HIV_AIDS患者并发EBV和HCMV感染临床免疫学特征及影响因素分析.pdf

91现代检验医学杂志第 39 卷第 2 期2024 年 3 月J Mod Lab Med,Vol.39,No.2,Mar.2024HIV/AIDS 患者并发 EBV 和 HCMV 感染临床免疫学特征及影响因素分析周林颖，刘 兴，伍 勇，胡金伟（长沙市第一医院检验科，长沙 410005）摘 要：目的 调查人类免疫缺陷病毒/获得性免疫缺陷综合征（human immunodeficiency virus/acquired immune deficiency syndrome，HIV/AIDS）患者感染 EB 病毒（Epstein-Barr virus，EBV）和人类巨细胞病毒（human Cytomegalovirus，HCMV）的情况，检测相关临床免疫学指标，分析其影响因素。方法 选取 2022 年 112 月在长沙市第一医院住院并接受 EBV 和 HCMV 筛查的 1 093 例 HIV/AIDS 患者。流式细胞术检测 CD4+T 淋巴细胞数量；荧光定量 PCR 检测 HIV-RNA 载量、EBV-DNA 载量和 HCMV-DNA 载量。采用 SPSS 27.0 统计学软件进行统计分析,并通过 Logistic 回归分析 HIV/AIDS 患者并发病毒感染的危险因素。结果 1 093 例 HIV/AIDS 患者中，EBV-DNA 阳性率为 48.22%（527/1 093），HCMV-DNA 阳性率为 19.03%（208/1 093）。随着 CD4+T 淋巴细胞数量增加，EBV-DNA 和 HCMV-DNA 的阳性率下降（2=39.50，143.0，均 P0.001）；随着 HIV-RNA 载量增加，EBV-DNA 和 HCMV-DNA 的阳性率增加，差异具有统计学意义（2=46.18，124.3，均 P0.001）。另外，患者接受抗逆转录病毒治疗（antiretroviral therapy，ART）也可明显降低 EBV-DNA 和 HCMV-DNA 的阳性率，差异具有统计学意义（2=30.60，96.59，均 P0.001）。CD4+T 淋巴细胞数量和 HIV-RNA 载量有显著的负相关关系（r=-0.49，P0.001）。Logistic 回归分析显示 CD4+T 淋巴细胞数量 200 copies/ml（OR=1.70，95%CI:1.182.44，P=0.004），年龄 30 岁（OR=2.15，95%CI:1.443.19，P200 copies/ml（OR=2.56，95%CI:1.504.35，P0.001），CD4+T 淋巴细胞数量200个/l（OR=4.61，95%CI:2.578.28，P0.001）是HIV/AIDS 患者并发HCMV 感染的危险因素。结论 在艾滋病的治疗与管理中，当 CD4+T 淋巴细胞数量下降（200 copies/ml）或者年龄 30 岁时，应加强对病毒的监测和 ART，减少 HIV/AIDS 患者机会性感染的可能。关键词：人类免疫缺陷病毒；EB 病毒；巨细胞病毒；T 淋巴细胞；艾滋病病毒载量；抗逆转录病毒治疗中图分类号：R512.91；R373文献标识码：A文章编号：1671-7414（2024）02-091-05doi:10.3969/j.issn.1671-7414.2024.02.017Clinical Immunological Characteristic and Influencing Factors Analysis of HIV/AIDS Patients Infected with EBV and HCMVZHOU Linying,LIU Xing,WU Yong,HU Jinwei(Department of Clinical Laboratory,the First Hospital of Changsha,Changsha 410005,China)Abstract:Objective To investigate the basic information of human immunodeficiency virus/acquired immune deficiency syndrome(HIV/AIDS)patients who infected with Epstein-Barr virus(EBV)or human Cytomegalovirus(HCMV),collect the relevant clinical immunological data and analyze the influencing factors.Method A total of 1 093 HIV/AIDS patients treated in the First Hospital of Changsha from January to December 2022 and underwent EBV and HCMV screening were collected.Flow cytometry was used to detect the CD4+T lymphocytes.Fluorescence quantitative PCR was applied for HIV-RNA,EBV-DNA,and HCMV-DNA testing.Statistical analysis was carried out by using SPSS 27.0,and logistic regression was used to analyze the risk factors of HIV/AIDS patients complicated with viral infection.Results Among 1 093 HIV/AIDS patients,the positive rates of EBV-DNA and HCMV-DNA were 48.22%(527/1 093)and 19.03%(208/1 093),respectively.As the number of CD4+T lymphocytes increased,the positive rates of EBV-DNA and HCMV-DNA decreased,and the differences was statistically significant(2=39.50,143.0,all P0.001).As the level of HIV-RNA increased,the positive rates of EBV-DNA and HCMV-DNA increased,and the differences were statistically significant(2=46.18,124.3,all P0.001).The patients 基金项目：湖南省卫健委湖南省自然科学基金（2023JJ40066）：虚拟筛选以 Ltas 蛋白为靶点的活性小分子抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的相关研究；长沙市卫健委长沙市自然科学基金（kq2208455）：高通量筛选小分子化合物并探究其对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抗菌作用。作者简介：周林颖（1997-），女，硕士，技师，研究方向：临床病原微生物学，E-mail:zly123_。通讯作者：胡金伟（1980-），男，硕士，副主任技师，研究方向：临床病原微生物学，E-mail:。92现代检验医学杂志第 39 卷第 2 期2024 年 3 月J Mod Lab Med,Vol.39,No.2,Mar.2024receiving antiretroviral therapy(ART)significantly decreased the positive rates of EBV-DNA and HCMV-DNA(2=30.60,96.59,all P0.001).There was a significant negative correlation between the number of CD4+T lymphocytes and the level of HIV-RNA(r=-0.49,P0.001).Logistic regression analysis showed that the CD4+T lymphocyte count 200 copies/ml(OR=1.70,95%CI:1.182.44,P=0.004)and the age 30 years old(OR=2.15,95%CI:1.443.19,P 200 copies/ml(OR=2.56,95%CI:1.504.35,P0.001)and the CD4+T lymphocyte count 200/l(OR=4.61,95%CI:2.578.28,P0.001)were risk factors for HCMV infection in HIV/AIDS patients.Conclusion To reduce the possibility of opportunistic infection in HIV/AIDS patients,the surveillance of EBV and HCMV and regular ART should be strengthened,especially when the number of CD4+T lymphocytes decreases(200 copies/ml)or the age 30 years old.Keywords:human immunodeficiency virus；Epstein-Barr virus;cytomegalovirus；T lymphocytes；HIV-RNA；antiretroviral therapy艾滋病是由人类免疫缺陷病毒（human immu-nodeficiency virus，HIV）引起的一种传染病，病毒主要通过攻击人体 CD4+T 淋巴细胞从而破坏正常免疫系统，诱发各种机会性感染和肿瘤疾病的发生，最终导致患者的死亡1-2。EB 病毒（Epstein-Barr virus，EBV）和人类巨细胞病毒（human Cytomeg-alovirus，HCMV）是临床上最常见的机会性病原体之一，常引发HIV/获得性免疫缺陷综合症（acquired immune deficiency syndrome，AIDS）患者多器官的病变与损伤，造成不良的预后结果3。本研究通过检测HIV/AIDS患者外周血的CD4+T淋巴细胞数量、HIV-RNA 载量、EBV-DNA 载量和 HCMV-DNA 载量，研究不同免疫状态下 HIV/AIDS 患者感染 EBV和 HCMV 的情况，分析 HIV/AIDS 患者并发病毒感染的危险因素，以期对 HIV/AIDS 患者进行早期干预和治疗，减少机会性感染的发生。1 材料与方法1.1 研究对象 选取 2022 年 1 月 1 日 12 月 1 日在长沙市第一医院南院（传染性疾病专科医院）住院并接受 EBV 和 HCMV 筛查的 1 093 例 HIV/AIDS患者，所有患者诊断符合中国艾滋病诊疗指南（2018 版）诊断标准4，HIV 抗体初筛阳性后经湖南省疾病预防控制中心实验室进行蛋白印迹试验确诊为 HIV 感染。研究对象持续接受 ART 3个月为有效接受抗逆转录病毒治疗（antiretroviral therapy,ART）；未接受过 ART，ART 持续时间 400 copies/ml 判定为阳性。1.4 统计学分析 应用 SPSS27.0 软件进行数据统计分析，HIV-RNA 载量结果经对数转换后再进行处理。计数资料以例数或百分比（%）表示，两组间比较采用卡方（2）检验，相关性分析采用Spearman 秩相关分析，多因素分析采用 Logistic 回归分析 HIV/AIDS 患者并发病毒感染的危险因素，可信区间（confidence interval，CI）的信度视为95%。P0.05 为差异有统计学意义。2 结果2.1 HIV/AIDS 患 者 并 发 EBV 和 HCMV 感 染 的基本资料 见表 1。1 093 例 HIV/AIDS 患者中，EBV-DNA 阳性率为 48.22%（527/1 093），HCMV-DNA 阳性率为 19.03%（208/1 093）。女性 HIV/AIDS 患者 EBV-DNA 阳性率大于男性，差异具有统计学意义（2=6.04,P=0.014）；对于不同年龄阶段的患者，EBV-DNA 阳性率随着年龄的增加而增加，且不同年龄阶段的阳性率不同，差异具有统计学意义（2=15.97,P0.001）。对于不同性别以及不同年龄阶段的 HIV/AIDS 患者，HCMV-DNA 阳性率之间的差异无明显统计学意义。随着 CD4+T淋巴细胞数量增加，EBV-DNA 和 HCMV-DNA 的阳性率均下降，差异具有统计学意义（2=39.50，143.0,均 P0.001）；随着 HIV-RNA 载量增加，EBV-DNA 和 HCMV-DNA 的阳性率均增加，差异具有统计学意义（2=46.18，124.3,均 P0.001）。另外，患者接受 ART 也可明显降低 EBV-DNA 和93现代检验医学杂志第 39 卷第 2 期2024 年 3 月J Mod Lab Med,Vol.39,No.2,Mar.2024HCMV-DNA 的阳性率，且差异具有统计学意义（2=30.60，96.59,均 P0.001）。表 1 HIV/AIDS 患者感染 EBV 和 HCMV 的基本资料n（%）类 别nHCMV-DNA 阳性率2PEBV-DNA 阳性率2P性别男856166(19.39)0.340.562396(46.26)6.040.014女23742(17.72)131(55.27)年龄（岁）3014530(20.69)5.570.06248(33.10)15.975054889(16.24)283(51.64)CD4+T（个/l）50275126(45.82)143.00.001157(57.09)39.5020047816(3.35)179(37.45)HIV-RNA 载量（copies/ml）20052728(5.31)124.30.001198(37.57)46.18200566180(31.80)329(58.13)ART是52436(6.87)96.590.001207(39.50)30.60200 copies/ml的患者比例下降，差异具有统计学意义（2=247.9,P0.001）。分别将 CD4+T 淋巴细胞数量和 HIV-RNA 载量经对数转换后进行 Spearman 秩相关分析，二者呈显著负相关（r=-0.49,P30 岁、CD4+T 淋巴细胞数量 200 copies/ml 是 HIV/AIDS 患者并发 EBV 感染的危险因素，见表 2。CD4+T 淋巴细胞数量 200 copies/ml、未接受 ART 是 HIV/AIDS 患者并发 HCMV 感染的危险因素，见表 3。表 2 HIV/AIDS 患者并发 EBV 感染的危险因素分析因 素SEWaldPOR 95%CI性 别男1.00女0.290.163.420.0641.34 0.98 1.81年龄（岁）301.0030500.760.2014.16500.900.2020.632001.00502000.380.184.330.0371.46 1.02 2.08500.640.1616.650.0011.89 1.39 2.56HIV-RNA 载量（copies/ml）2000.530.198.230.0041.70 1.18 2.44ART是1.00否0.250.181.830.1761.28 0.90 1.803 讨论人类免疫缺陷病毒（HIV）主要通过攻击人体 CD4+T 淋巴细胞破坏免疫系统，从而诱发各种机会性感染和肿瘤的产生。其中，EBV 和HCMV 感染就是 HIV/AIDS 患者常见的机会性感染之一。EBV 和 HCMV 在正常人群中多为潜伏94现代检验医学杂志第 39 卷第 2 期2024 年 3 月J Mod Lab Med,Vol.39,No.2,Mar.2024感染，有研究检测发现 EBV-DNA 在健康人群中的阳性率为 0.1%1%6-7，HCMV-DNA 的阳性率为 0.16%0.23%8，明显低于 HIV/AIDS 患者 EBV-DNA 和 HCMV-DNA 的 阳 性 率，这 可 能 与 HIV/AIDS 患者免疫功能低下，无法有效抑制上述病毒的复制有关。此外，EBV 和 HCMV 感染易导致霍奇金淋巴瘤、视网膜炎等9-10艾滋病并发症的产生，造成不良预后，故及时监测、预防此类感染的发生变得尤为重要。表 3 HIV/AIDS 患者并发 HCMV 感染的危险因素分析因 素SEWaldPOR 95%CI性别男1.00女0.220.221.020.3121.25 0.81 1.93年龄（岁）500.080.260.100.7471.09 0.66 1.79CD4+T（个/l）2001.00502001.530.3026.170.0014.61 2.57 8.28502.480.3068.450.00111.96 6.64 21.53HIV-RNA 载量（copies/ml）2000.940.2711.990.0012.56 1.50 4.35ART是1.00否0.600.265.460.0191.83 1.10 3.02CD4+T 淋巴细胞数量常用来评估 HIV/AIDS 患者免疫损伤情况，其数量少于 200 个/l 时是 HIV/AIDS 患者进入艾滋病期的重要指标，少于 50 个/l 时是 HIV/AIDS 患者进入艾滋病晚期的危险信号。HIV-RNA 载量是反映体内病毒转录能力的高敏指标，其拷贝数小于 200 copies/ml 是接受治疗后病毒学应答成功的标准4，同时也是反映 HIV/AIDS患者体内病毒数量得到有效控制的重要依据。二者联合检测对评估疾病的进展、预后状况的判断具有重要临床意义11。本研究发现，CD+T 淋巴细胞数量与 HIV-RNA 载量呈负相关关系，与李雪等12报道的结果一致，提示机体细胞免疫功能随着病毒载量的升高而降低。因此，当检测条件有限，无法检测 HIV-RNA 载量时，可通过 CD4+T 淋巴细胞数量反映患者体内病毒转录情况以及抗病毒治疗效果。CD4+T 淋巴细胞数量 200 copies/ml 的 HIV/AIDS 患 者 EBV-DNA 和 HCMV-DNA 的阳性率更高；与 EBV-DNA和 HCMV-DNA 阴性组比较，EBV-DNA 和 HCMV-DNA 阳性组的患者 CD4+T 淋巴细胞数量显著下降，HIV-RNA 载量显著升高，这与以往文献报道的结果一致13-14。说明 HIV/AIDS 患者细胞免疫功能低下或者 HIV 病毒数量未被有效控制时，机体清除 EBV 和 HCMV 的能力下降，成为上述病毒易感的危险因素。同时，EBV 和 HCMV 的感染会进一步降低患者体内的 CD4+T 淋巴细胞数量，提高 HIV-RNA 载量，加速疾病进展。在性别、年龄等方面，HCMV-DNA 阳性率无明显差异，这可能与 HCMV 普遍易感有关，但 EBV-DNA 阳性率女性稍高于男性，与王大刚等13,15人报道的结果有所不同，这可能与样本类型的差异、样本量的大小有关。此外，年龄 30 岁也是 EBV 易感的危险因素，这可能与机体免疫防御功能的下降有关，说明在进行 EBV 筛查时，年龄应作为重点考虑因素之一。据文献报道，HIV/AIDS 患者接受 ART 后可使HCMV 感染发生率下降 55%80%5，本研究也表明 ART 是 HCMV 感染的保护因素，推测这可能与有效抑制 HIV 病毒的转录、促进免疫系统的重建有关，但具体机制还需进一步研究探讨。本研究还存在以下不足之处：本研究为回顾性研究，仅通过全血 EBV-DNA 和 HCMV-DNA 的阳性率反映 EBV和 HCMV 感染的情况，不够全面和完善；纳入的样本量不够；未分析病程对病毒感染的影响。今后应选取不同的标本类型和检测方法（如测定血清病毒抗体等）、扩大样本量、完善艾滋病不同阶段对EBV 和 HCMV 感染的影响。综 上 所 述，CD4+T 淋 巴 细 胞 数 量 200 copies/ml 时，EB-DNA 和 HCMV-DNA 的阳性率增加。故在艾滋病的治疗与管理中，应加强对 EBV 和 HCMV 的监测，加强抗逆转录病毒治疗，减少患者机会性感染的 可能。参考文献：1 BERHAN A,BAYLEYEGN B,GETANEH Z.HIV/95现代检验医学杂志第 39 卷第 2 期2024 年 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