类进行衍生化1 4。但是,上述肼类与o-取代羟氨类试剂也存在一定的缺点。如它们的衍生产物都存在C=N双键,因而可能产生顺反异构体,导致色谱图上出现两个异构体峰,这不仅使得谱图复杂化影响了多种醛类的色谱分离,也可能导致分析结果出现误差。此外,在G C-M S分析前,通常需要将液体样品萃取到有机相中,因此还需要进行一系列富集、萃取步骤,如固相萃取、固相微萃取等1 5,1 6。这些前处理步骤不仅增加了分析时间,而且也增加了分析成本。在前期研究中1 7,我们发现一种N-取代羟氨类荧光试剂4-羟氨基丁基-7-甲氧基香豆素(HAMC)可与醛类化合物发生硝酮化反应(图1),选择性生成反式硝酮化产物,从而避免了多个异构化色谱峰的干扰。因此,本研究利用HAMC对1 3种醛类小分子进行标记,探索、优化其衍生化条件,建立了高效液相色谱-荧光检测法(H P L C-F L D)测定了橙汁样品中5种醛类小分子。结果表明,该方法线性范围宽、检出限低、准确性高且无需复杂的富集与萃取过程,在复杂基质的醛类检测中具有良好的应用前景。343第3期王成圣等:基于柱前衍生-高效液相色谱-荧光法检测橙汁中的醛类小分子第3 9卷图1 H AMC与醛类化合物衍生反应示意图F i g.1 R e a c t i o no fa l d e h y d e sw i t hH AMCt oa f f o r dn i t r o n ed e r i v a t i v e s1 实验部分1.1 仪器、试剂与材料S P D-2 0 A紫外检测器、R F-2 0 A荧光检测器、L C-2 0 AT高效液相色谱仪(日本S h i m a d z u公司);Z O R-B A XE c l i p s eX D B-C 1 8色谱柱(1 5 0mm4.6mm,5m,美国A g i l e n t公司);纳升电喷雾离子源-T r i p l eT O FTM5 6 0 0质谱仪(美国A BS C I E X公司)。5-羟甲基糠醛(HMF)、糠醛(F)和5-甲基糠醛(MF)(A R,北京百灵威科技有限公司);甲醛葵醛(C 1C 1 0)(H P L C级,上海阿拉丁生化科技股份有限公司);4-羟氨基丁基-7-甲氧基-香豆素(HAMC)实验室合成;乙酸钠、乙酸、苯胺(A R,国药集团化学试剂有限公司);乙腈(H P L C级,美国T E D I A公司);超纯水(经M i l l i-Q系统纯化)。图2 H P L C-F L D色谱图(A)空白样(B)1 3种醛类(各3 m o l/L)混合物经H AMC衍生后H P L C-F L D色谱图F i g.2 T y p i c a lc h r o m a t o g r a m so f(A)r e a g e n tb l a n ka n d(B)t h e m i x t u r eo f1 3 a l d e h y d e ss t a n d a r d s(3 m o l/Le a c h)a f t e rH AMCd e r i v a t i z a t i o n1.2 实验方法1.2.1 H AMC与醛的衍生与色谱分离 将1 0L醛类标准样品混合物(C 1C 1 0,F,MF,HMF各3m o l/L,溶于纯甲醇)与2 0L1mm o l/L的HAMC甲醇加入到1.5m L塑料离心管中,再向其中加入1 0L0.1m o l/LN a A c-HA c(p H=4.0,溶于蒸馏水)缓冲溶液和1 0L1 0mm o l/L苯胺(溶于纯甲醇),涡旋振荡器将反应液充分混合后于2 5的水浴锅中反应3 0m i n,待H P L C-F L D分析。H P L C-F L D条件:荧光检测器的激发和发射波长分别为3 2 0n m与3 9 0n m;柱温:3 0;进样体积:2 0L;流速:1m L/m i n;液相色谱梯度洗脱模式,流动相A为5%乙腈水溶液,流动相B为9 5%乙腈水溶液,梯度洗脱程序为03 0m i n,4 0%B;3 03 2m i n,4 0%1 0 0%B;3 23 8m i n,1 0 0%B;3 84 0m i n,1 0 0%4 0%B;4 04 5m i n,4 0%B。1.2.2 高分辨质谱条件 质谱分析采用的是质量范围为2 06 0 0m/z的正离子模式,二级质谱的分析所采用的是质量范围为2 06 0 0m/z的M S/M S模式,对数据所采用的分析软件为M a s s l y n x。1.2.3 样品前处理 称取1g橙汁于离心管中,80 0 0r/m i n离心1 0m i n。取上清液用0.2 2m的滤膜进行过滤,得到处理过后的1 0 0L实际样品(不经稀释),并按照“1.2.1”进行衍生。2 结果与讨论2.1 4-羟氨基丁基-7-甲氧基-香豆素(H AMC)与醛类小分子的衍生化HAM C的合成过程与表征已在前期工作中发表1 7。该化合物激发和荧光发射波长分别为3 2 0n m和3 9 0n m,其荧光量子产率为0.7 2,说明HAM C具有良好的荧光强度。为考察HAMC与醛类的衍生反应,我们选择了直链脂肪醛(C 1C 1 0)、糠醛(HMF、F和MF)为醛类标准品,将这1 3种醛类标准品的混合物(各3m o l/L)在2 5下与HAMC反应3 0m i n。反应液(1 0L)进行H P L C-F L D分离检测,结果如图2所示。图中显示与空白实验相比,衍生化后产生了1 3个衍生物色谱峰,通过加标实验鉴定443第3期分 析 科 学 学 报第3 9卷了这1 3个色谱峰为C 1C 1 0、F、HMF和MF衍生化产物峰。为了进一步对衍生化产物进行表征,我们分别接出相应峰的馏分并进行E S I-M S分析。图3展示了C 3与HMF衍生产物峰的质谱结果。C 3产物色谱峰组分的质谱检测结果显示(图3 A),检测到了质荷比3 0 4.1 5的信号峰,这与C 3-HAMC质荷比理论值3 0 4.1 4基本一致。HMF色谱峰组分的质谱检测结果中(图3 B),质荷比为3 7 2.1 4的信号与HMF-HAMC质荷比理论值3 7 2.1 4一致。上述结果进一步证明了HAMC可有效标记醛类小分子并生成相应的硝酮衍生产物。图3(A)C 3衍生产物质谱图(B)HM F衍生产物质谱图F i g.3 E S I-M Ss p e c t r ao f(A)C 3d e r i v a t i v ea n d(B)HM Fd e r i v a t i v e2.2 硝酮化反应条件的优化为了提高HAMC的衍生化效率,我们以短链脂肪醛(C 2),长链脂肪醛(C 9),糠醛(HMF)和HAMC的衍生产物色谱峰的峰面积作为评价标准,考察了不同反应条件对衍生化效率的影响,其中包括:加入催化剂苯胺(1 0mm o l/L)前后反应时间的影响、HAMC与标准醛混合物摩尔比的影响、反应温度的影响、反应p H值的影响。而根据硝酮化反应的机理,芳香胺对其有催化作用,于是我们在采用苯胺为催化剂的条件下,对反应的其他条件进行了优化,结果如图4所示。最佳反应条件为:反应时间为3 0m i n,1 0mm o l/L苯胺作为催化剂,HAMC与混合醛摩尔比为5 0 1,反应温度为3 0,反应体系的p H值(HA c-N a A c作为缓冲溶液)为4.5,最佳条件下衍生化效率为9 0%。图4 不同反应条件对产物峰面积的影响:(A)反应时间的影响,(B)加入催化剂苯胺(1 0mm o l/L)后反应时间的影响,(C)H AMC与醛类摩尔比的影响,(D)反应温度的影响,(E)反应p H值的影响.F i g.4 E f f e c t o fd e r i v a t i z a t i o nc o n d i t i o n s o np e a ka r e a s o f t h ed e r i v a t i v e s,i n c l u d i n g(A)e f f e c t o f t h e r e a c t i o n t i m e,(B)e f f e c t o fa n i l i n e(1 0mm o l/L)a sac a t a l y s t o v e r t i m e,(C)e f f e c t o f t h em o l a r r a t i oo f a l d e h y d e s t oH AMC,(D)e f f e c t o ft e m p e r a t u r e,(E)e f f e c t o fb u f f e rp H.T h ed a t ar e p r e s e n t e r r o rb a r so f t r i p l i c a t em e a s u r e m e n t s.=C 2-HAMCd e r i v a t i v e;=HMF-HAMCd e r i v a t i v e;=C 9-HAMCd e r i v a t i v e.2.3 分析方法验证在最佳衍生条件下,通过检测系列不同浓度的1 3种标准醛类混合液进行了方法学验证1 8,结果如表543第3期王成圣等:基于柱前衍生-高效液相色谱-荧光法检测橙汁中的醛类小分子第3 9卷1所示。可以看到该方法动态范围为180 0 0n m o l/L、线性相关系数(R)为0.9 9 2 70.9 9 9 7、检出限(L O D)为0.20.8n m o l/L、日内相对标准偏差(R S D)和日间R S D分别为0.8%4.7%和2.1%5.1%。与已报道的醛类检测方法1 9-2 1(L O D为5n m o l/L1 6.7m o l/L)相比本方法检测限更低。表1 A O H C分析3种芳香醛所得线性范围、线性方程、相对标准偏差和检出限T a b l e1 L i n e a rc a l i b r a t i o nr a n g e s,r e g r e s s i o ne q u a t i o n s,a n dd e t e c t i o nl i m i t so fd e r i v a t i v e sA n a l y t eL i n e a r r a n g e(n m o l/L)R e g r e s s i o ne q u a t i o naRR S DbI n t r a-d a yI n t e r-d a yL O D(n m o l/L)C 11 9-80 0 0Y=2.2 4X+4 1 70.9 9 8 40.8%2.9%0.4C 21-80 0 0Y=3.3 4 3X+2 90.9 9 9 71.5%4.1%0.4C 32 3-80 0 0Y=4 9 6X+8 70.9 9 7 62.7%3.5%0.8C 41 1-80 0 0Y=3.1X+2 9 10.9 9 2 71.9%2.5%0.4C 57-80 0 0Y=3.3 2 5X+2 2 10.9 9 7 82.4%2.6%0.4C 61 1-80 0 0Y=2.7 5 8X+2 8 10.9 9 7 34.1%5.1%0.2C 78-80 0 0Y=1.7 0 4X+1 2 90.9 9 9 21.9%2.5%0.4C 86-80 0 0Y=1.5 9 7X+1 1 50.9 9 5 34.7%5.1%0.4C 91 8-80 0 0Y=1.6 9 7X+1 4 20.9 9 4 52.7%2.6%0.4C 1 08-80 0 0Y=1.2 8 5X+8 90.9 9 9 33.7%4.3%0.4HMF1 6-80 0 0Y=1.4 6 8X+3 4 60.9 9 4 72.1%2.1%0.2F1 0-80 0 0Y=2.6 5 8X+2 5 40.9 9 9 61.6%2.4%0.4MF1 0-80 0 0Y=3.4 4 7X+3 4 20.9 9 7 43.5%3.5%0.4 aY:P e a ka r e a(mVm i n),X:S a m p l ec o n c e n t r a t i o n(n m o l/L).bT h ec o n c e n t r a t i o no fR S Da l d e h y d ew a s3m o l/L.2.4 实际样品分析图5 浓缩橙汁饮料分析H P L C-F L D色谱图:(A)未加标实际样品,(B)加标实际样品.F i g.5 H P L C-F L Dc h r o m a t o g r a m so fc o n c e n t r a t e do r a n g ej u i c eb e v e r a g e:(A)u n s p i k e dj u i c eb e v e r a g es a m p l e,(B)j u i c eb e v e r a g es a m p l es p i k e dw i t hC 1,C 2,HM F,Fa n dC 7s t a n d a r d s(1 m o l/Le a c h).按“1.2.3”将橙汁样品处理后,在优化条件下进行H P L C-F L D分离检测,所得色谱图如图5 A所示。图中我们发现了5种醛类衍生物色谱峰,这5个峰基线分离且峰形良好。根据保留时间,初步推断它们分别是C 1、C 2、C 7、HMF、F。为进一步验证,我们通过向实际样品中添加醛标准溶液并衍生后进行H P L C-F L D检测,所得色谱图如图5 B所示。图中显示,5种醛类色谱峰明显增高,进一步说明果汁样品中存在C 1、C 2、C 7、HMF、F。表2展示了果汁样品中检测到的醛类含量、方法回收率与精密度。方法回收率为9 0.7%1 0 7.2%,表明检测结果准确性高。日内与日间R S D分别为0.8%4.7%、2.1%5.1%,表明方法精密度高。橙汁样品中检测出C 1、C 2、HMF、F和C 75种醛类化合物,它们的浓度范围在0.7 0 19.1 1 4m o l/L。其中,C 1、C 2的含量为8.4 3 3m o l/L、9.1 1 4m o l/L,其中甲醛已经超过国家标准2 2,这表明食品中的醛类需要得到有效监控。表2 橙汁样品中醛类物质的回收率,相对标准偏差及含量T a b l e2 R e s u l t so f r e c o v e r y,R S Da n dc o n t e n t o b t a i n e du s i n gn i t r o n e f o r m a t i o nm e t h o d i nt h ed e t e r m i n a t i o no fa l d e h y d e s i no r a n g e j u i c eA n a l y t eA d d e d(m o l/L)F o u n d(m o l/L)R e c o v e r ya(%)R S D(%,n=6)I n t r a-d a yI n t e r-d a yC o n t e n t(m o l/L)C 101.72.84.98.4 3 30.2 3 312.69 5.96.36.65.223.69 7.50.90.91.7C 201.81.51.79.1 1 40.1 3 612.89 9.30.80.83.1643第3期分 析 科 学 学 报第3 9卷(续表2)A n a l y t eA d d e d(m o l/L)F o u n d(m o l/L)R e c o v e r ya(%)R S D(%,n=6)I n t r a-d a yI n t e r-d a yC o n t e n t(m o l/L)23.91 0 310.63.7C 700.15.41 0.10.7 0 10.0 0 311.19 8.21.81.84.622.21 0 222.33.0HMF00.54.37.52.5 5 30.0 7 911.59 8.71.31.36.122.71 0 711.24.7F00.63.21 3.21.3 0 10.0 4 211.31 0 221.66.322.19 0.70.91.03.9 aR e c o v e r y(%):AV GS D.3 结论本研究采用新型羟氨类荧光衍生试剂HAMC,通过硝酮化反应对醛类小分子进行标记,利用H P L C-F L D检测。该方法反应条件温和,衍生后的硝酮化产物具有良好的荧光性质和色谱分离行为,实现了1 3种醛类在C 1 8柱上的基线分离与高灵敏度检测。该方法线性范围宽、精密度高、准确性好。将该方法应用于橙汁样品分析并从中成功测定了C 1、C 2、C 7、HMF、F5种醛类。该法操作简单且无需富集萃取步骤,极大地节省了分析成本,在醛类化合物检测中极具应用前景。参考文献:1 X i a oZ,W uQ,N i uY,e t a l.J o u r n a l o fA g r i c u l t u r a l&F o o dC h e m i s t r y,2 0 1 7,6 5(3 8):8 3 9 2.2 Q i a oY,X i eBJ,Z h a n gY,e t a l.J o u r n a l o f I n t e g r a t i v eA g r i c u l t u r e,2 0 0 7,6(1 2):1 4 8 7.3 T s u z u k iS.J o u r n a l o fA g r i c u l t u r a l a n dF o o dC h e m i s t r y,2 0 1 9,6 7(1 7):4 7 2 0.4 P e n gCY,L a nCH,L i nPC,e t a l.J o u r n a l o fH a z a r d o u sM a t e r i a l s,2 0 1 7,3 2 4:1 6 0.5 S o a r e sM VL,A l v e sFEG,S i l v aL M A,e t a l.F o o dC h e m i s t r y,2 0 1 7,2 1 9:1.6 S e r r a n oM,G a l l e g oM,S i l v aM,e t a l.F o o dA d d i t i v e s a n dC o n t a m i n a n t sP a r tA-C h e m i s t yA n a l y s i sC o n t r o lE x p o s u r e&R i s kA s s e s s m e n t,2 0 1 7,3 4(9):1 4 6 1.7 S a f f a r i o n p o u rS,O t t e n sM.F o o dE n g i n e e r i n gR e v i e w s,2 0 1 8,1 0(2):8 1.8 Q i uS,W a n gJ.J o u r n a l o fF o o dS c i e n c e,2 0 1 5,8 0(1 0):S 2 2 9 6.9 V t o v E,S k a l o v K,M a h d a l o v M,e ta l.A c t aU n i v e r s i t a t i sA g r i c u l t u r a ee tS i l v i c u l t u r a eM e n d e l i a n a eB r u n e n s i s,2 0 1 5,6 3(1):1 4 7.1 0W a n gJ,K a r p u sJ,Z h a oBS,e t a l.A n g e w a n d t eC h e m i e-I n t e r n a t i o n a lE d i t i o n,2 0 1 2,5 1(3 8):9 6 5 2.1 1L i uC,J i a oX,H eS,e t a l.D y e sa n dP i g m e n t s,2 0 1 7,1 3 8:2 3.1 2B o u m y aW,H a mm a n iH,L a g h r i bF,e t a l.E l e c t r o a n a l y s i s,2 0 1 7,2 9(7):1 7 0 0.1 3H a r r i s o nF W,W e b e rP.H i s t o c h e m i s t r y,1 9 7 6,4 9(4):3 4 9.1 4D u r nGE,C h i n n i c iF,N a t a l iN,e t a l.J o u r n a l o f t h eS c i e n c eo fF o o da n dA g r i c u l t u r e,2 0 1 5,9 5(1 2):2 3 9 5.1 5R o d r g u e zM R,V y h m e i s t e rE,M e i s e nS,e t a l.A n a l y t i c a l a n dB i o a n a l y t i c a lC h e m i s t r y,2 0 1 7,4 0 9(2 8):6 5 9 5.1 6S o n gY,Z h a n gY,L i uN,e t a l.I n t e r n a t i o n a l J o u r n a l o fF o o dP r o p e r t i e s,2 0 1 7,2 0(s u p 1):S 3 9 9.1 7G u a nZ,D i n gM,S u nY,e t a l.R S CA d v a n c e s,2 0 1 7,7(3 2):1 9 7 0 7.1 8F D A.G u a i d a n c e f o r I n d u s t r y,B i o a n a l y t i c a lM e t h o dV a l i d a t e i o n.F D A,R e v1,2 0 1 3.1 9MA OL,WAN GY,HEZY.J o u r n a l o fA n a l y t i c a lS c i e n c e(茅龙,汪耀,何振宇.分析科学学报),2 0 2 0,3 6(2):2 1 7.2 0W a n gTC,W a n gH Y,X i aPF,e t a l.O p t i c sL e t t e r s,2 0 2 1,4 6(2 2):5 7 5 9.2 1G eH W,L i uGQ,Y i nR H,e t a l.M i c r o c h e m i c a l J o u r n a l,2 0 2 0,1 5 6:1 0 4 7 9 3.2 2S UNXL,Z HAN G W,L UANSL.M o d e r nF o o d(孙晓玲,张伟,栾绍乐.现代食品),2 0 2 1,(3):7 1.743第3期王成圣等:基于柱前衍生-高效液相色谱-荧光法检测橙汁中的醛类小分子第3 9卷D e t e r m i n a t i o no fA l d e h y d e s i nO r a n g eJ u i c eU s i n gN i t r o n eF o r m a t i o nD e r i v a t i z a t i o nC o m b i n e dw i t hH i g hP e r f o r m a n c eL i q u i dC h r o m a t o g r a p h yw i t hF l u o r e s c e n c eD e t e c t i o nWANGC h e n g s h e n g,L I UR a n,XUJ i n g,HUAN GL u j i e,X I NG u o l i n,WAN GP e i k e,L I NY a w e i*(D e p a r t m e n t o fC h e m i s t r y;S c h o o l o fC h e m i s t r y,C h e m i c a lE n g i n e e r i n g&L i f eS c i e n c e s,W u h a nU n i v e r s i t yo fT e c h n o l o g y,W u h a n4 3 0 0 7 0)A b s t r a c t:A l d e h y d e sa r eak i n do f i m p o r t a n tf l a v o rc o m p o u n d si nf r u i t j u i c e.I nt h i ss t u d y,ah y d r o x y l a m i n ef l u o r e s c e n tr e a g e n t4-h y d r o x y a m i n o b u t y l-7-m e t h o x yc o u m a r i n(HAM C)w a su s e dt od e r i v a t i z ea l d e h y d e st oa f f o r dn i t r o n ed e r i v a t i v e sw i t hh i g hf l u o r e s c e n c e i n t e n s i t i e sf o l l o w e db yH P L C-F L Da n a l y s i s.A f t e rt h eo p t i m i z a t i o no fd e r i v a t i z a t i o nc o n d i t i o n s,an i t r o n ef o r m a t i o nd e r i v a t i z a t i o nm e t h o dw a sp r o p o s e dw i t ht h em e r i t so f r o o m-t e m p e r a t u r er e a c t i o nw i t h i n3 0m i n.T h em e t h o dw a st h e nv a l i d a t e da n da p p l i e df o rt h ea n a l y s i so fo r a n g e j u i c es a m p l e s.F u r f u r a l,5-h y d r o x y m e t h y l f u r f u r a l,f o r m a l d e h y d e,a c e t a l d e h y d ea n dh e p t a n a l d e h y d ew e r es u c c e s s f u l l yd e t e c t e da n dq u a n t i f i e dw i t hh i g ha c c u r a c i e s.T h em e t h o dh a sh i g hs e n s i t i v i t y,g o o da c c u r a c ya n ds i m p l es a m p l ep r e t r e a t m e n t,p r o v i d i n ga ne f f i c i e n ta p p r o a c hf o rt h ea n a l y s i so f a l d e h y d e s i nc o m p l e xm a t r i x.K e y w o r d s:A l d e h y d e;N i t r o n ef o r m a t i o n;F l u o r e s c e n c ed e r i v a t i z a t i o n;H i g hp e r f o r m a n c e l i q u i dc h r o m a t o g r a p h y;4-H y d r o x y a m i n o b u t y l-7-m e t h o x yc o u m a r i n843