基于网络药理学、分子对接与细胞实验研究山沉香对急性肝损伤的作用机制.pdf

中国药理学与毒理学杂志2023年9月第37卷增刊1Chin J Pharmacol Toxicol，Vol 37，Suppl 1，Sep 2023markers and histopathological examination of theliver were used to assess the efficacy of NACand GSH in reversing flupirtine-induced hepatotoxicity.Finally,the effect of GSH on the saferange of flupirtine was assessed in an acute toxicity assay.RESULTS Flupirtine and NAC produceddose-dependentantiallodyniceffectsevoked by carrageenan and paclitaxel in mice.Inthe above model,the combination of NAC andflupirtine produced an unexpected synergisticanalgesic effect.There were no significant differences observed in the hepatotoxicity markersand liver histopathology between the experimental group and the control group under NAC andGSH treatment.Finally,GSH(200 mg kg-1)expanded the therapeutic index of flupirtine by1.77 times.CONCLUSION NAC and GSH areeffective in preventing liver damage caused bylong-term flupirtine use,which provides a solution for the safe and effective treatment of chronicpain with flupirtine.In addition,the other beneficial effects of NAC and GSH when combinedwith flupirtine may provide the basis for the development of a new therapy with minimal side-effects and good efficacy.Key words:N-acetylcysteine;reduced glutathione;flupirtine;hepatotoxicityFoundation item:Priority Academic ProgramDevelopment of Jiangsu Higher Education Institutions(2022JSPAPD006)Corresponding author:CHEN Jinsong,E-mail:W2-6-2基于网络药理学和实验验证探讨苓荷颗粒对非酒精性脂肪肝的作用机制胡宇婷1，王 佳1，汪晨冉1，蔡 虹2，陆奕宇1（1.上 海 中 医 药 大 学 交 叉 科 学 研 究 院，上 海201203；2.厦 门 市 中 医 院 肝 病 科，福 建 厦 门361001）摘要：目的 基于网络药理学及动物实验验证探讨苓荷颗粒对非酒精性脂肪肝（NAFLD）的作用 机 制。方 法 网 络 药 理 学 预 测 苓 荷 颗 粒 对NAFLD 的 靶 点 和 信 号 通 路；高 脂 饮 食 诱 导 的NAFLD 大鼠模型，给予不同剂量的苓荷颗粒灌胃治疗，评估其药效。观察大鼠体重，状态及肝体比的变化；油红 O 和 HE 染色评估大鼠肝脏组织的病理学变化；生化分析检测大鼠血清 TC、TG、ALT 和 AST 的含量变化；Western 印迹法检测大鼠肝脏组织中 SREBP1，SCD1，EZH2，和 Nrf2 的蛋白表达情况。结果 网络药理学筛选出苓荷颗粒潜在活性成分134个，NAFLD的靶点基因1029个；构建成分-靶点网络，获得潜在作用靶点 258个。靶点基因的 GO 和 KEGG 富集分析显示苓荷颗粒的作用机制可能与氧化应激及多种代谢性疾病途径显著相关。动物实验验证显示，苓荷颗粒能 够 改 善 NAFLD；降 低 大 鼠 肝 组 织 SREBP1，SCD1，EZH2 蛋白表达水平，提高核内 Nrf2 蛋白表达水平。结论 苓荷颗粒的潜在活性成分可能降 低 脂 肪 代 谢 相 关 蛋 白 表 达，通 过 作 用 靶 点EZH2，Nrf2 调 控 氧 化 应 激 信 号 通 路，起 到 对NAFLD大鼠的治疗作用。关键词：苓荷颗粒；非酒精性脂肪肝；网络药理；氧化应激机制基 金 项 目：上 海 市 卫 健 委 临 床 研 究 专 项（202240243）；国 家 自 然 科 学 基 金 资 助 项 目（82274183）；上海中医药大学产业发展中心医养结合科创项目（YYKC-2021-01-117）；厦门市卫健委医学科研计划项目（2021D006）；厦门市中医院医疗卫生科技计划项目（3502Z0214ZD1150）通讯作者：陆奕宇，E-mail：W2-6-3基于网络药理学、分子对接与细胞实验研究山沉香对急性肝损伤的作用机制秦园媛1，任妍慧1，常福厚1，2，杨 艳1，2，范 蕾1，2（1.内蒙古医科大学药学院，内蒙古 呼和浩特010010；2.内蒙古自治区新药筛选工程研究中心，内蒙古 呼和浩特 010010）摘要：目的 探讨山沉香对急性肝损伤（ALI）的作用机制，并通过细胞实验进行验证。方法 通过PubChem 数据库并结合文献，根据 SwissTargetADEM、SwissTargetPrediction 平台预测山沉香化学成分及其作用靶点；通过 GeneCards、OMIM 数据库筛选ALI相关靶点，Venny2.l.0平台获取山沉香有效成分与ALI的共有靶点；STRING数据库构建 PPI 网 络，Cytohubba 筛 选 核 心 靶 点；Cytoscape3.9.0 软件构建成分-靶点-疾病网络图；29中国药理学与毒理学杂志2023年9月第37卷增刊1Chin J Pharmacol Toxicol，Vol 37，Suppl 1,Sep 2023David 6.8 数 据 库 分 析 共 有 靶 点 并 进 行 GO 和KEGG 富集分析与分子对接；细胞实验检测 ALT、AST、MDA、SOD、GPx、IL-6、IL-1、TNF-因子，Western 印迹验证 PI3K-AKT 信号通路。结果 山沉香中的67个成分可作用于118个共有靶点并通过 AKT1、TNF、SRC 等 20 个核心靶点及 PI3K-AKT、MAPK及ErbB等181条信号通路发挥抗ALI作用。分子对接显示山沉香木脂素或为山沉香抗ALI的有效成分。细胞实验显示山沉香可显著降低ALI细胞中MDA与上清液中ALT、AST、IL-6、IL-1、TNF-含量并升高细胞中SOD、GPx含量。Western 印迹结果显示山沉香可有显著低 ALI 细胞中PI3K与 AKT含量。结论 山沉香木脂素或为蒙药山沉香抗ALI的主要活性成分，其作用机制可能与PI3K-AKT信号通路有关。关键词：山沉香；急性肝损伤；网络药理学基 金 项 目：内 蒙 古 自 治 区 自 然 科 学 基 金（2021MS08155）；内 蒙 古 医 科 大 学 面 上 项 目（YKD2021MS041）通讯作者：范 蕾，E-mail：W2-6-4基于网络药理学和分子对接探讨山沉香对肝癌的作用机制任妍慧1，秦园媛1，常福厚1，2，范 蕾1，2，赵 雪1，2（1.内蒙古医科大学药学院，内蒙古 呼和浩特010010；2.内蒙古自治区新药筛选工程研究中心，内蒙古 呼和浩特 010010）摘要：目的 挖掘山沉香治疗肝癌的作用机制。方法 通过山沉香相关文献获取山沉香的化学成分并通过 SwissTargetPrediction 数据库预测作用靶点；采用 Concensus Cluster Plus 包、Limma 包对 TCGA数据库下载的肝癌靶点进行一致性聚类分析、差异基因分析；将差异基因进行 GO 和KRGG富集分析；构建成分-靶点-通路网络图并进行分子对接。结果 山沉香中的 86个化学成分可作用于 692 个靶点发挥抗肝癌作用；主要通过PLK1、TTK、CDC25A、AURKB、MMP1、TNF、MMP9、IGF1R 8个核心靶点以及细胞周期、IL-17信号通路和黄体酮介导的卵母细胞成熟 3条通路发挥对肝癌的治疗作用。分子对接结果显示，Vitrofolal E、Umbelliferone、Burselignan 可能为山沉香治疗肝癌的有效化合物。结论 本文研究初步分析了山沉香治疗肝癌的分子机制，为后期作用机制的研究提供思路。关键词：山沉香；肝癌；网络药理学；分子对接；作用机制基 金 项 目：内 蒙 古 自 治 区 自 然 科 学 基 金（2021MS08155）；内 蒙 古 医 科 大 学 面 上 项 目（YKD2021MS041）通讯作者：赵 雪，E-mail：W2-6-5基于网络药理学对原阿片碱肝损伤保护作用及机制研究周海伦，杨晓婧，张万紫，王 睿，吕金玲，姬 玉，李美霖，王 丽，李 华（大连医科大学药学院，辽宁 大连 116044）摘要：目的 本研究拟结合网络药理学方法及肝细胞实验研究，筛选具有肝保护作用中药有效成分并对其机制进行探讨。方法 筛选 ETCM、TCMSP、ETCM、TCMID数据库中有肝保护作用中药及有效成分，再建立对乙酰氨基酚（APAP）肝损伤模型验证。通过SwissTargetPrediction平台，预测有效成分作用靶点。与DisGeNET、OMIM、GeneCard 平 台 筛 选 肝 损 伤 靶 点 取 交 集，再 通 过STRING、Cytoscape3.7.2构建蛋白相互作用网络和药物-靶点互作网络，筛选核心靶点。最终通过APAP诱导人正常肝细胞（LO2）损伤模型进行作用机制的验证。结果 通过ETCM、TCMSP、ETCM、TCMID数据库，筛选出13味中药，337个活性成分，高频出现活性成分27个，借助文献及APAP肝损伤模型验证，确定原阿片碱进行后续研究。通过构建蛋白相互作用网络和化合物-靶点互作网络，最终筛选 出 JAK2、PIK3CD、PIK3CB、PIK3CA、SIRT1、SYK等6个核心靶点。结合文献检索，选取SIRT1为目标靶点。细胞实验表明，原阿片碱明显增加损伤肝细胞 SIRT1 表达（P0.01），原阿片碱各组SIRT1下游因子NRF2、HO-1、SOD2表达均较模型组显著升高（P0.05），ROS 含量明显降低（P0.01）。结论 利用网络药理学成功筛选出具有肝保护作用的原阿片碱，并进行验证。其作用机制与激活SIRT1/NRF2信号通路，减轻APAP诱导的细胞氧化损伤有关。关键词：网络药理学；肝损伤；中药有效成；原阿片碱；SIRT1/NRF2通路通 讯 作 者：李华，E-mail：；王 丽，E-mail： 30