DB23_T2539—2019 针叶天蓝绣球组培繁殖技术规程(黑龙江省).pdf

ICS 65.020 B 62 DB23 黑龙江省地方标准DB23/T 2539-2019 针叶天蓝绣球组培繁殖技术规程2019-12-13发布2020-01-12实施黑龙江省市场监督管理局发布目IJ1=1 本标准依据GB/T1.1-2009的编写规则起草。本标准由黑龙江省科学院提出。DB23/T 2539-2019 本标准起草单位:黑龙江省科学院自然与生态研究所、五常市桂丹园艺有限公司O本标准主要起草人:曲彦婷、孟凡娟、马游、唐焕伟、陈菲、李黎、韩辉、熊燕、刘畅、张革燕、张悦、李虹、张天妹。DB23/T 2539-2019 针口十天蓝绣球组培繁殖技术规程1 范围本标准规定了针叶天蓝绣球(Phloxsubulata L.)组培繁殖的环境与设备消毒、培养基配制、外植体选择与消毒、外植体接种、继代增殖、壮苗培养、生根培养、培养条件、移栽及生产档案。本标准适用于针叶天蓝绣球的种苗生产。2 规范性寻|用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB!T 6001 育苗技术规程LY!T 1882 林木组织培养育苗技术规程NY!T 2306 花卉种苗组培快繁技术规程3 环境与设备消毒3.1 接种室消毒接种室消毒按NY/T2306-2013中8.6进行。3.2 超净工作台消毒超j争工作台消毒按NY!T2306-2013中8.5、8.6进行。3.3 培养室消毒培养室消毒按NY/T2306-2013中8.7进行。3.4 接种器具消毒接种器具按NY!T2306-2013中8.4进行。4 培养基配制4.1 母液配制培养基母液配制按NY!T2306-2013中7.3执行。4.2 培养基配制4.2.1 培养基配方培养基配制成分如下:DB23/T 2539-2019 a)接种培养基MS+NAAO.5mg/L十6BA1mg/L十黑糖30g/L+琼脂粉5g/L，而值6.0。b)继代增殖培养基MS+NAAO.5 mg/L+6BA2mg/L+底糖30g/L+琼脂粉5g/L，pH值6.0。c)壮苗培养基MS+庶糖30g/L+琼脂粉5g/L，pH直6.0。d)生根培养基:1!2MS十IBA1mg/L+NAAO.5 mg/L+臣和吉30g/L+琼脂粉5g/L十活性炭3g/L，pH 值6.0。4.2.2 培养基配制方法培养基配制方法按NY!T2306-2013中7.4执行。4.3 培养基贝菌及保存培养基灭菌及保存方法按LY!T1882-2010中4.2进行。5 外植体选择、消毒与接种5.1 外植体选择春季从生长健壮无病虫害的母株上剪当年生的粗壮嫩茎作为外植体，应晴天进行。5.2 外植体消毒将外植体置于500mL烧杯中，烧杯口套纱网，加2滴4洗洁精，先用自来水浸泡8min10min后，再冲洗30min，fi争水，在超j争工作台上用75%酒精清洗10s1.5s后取出，浸泡于0.1%氯化末溶液中6min8min，轻摇，倒掉消毒液后用无菌水冲洗3次5次，再用无菌滤纸吸干表面的水分备用。5.3 接种与诱导培养将消毒后的外植体切成lcm2cm的茎段，每段至少带有l个2个叶芽，将切好的外植体接种到诱导培养基中，注明接种物名称和日期，培养21d28d，记录诱导情况。6 继代增殖、壮苗与生根培养6.1 继代增殖培养切分诱导分化的不定芽接入继代增殖培养基中，约8个/瓶，培养28d35d，每个茎段萌发出5个8个不定芽，分割新长出的不定芽，可按需求重复继代06.2 壮苗培养切耳又继代增殖培养中长1.Ocm以上的不定芽，转接至壮苗培养基中，约8个/瓶，培养14d21do6.3 生根培养壮苗培养基中组培苗长到2.0cm以上高度时，将小苗转入生根培养基中，约10株/瓶，培养7d10d，当小苗基部长出健壮的不定根3条以上，大部分苗根长为O.5cm2.0cm时，即可进行移裁。7 培养条件无菌培养室白天的温度控制在23:!:2C，夜间不低于15C，相对空气温度控制在60%80%，光HR强度为2000Lux3000Lux，光照、时间为12h/d14h忡，黑暗时间为10h/d12h/do8 移栽2 DB23/T 2539-2019 8.1 炼苗将生根培养瓶转移到过渡培养间，半开瓶口1d2天后，敞开瓶口炼茵2d3d后可移裁。8.2 移栽基质的制备基质选择草炭、珍珠岩和蛙石混合，体积比约为2:2:1，栽植前用o.5%的高锚酸怦溶液浇透消毒24ho8.3 组培苗移栽在温室取出生根的小苗，用清水洗净根部培养基，清洗时应避免伤根。将洗净的生根苗移栽至装基质的128穴盘，移栽后压实小苗周围的基质，浇透水，覆70%遮阳网。8.4 移栽苗管理保证温室内幼苗水分供甫平衡，育苗水分管理按GB!T6001执行。移栽5d7d后，去掉遮阳网，浇1/2 MS营养液1次，温度220C280C，相对空气湿度60%80%，温室环境应保持清洁，21d28d新生根系长出，将穴盘苗装入营养钵，常规管理即可。9 生产档案建立针叶天蓝绣球组织培养繁殖技术档案，包括繁殖培养条件、培养基配制、外植体接种、增殖数量、种苗驯化移栽及管理等。3