抗β_(2)-GP1、HCY、ACA、LAC联合检测诊断不良妊娠结局的价值分析.pdf

14CHINA HEALTH STANDARD MANAGEMENT,Vol.14,No.18抗2-GP1、HCY、ACA、LAC联合检测诊断不良妊娠结局的价值分析片静1 刘城2作者单位：1 泰安市妇幼保健院疾病筛查中心，山东 泰安 271000；2 泰安市中心医院检验科，山东 泰安 271000不良妊娠结局主要包括流产、死胎、早产、低出生体质量儿、巨大儿、先天性异常、死产及新生儿死亡等，会对孕产妇身心健康状态造成严重损害1。中国是出生缺陷的多发地区，每年有 80 万 120 万例新生儿有出生缺陷，主要包括唇腭裂、先天性心脏病、无脑儿、神经管缺陷和染色体异常等2。出生缺陷的增多可能会增加不良妊娠结局发生风险，增加胎儿、新生儿死亡率，是导致围产儿死亡的重要因素。长期以来，影像学检查是临床诊断不良妊娠的最常用方法，但不良妊娠孕产妇临床表现与影像学特征改变时间通常具有滞后性，部分患者症状或影像学特【摘要】目的 探讨血清同型半胱氨酸（homocysteine，HCY）、抗心磷脂抗体（anticardiolipin antibody，ACA）、抗 2糖蛋白1（anti-2-glycoprotein 1 antibody，抗 2-GP1）抗 体、狼疮抗凝物（lupus anticoagulant，LAC）联合检测在不良妊娠结局诊断中的价值。方法 分析 2019 年 10 月2020 年 10 月泰安市妇幼保健院 176 例接受产前疾病筛查的孕产妇临床资料，根据妊娠结局将 176 例孕产妇分为病例组（96 例，不良妊娠结局）和对照组（80 例，正常分娩）。采用酶联免疫吸附法进行 HCY、ACA、抗 2-GP1 表达水平的测定，用自动血凝仪进行 LAC 表达水平的测定。比较两组的 HCY、ACA、抗2-GP1、LAC 检测值差异，绘制受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线，分析 HCY、ACA、抗2-GP1、LAC 在不良妊娠结局诊断中的应用。结果 病例组孕产妇的血清 ACA、HCY、LAC、抗 2-GP1 抗体水平高于对照组（P 0.05）。围生儿死亡组 ACA、HCY、LAC、抗2-GP1 检测值高于围生儿健康组；ROC 曲线显示，ACA、HCY、LAC、抗 2-GP1 联合检测不良妊娠结局的 AUC（0.882，95%CI：0.7710.993）最大，灵敏度、特异度分别为 92.86%、93.90%（P 0.05）。结论 血清 ACA、HCY、LAC、抗 2-GP1 在不良妊娠结局中呈高表达，可作为预测不良妊娠结局发生的指标，对于有效预警不良妊娠结局，早期予以干预等有重要的意义。【关键词】同型半胱氨酸；抗 2糖蛋白 1 抗体；不良妊娠结局；狼疮抗凝物；抗心磷脂抗体；酶联免疫吸附法【中图分类号】R714 【文献标识码】A【文章编号】1674-9316（2023）18-0014-04doi:10.3969/j.issn.1674-9316.2023.18.004Analysis of the Value of Anti-2-GP1,HCY,ACA and LAC Combined Detection in the Diagnosis of Adverse Pregnancy OutcomesPIAN Jing1 LIU Cheng2 1 Disease Screening Center,Taian Maternal and Child Health Hospital,Taian Shandong 271000,China;2 Department of Laboratory,Taian City Central Hospital,Taian Shandong 271000,ChinaAbstract Objective To explore serum homocysteine(HCY),anticardiolipin antibody(ACA),anti-2-glycoprotein 1 antibody(anti-2-GP1)antibody and lupus anticoagulant(LAC)in the diagnosis of adverse pregnancy outcome.Methods Clinical data of 176 pregnant women who received prenatal disease screening in Tai an Maternal and Child Health Hospital from October 2019 to October 2020 were analyzed.According to the pregnancy outcome,176 pregnant women were divided into case group(96 cases,adverse pregnancy outcome)and control group(80 cases,normal delivery).The expression levels of HCY,ACA and anti-2-GP1 were determined by enzymed-linked immunosorbent assay,and LAC expression levels were determined by automatic hemagglutination apparatus.The differences of HCY,ACA,anti-2-GP1 and LAC values between the two groups were compared,and receiver operating characteristic(ROC)curves were drawn to analyze the application of HCY,ACA,anti-2-GP1 and LAC in the diagnosis of adverse pregnancy outcomes.Results Serum levels of ACA,HCY,LAC and anti-2-GP1 antibodies in case group were higher than those in control group(P 0.05).The values of ACA,HCY,LAC and anti-2-GP1 in perinatal death group were higher than those in perinatal healthy group.ROC curve showed that the AUC(0.882,95%CI:0.771-0.993)of ACA,HCY,LAC and anti-2-GP1 combined to predict adverse pregnancy outcome was the largest,and the sensitivity and specificity were 92.86%and 93.90%(P 0.05).Conclusion Serum ACA,HCY,LAC and anti-2-GP1 are highly expressed in adverse pregnancy outcomes,which can be used as an indicator to predict the occurrence of adverse pregnancy outcomes.It is of great significance for effective warning of adverse pregnancy outcomes and early intervention.Keywords homocysteine;anti-2-glycoprotein 1 antibody;adverse pregnancy outcome;lupus anticoagulant;anticardiolipin antibody;enzyme-linked immunosorbent assay15中国卫生标准管理CHSM 18征出现时病情已较为严重，严重影响临床诊治与母婴预后结局，具有一定局限性3。近年来，随着临床检测技术的发展，生物学指标诊断不良妊娠结局的价值受到了临床研究认可，其中血清同型半胱氨酸（homocysteine，HCY）、抗心磷脂抗体（anticardiolipin antibody，ACA）、抗 2糖 蛋 白 1（anti-2-glycoprotein 1 antibody，抗2-GP1）抗 体、狼 疮 抗 凝 物（lupus anticoagulant，LAC）被认为与不良妊娠结局的发生与发展有关3-4。本研究对 176 例分娩孕妇进行 ACA、LAC、HCY、抗 2-GP1 抗体检测，现报道如下。1 资料与方法1.1 一般资料选取 2019 年 10 月2020 年 10 月泰安市妇幼保健院 176例接受产前疾病筛查的孕产妇作为研究对象。纳入标准：（1）均接受 ACA、LAC、HCY、抗 2-GP1 抗体检测。（2）孕产妇均知情同意。（3）年龄 18 岁。（4）受检者均可正常沟通。（5）单胎妊娠。排除标准：（1）有流产史产妇。（2）并发其他妇科疾病者。（3）中途自行退出者。（4）意识不清楚、不合作者。（5）合并遗传性疾病者。根据妊娠结局将 176 例孕产妇分为病例组（96 例，不良妊娠结局）和对照组（80 例，正常分娩）。病例组年龄 20 36 岁，平均（28.712.44）岁；身体质量指数 19 26 kg/m2，平均（21.631.84）kg/m2；初产妇 59 例（61.46%），经产妇 37 例（38.54%）。对照组年龄 20 35 岁，平均（28.182.26）岁；身体质量指数19 25 kg/m2，平均（21.411.73）kg/m2；初产妇 51例（63.75%），经产妇 29 例（36.25%）。两组一般资料比较，差异无统计学意义（P 0.05），具有可比性。本研究经泰安市妇幼保健院医学伦理委员会批准（审批号2018003）。1.2 方法在妊娠 14 27 周采集受检者 2 mL 肘静脉血，于3 000/min 离心 15 min，分离上清液，冷藏于低温冰箱中待检，通过酶联免疫吸附法检验抗心磷脂抗体-免疫球蛋白G（ACA-IgG）、抗心磷脂抗体-免疫球蛋白 A（ACA-IgA）、抗心磷脂抗体-免疫球蛋白 M（ACA-IgM）等血清 ACA 3 项。试剂盒购于德国欧蒙公司，血清 ACA 取 ACA-IgG、ACA-IgA、ACA-IgM 之和的均值。结果判定：待检血清和阴性对照吸光度比值 2.1 则为阳性，2.1 则为阴性；ACA 3 项中至少有 1 项为阳性，ACA 则为阳性，正常参考范围：ACA-IgG 3.5 GPLU/L、ACA-IgA 1.5 APLU/L、ACA-IgM 1.2 MPLU/L5。同时通过酶联免疫吸附法检验抗 2-GP1 抗体-IgM、IgG、IgA 等血清抗 2-GP1 抗体 3 项，以正常对照组为标准进行 3 项阳性判定，该值为阴性，该值为阳性；抗 2-GP1 抗体 3 项中至少有 1项为阳性，反之则为阳性，正常参考范围：抗 2-GP1抗 体-I g M 1 5 U/m L、I g G 2 0 U/m L、I g A 1 5 U/m L，血 清 抗 2-GP1 抗 体 取-IgM、IgG、IgA 之和的均值6。通过酶联免疫吸附法检验血清HCY 浓度，其中 HCY 10 mmol/L 为阳性，HCY 10 mmol/L为阴性7。使用自动血凝仪（法国 DIAGNOSTICA STAGO公司，型号 STAGO STA-R Evolution）检验 LAC 水平，采用原装配套质控品与试剂，LAC 确诊试验与筛选试验应用血 浆 蜂 蛇 毒 时 间 进 行，得 出 LAC 比 值，其 中 比 值 1.2 mmol/L 为阴性，1.2 mmol/L 为阳性8。所有孕产妇均进行联合检测，并且根据联合检测及最终妊娠结果进行分组，均随访至分娩结束，以孕产妇最终分娩结果作为不良妊娠结局的诊断金标准。不良妊娠结局包括流产、死胎、早产、低出生体质量儿、巨大儿、先天性异常、死产及新生儿死亡等，按围生儿生存、死亡情况，细分为围生儿死亡组（流产、死胎、死产、新生儿死亡）和围生儿健康组（早产、低出生体质量儿、巨大儿、先天性异常）。1.3 统计学方法采用 SPSS 25.0 统计学软件处理数据。计数资料以n（%）表示，采用2检验；计量资料以（x-s）表示，组间比较采用独立样本t检验；绘制受试者工作特征（receiver operating characteristic curve，ROC）曲线分析ACA、HCY、LAC、抗2-GP1在不良妊娠结局诊断中的应用。P 0.05 为差异有统计学意义。2 结果2.1 两组血清 ACA、HCY、LAC、抗 2-GP1 抗体水平比较病例组孕产妇血清 ACA、HCY、LAC、抗 2-GP1 抗体水平高于对照组，差异有统计学意义（P 0.05）。见表 1。2.2 ACA、HCY、LAC、抗 2-GP1 与不良妊娠结局的关系分析观察记录病例组产妇的妊娠结局，记录至产后 1 个月内的新生儿死亡病例数，其中死亡 14 例（14.58%）、健康存活 82 例（85.42%）。围生儿死亡组和围生儿健康组的产妇年龄、身体质量指数、生产次数比较，差异无统计学意义（P 0.05）。围生儿死亡组 ACA、HCY、LAC、抗 2-GP1 检测值高于围生儿健康组，差异有统计学意义（P 0.05）。见表 2。2.3 ACA、HCY、LAC、抗 2-GP1 在不良妊娠结局预测中的效能分析以妊娠结局为自变量（围生儿死亡 0，围生儿健康 1），以 ACA、HCY、LAC、抗 2-GP1 在表达水平为因变量，绘制 ROC 曲线，见图 1。结果显示，ACA、HCY、LAC、抗 2-GP1 联合检测不良妊娠结局的 AUC（0.882，16CHINA HEALTH STANDARD MANAGEMENT,Vol.14,No.1895%CI：0.771 0.993）最大，灵敏度、特异度分别为92.86%、93.90%（P 0.05）。见表 3。3 讨论不良妊娠主要指孕产妇在妊娠后，无法生产功能和外观正常的子代，为临床多发妇科病，多表现为流产、生长迟缓、胚胎停育、发育迟缓、死胎死产，可对母婴造成严表 3 ACA、HCY、LAC、抗 2-GP1 在不良妊娠结局预测中的效能分析指标AUC95%CICut-off 值灵敏度（%）特异度（%）约登指数P值ACA0.6310.5560.7063.20 mIU/mL64.2974.390.417 0.05HCY0.5970.5010.69313.50 mmol/L57.1471.950.291 0.05LAC0.7620.6760.8481.60 mmol/L85.7187.800.735 0.05抗 2-GP10.7330.6490.8177.00 U/mL78.5784.150.627 0.05联合检测0.8820.7710.993-92.8693.900.868 0.05表 1 病例组与对照组血清 ACA、HCY、LAC、抗 2-GP1 抗体水平比较（x-s）组别例数ACA（mIU/mL）HCY（mmol/L）LAC（mmol/L）抗 2-GP1 抗体（U/mL）病例组962.820.4712.722.351.390.165.560.81对照组801.480.699.242.261.030.123.180.56t值-15.2539.95316.60322.221P值-0.001 0.001 0.001 0.001组别例数ACA（mIU/mL，x-s）HCY（mmol/L，x-s）LAC（mmol/L，x-s）抗 2-GP1 抗体（U/mL，x-s）围生儿死亡组143.450.6114.022.571.880.238.021.34围生儿健康组822.710.4512.502.311.310.155.140.72t/2值-5.3832.23927.14011.946P值-0.0010.028 0.001 0.001表 2 病例组的基线资料及指标水平比较组别例数产妇年龄（岁，x-s）产妇身体质量指数（kg/m2，x-s）产妇生产次数 例（%）初产妇经产妇围生儿死亡组1428.992.5021.741.919（64.29）5（35.71）围生儿健康组8228.662.4221.611.8350（60.98）32（39.02）t/2值-0.4670.2440.234P值-0.6410.8080.629重威胁。导致流产的因素很多，其中半数以上的原因不 能 查 明。抗 磷 脂 抗 体（antiphospholipid antibody，APA）是一组与抗磷脂有关的抗体，APA 为自身免疫抗体的组合，其中 ACA、LAC、抗 2-GP1 抗体主要成员。有研究显示，妊娠期的许多疾病均与 APA 相关，APA 异常多见于妊娠不良患者，易出现死胎、习惯性流产、妊娠期高血压、早产等不良妊娠结局9。因此，分析血清 ACA、LAC、HCY、抗 2-GP1 抗体联合检验在不良妊娠结局诊断中的价值，有利于提高不良妊娠检测的准确性，针对性地制订围孕期保健方案，为妊娠结局的改善提供一定的数据支持。抗 2-GP1 抗体作为单链糖蛋白之一，主要包括抗2-GP1 抗 体-IgM、抗 2-GP1 抗 体-IgG，抗 2-GP1抗体-IgA，在血栓形成过程中水平显著升高。有报道指出，抗 2-GP1 抗体在子宫内的表达能够抑制血小板凝血酶原活性与内源性凝聚通路，协同宫内血栓的形成，最终导致不良妊娠结局10。ACA 多存在于组织细胞膜和血细胞中，是 APA 的主要抗体，一般情况下 ACA-IgM、ACA-IgG、ACA-IgA 等 ACA 亚型不会被免疫系统识别，但在身体异常情况下磷脂抗原可对人体造成一定的刺激，致使血清图 1 ACA、HCY、LAC、抗 2-GP1 在不良妊娠结局预测中的ROC 图17中国卫生标准管理CHSM 18参考文献1 李娜，苏建强，孙聪欣，等.20 周胎龄胎儿肠管内径超中 ACA 水平升高，ACA 高表达可造成血管内皮受损，致使微血管栓形成，导致不良妊娠结局发生11。本研究中，病例组孕产妇的血清 ACA、HCY、LAC、抗 2-GP1 抗体水平高于对照组，围生儿死亡组 ACA、HCY、LAC、抗 2-GP1 检测值高于围生儿健康组。这表明血清 ACA、HCY、LAC、抗 2-GP1 抗体水平与不良妊娠结局的发生、发展存在关联，能够预测孕产妇的不良妊娠结局风险。陈航华等12研究显示，ACA 诊断妊娠结局的效果满意，ACA在不良妊娠结局中呈高表达，与本研究结果基本一致。CARMO-PEREIRA 等13研究也指出，抗 2-GP1 抗体和抗心磷脂对于妊娠并发症具有较高的预测价值，妊娠发病患者的早产、胎儿生长受限、胎盘早剥、围生儿死亡、死胎发生率与正常产妇相比显著增加，并且 ACA、抗 2-GP1 抗体水平高于正常产妇，其结果和本研究相似。本研究结果还显示，ROC 曲线显示，ACA、HCY、LAC、抗 2-GP1 联合检测不良妊娠结局的 AUC（0.882，95%CI：0.771 0.993）最大。提示 ACA、HCY、LAC、抗 2-GP1 表达水平变化可能与孕产妇的妊娠状态及胎儿生长发育情况有关。分析原因如下，HCY 是一种蛋氨酸代谢产物，高水平的 HCY 可破坏血管内皮细胞的正常功能，造成凝血功能和纤溶系统紊乱，对正常代谢功能造成不良影响14。同时可引发胎盘微血栓形成，损害胎盘正常的血液循环功能，致使宫内窒息与流产等不良妊娠结局出现。LAC 是一种异质性免疫球蛋白，作为一种 IgM 与 IgG 抗磷脂抗体，能增加磷脂依赖性凝血时间15。高水平的 LAC 有血栓形成倾向，可累及胎盘血管与蜕膜，出现严重的血管梗死与纤维变性。并且，LAC 可导致螺旋动脉血管病变、绒毛间血栓形成与滋养层受损，从而损害胎盘功能，造成死产、自然流产、发育迟缓等。单用血清 ACA、HCY、LAC、抗 2-GP1 抗体预测不良妊娠结局的价值不高，4 项联合检测，能够尽可能排除自身免疫外的其他危险因素，早期鉴别病理妊娠，提高不良妊娠结局的预测价值，为产前干预提供指导意见，实现优生，提高人口素质。文章中体现了 产前诊断实验室质量指标专家共识16的临床参考或执行标准，以期为降低出生缺陷提供参考。综上所述，血清 ACA、HCY、LAC、抗 2-GP1 在不良妊娠结局中呈高表达，可以作为预测不良妊娠结局发生的指标，对于有效预警不良妊娠结局，早期予以干预等有重要的意义。因此次研究样本量较小，且来源有限，需进一步扩大样本，完善实验方法，进一步证实。声检查结果对不良妊娠结局的预测价值研究 J.中国全科医学，2021，24（18）：2314-2317.2 徐道仙，施晓华，宋艳萍，等.新生儿出生缺陷风险和缺陷类型与父母年龄的相关性分析 J.中国妇幼保健，2022，37（21）：4043-4046.3 ULRICH N D，HESSON A，WALDO A，et al.S-178 trophectoderm morphology in euploid embryos is related to infertility diagnosis and pregnancy outcome after transferJ.Reprod Sci，2020，27（1）：1455-1459.4 刘颖群，郑绍军，郑芳，等.抗心磷脂抗体（ACL）和抗2糖蛋白 1（抗 2GP1）及同型半胱氨酸（Hcy）与自发性早产关系的研究 J.当代医学，2020，26（5）：6-8.5 崔佳，郭莹，刘巧，等.产妇血清 ACA 和抗 2-GP1 抗体与不良妊娠结局的相关分析 J.贵州医科大学学报，2020，45（1）：87-90.6 张好为，袁海生，康建华.妊娠晚期孕妇抗心磷脂抗体和抗 2GP1 抗体对血栓形成性疾病的预测价值 J.中国妇幼保健，2021，36（22）：5153-5156.7 吴熠，邓强，胡凌云.Hcy 联合 PAPP-A、HCG 预测妊娠早期流产治疗结局价值 J.中国计划生育学杂志，2022，30（4）：907-910.8 崔雪，周颖，张璐，等.妊娠合并抗磷脂综合征不良妊娠结局危险因素分析J.大连医科大学学报，2022，44（1）：18-23，30.9 ZAMANI B，SHAYESTEHPOUR M，ESFAHANIAN F，et al.The study of factors associated with pregnancy outcomes in patients with systemic lupus erythematosusJ.BMC Res Notes，2020，13（1）：185.10 周燕，罗孟军，陈莉农，等.抗精子抗体、抗子宫内膜抗体、抗心磷脂抗体和抗核抗体检测在复发性流产诊断中的价值 J.中国计划生育和妇产科，2020，12（5）：25-28，51.11 徐恒，卢佳萍，戴希望.双胎妊娠孕妇孕中期血清-HCG，E2和 P 水平检测及对不良妊娠结局的预测作用 J.中国性科学，2020，249（10）：68-72.12 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