错配修复蛋白表达缺失在子宫内膜癌中的临床病理意义.pdf

探究错配修复（MMR）蛋白表达缺失在子宫内膜癌（EC）中的临床病理意义。方法：选取惠州市第一人民医院 2019 年 3 月至 2022 年 12 月收集的 EC 患者术后石蜡包埋子宫内膜组织标本 50 例，采用免疫组织化学检测法检测 MMR 蛋白表达，包含 MLH1、MSH2、MSH6 及 PMS2，观察 MMR 蛋白表达缺失率，对不同年龄及 EC 病理特征的MMR 蛋白表达缺失情况进行比较。结果：（1）50 例 EC 患者 MMR 蛋白表达缺失发生率为 36.00%。MMR 蛋白 MLH1、MSH2、PMS2、MSH6 表达缺失率分别为 22.00%、6.00%、30.00%、6.00%，其中单项缺失 4 例（8.00%），两项表达缺失 14 例（18.00%）。（2）50 岁 EC 患者 MMR 蛋白缺失表达率（56.00%）高于 50 岁 EC 患者（16.00%），差异具有统计学意义（P 0.05）。（3）不同细胞分化程度、肌层浸润程度及淋巴结转移情况患者 MMR 蛋白表达缺失情况比较，差异均无统计学意义（P 0.05）。结论：MMR 蛋白在 EC 中表达缺失率较高，以 PMS2 表达缺失为主，且 MMR 蛋白表达缺失率在 50 岁 EC 患者中更高，故需重视对年轻女性 EC 早期筛查。关键词子宫内膜癌；错配修复蛋白；蛋白表达缺失；林奇综合征中图分类号 R 737.33 文献标识码 BClinical and Pathological Significance of Expression Loss of Mismatch Repair Protein in Endometrial CancerFAN Xiao-hui,CHEN Li-hong,ZHAO Wen-li,SUI Wen-yan,CHEN Ming-quan (Huizhou First Hospital,Guangdong Huizhou 516000)Abstract ObjectiveExploring the clinical and pathological significance of mismatch repair(MMR)protein expression loss in endometrial cancer(EC).MethodsFifty postoperative paraffin embedded endometrial tissue samples from EC patients at Huizhou First Hospital from March 2019 to December 2022 were selected.Immunohistochemical detection was used to detect the expression of MMR protein,including MLH1,MSH2,MSH6,and PMS2.The expression loss rate of MMR protein was observed,and the expression loss of MMR protein was compared among different ages and EC pathological characteristics.Results(1)The incidence of MMR protein expression loss in 50 EC patients was 36.00%.The expression deletion rates of MMR protein MLH1,MSH2,PMS2,and MSH6 were 22.00%,6.00%,30.00%,and 6.00%,respectively.Among them,there were 4 cases of single deletion(8.00%)and 14 cases of two expression deletions(18.00%).(2)The expression rate of MMR protein deficiency in EC patients 50 years old(56.00%)was higher than that in EC patients 50 years old(16.00%),and the difference was statistically significant(P 0.05).ConclusionThe expression loss rate of MMR protein in EC is relatively high,with PMS2 expression loss being the main factor.Moreover,the expression loss rate of MMR protein is higher in EC patients 50 years old.Therefore,it is necessary to pay attention to early screening for related heritability in young women.KeywordsEndometrial cancer;Mismatch repair protein;Loss of protein expression;Lynch syndrome收稿日期2023-04-11基金项目惠州市科学技术局项目（210406234572926）作者简介范晓慧，女，副主任医师，主要研究方向是肿瘤病理。子宫内膜癌（endometrial carcinoma，EC）是目前女性高发的生殖系统恶性肿瘤之一，主要包括雌激素依赖型与非雌激素依赖型，其中以前者占比最高，该类患者的分化程度较好，预后情况相对较佳1-2。EC 的发病机制尚未明确，或与患者年龄、雌激素水平、生育状况、林奇综合征等因素有关3。研究发现4，林奇综合征是导致 EC 发生风险较高的原因之一，其属于一种常染色体显性遗传疾病，病因与错配修复（mismatch repair，MMR）基因种系突变有关。MMR 基因突变会导致相应的 MMR 蛋白缺失，影响脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic Shenzhen Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine June 2023 Vol.33.No.12 2 acid，DNA）复制合成中的MMR功能，当突变积累过多后，造成肿瘤的发生5。基于此，提高对林奇综合征筛查及诊断是防治 EC 的关键。程序性死亡受体 1（programmed cell death protein，PD1）免疫治疗已在多种恶性肿瘤中发挥出作用，且肿瘤组织中 PD1 的表达是预测免疫治疗的关键指标6，但目前关于其在 EC 中的效果尚未得知。故本研究通过对惠州市第一人民医院收治的 50 例患者相关样本进行分析，旨在为 EC 的早期筛查及治疗提供科学的意见。1资料与方法1.1一般资料选取惠州市第一人民医院2019年3月至2022年12月 收集的 EC 患者术后石蜡包埋 EC 组织标本 50 例，患者年龄 30 76 岁，平均年龄（55.77 9.34）岁，其中 50 岁 25 例、50 岁 25 例；已绝经 32 例、未绝经 18 例。患者及家属均知情同意本研究，且本研究通过医学伦理委员会批准（2021020）。1.2纳入与排除标准1.2.1纳入标准（1）EC 的诊断参考子宫内膜癌诊断与治疗指南（2021 年版）7中的相关标准，患者均确诊为 EC；（2）临床资料完整；（3）行 EC 根治术并在术后留取石蜡包埋 EC 组织样本；（4）术前未进行相关治疗。1.2.2排除标准（1）严重的脏器功能异常；（2）妊娠期与哺乳期女性；（3）认知障碍及精神疾病；（4）其他恶性肿瘤疾病。1.3方法取所有患者子宫内膜病变组织样本，采用免疫组织化学法检测 MMR 蛋白表达，包含 MLH1、MSH2、PMS2、MSH6。样本均进行脱蜡、水化操作，进行抗原修复，加入抗体并使用磷酸盐缓冲液冲洗，二氨基联苯胺法显色，苏木素复染，而后使用乙醇分化、二甲苯透明，采用中性树胶封固。由 3 位病理科副高以上医师共同阅片并得出一致的结论。阳性对照：切片内正常子宫内膜、间质细胞及淋巴细胞。使用鼠、兔单克隆抗体检测试剂盒检测，依据试剂盒说明书严格操作。阳性表达：MMR蛋白在细胞核表现为棕褐色着色，反之为阴性。表达 缺失为 MLH1、MSH2、PMS2、MSH6 任意 1 项着色显示阴性。1.4观察指标（1）观 察 50 例 患 者 MMR 蛋 白 MLH1、MSH2、PMS2、MSH6 表达缺失情况。（2）比较不同年龄、细胞分化程度、肌层浸润程度及淋巴结转移情况患者 MMR蛋白表达缺失情况。1.5统计学处理采用 SPSS 22.0 软件进行数据处理，计量资料以sx表示，用百分比表示，采用 2 检验或 Fisher 确切概率法检验，P 0.05 为差异具有统计学意义。2结果2.1患者的 MMR 蛋白表达缺失情况50 例 EC 患者 MMR 蛋白表达缺失发生率为 36.00%（18/50）。MMR 蛋白 MLH1、MSH2、PMS2、MSH6 表 达缺失率分别为 22.00%（11/50）、6.00%（3/50）、30.00%（15/50）、6.00%（3/50）。其中单项缺失 4 例（8.00%），两项表达缺失 14 例（18.00%）。2.2不同年龄患者 MMR 蛋白表达缺失情况比较 50 岁 EC 患者 MMR 蛋白缺失表达率为 56.00%（14/25），50 岁 EC 患者 MMR 蛋白缺失表达率为16.00%（4/25），差异具有统计学意义（P 0.05）。2.3不同病理特征患者 MMR 蛋白表达缺失情况 比较不同细胞分化程度、肌层浸润程度及淋巴结转移情况患者 MMR 蛋白表达缺失情况比较，差异均无统计学意义（P 0.05），见表 1。表 1不同病理特征患者 MMR 蛋白表达缺失情况比较结果 病理特征nMMR 蛋白表达 缺失/n(%)2P细胞分化程度3.0160.221低分化 2 1(50.00)中分化2612(46.15)高分化22 5(22.73)肌层浸润程度0.0870.768侵及肌层 1/23212(37.50)侵及肌层 1/218 6(33.33)淋巴结转移0.530是 2 0(0.00)否4818(37.50)注：MMR 错配修复。3讨论EC 的发生不但与患者自身基础状况有关，且与肿瘤遗传学密切相关8-9。林奇综合征是 EC 患者常见遗传因素，其属于 DNA MMR 基因单个或多个胚系突变，在多个肿瘤中存在遗传易感性10，因此，对 EC 发生与 MMR蛋白相关胚系突变进行分析十分重要。沙仁高娃等11的研究结果指出，MMR 蛋白主要是表达于低级别 EC 中，且能够为临床诊断及治疗 EC 提供有效依据。黄银银等12在一项 2023 年的最新研究中表明，MMR 蛋白表达与 EC 患者的病变程度相关，且与预后不良均有关。本研究结果显示，患者蛋白表达缺失发生率为 36.00%，其中 PMS2 表达缺失率为 30.00%，占深圳中西医结合杂志 2023 年 6 月第 33 卷第 12 期 3 比最高，其次为 MLH1，两种蛋白经常以联合缺失的形式呈现，MLH1 蛋白是 MLH1 及 PMS2 蛋白二聚体的主导蛋白，基因 MLH1 突变后导致作为必须蛋白的 MLH1蛋白的表达出现异常，蛋白 MLH1 及 PMS2 相互作用功能下降，异二聚体发生降解，引起了 PMS2 表达的缺失，故两者常联合缺失。本研究还发现，不同年龄的 EC 患者MMR 蛋白缺失率的差异具有统计学意义（P 0.05），在 50 岁的患者中，MMR 蛋白缺失发生风险更高，体现出 EC 患者年龄与 MMR 蛋白缺失有关，患者呈现低龄化趋势，这提示应加强对年龄较小的患者的重视，关注早期检测对于低龄者 EC 诊治的重要意义。分析 EC 低龄化现象的原因，可能在于，（1）遗传因素13：患者 EC受到遗传的影响，例如林奇综合征，该疾病属于常染色体显性遗传病，是一种易发生 EC 及结直肠癌相关的遗传性疾病，患者若存在林奇综合征则患 EC 的风险显著上升，临床症状表现为非遗传性 EC，但需注意的是，林奇综合征的相关 EC 并不会表现出肥胖、糖尿病、雌激素过多等现象，且发病年龄较 EC 早约 10 年。（2）生活方式与精神压力14：随着经济与社会发展，人们生活方式及饮食习惯也受到改变，暴饮暴食、熬夜、抽烟喝酒等不良习惯均会导致 EC 低龄化的出现，且现代人生活节奏较快，长期存在焦虑、抑郁等消极情绪，造成精神压力较大，故出现一系列内分泌失调疾病，例如多囊卵巢综合征等，从而导致 EC 的年轻化趋势。（3）生理原因与慢性疾病15：初潮过早或过晚、不孕不育、肥胖、高血压与糖尿病等基础疾病，均会导致女性 EC 的年龄较低。因此，对于年龄较小的患者，需重视早期的遗传学检测。另外，本研究中不同细胞分化及肌层浸润程度、淋巴结转移状况的患者 MMR 蛋白缺失情况比较，差异无统计学意义（P 0.05）。因此，本研究结果提示应重视对年轻女性的早期筛查，早期发现 EC 前病变与早期EC 有助于早期诊治，目前辅助检查的方式主要有 4 种，包括：（1）无创性筛查：血清学标记物糖类抗原 125（carbohydrate antigen 125，CA125）、人附睾蛋白4（human epididymis protein4，HE4）均是常见筛查指标；经阴道超声检查子宫内膜厚度并观察血流阻力也是评价 EC 是否存在恶性的方式。（2）有创性筛查：包含诊断性刮宫、宫腔镜下取子宫内膜标本病理学检查等。（3）子宫内膜细胞学检查：包含子宫颈脱落细胞学检查、取宫腔内子宫内膜细胞学检查。（4）子宫内膜微量组织病理学检查。患者可以依据个人情况选择合适的筛查方式，为降低女性生殖系统疾病的发病率及死亡率提供依据。综上所述，MMR 蛋白在 EC 中表达缺失率较高，其中以 PMS2 表达缺失占比最高，MMR 蛋白表达缺失在年龄 50 岁的 EC 患者中发生率更高。但本研究还存在着不足，例如收集的石蜡包埋样本有限，并非大样本量的研究，故在今后的研究中将会争取纳入更多样本并更加细化研究。参考文献1 罗勇，岳雪梅雌激素依赖性子宫内膜癌体内胰岛素抵抗参数、凝血因子指标及炎症细胞因子水平的变化和临床意义J血栓与止血学，2022，28(3)：1022-1023，10262 钱霞，韩磊，尤小英雌激素、雄激素及其受体对子宫内膜影响的研究进展J疑难病杂志，2022，21(9)：989-9923 张心，王建东子宫内膜癌相关流行病学高危因素的研究进展J医学综述，2021，27(15)：2995-29994 杨子慧，刘新宇，杨曦，等林奇综合征患者子宫内膜癌及卵巢癌的筛查与预防J国际妇产科学杂志，2021，48(4)：453-4565 谢天赐，徐向上林奇综合征发生发展的研究进展J现代肿瘤医学，2022，30(6)：1102-11086 何丽娜，成小姣，马越，等PD1/PD-L1 免疫检查点抑制剂联合胸腺肽 1 治疗恶性肿瘤的临床疗效J中国医师杂志，2022，24(5)：783-7867 中国抗癌协会妇科肿瘤专业委员会子宫内膜癌诊断与治疗指南(2021 年版)J中国癌症杂志，2021，31(6)：501-5128 王丽，文军，白娥，等绝经后出血的高危因素及预测子宫内膜病变模型的建立J实用妇产科杂志，2022，38(9)：679-6849 姜婷婷遗传性子宫内膜癌的研究进展J实用肿瘤杂志，2020，35(4)：306-30910 齐月，许天敏，赵丽苹，等不同分子学筛查方法在 Lynch综合征相关子宫内膜癌患者中的对比分析J中国妇产科临床杂志，2022，23(2)：116-12011 沙仁高娃，王睿，陈华，等MDC1 和 MMR 蛋白在子宫内膜癌中的表达及临床意义J临床和实验医学杂志，2022，21(20)：2201-220412 黄银银，方彩云，柏诗玉，等子宫内膜癌中错配修复蛋白与 ER、PR、p53 表达的临床病理意义及其对预后的影响J中国性科学，2023，32(2)：72-7613 齐月，许天敏，赵丽苹，等不同分子学筛查方法在 Lynch综合征相关子宫内膜癌患者中的对比分析J中国妇产科临床杂志，2022，23(2)：116-12014 王晓萍，王明波，佘昊清，等绝经后子宫异常出血患者发生子宫内膜癌的危险因素及风险预测J中国性科学，2022，31(3)：89-9315 钱俊雄，陈剑，李光军子宫内膜癌合并高血压疾病患者肿瘤标志物的表达和凝血功能参数变化 J 中国妇幼保健，2021，36(18)：4187-4190