红和绿香椿芽贮藏过程中花青素和木质素含量及相关基因表达分析.pdf

西北植物学报,2 0 2 3,4 3(8):1 3 0 4-1 3 1 3A c t a B o t.B o r e a l.-O c c i d e n t.S i n.d o i:1 0.7 6 0 6/j.i s s n.1 0 0 0-4 0 2 5.2 0 2 3.0 8.1 3 0 4 h t t p:/x b z w x b.a l l j o u r n a l.n e t收稿日期:2 0 2 2-0 9-1 6;修改稿收到日期:2 0 2 3-0 3-3 0基金项目:贵州省农业科学院项目(黔农科院支撑2 0 2 10 5号、黔农科院种质资源2 0 2 21 0号);贵州省现代农业产业技术体系建设-蔬菜体系项目(G Z C Y T X 2 0 2 2-0 1 0 1);贵州省科学技术厅重点项目(黔科合支撑2 0 2 2 重点0 1 9 号);贵阳市科技局项目(筑科合同2 0 2 15-1号)作者简介:赵 倩(1 9 9 7-),女,在读硕士研究生,主要从事蔬菜分子生物学研究。E-m a i l:z h a o q 2 1 71 6 3.c o m*通信作者:孟平红,博士,研究员,主要从事蔬菜育种及分子技术研究。E-m a i l:M e n g p h 3 2 21 6 3.c o m红和绿香椿芽贮藏过程中花青素和木质素含量及相关基因表达分析赵 倩1,2,3,朱顺华2,蔡 霞2,文晓鹏1,谭国飞2,孟平红2*(1 贵州大学 生命科学学院/农业生物工程研究院,山地植物资源保护与保护种质创新教育部重点实验室,贵阳 5 5 0 0 2 5;2 贵州省农业科学院园艺研究所/贵州省园艺工程技术研究中心,贵阳 5 5 0 0 0 6;3 吉林农业大学 农学院,长春 1 3 0 1 1 8)摘 要:为了探究低温贮藏对香椿芽品质的影响,研究以贵州省织金县板桥镇红光村种植的红和绿香椿芽为材料,在4 低温黑暗贮藏过程中对其叶片和叶柄进行外观形态和组织细胞学观察,花青素、木质素含量及其相关合成基因表达水平分析。结果表明,(1)红香椿芽贮藏3 d后色泽保持较好,而绿香椿芽贮藏1 d后开始出现黑色斑点,且黑色斑点的数量随贮藏时间的延长逐渐增加;(2)红香椿芽叶脉和叶柄木质部细胞比相应绿香椿芽小且数量少;红、绿香椿芽贮藏过程中次生细胞壁均逐渐增厚,且绿香椿芽叶脉和叶柄细胞染色程度较深;(3)在低温贮藏过程中,红、绿香椿芽花青素含量均降低,木质素含量均升高,红香椿芽花青素含量始终高于绿香椿芽,而其木质素含量始终低于绿香椿芽,且红香椿芽升降幅度较小;(4)在采后低温贮藏过程中,香椿芽叶片和叶柄中花青素和木质素相关合成基因的表达水平与花青素和木质素含量的变化趋势基本一致。研究表明,红、绿香椿芽贮藏过程中均发生了木质化和蒸腾失水,花青素含量降低,但绿香椿芽的变化更明显;香椿芽花青素和木质素含量的差异与其合成相关基因的表达水平具有相关性。关键词:香椿芽;低温;贮藏;细胞学观察;木质素含量;花青素含量;基因表达中图分类号:Q 9 4 5.7 8;S 6 4 4.4文献标志码:AA n a l y s i s o f A n t h o c y a n i n a n d L i g n i n C o n t e n t s a n d E x p r e s s i o n o f R e l a t e d G e n e s i n R e d a n d G r e e n T o o n a s i n e n s i s B u d s d u r i n g S t o r a g eZ HAO Q i a n1,2,3,Z HU S h u n h u a2,C A I X i a2,WE N X i a o p e n g1,T AN G u o f e i2,ME NG P i n g h o n g2*(1 K e y l a b o r a t o r y o f P l a n t R e s o u r c e C o n s e r v a t i o n a n d G e r m p l a s m I n n o v a t i o n i n M o u n t a i n o u s R e g i o n M i n i s t r y o f E d u c a t i o n,C o l l e g e o f L i f e S c i e n c e s/I n s t i t u t e o f A g r o b i o e n g i n e e r i n g,G u i z h o u U n i v e r s i t y,G u i y a n g 5 5 0 0 2 5,C h i n a;2 I n s t i t u t e o f H o r t i c u l t u r e,G u i z h o u A c a d e m y o f A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s/H o r t i c u l t u r a l E n g i n e e r i n g T e c h n o l o g y R e s e a r c h C e n t e r o f G u i z h o u,G u i y a n g 5 5 0 0 0 6,C h i n a;3 C o l l e g e o f A g r o n o m y,J i l i n A g r i c u l t u r a l U n i v e r s i t y,C h a n g c h u n 1 3 0 1 1 8,C h i n a)A b s t r a c t:I n o r d e r t o e x p l o r e t h e e f f e c t o f l o w t e m p e r a t u r e s t o r a g e o n t h e q u a l i t y o f T o o n a s i n e n s i s b u d s,t h i s s t u d y u s e d r e d a n d g r e e n T.s i n e n s i s b u d s w h i c h f r o m H o n g g u a n g V i l l a g e,B a n q i a o T o w n,Z i j i n C o u n t y,G u i z h o u P r o v i n c e a s m a t e r i a l s,o b s e r v e d t h e a p p e a r a n c e m o r p h o l o g i c a l a n d h i s t o c y t o l o g i c a l,a n a-l y z e d t h e a n t h o c y a n i n a n d l i g n i n c o n t e n t a n d t h e i r r e l a t e d s y n t h e t i c g e n e s e x p r e s s i o n l e v e l s i n l e a v e s a n d p e t i o l e s o f r e d a n d g r e e n T.s i n e n s i s b u d s d u r i n g s t o r a g e a t 4 i n t h e d a r k.T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t:(1)T h e c o l o r o f r e d T.s i n e n s i s b u d s w a s b e t t e r a f t e r 3 d a y s o f s t o r a g e,w h i l e b l a c k s p o t s b e g a n t o a p p e a r o n g r e e n T.s i n e n s i s b u d s a f t e r 1 d a y o f s t o r a g e,a n d t h e n u m b e r o f b l a c k s p o t s g r a d u a l l y i n c r e a s e d w i t h t h e e x t e n s i o n o f s t o r a g e t i m e;(2)T h e l e a f v e i n s a n d p e t i o l e s x y l e m c e l l s o f r e d T.s i n e n s i s b u d s w e r e s m a l l e r a n d h a d f e w e r c e l l s t h a n t h a t o f t h e c o r r e s p o n d i n g g r e e n T.s i n e n s i s b u d s;t h e s e c o n d a r y c e l l w a l l s o f b o t h r e d a n d g r e e n T.s i n e n s i s b u d s g r a d u a l l y t h i c k e n e d d u r i n g s t o r a g e,a n d t h e g r e e n T.s i n e n s i s b u d s v e i n s a n d p e t i o l e x y l e m c e l l s s t a i n e d m o r e d e e p l y;(3)T h e a n t h o c y a n i n c o n t e n t d e c r e a s e d a n d t h e l i g n i n c o n t e n t i n c r e a s e d o f b o t h r e d a n d g r e e n T.s i n e n s i s b u d s d u r i n g l o w t e m p e r a t u r e s t o r a g e,a n d t h e a n t h o c y a n i n c o n-t e n t o f r e d T.s i n e n s i s b u d s w a s a l w a y s h i g h e r t h a n t h a t o f g r e e n T.s i n e n s i s b u d s,w h i l e i t s l i g n i n c o n-t e n t w a s a l w a y s l o w e r t h a n t h a t o f g r e e n T.s i n e n s i s b u d s,a n d t h e r i s e a n d f a l l o f r e d T.s i n e n s i s b u d s w a s s m a l l e r;(4)T h e e x p r e s s i o n l e v e l s o f a n t h o c y a n i n a n d l i g n i n s y n t h e s i s r e l a t e d g e n e s i n t h e l e a v e s a n d p e t i o l e s o f T.s i n e n s i s b u d s w e r e b a s i c a l l y c o n s i s t e n t w i t h t h e t r e n d s o f a n t h o c y a n i n a n d l i g n i n c o n t e n t s d u r i n g p o s t h a r v e s t l o w t e m p e r a t u r e s t o r a g e.I t w a s f o u n d t h a t b o t h r e d a n d g r e e n T.s i n e n s i s b u d s u n d e r-w e n t l i g n i f i c a t i o n a n d t r a n s p i r a t i o n w a t e r l o s s d u r i n g s t o r a g e,a n d t h e a n t h o c y a n i n c o n t e n t d e c r e a s e d,b u t t h e c h a n g e w a s m o r e o b v i o u s i n t h e g r e e n T.s i n e n s i s b u d s;t h e d i f f e r e n c e s i n a n t h o c y a n i n a n d l i g n i n c o n-t e n t o f T.s i n e n s i s b u d s w e r e c o r r e l a t e d w i t h t h e e x p r e s s i o n l e v e l s o f t h e i r s y n t h e s i s g e n e s.K e y w o r d s:T o o n a s i n e n s i s b u d s;l o w t e m p e r a t u r e;s t o r a g e;c y t o l o g i c a l o b s e r v a t i o n;l i g n i n c o n t e n t;a n-t h o c y a n i n c o n t e n t;g e n e e x p r e s s i o n 香椿(T o o n a s i n e n s i s L.),是中国特有的木本蔬菜之一1-2,富含多种营养与活性物质,具有抗氧化、抗癌、抗炎、降血糖等保健功效3-4。根据香椿嫩芽的颜色,可将香椿分为红香椿和绿香椿两大类5。新鲜香椿芽含水量高,采后新陈代谢旺盛,在室温下不耐贮藏,采后贮藏过程中紫红色逐渐变为深绿色6,且极易发生萎焉、腐烂、褐变及木质化等现象,货架期短,严重影响了香椿的商品和经济价值7。低温贮藏是果蔬贮藏常用的贮藏方式,在一定温度范围内,可抑制果蔬的呼吸作用和蒸腾作用,减少乙烯的释放和营养物质的流失,延缓腐烂、衰老和组织褐变,延长贮藏期和货架期8。近年来,关于香椿芽低温贮藏的研究已有报道,主要集中在贮藏温度9、包装材料1 0-1 3、喷施外源物质1 4-1 7对红香椿芽贮藏期间营养物质、微生物多样性及酶活性变化的影响等方面。花青素和木质素作为香椿芽的重要物质成分,是评价香椿芽品质优劣的重要指标之一。研究香椿芽采后贮藏过程中花青素和木质素含量对其品质调控具有积极意义。然而,国内外对香椿芽采后花青素和木质素含量变化的研究较少。本研究以4月上旬采自贵州省织金县板桥镇红光村相同树龄(4年)的红和绿香椿芽为试验材料,观察香椿芽采后低温贮藏过程中色泽变化,并测定香椿芽叶和叶柄花青素和木质素含量,且通过石蜡切片观察其叶和叶柄木质部细胞的变化。另外,根据课题组建立的香椿芽转录组数据库,检索和鉴定与香椿芽花青素和木质素合成途径相关基因,并利用q R T-P C R对红和绿香椿芽叶和叶柄花青素与木质素合成相关基因的表达水平进行分析,旨在为进一步指导香椿芽贮藏保鲜及其品质调控研究提供理论依据。1 材料和方法1.1 材料采集和固定2 0 2 2年4月上旬,采摘种植于贵州省织金县板桥镇红光村(1 0 5.7 1 E,2 6.7 9 N)相同树龄(4年)、生长状况一致、无机械损伤的红和绿香椿芽。采摘后分别装入聚乙烯包装袋中进行4 低温黑暗贮藏。分别于贮藏0 d(采摘当天)、1 d、2 d、3 d的同一时间(早上7:0 0)取样。取样时选取不同贮藏期的红和绿香椿芽各3个,进行3次生物学重复,分别将红和绿香椿芽的叶片和叶柄用锡箔纸包好,一部分快速放入液氮中速冻,并保存于-8 0 冰箱,用于红和绿香椿芽叶片和叶柄R NA的提取和花青素含量的测定,一部分置于烘箱8 0 烘干至恒重,用于木质素含量的测定。同时,分别取红和绿香椿芽不同贮藏期叶片及叶柄用F AA(F o r m a l i n-A c e t o-A l c o h o l)固定液(7 0%酒精9 0 m L,福尔马林5 m L,冰醋酸5 m L)1 8进行固定,用于组织切片,观察叶脉和叶柄的组织结构。1.2 香椿芽色泽及叶片、叶柄组织结构观察先仔细观察不同贮藏时期香椿芽的色泽变化,然后制作石蜡切片和进行组织化学染色。用F AA固定液分别将不同贮藏期红、绿香椿芽同一部位的50318期 赵 倩,等:红和绿香椿芽贮藏过程中花青素和木质素含量及相关基因表达分析叶片和叶柄固定2 4 h,经乙醇梯度脱水,使用石蜡浸透与包埋。利用石蜡切片机将样品切成4 m厚的切片,用番红固绿染色液染色,乙醇梯度脱色脱水后封片,最后在光学显微镜下(N I KON E C L I P S E E 1 0 0,尼康仪器上海有限公司)观察叶脉及叶柄组织结构,并进行拍照。1.3 香椿芽叶片和叶柄花青素和木质素含量测定1.3.1 花青素含量花青素的提取及其含量的测定参照王欢等1 9和谭国飞等2 0的方法进行。具体步骤:使用液氮将采后不同贮藏期红和绿香椿芽叶片和叶柄研磨成粉末后,各称取约0.2 g放入2 0 m L 9 5%乙醇中,室温暗光下浸提8 h。浸提液用0.2 5 m滤头过滤后,使用紫外分光光度计(A l p h a-1 8 6 0,上海谱元仪器有限公司)测定其在5 3 0,6 2 0,6 5 0 n m波长下的吸光度值D5 3 0、D6 2 0和D6 5 0。根据公 式 D=(D5 3 0-D6 2 0)-0.1(D6 5 0-D6 2 0)并按照0.1个吸光度为1个花青素单位,计算不同贮藏期红和绿香椿芽叶片和叶柄花青素含量。每个样品进行3次生物学重复。1.3.2 木质素含量取不同贮藏期的红、绿香椿芽叶片和叶柄干样置于研钵研磨成粉末,过3 05 0目筛,然后使用S o l a r b i o生物科技有限公司的木质素含量检测试剂盒,提取木质素并计算木质素含量。每个样品进行3次生物学重复1.4 香椿芽叶片和叶柄花青素和木质素合成相关基因的表达分析1.4.1 R N A提取及c D N A合成将-8 0 冰箱保存的香椿芽样品,分别置于灭菌的研钵中,用液氮将不同贮藏期红和绿香椿芽叶片和叶柄研磨成粉末。各取约0.1 g装入2 m L无酶的离心管中,采用植物 R NA 提取试剂盒(北京华越洋生 物 科 技 有 限 公 司,G X型)提 取 香 椿 芽 的总 R NA。使用1.5%的琼脂糖凝胶检测香椿芽总R NA的完整性及使用微量分光光度计N a n o d r o p N D-1 0 0(N a n o d r o p T e c h n o l o g y I n c.,D E,U S A)检测香椿芽总R NA的浓度。利用H i S c r i p t 1 s t S t r a n d c D NA S y n t h e s i s K i t(+g D NA w i p e r)试剂盒(南京诺唯赞生物科技有限公司,该试剂盒中有去除基因组成分),按照说明书将提取的R NA反转录为 c D-NA。最后,用灭菌的d d H2O 稀释1 5倍,保存于-2 0 冰箱备用。1.4.2 花青素和木质素合成相关基因的表达分析根据花青素和木质素合成的代谢通路,从香椿芽转录组数据库中检索获得花青素合成基因苯丙氨酸 解 氨 酶 基 因(p h e n y l a l a n i n e a mm o n i a-l y a s e,P A L)、肉桂酸-4-羟化酶基因(c i n n a m a t e 4-h y d r o x-y l a s e,C 4 H)、查 尔 酮 合 成 酶 基 因(c h a l c o n e s y n-t h a s e,CHS)、查尔酮异构酶基因(c h a l c o n e i s o m e r-a s e,CH I)、黄 烷 酮-3-羟 化 酶 基 因(f l a v a n o n e 3-h y d r o x y l a s e,F 3 H)、类黄酮3,5 羟化酶基因(f l a-v o n o l 3,5 h y d r o x y l a s e,F 3 5 H)、二氢黄酮醇还原酶基因(d i h y d r o f l a v o n o l 4-r e d u c t a s e,D F R)、花青素合成酶基因(a n t h o c y a n i d i n s y n t h e s i s,AN S)、花青素-3-O-葡萄糖基转移酶基因(a n t h o c y a n i d i n 3-O-g l u c o s y l t r a n s f e r a s e,3 G T)等9个,以及木质素合成基因4-香豆酸辅酶A连接酶基因(4-c o u m a r a t e C o A l i g a s e,4 C L)、肉桂酰辅酶A还原酶基因(c i n-n a m o y l-C o A r e d u c t a s e,C C R)、肉桂醇脱氢酶基因(c i n n a m y l a l c o h o l d e h y d r o g e n a s e,C AD)、莽草酸/奎宁酸羟基肉桂酰转移酶基因(s h i k i m a t e/q u i n a t e h y d r o x y c i n n a m o y l t r a n s f e r a s e,HC T)、香豆酸-3-羟化酶基因(c o u m a r o y l s h i k i m a t e/q u i n a t e 3 -h y d r o x-y l a s e,C 3 H)、咖啡酸-O-甲基转移酶基因(c a f f e i c a c i d O-m e t h y I t r a n s f e r a s e,C OMT)、阿魏酸-5-羟化酶基因(f e r u l a t e 5-h y d r o x y l a s e,F 5 H)、咖啡酰辅酶A-O-甲 基 转 移 酶 基 因(c a f f e o y l C o A O-m e t h y I t r a n s f e r a s e,C C o A OMT)和 漆 酶 基 因(L a c c a s e,L A C)等9个。以香椿A c t i n基因(T s A c t i n)作为内参基因,设计q R T-P C R引物(引物由南京金斯瑞生物科技有限公司合成,表1)。使用S Y B R P r e m i x E x T a q 试剂盒(T a K a R a,大连)进行荧光定量实验。反应体系为2 0 L,包括1 0 L 2S Y B R q P C R M a s t e r M i x,2 L稀释的模板c D NA,上、下游引物各0.5 L,7 L灭菌的d d H2O,香椿T s A c t i n基因与目的基因一起扩增。每个样品进行3次生物学重复。P C R反应程序为:9 5 预变性5 m i n;9 5 变性1 0 s,5 4 退火3 0 s,6 5 延伸1 0 s,4 0个循环;最后8 保存。相对定量表达参照2-CT法。1.5 数据分析用M i c r o s o f t E x c e l 2 0 0 7软件作数据统计分析,用I BM S t a t i s t i c s 2 0.0软件进行显著性分析,显著水平设置为0.0 5。6031西 北 植 物 学 报 4 3卷表1 花青素和木质素合成相关基因的q R T-P C R引物T a b l e 1 P r i m e r s f o r q R T-P C R r e l a t e d t o a n t h o c y a n i n a n d l i g n i n s y n t h e s i s基因G e n e正向引物(5 3)F o r w a r d p r i m e r(5 3)反向引物(5 3)R e v e r s e p r i m e r(5 3)物质S u b s t a n c eT s P A LC T T G T GA G GA T C AA C A C T C T T C TC AA T G T AG GA T A GA G GAA C C A GA T花青素/木质素A n t h o c y a n i n/L i g n i nT s C4HC AA C T C T A T G G T C AA T G GAA T G GG G A A T T G G A G T G T G T A A T C T T A G T G花青素/木质素A n t h o c y a n i n/L i g n i nT s CHSA G GA T A T T G T G G T G G T G GAA G TAGA T A C AT C A T C A GA C G C T T AA C A G花青素A n t h o c y a n i nT s CH IGA T A G GA G T G T A C T T G GA G GA T AGC C T T C A G C A T C T G T G T AAAT T C C花青素A n t h o c y a n i nT s F 3 HC C T GAT C TA G C A C T T G GA T T A G TA T C T C T A T C T G G T C G C C AA T A T G花青素A n t h o c y a n i nT s F 3 5 HC C A TA G C C GAA C T AA T C A GA C A CGA T AT G G T A G C C G T T GA T C T C A C花青素A n t h o c y a n i nT s D F RC A G GAA C T G T G GA T G T T GAA GA GC AA GAG T T G G T A T GA C A C T GA T GA花青素A n t h o c y a n i nT s AN SC AA GA C A C C AA C C GA C T A T A C T GC T T C AA C A C C AA GA G C T AA T T C T G花青素A n t h o c y a n i nT s 3 G TG T AA T C A C T T A C A C C GAA T C A C T CC AA C T T C T A T C A T G GA C G TA C A GA花青素A n t h o c y a n i nT s 4 C LC A A A G A G A A C C A T A G A C A A A G A A G GC AA C A G C A G C A T C A G T GA T A T T G木质素L i g n i nT s C C RG T A G T A G T T GA C GA GA C T T G G T TG T A T TAA G T G T T G G C T G T AAGA GA G木质素L i g n i nT s C ADG C AA C T A C T G T AA T C T C A G G C T AG C A T C A T C G GA GAA T AA C AA G T G木质素L i g n i nT s HC TA G C A G T T A T A GA C T C C A C AA C A GT AA GA T C A T C C T C A G G C AA T C A C木质素L i g n i nT s C 3 HC A GA T T A C G G T C C T C A C T A T G T T AC A G C C T C G T T A T G T T G T T GAA T G木质素L i g n i nT s C OMTA G C A G T T A T A GA C T C C A C AA C A GT AA GA T C A T C C T C A G G C AA T C A C木质素L i g n i nT s C C o A OMTG T G T T T A C A C A G G C T A C T C T C T CT A T C A G C G T C C A C GAA TA T GAA G木质素L i g n i nT s F 5 HC A C C A TA G C C AT C AG T T A T C T C AT A C AA G T G T A T C AA C C T C G T C T C木质素L i g n i nT s L A CG T C A C AA T T A T G C T C G GA GAA T GGA GA T A T G T C T T T C C T G G C T T C A木质素L i g n i n2 结果与分析2.1 香椿芽贮藏过程中色泽和叶脉、叶柄解剖结构的变化 香椿芽采后4 低温黑暗贮藏过程中,红香椿芽贮藏3 d后仍色彩鲜艳,而绿香椿芽采后贮藏1 d叶柄开始出现黑色斑点,随贮藏时间的延长,黑色斑点逐渐增加,且黑色逐渐加深(图1),表明绿香椿芽的贮藏时间短。同时,红、绿香椿芽在采后贮藏期间,叶片紫红色逐渐变浅,而叶柄的颜色变化甚微。番红染液可以使细胞壁中的木质素呈现红色,染色时染色程度越深说明木质素含量越高2 1。利用显微镜观察红、绿香椿芽采后4 低温贮藏过程中叶脉和叶柄细胞结构的变化。结果表明,红香椿芽叶脉(图2,A-A-)和叶柄(图3,A-A-)木质部细胞比绿香椿芽叶脉(图2,B-B-)和叶柄(图3,B-B-)木质部细胞小且细胞数量少;红、绿香椿芽采后贮藏过程中,次生细胞壁逐渐增厚,且细胞染色程度上绿香椿芽叶及叶柄红色较深,表明红、绿香椿芽贮藏过程中均发生了木质化,但绿香椿芽的木质化程度更高。另外,蒸腾作用使组织细胞失水而失去新鲜状态2 2,贮藏过程中红香椿芽叶脉和叶柄的木质部细胞逐渐增大;而绿香椿芽叶脉和叶柄木质部细胞先增大(01 d)后变小(23 d),表明贮藏过程中绿香椿芽的蒸腾作用较强,水分流失严重。2.2 香椿芽贮藏过程中叶片和叶柄花青素和木质素含量的变化 图4,A显示,在4 低温贮藏期间,红香椿芽叶片和叶柄中花青素含量始终明显高于相应的绿香椿芽,而在同一品种香椿芽内又表现为叶片中花青素含量始终高于叶柄。其中,随贮藏时间的延长,红、绿香椿芽叶片和叶柄花青素含量均逐渐降低,贮藏3 d时红香椿芽叶片和叶柄花青素含量分别比采摘当天降低3 5.8 8%、3 3.3 3%,绿香椿芽叶片和叶柄 花 青 素 含 量 则 比 采 摘 当 天 分 别 显 著 降 低 了3 9.1 3%、3 7.5 0%,表明绿香椿芽中花青素降解速率较快。香椿芽木质素含量的高低是评价香椿芽品质的重要因素。从图4,B可知,在低温贮藏期间,2个香椿品种芽内木质素含量差异较大,始终表现为绿香椿芽木质素含量高于红香椿芽,且红、绿香椿芽中叶柄木质素含量高于叶片。70318期 赵 倩,等:红和绿香椿芽贮藏过程中花青素和木质素含量及相关基因表达分析A.红香椿芽;B.绿香椿芽;.0 d;.1 d;.2 d;.3 d。下同。图1 4 低温黑暗贮藏期间红、绿香椿芽色泽变化A.R e d T.s i n e n s i s b u d s;B.G r e e n T.s i n e n s i s b u d s;.0 d;.1 d;.2 d;.3 d.T h e s a m e a s b e l o w.F i g.1 T h e c o l o r c h a n g e o f r e d a n d g r e e n T.s i n e n s i s b u d s d u r i n g c o l d s t o r a g e a t 4 d a r k c o n d i t i o n sA.红香椿芽;B.绿香椿芽;.0 d;.1 d;.2 d;.3 d;X.木质部。下同。图2 4 低温贮藏期间香椿芽叶脉结构A.R e d T.s i n e n s i s b u d s;B.G r e e n T.s i n e n s i s b u d s;.0 d;.1 d;.2 d;.3 d;X.X y l e m.T h e s a m e a s b e l o w.F i g.2 V e i n s t r u c t u r e o f T.s i n e n s i s b u d s d u r i n g c o l d s t o r a g e a t 4 d a r k c o n d i t i o n s图3 4 低温贮藏期间香椿芽叶柄结构F i g.3 P e t i o l e s t r u c t u r e o f T.s i n e n s i s b u d s d u r i n g c o l d s t o r a g e a t 4 d a r k c o n d i t i o n s8031西 北 植 物 学 报 4 3卷不同小写字母表示各贮藏时期间差异显著(P0.0 5)。下同。图4 低温贮藏期间香椿芽叶片和叶柄中花青素和木质素含量变化D i f f e r e n t l o w e r c a s e l e t t e r s w i t h i n t h e s a m e m a t e r i a l i n d i c a t e s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e a m o n g d i f f e r e n t s t o r a g e t i m e p o i n t s a t 0.0 5 l e v e l(P0.0 5).T h e s a m e a s b e l o w.F i g.4 C h a n g e s o f a n t h o c y a n i n a n d l i g n i n c o n t e n t s i n l e a v e s a n d p e t i o l e s o f T.s i n e n s i s b u d s d u r i n g c o l d s t o r a g e 其中,随贮藏时间延长,红香椿芽叶片木质素含量逐渐升高,其叶柄木质素含量先上升后下降,而同期的绿香椿芽叶片和叶柄木质素含量均呈先上升后下降的趋势;与贮藏0 d时相比,两个品种香椿芽叶片和叶柄中木质素含量总体均呈升高趋势,在贮藏3 d时红香椿芽叶片和叶柄中木质素含量分别显著升高了7 7.9 4%和4 8.7 1%,绿香椿芽则分别升高了1 5.3 0%和3 0.4 6%,表明香