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实验与检验医学 2023 年 4 月第 41 卷第 2 期 Experimental and Laboratory Medicine,Apr.2023,Vol.41,No.2HPV L1 壳蛋白、CDC7、Spindlin1 在不同程度宫颈病变中的表达及意义杨红，张亚磊，丁怡馨，王子仪渊平煤神马医疗集团总医院袁河南 平顶山 467099冤宫颈癌作为一种常见女性生殖系统恶性肿瘤袁给女性的健康和社会经济带来巨大的负担袁宫颈病变的主要原因是人乳头状瘤病毒渊HPV冤侵入机体引发感染后造成体内细胞周期调控失常1袁明确的病因使得宫颈癌能够被有效预防袁因此袁对宫颈癌进行早期诊断和预后评估至关重要袁 宫颈上皮瘤变渊CIN冤是宫颈癌筛查指标之一2遥 HPV L1 壳蛋白是 HPV 病毒的主要结构蛋白袁参与机体感染后的免疫问答袁多出现于宫颈病变早期袁并在 HPV 病毒整合到宿主 DNA 时期停止免疫问答3袁可以作为反应宫颈病变的一个标志遥 细胞周期蛋白 7渊CDC7冤在多种癌症中都被发现具有高水平的表达4袁可以作为肿瘤研究的重要标记袁 但是目前对于其在宫颈病变中的表达尚无详细完整的研究袁 同时袁Spindlin1 蛋白具有促进癌细胞生长尧增殖尧分化袁抑制其凋亡的作用5袁癌症患者体内存在着 Spindlin1蛋白异常表达的现象遥本文通过研究 HPV L1 壳蛋白尧细胞周期蛋白 7渊CDC7冤尧Spindlin1 在不同程度的宫颈病变中的阳性表达水平袁 分析其与宫颈病变临床特征的关系袁 为宫颈癌的早期诊断提供参考价值袁现报告如下遥1 一般资料与方法1.1 一般资料回顾性分析 2019 年 3 月至 2020年 12 月于本院行宫颈 hrHPV 检测尧宫颈基液细胞学检查后诊断为宫颈病变的患者袁 对患者病例进行整理袁纳入标准院渊1冤有完整的 hrHPV 检测尧宫颈基液细胞学检查的病理学诊断结果6曰渊2冤无免疫学疾病尧血液疾病尧其他严重肿瘤病史曰渊3冤宫颈手术前 6 个月未接受过放化疗遥 排除标准院渊1冤妊娠期或者哺乳期妇女曰渊2冤复发性宫颈癌患者遥 按照纳入和排除标准筛选病例袁 纳入组内分析的宫颈病变患者一共 253 例袁 收集其宫颈组织制成的石蜡标本遥 病理学检测结果院正常宫颈 62 例曰CIN玉54 例曰CIN 域芋50 例曰宫颈鳞状细胞癌 48 例袁浸润腺癌 39 例遥 细胞学检测结果院无宫颈上皮内瘤变渊NILM冤57 例曰不典型鳞状上皮细胞渊ASCUS冤48例曰低级别鳞状上皮细胞渊LSIL冤40 例袁高级别鳞状上皮细胞渊HSIL冤52 例袁宫颈癌渊SCC冤56 例遥1.2 方法和试剂 渊1冤方法院采用免疫组织化法检测 HPV L1 壳蛋白尧CDC7尧Spindlin1 在宫颈病变患者组织中的阳性表达7遥 将石蜡标本进行常规脱水包埋尧连续切片袁3 次二甲苯脱蜡袁柠檬酸缓冲液冲洗进行抗原修复袁滴加 5%牛血清白蛋白溶液常温下放置 30 min袁滴加一抗袁过夜后滴加二抗袁DAB溶液显色袁缓冲液冲洗袁观察显色反应袁待显色结束后采用苏木素复染遥 阴性对照为柠檬酸缓冲液摘要:目的 检测 HPV L1 壳蛋白尧细胞周期蛋白 7渊CDC7冤尧Spindlin1 在不同程度的宫颈病变中的阳性表达水平袁探究其临床意义遥 方法 回顾性收集 2019 年 3 月至 2020 年 12 月于本院就诊的符合入组条件的人员 253 例袁按照病理学检测分为正常宫颈 62 例袁CIN玉54 例袁CIN 域芋50 例袁宫颈鳞状细胞癌 48 例袁浸润腺癌 39 例遥按照细胞学检测结果分为无宫颈上皮内瘤变渊NILM冤57 例袁不典型鳞状上皮细胞渊ASCUS冤48 例袁低级别鳞状上皮细胞渊LSIL冤40 例袁高级别鳞状上皮细胞渊HSIL冤52 例袁宫颈癌渊SCC冤56 例袁采用免疫组化法检测 HPV L1 壳蛋白尧CDC7尧Spindlin1 在不同程度的宫颈病变中的阳性表达水平遥 结果 HPV L1 壳蛋白的阳性表达随着宫颈组织病变的程度增加而减少袁CDC7尧Spindlin1 阳性表达随着宫颈组织病变的程度增加而增加袁差异均具有显著性渊P75%的标准分别记为 0尧1尧2尧3尧4遥 根据染色强度进行分级院淡黄色尧黄色尧棕黄色袁分值为 03 分袁以两种判定结果的乘积为阳性强度袁可分为 0 分阴性袁5 分弱阳性袁9 分阳性袁逸9 分强阳性遥1.4 统计学方法 使用 SPSS 22.0 软件进行统计学分析袁字2检验法分析计数资料 渊%冤袁P0.05 为差异有统计学意义标准遥2 结果2.1 HPV L1 壳蛋白在不同程度的宫颈病变中的阳性表达情况 HPV L1 壳蛋白的阳性表达随着宫颈组织病变的程度增加而减少袁病理学检测阳性表达率渊字2=43.435袁P0.001冤袁细胞学检测阳性表达率渊字2=59.472袁P0.001冤袁差异有统计学意义渊P0.05冤袁见表1-2遥2.2 CDC7 在不同程度的宫颈病变中的阳性表达情况 CDC7 阳性表达随着宫颈组织病变的程度增加而增加袁病理学检测阳性表达率渊字2=107.375袁P0.001冤袁细胞学检测阳性表达率渊字2=133.582袁P0.001冤袁差异有统计学意义渊P0.05冤袁见表 3-4遥2.3 Spindlin1 在不同程度的宫颈病变中的阳性表达情况 Spindlin1 阳性表达随着宫颈组织病变的程度增加而增加袁 病理学检测阳性表达率 渊字2=133.078袁P0.001冤袁 细胞学检测阳性表达率 渊字2=153.451袁P0.001冤袁差异有统计学意义渊P0.05冤袁见表 5-6遥3 讨论研究表明袁 细胞调控紊乱是肿瘤细胞发生病变的重要因素袁能够参与到 DNA 复制尧整合的进程中袁因此袁检测细胞周期调控的生物标志物的变宫颈组织n阴性弱阳性阳性强阳性总阳性（%）正常宫颈CINCIN 宫颈鳞状细胞癌浸润腺癌625450483928283140391091050141273010520034（54.84）26（48.15）19（38.00）8（16.67）0（0.00）表 1 病理学检测的 HPV L1 壳蛋白的表达情况（n%）宫颈组织n阴性弱阳性阳性强阳性总阳性（%）NILMASCUSLSILHSILSCC5748405256212122405511656196730161563036（63.16）27（56.25）18（45.00）12（23.08）1（1.79）表 2 细胞学检测的 HPV L1 壳蛋白的表达情况（n%）宫颈组织n阴性弱阳性阳性强阳性总阳性（%）正常宫颈CINCIN 宫颈鳞状细胞癌浸润腺癌6254504839594530143361396035111100214193（4.84）9（16.67）20（40.00）34（70.83）36（92.31）表 3 病理学检测的 CDC7 的表达情况（n%）216窑窑实验与检验医学 2023 年 4 月第 41 卷第 2 期 Experimental and Laboratory Medicine,Apr.2023,Vol.41,No.2宫颈组织n阴性弱阳性阳性强阳性总阳性（%）NILMASCUSLSILHSILSCC57484052565534177227811100510191802515262（3.51）14（29.17）23（57.50）45（86.54）54（96.43）表 4 细胞学检测的 CDC7 的表达情况（n%）宫颈组织n阴性弱阳性阳性强阳性总阳性（%）正常宫颈CINCIN 宫颈鳞状细胞癌浸润腺癌62545048396043298016141291410181101710192（3.23）11（20.37）31（62.00）40（83.33）39（100.00）表 5 病理学检测的 Spindlin1 的表达情况（n%）宫颈组织n阴性弱阳性阳性强阳性总阳性（%）NILMASCUSLSILHSILSCC5748405256533610313698121592220011219234（7.02）12（25.00）30（75.00）49（94.23）55（98.21）表 6 细胞学检测的 Spindlin1 的表达情况（n%）化是临床癌症检测的至关重要的指标遥 生物标志物是指从生物学介质中能够检测到的细胞尧 生物化学尧分子的变化的标志物9袁由于生物标志物具有反应变化趋势的标记作用袁 是一个渐进缓慢的过程袁同时能够反应癌细胞的扩散尧增殖程度袁是作用于癌症早期筛查尧诊断的指标袁医学上常见的肿瘤标志物有甲胎蛋白尧癌胚抗原等10遥HPV L1 壳蛋白在 HPV 入侵机体后袁 参与病毒的早期复制袁作为结构蛋白袁它也是人体细胞免疫反应的目标袁 当 HPV 病毒整合到宿主 DNA 后袁HPV L1 壳蛋白的表达逐渐缺失11袁因此袁对于HPV感染引发的宫颈病变袁 它能够起到一个检测的作用袁本文研究结果显示袁随着宫颈病变程度加深袁HPV L1 壳蛋白的阳性表达量逐渐下降袁 而且袁随着宫颈病变发展到癌症进程袁 其阳性表达几乎完全消失袁这与王登山的研究结果相符12遥细胞周期蛋白 7渊CDC7冤在 DNA 复制中具有重要地位袁主要影响细胞有丝分裂的 S 期袁其活性会随着细胞周期的改变而产生变化袁 已有研究证明 CDC7 的异常表达与肿瘤细胞增殖分化息息相关袁 而 HPV 引起宫颈病变的关键因子是癌蛋白上的 E6尧E7袁E6 与 MCMs 羧基末端相连袁HPV16 的E6 蛋白与 MCMs 紧密结合袁 引起染色体畸变13遥HPV 直接影响 MCMs 的表达袁 而 CDC7 高表达加速肿瘤细胞 MCMs 过度活化袁促进肿瘤异常增殖袁这与本研究发现 CDC7 阳性率随着宫颈病变的加剧而上升的结果是相对应的袁 猜测下调或阻断CDC7 的表达能够成为影响宫颈病变的重要因素遥Spindlin1 的致癌机制与 CDC7 相似袁异常表达对细胞有丝分裂产生干扰袁使得 DNA 产生紊乱袁从而导致肿瘤癌变袁同时作为一种靶蛋白袁它能够通过信号干扰来促进肿瘤细胞增殖袁 相关文献报道袁Spindlin1 在卵巢癌尧宫颈癌尧乳腺癌中都存在广泛表达的现象14遥 本研究发现袁Spindlin1 在宫颈癌渊SCC冤中的阳性检测率高达 98.21%袁而在宫颈病变早期阳性表达率只有 7.02%袁且是随着病变程度加剧而逐步上升袁 与文献记载的 Spindlin1 高表达与宫颈病变甚至癌变有关这一结论是一致的15遥近年来袁 国内外对于 Spindlin1 基因和蛋白的研究和报道主要集中于细胞分裂和信号传导通路16袁对于它与恶性肿瘤发生发展的关系研究较少袁 但是发表的文章中可以看出其与恶性肿瘤的发生发展密217窑窑实验与检验医学 2023 年 4 月第 41 卷第 2 期 Experimental and Laboratory Medicine,Apr.2023,Vol.41,No.2清水平及颈动脉粥样硬化评分评估冠状动脉病变程度的临床研究J.中国心血管病研究,2019,17(4):326-330.8厉菁,袁义强,于力,等.血清 Copeptin尧GDF-15尧IMA 水平联合检测在急性心肌梗死患者预后评估中的应用价值J.中国卫生工程学,2018,17(2):249-251.9Buljubasic N,Vroegindewey MM,Oemrawsingh RM,et al.TemporalPattern of Growth Differentiation Factor-15 Protein After AcuteCoronary Syndrome(From the BIOMArCS Study)J.Am J Cardiol,2019,124(1):8-13.10黄晗,卢红霞.缺血修饰蛋白与肺炎合并心力衰竭新生儿心肌损害损伤程度及预后的相关研究J.医学研究杂志,2018,47(5):153-156,152.11夏静雯.急性冠脉综合征患者血清 Copeptin 与心肌损伤程度尧RAAS 系统活化的相关性J.海南医学院学报,2017,23(7):890-893.12周秀,廖晓现,成力.血清生长分化因子 15尧和肽素尧缺血修饰清蛋白浓度对急性冠脉综合征患者 PCI 治疗后心肌损伤的预测价值J.岭南心血管病杂志,2020,26(4):385-389,399.(收稿日期 2021-06-29)渊上接第 209 页冤切相关袁 但是对于癌细胞扩散转移还需要进一步的深入研究遥综上所述袁HPV L1 壳蛋白尧 细胞周期蛋白 7渊CDC7冤尧Spindlin1 三者都能够反映宫颈病变的严重程度袁 可以作为宫颈癌早期筛查的指标应用到临床检测尧诊断中遥 由于宫颈癌是威胁女性健康的危险因子袁在全球女性癌症中发病率高居第四位袁因此袁 早期筛查方法的推广应用无论是对个人安全还是社会稳定都具有一定的积极意义遥参考文献1徐瑶,邓晓杨,吴海燕,等.人乳头状瘤病毒感染与宫颈癌患者临床病理特征和 Ki-67,PCNA 的关系J.现代生物医学进展,2019,19(14):153-156.2李灵芝,胡晓飞,程月平,等.Yes 相关蛋白,AEG-1 蛋白在宫颈癌癌前病变患者中表达及联合液基细胞学检查的临床意义J.中国计划生育和妇产科,2019,11(7):82-85.3沈小静,刘方方,姜莉,等.人乳头瘤病毒 L1 壳蛋白在子宫颈活检组织中的表达及意义J.临床与实验病理学杂志,2019,35(12):71-73.4张从义,崔逸峰,李宝宝,等.细胞分裂周期 7 蛋白在肝癌组织的表达及其对肝癌细胞增殖和侵袭的影响J.实用肿瘤学杂志,2020,166(2):60-65.5Luise C,Robaa D,Regenass P,et al.Structure-Based Design Dockingand Binding Free Energy Calculations of A366 Derivatives asSpindlin1 InhibitorsJ.Int J Mol Sci,2021,22(11):5910.6肖瑶,常淑芳,孙江川,等.阴道镜联合选择性液基细胞学检查对宫颈癌机会筛查人群的临床价值研究J.重庆医科大学学报,2019,44(1):36-40.7吴小延,刘小云,邵琼,等.免疫组织化学法与 Sanger 测序法对IDH1 基因突变检测的比较分析J.肿瘤预防与治疗,2020,33(4):291-299.8郭睿,田怡,金雪媛,等.胸苷酸合成酶免疫组化染色在标记前列腺基底细胞中的应用J.山西医科大学学报,2019,50(5):658-663.9宋丽,丁玲,冯美娟,等.hnRNP E1 对 HPV16 早期基因 E2,E6 的调控及其对宫颈癌细胞生物学功能的影响J.中华流行病学杂志,2021,42(2):321-326.10蒋楠楠,张丽科,杨育英,等.HPV 分型检测联合 TCT 在宫颈病变筛查中的价值分析J.实验与检验医学,2018,36(6):892-894.11田智丹,王劲松,黄文斌.HPV E6/E7 mRNA 联合 HPV L1 衣壳蛋白在子宫颈癌前病变诊断中的价值J.临床与实验病理学杂志,2019,35(3):351-353.12王登山,曹磊,钱金林,等.HPVL1 壳蛋白联合 MCM2 检测对 HPVDNA 阳性患者宫颈病变的诊断及预后意义J.现代肿瘤医学,2020,28(2):287-292.13黄影蓓.HPV 不同基因亚型感染与宫颈病变相关性研究J.中国性科学,2020,241(2):39-41.14顾云婧,朱平.卵巢癌基因共表达网络及预后标志物的研究J.生物学杂志,2020,37(5):10-14.15黄燕,朱晓云,李天英.人乳头瘤病毒 DNA 检测联合液基细胞学检查在宫颈病变筛查中的意义J.检验医学,2019,34(4):37-41.16李明珠,李换男,赵丽君,等.去甲基化对宫颈癌细胞系增殖及信号通路的影响J.中国妇产科临床杂志,2019,20(2):153-156.(收稿日期 2021-08-19)218窑窑