Qubit统一标准操作作业规程.docx

Qubit 3.0荧光定量仪操作和维护规程一、目标使Qubit 3.0荧光定量仪能够正确和正常使用，确保系统正常运行正确性和精密度，以取得正确可靠检验结果。二、适用范围可用于定量DNA,RNA, micro RNA和蛋白质,使用高度敏感和正确荧光技术量子位定量分析三、工作原理Qubit荧光定量仪采取荧光染料和特异性靶分子结合。这些荧光染料只有和这些靶分子结合时才会发射荧光信号，即使在浓度很低时。Qubit3.0荧光定量仪比传统紫外吸光法愈加正确。以往紫光吸光法不具选择性，测量260nm全部分子吸光值包含DNA，RNA，蛋白质，游离核苷酸或多出盐离子。另外，紫外分光光度计灵敏度不足，无法完成低浓度DNA和RNA正确定量。使用Qubit荧光定量仪，将大大提升正确性。因为Qubit分析试剂盒里荧光染料只和样品中特异分子结合DNA,RNA或蛋白，避免不正确测量带来反复工作四、职责试验室负责该系统日常维护保养，包含每七天保养，和需要时保养工作。1.确保仪器设备在计量使用期内使用，并配合完成计量相关工作。2.负责仪器设备正确使用、妥善保管和精心维护。3.负责仪器设备日常保养、定时校准。五、仪器特点1.快速和高度正确定量 DNA，RNA 和蛋白质样品少于 5 秒。2.高水平正确性只有 1 20 L 样品，甚至用很稀样品3.使用染料选择性双链 Dna、 RNA 或蛋白质样品中污染物影响降至最低。4.大型、 优异彩色触摸屏为简单工作流导航。5.以图形方法显示达 20 数据点6. 能够个性化仪器用户界面将显示只有常见化验六、使用要求1.不要在阳光直射下操作仪器2.样品处理过程中需带无粉橡胶手套3. 在室温使用仪器(22-28C)4.测量之前已经进行校准七、操作指南仪器外观触摸屏USB 驱动器端口电源插口USB电缆接口样品室7.1仪器开启和关闭1. 该仪器在平坦地方,水平,干燥表面2. 将提供电源线一端插入Qubit 3.0荧光计3. 电源线另一端附加合适插头适配器，插在适宜电源上4. 仪器自动开启,首先显示闪屏,然后主屏幕5. 要关闭Qubit 3.0荧光计，直接拔下电源7.2仪器开机后，主屏幕自动显示，能够在屏幕上选择以下功效：1.选择一个定量测定：dsDNA, RNA, oligo (ssDNA), 蛋白质,或离子球2.选择荧光计模式3.访问以前保留数据4.系统设置 7.3屏幕设置（Instrument settings）1.睡眠模式2.亮度设置3.日期时间设置4.恢复设置5.语言设置7.3.1设置睡眠模式：a.系统默认为10分钟进入睡眠模式，如要调整该项，在屏幕上点击“Sleep mode”b.点击文本框中得数字，然后更改，仪器设置范围为160分钟c.设置好后点击保留返回设置界面7.3.2设置亮度a.屏幕上点击“Brightness”b. 移动滑块按钮向上或向下调整显示器亮度c. 设置好后点击保留返回设置界面7.3.3设置时间日期a.屏幕上点击“Date/Time”b.选着日期时间格式然后进入下一步c.点击对应文本框进行设置d.设置完成后点击保留返回设置界面7.3.4恢复设置：恢复出厂设置，删除全部保留数据,用户定义仪器设置和定制化验，该选项请慎重选择7.3.5语言设置a.屏幕上点击“Language”b. 选择对应选项c.点击保留返回设置界面7.4校准仪器工作原理是先使用标准浓度试剂生成荧光值和浓度二维坐标轴，检测时测出溶液荧光值，然后依据荧光值来换算浓度，所以进行测验时需要选择新校准或使用以前保留校准（如该功效第一次使用或更换检测试剂盒就需重新校准）7.4.1点选需要检测项目，进入下一级目录7.4.2点选试验，如第一次选择会直接提醒进行校准，如以前进行过校准，则会提醒使用以前或新进行校准，这里选择进行校准7.4.3出现下面界面，将试剂盒中用于校准标准品1#放入样品室，点击“Read standard”，大约3秒，读取完成进入到下一步，放入标准品2#，点击“Read standard”（蛋白质校准还需放入标准品3#）。 7.4.4校准完成后能够不将标准品2#取出直接检测浓度，查看校准是否成功。假如校准成功,软件显示读取标准屏幕,显示荧光和浓度图。在荧光和浓度图:标准数据点被一条线连接。（圆圈表示正确标准）假如校验不成功,软件显示“校准误差”消息，需重新进行校准7.5样品检测7.5.1将样品和反应液混合（混合方案具体见试剂盒）孵化一段时间（DNA和RNA为2分钟，蛋白质需要15分钟）7.5.2在阅读标准屏幕,点击运行样本7.5.3在样本体积屏幕,选择样本体积和单位a. 触摸+和-按钮在方向盘上选择样本体积添加到试验管(1 - 20L)。b. 从下拉菜单中,选择单位输出样本浓度 7.5.4将样品管插入到样品室,关上盖子,然后点击读取管。大约需要3秒 7.5.5在屏幕上就会显示所需检测浓度7.5.6多个样品检测：a.相同体积和浓度单位：只需更换样品室中样品管，点击读取管b.不一样体积和浓度单位：反复上诉步骤更改体积和浓度单位7.5.7检测浓度存在一定范围，如超出检测范围会显示“超出范围”7.5.7能够点击屏幕上左右箭头进入体积浓度设置界面和荧光和浓度图1.空心圆表示进行校准标准品2.大灰色圆圈代表最新样品3.蓝色圆圈代表在检测范围内4.黄色圆圈代表在拓展范围内5.红色圆圈代表在仪器检测范围外7.6荧光模式能够选择荧光模式来作为mini荧光计使用（光源通道蓝色 (470 nm) 或红色 (635 nm) ）7.6.1主界面点击“Fluorometer”，进入下一级，选择对应选项7.6.2放入样品，点击读取管7.6.3选择蓝光时，显示结果有蓝光和红光检测数值，选择红光时，只显示红光检测数值7.7数据管理Qubit 3.0机子本身能够存放1000样本数据，对保留数据，能够进行以下操作：a.针对每个样本查看具体数据b.重命名数据文件c.能够保留数据，导出到USB存放器或电脑中d.删除数据文件7.7.1从浓度检测界面、荧光和浓度图界面、主屏幕点击“Data” 7.7.2出现数据屏幕,点击想查看数据集7.7.3点击想要查看数据，就会出现以下具体数据列表7.7.4如需更改数据显示名称，在具体数据界面点击数据名（上图红色框），在弹出界面输入想要更改即可7.7.5如需导出数据，将USB存放器插入Qubit 3.0USB接口上，假如想导出是数据集，则勾选该数据集；如需导出是单个数据，则点击数据集进入再勾选需要导出数据7.7.6点击导出数据，数据就会以.CSV格式保留到USB存放器