microRNA调控成骨分化修复股骨头坏死塌陷的研究进展.pdf

中 国 组 织 化 学 与 细 胞 化 学 杂 志CHINESE JOURNAL OF HISTOCHEMISTRY AND CYTOCHEMISTRY第 32 卷第 3 期2023 年 6 月Vol.32.No.3June.2023收稿日期2022-10-14 修回日期2023-06-05基金项目国家自然科学基金项目资助（81860861，8206 0876）作者简介吕子豪，男(1996 年)，汉族，硕士研究生在读*通讯作者(To whom correspondence should be addressed)：microRNA 调控成骨分化修复股骨头坏死塌陷的研究进展吕子豪1，周明旺2*，王晓萍2，吉星2，李盛华2（1甘肃中医药大学，兰州 730000；2甘肃省中医院，兰州 730050）摘要股骨头坏死（osteonecrosis of the femoral head,ONFH）往往会因股骨头内生物力学的不稳定而进一步加重，股骨头塌陷的本质是坏死修复的启动导致骨吸收多于骨形成。通过调控成骨分化进程，使成骨与破骨形成一种利于骨生长的平衡状态，可以对 ONFH 的塌陷区域进行修复。microRNA 作为可以调控成骨分化过程中各阶段不同细胞的增殖与分化的非编码单链 RNA 分子，通过不同信号通路对成骨分化起到正向调节或负向调节，骨桥蛋白、Runt 相关转录因子 2 及成骨细胞特异性转录因子等在成骨分化的多个阶段也发挥着不同的作用，也可以作为成骨检测标志物来应用。本文从近年来 microRNA对成骨分化相关生物标记物的干预作用进行分析和总结，阐述成骨分化在 ONFH 塌陷修复中的调控机制，并展望 microRNA调控成骨分化在修复 ONFH 塌陷中的研究前景。关键词微小核糖核酸；股骨头坏死；骨塌陷修复；成骨分化；调控机制中图分类号R681.2 文献标识码A DOI：10.16705/ki.1004-1850.2023.03.013Research progress of microRNA regulating osteogenic differentiation to repair collapse of femoral head in osteonecrosisLv Zihao1,Zhou Mingwang2*,Wang Xiaoping2,Ji Xing2,Li Shenghua2(1 Gansu University of traditional Chinese medicine,Lanzhou Gansu Province 730000;2 Gansu Provincial Hospital of traditional Chinese medicine,Lanzhou Gansu Province 730050)AbstractOsteonecrosis of the femoral head(ONFH)often aggravates due to the biomechanical instability of the femoral head,and the essence of femoral head collapse is the initiation of necrosis repair resulting in bone absorption more than bone formation.By regulating the process of osteogenesis,a balanced state conducive to bone growth can be achieved to repair the collapse area of ONFH.MicroRNAs,as non-coding single-stranded RNA molecules that can regulate the proliferation and differentiation of different cells in different stages of osteogenesis,can positively or negatively regulate osteogenesis through different signaling pathways.Bone bridge proteins,Runt-related transcription factor 2,and osteoblast-specific transcription factors also play different roles in multiple stages of osteogenesis and can be used as osteogenesis detection markers.This article analyzes and summarizes the intervention effects of mi-croRNA on osteogenesis-related biomarkers in recent years,elucidates the regulatory mechanism of osteogenesis in the repair of ONFH collapse,and looks forward to the research prospects of microRNA regulating osteogenesis in the repair of ONFH collapse.KeywordsmicroRNA;osteonecrosis of the femoral head;repair of bone collapse;osteogenic differentiation;regulatory mechanism股骨头坏死（osteonecrosis of the femoral head,ONFH）是由于股骨头内血供受阻，引起骨细胞死亡与修复交替，继发股骨头内微骨折、软骨下骨折，出现“头内不稳定”的状态，最终导致关节面塌陷，并发骨性关节炎的骨伤科疾病1。ONFH是一种退行性、难治性、骨细胞坏死性的骨骼疾病，其病因包括创伤、类固醇2使用和酒精摄入等。股骨头塌陷作为ONFH发生与发展的关键转折点3，其本质是坏死修复的启动导致骨吸收多于骨形成，进而使股骨头内生物力学失稳1。如何利用成骨分化的这一机制使骨形成与骨吸收达到平衡进而防治股骨头坏死，一直是学者们研究与思考的关键问题。成骨分化作为骨修复的一个重要步骤，需要我们对它相关机制作进一步的研究，以便更好的利用成骨分化作用促进塌陷部位的骨再生。微小 RNA（microRNA）可用来吕子豪等.microRNA 调控成骨分化修复股骨头坏死塌陷的研究进展第 3 期 309阐述 ONFH 疾病的机理，也可作为 ONFH 生物标志物参与针对ONFH的靶向给药，miRNA转录后可通过改变靶点信使 RNA（mRNA）的翻译来控制各种分化因子及受体的表达，调控成骨细胞（osteoblast,OB）等的增殖与分化，进而起到组织修复作用。1 成骨分化修复骨塌陷的机制股骨头骨组织缺损严重或血供产生障碍时，成骨与破骨平衡会被打破，致使骨组织的自我修复能力无法满足自体需求，最终引起骨坏死的发生。在骨的重建过程中，成骨活动、血管生成与骨生长和再生联系密切4。miR-320a 通过抑制-连环蛋白（-catenin）在骨质疏松症的成骨分化过程中调节 Wnt/-catenin 信号通路5，-catenin 作为 Wnt 信号通路的主要成分，还在OB的增殖中起着至关重要的作用，这与ONFH的发病机制密切相关6，也与股骨头塌陷的修复过程紧密联系。Wnt/-catenin、Ihh/PTHrP、TGF/BMP和 IGF-1/PI3K-Akt 信号在骨折修复中操纵着骨膜细胞的成骨分化7，不论是 OB 的增殖还是成骨分化作用的增强，都可对 ONFH 中股骨头骨塌陷的修复起到积极作用。另一项研究表明8，激素性 ONFH中 Wnt/-catenin 信号通路受抑制会导致调控成骨分化相关基因 Runt 相关转录因子 2（runt-related tran-scription factor 2,Runx2）、骨桥蛋白（osteopontin,OPN）及 Wnt5a/b、-Catenin 蛋白等表达受到影响，这是由于骨髓间充质干细胞（bone mesenchymal stem cells,BMSCs）增殖受到抑制，致使存活细胞数量下降，成骨、成脂分化的平衡紊乱，破坏骨修复的平衡，这也是引发激素型 ONFH 患者股骨头塌陷的发病原因之一。BMSCs 具有向成骨细胞分化和促进血管再生的能力，ONFH 患者自体 BMSCs 的 LncRNA表达谱异常可能导致其增殖和成骨能力下降。现代研究表明9,10，骨代谢相关信号通路异常转导造成的BMSCs异常增殖分化、骨代谢平衡失调11-13、骨小梁破坏增加14可能是引起 ONFH 的重要原因。成骨分化相关机制影响并参与 ONFH 的病程发展，ONFH 常因股骨头骨结构的塌陷导致髋关节功能逐渐丧失，病理变化的核心在于长期持续存在的骨生成速率低于骨吸收速率15。由此可见，通过调节成骨分化进而改善股骨头塌陷可延缓 ONFH 的发生，甚至对坏死塌陷产生逆向影响，这种影响可能通过 microRNA 来实现。2 microRNA 调控成骨分化影响股骨头塌陷microRNA可用来阐述ONFH疾病的机理，也可作为 ONFH 生物标志物，研究认为，microRNA 对于成骨分化发挥促进或抑制作用。2.1 正向促进许多miRNA对成骨分化起到促进作用，进而起到对 ONFH 股骨头塌陷的治疗。miRNA-21 通过 IL-1 和 HIF-1 通路提高碱性磷酸酶（ALP）、Runx2、OPN 及成骨细胞特异性转录因子（osterix,OSX）在 mRNA 及蛋白的表达水平，进而成为骨重塑中的关键转录后调节剂，调节成骨细胞和破骨细胞的功能16，将成骨与破骨平衡调节到修复股骨头塌陷的最佳平衡状态。Smads 蛋白是转化生长因子-（TGF-）和骨形态发生蛋白（BMP）成员的关键细胞内效应物，在骨骼发育、骨形成和骨稳态过程中对OB分化的调节至关重要17。miR-452-3p 通过 Smad4 靶点增强成骨细胞分化，并且通过抑制miRNA-452-3p的表达以增加 Runx2、OPN 的表达，进而用于治疗骨形成和再生18。miR-320a 的抑制减弱 Smad5 沉默对 OPN、RUNX2 表达和 ALP 活性的影响19。miR-17-5p 可通过靶向抑制 Smad7 表达提高 hBMSC 的成骨分化及增殖20。miR-27a-3p可以促进OPN和Runx2的表达，并通过 CRY2/ERK1/2 轴促进成骨细胞分化21。miR-25-3p 过表达可逆转 TGFBR2 过表达对成骨 VIC 中ALP 活性、Runx2 和 OPN 表达的抑制作用22。miR-133b 通过靶向 GNB4 提高 ALP、Runx2、OSX 和OPN 的表达，并增强成骨细胞的活力和分化23。miR-135-5p 可以逆转 HIF1AN 过表达对 MC3T3-E1成骨分化的抑制作用，增强Runx2、OSX、OPN的表达及ALP的活性24。由此可见，miRNA通过多种信号通路而对成骨分化发挥促进作用，加强对 ONFH塌陷部位的修复作用。2.2 负向抑制我们前期研究发现25，miRNA-483在ONFH患者中存在差异表达，且 miRNA-483-5p 可通过影响胰岛素样生长因子-2 的表达而促进 OC 分化26，干预骨塌陷的修复，进而对 ONFH 的发生产生影响。研究亦证实部分 miRNA 对成骨分化也起着抑中国组织化学与细胞化学杂志310第 32 卷制作用。miR-100-5p 可能通过抑制 rBMSC 的迁移和成骨分化影响ONFH的发病27。miRNA-206通过抑制靶基因 CAJ1 目的蛋白 Cx43 的表达，从而抑制成骨细胞增殖、分化28，通过 PDCD4 及其相关信号途径促进成骨细胞凋亡29。miR-153-3p 可通过抑制 ALP、Runx2 和 OPN 的转录来抑制牙周膜干细胞（PDLSC）的成骨30。miR-23a 靶向 LRP5 并通过Wnt 通路抑制 hBMSC 的成骨分化31。我们可以通过抑制这些 miRNA 的表达来加强成骨分化作用对ONFH 塌陷部位的修复。3 成骨分化相关生物标记物microRNA 常常通过调节 OPN、Runx2 及 OSX等来干预成骨分化作用，这些相关因子通常被用来作为成骨分化的检测指标，但他们之间也相互作用，并通过相关信号通路对成骨分化作用起到影响，进而参与并影响 ONFH 股骨头塌陷的修复。3.1 骨桥蛋白OPN是一种OB和造血干细胞32（hematopoietic stem cells,HSCs）产生的分泌型磷蛋白33，与 ON-FH、骨质疏松症、类风湿性关节炎等多种骨科疾病密切相关，在骨代谢平衡中发挥作用。OPN 是内分泌调节骨量的重要因素，并参与 BMSCs、破骨细胞（osteoclast,OC）和OB等多种骨相关细胞的增殖、迁移和贴附等生物学活动34，通过这些调节作用，可以干预成骨-破骨平衡，起到对坏死塌陷区的修复作用。OPN 能增加 MSCs 表面整合素 1 的表达，并通过与之结合激活 FAK/ERK 信号通路，诱导 MSCs的定向迁移35，进而对成骨分化起到影响。不仅如此，OPN能减缓HSCs的衰老、增加干细胞极性并恢复外周血淋巴细胞和骨髓细胞之间的平衡36，并在体外负调节原始造血细胞的增殖37，通过干预 OPN可以对坏死区的血运提供便利条件，更有利于塌陷的修复。尽管如此，OPN 对 OB 的影响仍存在一定分歧，Forsprecher 等人38发现 OPN 可促进 OBs 增殖、钙化，但部分研究显示 OPN 抑制 OB 的增殖、分化39，但 OC 的激活是依赖于 OPN 的，OPN 通过影响 PKC/RhoA-Rac1 信号通路的 PLC 干预 OC的贴附与扩散40，所以成骨-破骨的平衡仍受 OPN的影响。因此，OPN 不仅可以作为成骨分化过程中的一个指示指标，用于检测我们所选的干预因素对成骨分化的影响，还可以作为促进成骨分化的干预蛋白，进而应用于 ONFH 股骨头塌陷的治疗之中。但鉴于OPN的表达对成骨分化的影响存在一定分歧，进一步明确 OPN 在成骨作用中的实际作用机制，更好的明晰其在 ONFH 骨塌陷中的治疗效果，尤其是在 miRNA 研究层面，是我们当前面临的一个研究难点。3.2 Runx 相关转录因子 2Runx2 是骨细胞的特异转录因子，通过与特定DNA 序列结合，从而控制成骨细胞从 MSCs 向骨细胞的发育和成熟41，在软骨细胞和 OB/分化的不同阶段都有表达42。Runx2 与 hedgehog、经典 Wnt 信号通路以及 Sp7 相互调节，进而对成骨分化的多个阶段产生影响。Runx2 可诱导多能间充质细胞分化为前成骨细胞，通过诱导 Fgfr2 和 Fgfr3 调节前成骨细胞的增殖，诱导 Sp7 传导以促进前成骨细胞分化为未成熟成骨细胞。不仅如此，Runx2、Sp7 也参与成骨细胞的成熟43。二甲双胍可维持骨的密度、对抗骨质的流失并保护骨的微结构44，对成骨有着直接作用，并对 ONFH 股骨头塌陷修复起到积极的作用，二甲双胍上调 Runx2 的表达在体外增加BMSCs 中 ALP 活性、胶原合成、骨钙素产生和细胞外钙沉积45，并通过 AMPK-Runx2 信号通路对成骨细胞进行调节46。Ma 等人47通过对类固醇性骨坏死大鼠股骨头的研究发现糖皮质激素可通过下调Runx2/Osterix 的 mRNA 和上调 AJ18 的 mRNA 来诱导ONFH。郝铖等人发现48，激素可上调miRNA-708的表达，它的上调抑制 MSCs 中 Smad3 的表达，这一系列变化间接通过 TGF-信号等一系列细胞内信号转导作用影响 Runx2 的表达水平，最终使 MSCs成骨分化能力下降，进而促进了 ONFH 股骨头塌陷的发生。由此表明，Runx2 可能通过调节成骨分化的多个阶段来影响 ONFH 的发生，例如 microRNAs 通过调节 Runx2 的表达并影响其活性，进而对成骨过程产生干预49，进一步明晰基因层面调控 Runx2 的作用机制，可作为诱导成骨分化进而治疗 ONFH 的研究方向。3.3 成骨细胞特异性转录因子OSX 被认为是 Runx2 的下游调控因子50，亦吕子豪等.microRNA 调控成骨分化修复股骨头坏死塌陷的研究进展第 3 期 311是 OB 分化和骨矿化的重要转录因子，它不仅在膜内骨形成中起重要作用，而且通过参与终末软骨分化影响软骨内骨化51。由成骨细胞和其他外周组织产生的神经肽 Y（NPY）会抑制成骨细胞的生物学功能，其过表达通过自分泌机制显着增强小鼠颅顶前骨细胞（MC3T3-E1）的成骨能力，这与 OSX 的上调一致52，不仅如此，在体外的成骨细胞中 NPY也会上调 Runx2、ALP 和 OSX 的表达来增加其活性，这些机制都直接或间接影响着 ONFH 骨塌陷的修复。ONFH 发病的一大原因就是血液循环障碍，成骨细胞不仅负责骨形成，他们还支持造血，OSX启动子在体内删除 Cdc42 会抑制成骨细胞功能，而使用 I 型胶原蛋白-1 启动子在分化成骨细胞中删除它会降低成骨细胞数量，两者都降低骨矿物质密度53。Yin 等人54发现 miR-135-5p 通过促进 MC3 T3-E1 细胞中 OSX 的表达影响成骨分化作用。不仅如此，miRNA-145、miRNA-143、miRNA-214 均可靶向 OSX 干预成骨分化55-57。因此，在 ONFH 的治疗中 OSX 改善 OB 功能的同时也有可能改善血液循环，这一改变可以通过对 OSX 基因和蛋白层面的调控来进行。不仅成骨分化作用的加强有利于骨修复，血液循环的改善同时也可以促进骨坏死的修复，进而对塌陷区域的修复起积极影响。4 小结与展望我国 ONFH 患者目前的发病率呈逐年增高趋势，早期未进行有效治疗的患者多数后期需行手术治疗，存在高风险、高花费等弊端。成骨作用的加强，有助于坏死骨组织的修复，在早期ONFH患者股骨头塌陷的治疗中有着重要意义，明确miRNA的相关调控机制，并对相关基因及蛋白层面上的表达标志物Runx2、OSX 和 OPN 等进行研究，明晰其相关表达所代表的含义，有利于后期通过各种信号通路调控这些标志物的表达，进而起到寻找 ONFH的新治疗靶点的目的。不论 miRNA 在成骨分化的过程中发挥正向或是负向调节作用，我们都可以通过干预此miRNA的表达实现对成骨分化的干预，但是需要考虑 ONFH坏死区域此miRNA的表达水平。例如：在ONFH坏死区，调控该基因的表达是否可以真正起到预想的成骨分化调控效果？调控的相应成骨分化阶段是否对 ONFH 的治疗起到促进作用？各 miRNA 调控效率的高低？如何选择最优干预 miRNA？不可忽略的一点，就是在此 miRNA 调控成骨分化的同时，是否会对其他进程进行调控，若仅能给予成骨分化少量促进作用，而对 ONFH 治疗的其他方法机制产生相对更大的抑制，反而适得其反。近年来，人们从生物力学、分子生物学等方面对 ONFH 发病机制进行了大量的研究，但其坏死机制仍未明晰。因此，进一步明确 ONFH 股骨头塌陷的发病机制，寻找有价值的分子标志物，为其精准防治提供策略，仍是学者们追求的目标。参 考 文 献1 Liu YH,Zhou C,Chen LL,et al.A summary of hip-preserva-tion surgery based on peri-collapse stage of osteonecrosis of femoral headJ.Zhongguo xiu fu chong jian wai ke za zhi,2017,31(8):1010-1015.2 Wang YX,Luan S,Yuan Z,et al.The combined use of plate-let-rich plasma clot releasate and allogeneic human umbili-cal cord mesenchymal stem cells rescue glucocorticoid-in-duced osteonecrosis of the femoral headJ.Stem Cells Int,2022,2022:7432665.3 Wang P,Wang C,Meng HY,et al.The role of structural dete-rioration and biomechanical changes of the necrotic lesion in collapse mechanism of osteonecrosis of the femoral headJ.Orthop Surg,2022,14(5):831-839.4 梁文，张怀斌，杨国清，等.非编码 RNA 对骨髓间充质干细胞成骨分化影响研究进展 J.中国组织化学与细胞化学杂志，2022，31（03）：294-299.5 Wang CG,Hu YH,Su SL,et al.LncRNA DANCR and miR-320a suppressed osteogenic differentiation in osteoporosis by directly inhibiting the Wnt/-catenin signaling path-wayJ.Exp Mol Med,2020,52(8):1310-1325.6 Huang J,Zhou Y,Xiao W,et al.Serum-catenin changes vary among different stages of osteonecrosis of the femoral head:an exploratory biomarker studyJ.BMC Musculo-skelet Disord,2022,23(1):434.7 Wang T,Zhang XP,Bikle DD.Osteogenic differentiation of periosteal cells during fracture healingJ.J Cell Physiol,2017,232(5):913-921.8 乔仁秋，李树山，殷力.基于经典 Wnt/-连环蛋白信号通路探讨激素性股骨头坏死骨髓间充质干细胞成骨成脂分化机制 J.中华实验外科杂志，2021，38（7）：1206-1209.9 申意伟，张晓峰，李雪，等.活骨灌注液干预骨坏死的病理形态学、血管新生和成骨分化的实验研究 J.时珍中国组织化学与细胞化学杂志312第 32 卷国医国药，2022，33（04）：831-834.10 黄荣兰，胡文彬，詹庆昊.中医药通过调控骨代谢相关信号通路治疗股骨头坏死的研究进展 J.中国实验方剂学杂志，2021，27（08）：241-250.11 Yue JA,Yu HC,Liu P,et al.Preliminary study of icariin indicating prevention of steroid-induced osteonecrosis of femoral head by regulating abnormal expression of miR-NA-335 and protecting the functions of bone microvascular endothelial cells in ratsJ.Gene,2021,766:145128.12 Zhang YZ,Shen XM,Cheng L,et al.Toll-like receptor 4 knockout protects against diabetic-induced imbalance of bone metabolism via autophagic suppressionJ.Mol Immu-nol,2020,117:12-19.13 Rochette L,Meloux A,Rigal E,et al.The role of osteopro-tegerin in vascular calcification and bone metabolism:the basis for developing new therapeuticsJ.Calcif Tissue Int,2019 105(3):239-251.14 Endo K,Takahata M,Sugimori H,et al.Magnetic reso-nance imaging T1 and T2 mapping provide complementary information on the bone mineral density regarding cancel-lous bone strength in the femoral head of postmenopausal women with osteoarthritisJ.Clin Biomech(Bristol,Avon),2019,65:13-18.15 Ren Y,Deng Z,Gokani V,et al.Anti-Interleukin-6 therapy decreases hip synovitis and bone resorption and increases bone formation following ischemic osteonecrosis of the femoral headJ.J Bone Miner Res,2021,36(2):357-368.16 Oka S,Li XY,Zhang FZ,et al.MicroRNA-21 facilitates osteoblast activityJ.Biochem Biophys Rep,2020,25:100894.17 Zou ML,Chen ZH,Teng YY,et al.The smad dependent TGF-and BMP signaling pathway in Bone Remodeling and TherapiesJ.Front Mol Biosci,2021,8:593310.18 Wu M,Wang HY,Kong DC,et al.miR-452-3p inhibited osteoblast differentiation by targeting Smad4J.PeerJ,2021,9:e12228.19 Wang JL,Wei X,Wang AG,et al.KCNQ1OT1 regulates osteogenic differentiation of hBMSC by miR-320a/Smad5 axisJ.Eur Rev Med Pharmacol Sci,2020,24(6):2843-2854.20 贾杰.MiR-17-5p 调控非创伤性股骨头坏死骨髓基质干细胞成骨分化与增殖的相关研究 D.华中科技大学，2015.21 Ren LR,Yao RB,Wang SY,et al.MiR-27a-3p promotes the osteogenic differentiation by activating CRY2/ERK1/2 axisJ.Mol Med,2021,27(1):43.22 Yu C,Wu D,Zhao C,et al.CircRNA TGFBR2/MiR-25-3p/TWIST1 axis regulates osteoblast differentiation of human aortic valve interstitial cellsJ.J Bone Miner Metab,2021,39(3):360-371.23 Wang JQ,Gao ZQ,Gao P.MiR-133b modulates the os-teoblast differentiation to prevent osteoporosis via targeting GNB4J.Biochem Genet,2021,59(5):1146-1157.24 Yin N,Zhu LZ,Ding L,et al.MiR-135-5p promotes os-teoblast differentiation by targeting HIF1AN in MC3T3-E1 cellsJ.Cell Mol Biol Lett,2019,24:51.25 邓昶.非创伤性股骨头坏死高发中医体质类型及其特异性表达 microRNA 筛选研究 D.甘肃中医药大学，2019.26 Li KQ,Chen SH,Cai PY,et al.MiRNA-483-5p is involved in the pathogenesis of osteoporosis by promoting osteoclast differentiationJ.Mol Cell Probes,2020,49:101479.27 杨武，杨韵霏，郭民康，等.miR-100-5p 通过抑制大鼠骨髓间充质干细胞的迁移和成骨分化参与非创伤性股骨头坏死 J.细胞与分子免疫学杂志，2022，38（02）：159-164.28 韦露.微小 RNA-206 及其靶基因 GJA1（间隙连接蛋白43基因）在激素性股骨头坏死中的作用研究D.广西医科大学，2015.29 张在恒.MicroRNA-206 调控激素性股骨头缺血性坏死进程的分子机制研究及 Dixdc1b 基因骨骼发育调控功能的初步探讨 D.南方医科大学，2018.30 Jiang H,Jia PZ.MiR-153-3p inhibits osteogenic differ-entiation of periodontal ligament stem cells through KD-M6A-induced demethylation of H3K27me3J.J Periodon-tal Res,2021,56(2):379-387.31 李涛.人激素性股骨头坏死骨髓间充质干细胞差异表达miRNA 筛选与 miRNA-23a 抑制干细胞成骨分化及机制研究 D.北京协和医学院，2015.32 Mirzaei A,Ghaffari SH,Nikbakht M,et al.OPN b and c isoforms doubtless veto anti-angiogenesis effects of cur-cumin in combination with conventional AML regimentJ.Asian Pac J Cancer Prev,2017,18(9):2591-2599.33 Si JY,Wang CW,Zhang DH,et al.Osteopontin in bone metabolism and bone diseasesJ.Med Sci Monit,2020,26:e919159.34 Marycz K,Smieszek A,Marcinkowska K,et al.Nanohy-droxyapatite(nHAp)doped with iron oxide nanoparticles(IO),miR-21 and miR-124 under magnetic field conditions modulates osteoblast viability,reduces inflammation and inhibits the growth of osteoclast-a novel concept for oste-oporosis treatment:Part 1J.Int J Nanomedicine,2021,16:3429-3456.35 Liu L,Luo Q,Sun J,et al.Decreased nuclear stiffness via 吕子豪等.microRNA 调控成骨分化修复股骨头坏死塌陷的研究进展第 3 期 313FAK-ERK1/2 signaling is necessary for osteopontin-pro-moted migration of bone marrow-derived mesenchymal stem cellsJ.Exp Cell Res,2017,355(2):172-181.36 Guidi N,Sacma M,Standker L,et al.Osteopontin atten-uates aging associated phenotypes of hematopoietic stem cellsJ.EMBO J,2017,36(7):840-853.37 Haylock DN,Nilsson SK.Osteopontin:A bridge between bone and bloodJ.Br J Haematol,2006,134(5):467-74.38 Forsprecher J,Wang Z,Goldberg HA,et al.Transglutam-inase-mediated oligomerization promotes osteoblast adhe-sive properties of osteopontin and bone sialoproteinJ.Cell Adh Migr,2011,5(1):65-72.39 Holm E,Gleberzon JS,Liao Y,et al.Osteopontin mediates mineralization and not osteogenic cell development in vit-roJ.Biochem J,2014,464(3):35564.40 Sun Y,Yao Y,Ding CZ.A combination of sinomenine and methotrexate reduces joint damage of collagen induced ar-thritis in rats by modulating osteoclast-related cytokinesJ.Int Immunopharmacol,2014,18(1):135-41.41 吴钰坤，韩杰，温帅波.骨折愈合过程中 Runx2 基因的作用机制 J.中国组织工程研究，2021，25（14）：2274-2279.42 Tang CY,Chen W,Luo Y,et al.Runx1 up-regulates chon-drocyte to osteoblast lineage commitment and promotes bone formation by enhancing both chondrogenesis and os-teogenesisJ.Biochem J,2020,477(13):2421-2438.43 Komori T.Regulation of proliferation,differentiation and functions of osteoblasts by Runx2J.Int J Mol Sci,2019,20(7):1694.44 Wang P,Ma T,Guo D,et al.Metformin induces osteoblastic differen