马缨杜鹃炭疽病病原菌生物学特性及防治药剂筛选.pdf

胡珊,莫维弟,周志成,等.马缨杜鹃炭疽病病原菌生物学特性及防治药剂筛选 J.华南农业大学学报,2023,44(4):570-576.HUShan,MOWeidi,ZHOUZhicheng,etal.BiologicalcharacteristicsofpathogenicanthracnoseColletotrichum fioriniaeonRhododendron delavayiandscreeningoffungicidesJ.JournalofSouthChinaAgriculturalUniversity,2023,44(4):570-576.马缨杜鹃炭疽病病原菌生物学特性及防治药剂筛选胡珊1，莫维弟2，周志成2，丁海霞2,3，彭丽娟1(1贵州大学烟草学院/贵州省烟草品质研究重点实验室,贵州贵阳550025；2贵州大学农学院,贵州贵阳550025；3贵州省农业生物技术重点实验室/贵州省农业科学院,贵州贵阳550006)摘要:【目的】探明贵州百里杜鹃自然保护区马缨杜鹃 Rhododendron delavayi 炭疽病菌 Colletotrichumfioriniae 生物学特性，并筛选出有效药剂。【方法】采用菌丝生长速率法测定马缨杜鹃炭疽病菌生物学特性；选用二氰蒽醌、吡唑醚菌酯、溴菌腈、丙环唑、苯醚甲环唑、肟菌戊唑醇、四霉素、乙蒜素、蛇床子素及宁南霉素对该病原菌的室内毒力进行测定；选择作用机制不同、抑菌活性较高的 2 种药剂按不同比例复配，测定其对马缨杜鹃炭疽病菌菌丝的联合毒力。【结果】病原菌在 535、pH511 均能生长，最适温度为 25，最适生长 pH 为 8，最适碳源为葡萄糖和可溶性淀粉，最适氮源为蛋白胨，最适培养基为 PSA。室内毒力测定结果表明，所选药剂对病原菌菌丝生长均有一定抑制作用，其中，肟菌戊唑醇、吡唑醚菌酯、四霉素、苯醚甲环唑和丙环唑抑制效果较好，EC50分别为 0.102、0.118、1.107、1.202 和 2.101mg/L；其次为蛇床子素，EC50为 6.803mg/L。选用四霉素与苯醚甲环唑进行混配，结果表明不同配比对病原菌的联合毒力较单剂均具有协同增效作用，增效最佳配比为 73，共毒系数(Co-toxicitycoeffecient,CTC)达 584.56，明显高于其他配比；配比为 64 和 82时，对应 CTC 均在 500 以上，仅次于最佳配比。【结论】马缨杜鹃炭疽病菌的生长受温度、pH、培养基成分、碳氮源影响明显。四霉素和苯醚甲环唑不同比例复配活性增效明显，可选择 73 复配比例进行田间防治。关键词:马缨杜鹃；松针炭疽菌；生物学特性；联合毒力测定中图分类号:S432文献标志码:A文章编号:1001-411X(2023)04-0570-07Biological characteristics of pathogenic anthracnose Colletotrichumfioriniae on Rhododendron delavayi andscreening of fungicidesHUShan1,MOWeidi2,ZHOUZhicheng2,DINGHaixia2,3,PENGLijuan1(1CollegeofTobaccoScience,GuizhouUniversity/GuizhouKeyLaboratoryforTobaccoQualityResearch,Guiyang550025,China;2CollegeofAgriculture,GuizhouUniversity,Guiyang550025,China;3GuizhouKeyLaboratoryofAgriculturalBiotechnology/GuizhouAcademyofAgriculturalSciences,Guiyang550006,China)Abstract:【Objective】To investigate the biological characteristics of Colletotrichum fioriniae onRhododendron delavayiinBailiAzaleaNatureReserveofGuizhouProvince,andtoscreeneffectivefungicidesfor disease control.【Method】The mycelial growth rate method was applied to explore the biological收稿日期：20220625网络首发时间：2023051809:10:21首发网址：https:/ KY 字 2018101)；贵州省林业优秀青年人才培养专项资金(黔林科合 J201808)；贵州省科技计划(黔科合服企 20194016)华南农业大学学报JournalofSouthChinaAgriculturalUniversity2023,44(4):570-576DOI:10.7671/j.issn.1001-411X.202206039characteristics of C.fioriniae on R.delavayi.The indoor toxicity of pathogen was determined using 10fungicides,includingtrifloxystrobintebuconazole,pyraclostrobin,difenoconazole,propiconazole,bromothalonil,dithianon,tetramycin,ethylicin,cnidiadin and ningnanmycin.Combined toxicity of twofungicideswithhighantifungalactivitiesanddifferenttoxicologicalmechanismstoC.fioriniaewasassessedindifferentmixtureratio.【Result】Thepathogenicfungicouldgrowunder535andpH511.Theoptimumtemperaturewas25andtheoptimumpHwas8.Thebestcarbonsourceswereglucoseandsolublestarch.PeptonewasthebestnitrogensourceforthepathogengrowthandthegrowthratereachedthemaximumonPSAmedium.Theresultsoftheindoortoxicitytestindicatedthatallofthe10fungicidesinhibitedthemycelialgrowth of the pathogen to some extent.Among 10 fungicides,trifloxystrobintebuconazole,pyraclostrobin,tetramycin,difenoconazole,andpropiconazolehadbetterinhibitoryeffectwithEC50of0.102,0.118,1.107,1.202 and 2.101 mg/L,respectively,followed by cnidiadin with EC50 of 6.803 mg/L.The combination oftetramycinanddifenoconazolewithdifferentmixtureratioshowedsynergisticinhibitingeffectonthepathogencomparedwithsinglefungicide.Theoptimalmixtureratiowas73withco-toxicitycoefficient(CTC)of584.56,whichwasobviouslyhigherthanthoseofothermixtureratios.Boththemixtureratioof64and82hadCTCabove500,beingnexttothebestratio.【Conclusion】ThegrowthofC.fioriniaeissignificantlyaffectedbytemperature,pH,culturemedium,carbonandnitrogensources.Thecombinationoftetramycinanddifenoconazoleindifferentmixtureratioshasobvioussynergistictoxicity,andthe73mixtureratiocanbeselectedforfieldcontrolexperiments.Key words:Rhododendron delavayi;Colletotrichum fioriniae;Biologicalcharacteristic;Combinedtoxicityassessment贵州百里杜鹃自然保护区位于贵州大方县与黔西市交界处(E10545301060445，N270830272000)，保存有地球同纬度范围内中低海拔区面积最大的天然杜鹃林 1。马缨杜鹃Rhododendron delavayiFranch 是该保护区的建群种和优势种，面积约 25.16km2，占百里杜鹃林区总面积的 20%。马缨杜鹃又名马缨花，是杜鹃花科Ericaceae 杜鹃属 Rhododendron 的一种常绿灌木或小乔木2。因花大、颜色鲜艳，且形似马头饰上的璎珞而得名。其分布广泛，花色艳红，观赏价值高，是杜鹃属重要的育种亲本，具有较高研究利用价值3。但随着旅游业发展，频繁的人为活动使杜鹃花病害发生日益严重，不仅对观赏性产生影响，对物种的生存也产生了威胁。因此，开展马缨杜鹃病原菌生物学特性研究以及室内药剂的筛选，对该病害防治具有重要意义。杨秀梅等4-5调查发现云南省昆明市晋宁区高山杜鹃盆花种植基地炭疽病 Colletotrichumboninense、枯梢病 Neofusicoccum parvum 发生严重，田间发病率达 20%以上。Wang 等6对台湾地区 杜 鹃 花 调 查 发 现 春 秋 季 节 杜 鹃 叶 肿 病Exobasidium japonicum 发生严重，该病原菌导致杜鹃幼嫩组织发育受损，对杜鹃花产业具有极大破坏性。童俊等7对武汉周边以龟峰山景区为代表的杜鹃自然群落的主要病虫害进行了系统调查，发现杜鹃叶肿病、黑斑病 Cercospora rhododendri 发生严重。刘浩凯等8调查发现浙江省景宁县上山头云锦杜鹃叶斑病 Phomopsis asparagi 频繁发生，严重影响了杜鹃林的健康生长和景观效果。胡芳菲9对吉安市苗圃几种常见树木病害进行调查发现，西洋杜鹃褐斑病 Ce.rhododendri 发生相对较严重，苗期发病会造成植株整株死亡。陈明珠等10调查发现，贵州省贵阳市凤凰山锦绣杜鹃叶肿病发生严重，发病率高达 80%，严重影响其观赏性。研究大多聚焦于不同种类杜鹃花病害调查和病原菌鉴定，关于杜鹃病害的生物学特性及防治药剂筛选研究较少。任纬恒11对百里杜鹃花腐病 Alternaria alternata 进行了室内药剂防治筛选，认为咪鲜胺、异菌脲、苯醚甲环唑、戊唑醇 4 种药剂是可进行花腐病防治的候选药剂。笔者于 2021 年 7 月在贵州百里杜鹃自然保护区进行病害调查，发现了 1 种杜鹃真菌病害，经多基因构建系统发育树并结合形态特征，确定该病害是由松针炭疽菌 Colletotrichum fioriniae 引起12。为明确该真菌的生物学特性及适宜防治药剂，采用菌丝生长速率法对松针炭疽菌生物学特性进行研究，第4期胡珊，等：马缨杜鹃炭疽病病原菌生物学特性及防治药剂筛选571同时测定 10 种杀菌剂对该病原菌室内毒力及 2 种药剂混配对病原菌的联合毒力，了解松针炭疽菌生物学特性，筛选出有效抑制该病原菌菌丝生长的药剂，以期为贵州百里杜鹃自然保护区马缨杜鹃炭疽病的科学防治提供指导。1 材料与方法 1.1 材料于 2021 年 7 月从贵州省百里杜鹃自然保护区采集马缨杜鹃具有典型炭疽病症状的叶片，带回实验室进行分离培养，经贵州大学烟草品质研究重点实验室分离、鉴定并保存。供试培养基为马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基、马铃薯蔗糖(PSA)培养基、燕麦片琼脂(OMA)培养基、查氏(Czapek)培养基和高氏 1 号(GSA)培养基13。PDA 培养基用于培养病原真菌、生物学测定及室内药剂筛选等试验。PSA、OMA、Czapek、GSA 培养基用于病原菌生物学特性测定。供试药剂：22.7%(w)二氰蒽醌 SC(江西禾益化工股份有限公司)、25.0%(w)吡唑醚菌酯 SC(江苏托球农化股份有限公司)、25.0%(w)溴菌腈 EC(江苏托球农化股份有限公司)、50.0%(w)丙环唑ME(青岛格力斯药业有限公司)、10.0%(w)苯醚甲环唑 WDG(先正达南通作物保护有限公司)、75.0%(w)肟菌戊唑醇WDG(拜耳作物科学有限公司)、0.3%(w)四霉素 AS(辽宁微科生物工程股份有限公司)、80.0%(w)乙蒜素 EC(南阳新卧龙生物化工有限公司)、1.0%(w)蛇床子素 ME(云南南宝生物科技有限责任公司)及 8.0%(w)宁南霉素 AS(德强生物股份有限公司)。1.2 病原菌生物学特性采用菌丝生长速率法13测定不同培养基对病原菌菌丝生长的影响，将直径为 6mm 的菌饼分别转接于 PDA、Czapek、OMA、PSA 和 GSA 培养基，置于 25 恒温培养箱黑暗培养 7d 后，测量各培养基上的菌落直径。每处理 4 皿，重复 3 次。取直径为 6mm 菌饼置于 PDA 培养基中央，分别放入 5、10、15、20、25、30、35、40 恒温培养箱黑暗培养 7d 后，十字交叉法测量菌落直径13，得到菌丝生长适宜温度，每处理 4 皿，重复 3 次。将直径为 6mm 菌饼分别接种到 pH 为 5、6、7、8、9、10、11 的 PDA 培养基(用 1mol/LHCl 和 1mol/LNaOH 进行调节)，置于 25 恒温培养箱暗培养 7d 后，测量菌落直径，得出菌丝生长适宜 pH，每处理 4 皿，重复 3 次。以 Czapek 培养基为基础培养基13，分别以等质量的果糖、葡萄糖、可溶性淀粉、乳糖、麦芽糖替代 Czapek 培养基中的蔗糖作为碳源，以等质量的硫酸铵、硝酸钠、蛋白胨、硝酸钾、磷酸二氢铵替换Czapek 中的硝酸钠作为氮源，以不添加碳源和氮源的 Czapek 为对照，25 恒温箱黑暗培养 7d 后测量菌落直径，筛选最适碳、氮源。每处理 4 皿，重复3 次。1.3 室内药剂毒力1.3.1单剂毒力测定采用菌丝生长速率法测定10 种杀菌剂(6 种常用化学药剂和 4 种生物农药)对马缨杜鹃炭疽病菌的抑菌活性。供试药剂母液用无菌水溶解稀释，分别设置5 个质量浓度梯度。二氰蒽醌为 1271.00、635.60、317.80、158.90、79.45mg/mL；吡唑醚菌酯为 0.3000、0.1500、0.0750、0.0375、0.0188mg/mL；溴菌腈为 500.00、250.00、125.00、62.50、31.25mg/mL；丙环唑为 10.000、5.000、2.500、1.250、0.625mg/mL；苯醚甲环唑为4.8、2.4、1.2、0.6、0.3mg/mL；肟菌戊唑醇为1.200、0.600、0.300、0.150、0.075mg/mL；四霉素为3.0000、1.5000、0.7500、0.3750、0.1875mg/mL；乙蒜素为 400、200、100、50、25mg/mL；蛇床子素为20.00、10.00、5.00、2.50、1.25mg/mL；宁南霉素为80、40、20、10、5mg/mL。在无菌操作条件下，将不同质量浓度的杀菌剂溶液分别加入到灭菌的 PDA培养基中，充分摇匀后等量倒入培养皿(直径为 85mm)中，制成含有相应质量浓度药剂的平板，以加入等量无菌水的 PDA培养基为对照。将供试病原菌接种于 PDA 培养基上培养 5d 后，取直径为 6mm 菌饼分别置于含不同质量浓度药剂平板和对照 PDA 平板中央，待对照菌丝长满平板时，采用十字交叉法测量菌落直径，计算抑菌率。1.3.2混剂毒力测定根据单剂毒力测定结果，采用菌丝生长速率法，选择作用机制不同、防治效果较好且 EC50差异较小的 2 种药剂进行混配，测定混剂对马缨杜鹃炭疽病菌的联合毒力。分别设置体积比 91、82、73、64、55、46、37、28 和 19 共 9 种配比为母液。按照上述方法测定混剂对松针炭疽菌的抑制率,求出毒力回归方程和 EC50，参考 Sun 等14的毒力评判法计算复配农药的共毒系数(Co-toxicitycoefficient，CTC)，评价药剂混用的增效作用。CTC 小于 80 为拮抗作用，大于 120 为增效作用，80120 为相加作用。相关计算公式如下：572华南农业大学学报(https:/ 数据分析Excel采用2010 进行数据统计处理；使用 SPSS17.0 和 DPS7.05 对数据进行单因素方差分析。2 结果与分析 2.1 不同培养基、温度、pH、氮源、碳源对菌丝生长的影响试验结果表明，菌丝在 5 种培养基上均能生长(图 1A)，且 5 种培养基对菌丝的生长影响差异显著。在 PSA 培养基上生长最快，平均菌落直径为7.60cm，显著高于其他处理；其次是 PDA 培养基，平均菌落直径为 7.05cm。病原菌在 OMA、Czapek、GSA 培养基上均能生长，但生长较为缓慢且菌丝极其稀疏，不适宜该菌的培养。由图 1B 可知，病原菌在 1035 均可生长，在 1525 生长较好，且最适生长温度为 25，与其他温度处理有明显差异(P0.05)，平均菌落直径为 7.05cm。温度为 10或 35 时生长较缓慢，3d后才开始生长，平均菌落直径分别为 4.21和 2.69cm。在 5、40 温度条件下，病原菌菌丝未生长。由图 1C 可知，该菌在 pH 为 511 的范围内均可正常生长，且随着 pH 的增大，菌丝生长愈发致密。pH79 长势较好，其中最适 pH 为 8，平均菌落直径达到 8.04cm，显著高于其他处理。dbacd0246810ABCCzapek PDAPSAOMAGSA菌落直径/cmColony diameter培养基Culture mediumfdbbacef012345678510152025303540/ecbabcde0123456789567891011pH各图中，柱子上方不同小写字母表示处理间差异显著(P0.05，Duncans 法)Ineachdiagram,differentlowercaselettersonthecolumnsindicatesignificantdifferences(P0.05，Duncansmethod)图 1 不同培养基(A)、温度(B)和 pH(C)对马缨杜鹃炭疽病菌菌丝生长的影响Fig.1 Effects of different culture medium,temperature and pH on mycelial growth of Colletotrichum fioriniae onRhododendron delavayi如表 1 所示，病原菌在不同的碳、氮源培养基上均可生长。在葡萄糖和可溶性淀粉为碳源的培养基上长势最好，平均菌落直径分别为(5.720.15)和(5.590.02)cm，显著高于对照的(3.490.16)cm以及其他 3 种不同碳源的。在乳糖为碳源的培养基上长势最差，平均菌落直径为(3.050.24)cm，显著表 1 碳、氮源对马缨杜鹃炭疽病菌菌丝生长的影响1)Table 1 Effects of carbon and nitrogen sources on mycelial growth of Colletotrichum fioriniae on Rhododendron delavayi碳源Carbonsource菌落直径/cmDiameterofcolony氮源Nitrogensource菌落直径/cmDiameterofcolony对照CK3.490.16c对照CK3.020.11d葡萄糖Glucose5.720.15a蛋白胨Peptone7.630.12a可溶性淀粉Solublestarch5.590.02a硝酸钾Potassiumnitrate6.080.26b果糖Fructose3.990.18b硝酸钠Sodiumnitrate5.050.08c麦芽糖Maltose3.650.31bc硫酸铵Ammoniumsulfate1.750.39e乳糖Lactose3.050.24d磷酸二氢铵Ammoniumdihydrogenphosphate2.810.18d1)同列数据后不同小写字母表示处理间差异显著(P0.05，Duncans法)1)Differentlowercaselettersinthesamecolumnindicatesignificantdifferences(P0.05,Duncansmethod)第4期胡珊，等：马缨杜鹃炭疽病病原菌生物学特性及防治药剂筛选573低于其他处理的。氮源以蛋白胨最好，平均菌落直径为(7.630.12)cm，显著高于其他氮源培养基的，其次是硝酸钾，平均菌落直径为(6.080.26)cm。在以硫酸铵为氮源的培养基上长势最差，平均菌落直径为(1.750.39)cm，显著低于其他处理及对照的。由此表明，供试的 5种碳源和氮源中，最适宜病原菌菌丝生长的碳源为葡萄糖和可溶性淀粉，最适宜的氮源为蛋白胨。2.2 杀菌剂室内毒力测定供试的 10 种杀菌剂对病原菌菌丝生长均有不同程度的抑制作用，EC50如表 2 所示。化学药剂中，肟菌戊唑醇、吡唑醚菌酯、苯醚甲环唑和丙环唑抑制效果最好，EC50分别为 0.102、0.118、1.202 和 2.101mg/L。二氰蒽醌和溴菌腈的抑菌活性最低，EC50分别为 196.501 和 95.402mg/L。生物农药中，四霉素抑菌效果最好，EC50为 1.107mg/L，其次是蛇床子素，EC50为 6.803mg/L。乙蒜素和宁南霉素抑菌效果相对较差，EC50分别为 82.711 和64.712mg/L。表 2 10 种杀菌剂对马缨杜鹃炭疽病菌的抑菌活性Table 2 Antibiotic activities of 10 fungicides to Colletotrichum fioriniae on Rhododendron delavayi供试药剂Trialfungicidew(有效成分)/%Massconcentrationoftheactiveingredients毒力回归方程1)ToxicityregressionequationEC502)/(mgL1)相关系数Correlationcoefficient肟菌戊唑醇Trifloxystrobintebuconazole75.0y=0.6232x+7.54650.1020.021a0.9802吡唑醚菌酯Pyraclostrobin25.0y=0.6906x+7.96560.1180.012a0.9642苯醚甲环唑Difenoconazole10.0y=0.5163x+6.51241.2020.037ab0.9998丙环唑Propiconazole50.0y=0.9880 x+7.64302.1010.099a0.9898溴菌腈Bromothalonil25.0y=1.4748x+6.505395.4021.718e0.9890二氰蒽醌Dithianon22.7y=0.8520 x+5.6021196.5015.117f0.9931四霉素Tetramycin0.3y=0.8794x+7.61641.1070.015a0.9970乙蒜素Ethylicin80.0y=1.4409x+6.559982.7112.597d0.9850蛇床子素Cnidiadin1.0y=1.2111x+7.62796.8030.147b0.9913宁南霉素Ningnanmycin8.0y=0.5785x+5.687864.7121.124c0.93501)x：杀菌剂浓度的对数；y：杀菌剂对马缨杜鹃炭疽病菌的抑制率；2)同列数据后不同小写字母表示处理间差异显著(P0.05，Duncans法)1)x:Logarithmoffungicideconcentration;y:InhibitionrateoffungicideagainstColletotrichum fiorinia on Rhododendrondelavayi;2)Differentlowercaselettersinthesamecolumnindicatesignificantdifferences(P0.05,Duncansmethod)根据单剂毒力测定结果，选择抑菌效果较好、作用机制不同且 EC50相近的 10.0%(w)苯醚甲环唑和 0.3%(w)四霉素按照体积比 91、82、73、64、55、46、37、28 和 19 进行混配后测定其EC50、CTC 及联合毒力，结果(表 3)表明，9 种配比组合的 EC50均较小，且小于 2 种单剂的 EC50，说明以这 9 种配比组合进行混配均对马缨杜鹃炭疽病菌菌丝生长具有较强的抑制作用；9 种配比组合的CTC 分别为 302.51、511.49、584.56、549.23、423.58、339.93、314.25、326.69 和 279.91，均大于120。其中，配比为 82、73、64 时 CTC 均大于 500，表现为显著增效作用，且 9 种比例中 73配比 EC50最小，为 0.1930mg/L，CTC 最大(584.56)，为室内毒力测定最佳混剂配比。574华南农业大学学报(https:/ 3 结论与讨论明确病原菌生物学特性是了解病害发生规律的前提，本研究通过测定马缨杜鹃炭疽病菌生物学特性发现，该菌在 pH511 均可生长，最适 pH 为8；菌丝对温度适应范围较广，1035 均可生长，最适温度为 25。这与 Baroncelli等15报道的红花炭疽病菌 C.chrysanthemi 和张琳等16报道的南瓜炭疽病菌 C.brevisporum 生物学特性研究结果相似。供试的 5 种碳源中，以葡萄糖为碳源的培养基最适宜该菌的生长，而以乳糖为碳源的培养基明显不利于该菌生长，这与黄蔚等17报道的西瓜新炭疽病菌 C.gloesporioides 研究结果相同。供试的 5 种氮源中，菌株在以蛋白胨作氮源的培养基上的生长显著优于其他氮源，而以硫酸铵作为氮源时菌株菌丝生长速率显著低于其他氮源，说明蛋白胨为该菌生长最佳氮源，硫酸铵则不适合作为培养该菌的氮源。此研究结果与曹尚等18对高粱炭疽病菌 C.sublineola生物学特性测定结果一致。目前，化学防治仍是田间病害防治的主要手段，对化学药剂进行筛选是植物病害防治的重要内容。宋慧云等19对宫粉羊蹄甲炭疽病菌 C.glo-eosporioides 进行室内毒力测定，结果表明 98%(w)溴菌腈和 97%(w)吡唑醚菌酯对宫粉羊蹄甲炭疽病菌菌丝生长具有较强的抑制作用。冉飞等20对百香果炭疽病菌 C.karstii 进行室内杀菌试验发现75%(w)肟菌戊唑醇和 25%(w)吡唑醚菌酯抑菌效果最好，EC50分别为 0.067 和 0.463mg/L。孟珂等21对 9 种薄壳山核桃炭疽病病原菌的毒力测定结果表明，戊唑醇对 C.fioriniae、C.liaoningense 和 C.tamarilloi 等炭疽菌生长具有较强抑制作用，平均EC50为 0.49mg/L。本研究也表明，75%(w)肟菌戊唑醇和 25.0%(w)吡唑醚菌酯对马缨杜鹃炭疽病菌抑制效果较好，EC50分别为 0.102 和 0.118mg/L。试验还发现 10.0%(w)苯醚甲环唑和 50.0%(w)丙环唑 ME 对该病原菌也具有较好抑制效果，EC50分别为 1.202 和 2.101mg/L。另外，生物农药 0.3%(w)四霉素和 1.0%(w)蛇床子素对该菌也有较好抑制作用，EC50分别为 1.107和 6.803mg/L，以上药剂均可作为田间防治马缨杜鹃炭疽病的候选药剂。苯醚甲环唑是三唑类广谱杀菌剂，通过抑制麦角甾醇的生物合成、破坏细胞膜结构功能，从而达到杀菌效果22。四霉素为不吸水链霉菌梧州亚种的发酵代谢产物，其有效成分可通过抑制菌丝体生长、诱导植物抗性并促进作物生长而达到防治病害的目的23。王晓琳等24测定了 0.3%(w)四霉素与 30%丙硫菌唑对草莓炭疽病菌 C.gloeosporioides 的室内毒力，结果表明四霉素与丙硫菌唑质量比为115 时抑菌效果最佳，EC50仅为 0.0224mg/L，增效系数为 1.73。韦薇等25测定 95%(w)苯醚甲环唑和 90%(w)代森锰锌不同比例复配对柑桔炭疽病菌 C.gloeosporioides的影响，结果表明前者与后者17 体积配比时 CTC 达到最大(150.25)，是防治该病原菌的最佳配比。贤小勇等26测定 98%(w)表 3 四霉素与苯醚甲环唑不同配比混剂对马缨杜鹃炭疽病菌的毒力Table 3 Bioactivities of mixtures containing different ratios of tetramycin and difenoconazole against Colletotrichumfioriniae on Rhododendron delavayiV(四霉素)V(苯醚甲环唑)V(Tetramycin)V(Difenoconazole)毒力回归方程1)Toxicityregressionequation相关系数CorrelationcoefficientEC502)/(mgL1)共毒系数Co-toxicitycoefficient91y=1.0766x+5.46950.99920.36640.011e302.5182y=1.0903x+5.72060.99820.21830.020b511.4973y=0.8994x+5.64260.98890.19300.015a584.5664y=0.9324x+5.63780.99780.20700.028ab549.2355y=1.1314x+5.64210.98880.27070.027c423.5846y=0.9365x+5.43860.99840.34010.019d339.9337y=0.8895x+5.38290.98940.37110.021e314.2528y=0.9220 x+5.40900.99560.36010.014de326.6919y=1.1020 x+5.41100.99840.42370.022f279.911)x：杀菌剂浓度的对数；y：杀菌剂对马缨杜鹃炭疽病菌的抑制率；2)同列数据后不同小写字母表示不同处理间差异显著(P0.05，Duncans法)1)x:Logarithmoffungicideconcentration;y:InhibitionrateoffungicideagainstColletotrichum fioriniaonRhododendrondelavayi;2)Differentlowercaselettersinthesamecolumnindicatesignificantdifferences(P0.05,Duncansmethod)第4期胡珊，等：马缨杜鹃炭疽病病原菌生物学特性及防治药剂筛选575吡唑醚菌酯和 96%(w)苯醚甲环唑不同配比混剂对核桃炭疽病菌 C.gloeosporioides 菌丝生长的影响，发现 2 种药剂按质量比 32 和 11 进行复配时，毒力均表现增效作用。本研究前期单剂毒力测定结果表明 10.0%(w)苯醚甲环唑和 0.3%(w)四霉素对马缨杜鹃炭疽病菌均有较好抑制作用，为延缓病原菌抗药性、减少化学农药的使用量，故选择这 2 种不同作用机理的药剂进行复配以增强防治效果。结果表明，较单剂而言，试验所设置的 9 种复配比例均有增效作用，以 73 为最佳混剂体积比，EC50最小，CTC 最大。综合分析认为，75.0%(w)肟菌戊唑醇、25.0%(w)吡唑醚菌酯、50.0%(w)丙环唑、0.3%(w)四霉素和 10.0%(w)苯醚甲环唑可作为马缨杜鹃炭疽病的候选防治单剂；将 0.3%(w)四霉素与 10.0%(w)苯醚甲环唑进行复配能显著增效。本研究可为百里杜鹃自然保护区马缨杜鹃炭疽病田间药剂筛选及合适的施用浓度提供理论依据，为延缓该地区马缨杜鹃炭疽病病菌抗药性，选择适宜复配药剂提供一定参考。参考文献：杨成华,李贵远,邓伦秀,等.贵州百里杜鹃保护区的杜鹃属植物种类及其观赏特性研究J.西部林业科学,2006,35(4):14-18.1CAIYF,WANGJH,LISF,etal.Photosyntheticre-sponseofanalpineplant,Rhododendron delavayiFran-ch,towaterstressandrecovery:TheroleofmesophyllconductanceJ.FrontiersinPlantScience,2015,6:1089.2ZHANGL,XUPW,CAIYF,etal.Thedraftgenomeassembly of Rhododendron delavayi Franch.var.delavayiJ.Gigascience,2017,6(10):gix076.doi:10.1093/gigascience/gix076.3杨秀梅,瞿素萍,张宝琼,等.高山杜鹃枯梢病病原菌鉴定及品种抗病性调查J.园艺学报,2019,46(5):923-930.4杨秀梅,唐艺榕,李进昆,等.杜鹃炭疽病病原鉴定及其生物学特性研究J.江西农业学报,2018,30(3):74-77.5WANGPH,TSAOCC,PAITY.Exobasidium japonic-um inhabits in node strategically during summer inRhododendronJ.Sydowia-Horn,2014,66(2):325-334.6童俊,毛静,周媛,等.武汉地区杜鹃花主要病虫害调查研究J.现代农业科技,2021(5):115-117.7刘浩凯,张辉,陈玲芳,等.浙江景宁云锦杜鹃叶斑病病原菌鉴定及生物学特征研究J.浙江林业科技,2020,40(2):9-16.8胡芳菲.吉安市苗圃几种常见树木病害及防治J.园艺与种苗,2021,41(11):51-52.9陈明珠,丁海霞,刘国琴,等.锦绣杜鹃叶肿病菌鉴定及病原菌培养代谢产物的初步分析J.植物病理学报,102021,51(6):1005-1010.任纬恒.高山杜鹃病害的病原菌分离鉴定与防治基础研究D.贵阳:贵州师范大学,2019:33-45.11HUS,PENGLJ,DINGHX,etal.FirstreportofCol-letotrichum fioriniaecausinganthracnoseonRhododen-dron delavayiinChinaJ.PlantDisease,2022,106(11):2995.12方中达.植病研究方法M.3 版.北京:中国农业出版社.1998:140-141.13SUNYP,JOHNSONER.Analysisofjointactionofi