血清蛋白电泳的临床应用.pptx

Cliquez pour modifier le style du titre,Cliquez pour modifier les styles du texte du masque,Deuxime niveau,Troisime niveau,Quatrime niveau,Cinquime niveau,*,*,主要内容,血清蛋白电泳,免疫分型电泳,血清蛋白电泳的临床应用,第1页,电泳技术发展历程,1809,年,发觉电泳现象,1937,年,建立了界面电泳技术,1948,年诺贝尔化学奖,1950,年后,区带电泳从发展到成熟,1980,年,毛细管电泳技术,年,sebia,首次推出全自动毛细管电泳仪,19,世纪,21,世纪,sebia,血清蛋白电泳的临床应用,第2页,蛋白电泳技术变迁,滤纸电泳,醋酸纤维素薄膜电泳,凝胶电泳,琼脂糖凝胶电泳,临床,聚丙烯酰胺凝胶电泳,科研,毛细管电泳,电泳技术革命,3,血清蛋白电泳的临床应用,第3页,蛋白电泳技术临床应用,描绘出蛋白组分全貌,各种体液,血清、血浆,尿液,脑脊液,胸腹水,全血,临床疾病,肝病,肾病,肿瘤,心脑血管疾病、代谢病、中枢神经病变、血红蛋白分子病,4,血清蛋白电泳的临床应用,第4页,Capillarys Electrophoresis Principle,正极,负极,检测器,氘光源,200 nm,约,1,万伏高压,毛细管,(,内径,25,微米）,样本进入,-,+,温控装置,电泳方向,毛细管电泳工作原理,血清蛋白电泳的临床应用,第5页,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,毛细管内表面是带负电荷,当毛细管内部充满缓冲液被活化后，在毛细管内表面负电荷层上形成了一正电荷层,毛细管电泳工作原理,血清蛋白电泳的临床应用,第6页,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,阳极,阴极,+,电渗流作用方向,内部充满电泳缓冲液毛细管带电后，,-,毛细管内正电荷层整体向阴极移动，这种现象称之为,电渗流,血清蛋白电泳的临床应用,第7页,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,阳极,-,阴极,+,电渗流作用方向,电场力作用方向,在毛细管内部,正电荷,粒子,同时到受电渗流和电场力作用，两种作用力方向一致,快速向负极端迁移,+,血清蛋白电泳的临床应用,第8页,-,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,阳极,-,阴极,+,电渗流作用方向,电场力作用方向（负电荷）,在毛细管内部,负电荷,粒子,同时到受电渗流和电场力作用，两种作用力方向相反；电渗流,电场力,向负极端迁移,血清蛋白电泳的临床应用,第9页,-,-,-,-,-,-,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,阳极,-,阴极,+,电渗流作用方向,负电荷电场力作用方向,样品进入到毛细管之中运动,正电荷电场力作用方向,不论是带正电、带负电或不带电粒子，都在电渗流作用下，向阴极迁移，带正电，受到同方向电场力作用，迁移最快，不带电迁移速度次之，带负电迁移速度最慢，因为它受到与电渗流反方向电场力作用。,血清蛋白电泳的临床应用,第10页,优点,性能特征,降低手工操作,全自动,人机分离操作,操作简单,可依据用户需求调整操作模式,提供各种检测项目,供溯源性,降低误差,原管条码识别,增加用户满意度,高通量,优化工作流程,连续进样、双向通讯、快捷数据读取,优化结果,用,200nm,氘光直接检测蛋白，无需染色,简化结果分析,高分辨率、高清楚度,M蛋白检测高灵敏度,毛细管电泳技术优势,血清蛋白电泳的临床应用,第11页,毛细管血清蛋白电泳图谱,白蛋白,Gamma,Beta-2,Beta-1,Alpha-2,Alpha-1,免疫球蛋白,C3,补体,-1,抗胰蛋白酶,结合珠蛋白,转铁蛋白,白蛋白,-1,酸性糖蛋白,-2,巨球蛋白,血红素结合蛋白,血清蛋白电泳的临床应用,第12页,临床疾病识别,炎症,肝病,肾病,“,M,”蛋白筛查及定量,对疑似骨髓瘤患者检测单克隆免疫球蛋白,早期检出无症状骨髓瘤患者,对骨髓瘤疾病进行随访及疗效观察,血清蛋白电泳临床应用,13,血清蛋白电泳的临床应用,第13页,Capillarys Electrophoresis,毛细管血清蛋白电泳,14,血清蛋白电泳的临床应用,第14页,正常血清蛋白电泳图谱,白蛋白,Gamma,Beta-2,Beta-1,Alpha-2,Alpha-1,免疫球蛋白,C3,补体,-1,抗胰蛋白酶,结合珠蛋白,转铁蛋白,白蛋白,-1,酸性糖蛋白,-2,巨球蛋白,血红素结合蛋白,血清蛋白电泳的临床应用,第15页,电泳图谱,-,急性炎症,免疫球蛋白,C3,补体,-1,抗胰蛋白酶,结合珠蛋白,转铁蛋白,白蛋白,-1,酸性糖蛋白,-2,巨球蛋白,血红素结合蛋白,急性期反应蛋白,16,血清蛋白电泳的临床应用,第16页,电泳图谱,-,慢性炎症,血清蛋白电泳的临床应用,第17页,电泳图谱,-,肝脏,肝脏是血清蛋白合成主要器官,白蛋白,Gamma,Beta-2,Beta-1,Alpha-2,Alpha-1,免疫球蛋白,C3,补体,-1,抗胰蛋白酶,结合珠蛋白,转铁蛋白,白蛋白,-1,酸性糖蛋白,-2,巨球蛋白,血红素结合蛋白,血清蛋白电泳的临床应用,第18页,电泳图谱,-,肝病,19,血清蛋白电泳的临床应用,第19页,beta 2,区：多克隆,Ig A,gamma,区：多克隆,IgG,电泳图谱,-,肝硬化,Beta,-,Gamma,桥,20,血清蛋白电泳的临床应用,第20页,Beta Gamma,桥,血清蛋白电泳的临床应用,第21页,电泳图谱,-,肾病,22,血清蛋白电泳的临床应用,第22页,电泳图谱,-,肾病,肾小球滤过屏障损伤,白蛋白流失,低白蛋白,高,-2,贾晓辉,马彧旻,.,齐齐哈尔医学院学报,.,30(16):,Alpha-2,巨球蛋白,23,血清蛋白电泳的临床应用,第23页,Alb,a,1,a2,b,1,b,2,g,总蛋白浓度降低,(,低于,60g/l),-,2,巨球蛋白,脂蛋白,低白蛋白,电泳图谱,-,肾病综合征,三高一低：高脂蛋白血脂,24,血清蛋白电泳的临床应用,第24页,电泳图谱,-,肾病综合征,性别：男,年纪：,24,科室：肾脏内科,诊疗：肾病综合征,血清蛋白电泳的临床应用,第25页,原因,:,免疫缺点病、免疫抑制剂、游离轻链病,电泳图谱,-,低免疫球蛋白,26,血清蛋白电泳的临床应用,第26页,电泳图谱,-,高免疫球蛋白,原因,:,慢性感染、本身免疫病、慢性肝病、慢性肉芽肿,血清蛋白电泳的临床应用,第27页,血清蛋白电泳图谱常见类型,图谱类型,总蛋白,Alb,1,2,低蛋白血症,N,N,N,急性炎症,/,急性时相反应,N,N,/,N,慢性炎症型,弥漫性肝损害,N,肝硬化,N,N,N,-,桥,肾病,不定,弥漫宽,球蛋白血症型,N,M,蛋白血症型,在,2-,区出现,异常,峰,高,2,（,）球蛋白血症,妊娠（高,型）,N,N,蛋白质缺点,个别区带出现特征性缺乏,血清蛋白电泳的临床应用,第28页,Gamma globulins(,免疫球蛋白区带,),免疫球蛋白,是机体正常生理成份,多克隆,分类,重链：,IgG,、,IgA,、,IgD,、,IgE,、,IgM,轻链：,、,10,种类型,血清蛋白电泳的临床应用,第29页,10,种免疫球蛋白,IgD Lambda,IgE Lambda,IgE Kappa,IgD Kappa,IgA Lambda,IgG Kappa,IgG Lambda,IgM Lambda,IgA Kappa,IgM Kappa,血清蛋白电泳的临床应用,第30页,B,淋巴细胞,转化为浆细胞,3,浆细胞,合成抗体,即,免疫球蛋白,.,4,浆细胞,免疫球蛋白,造血干细胞分化为,3,类细胞,:,红细胞,粒细胞,巨核细胞,免疫球蛋白,在免疫系统中被用来识别和毁灭如细菌或病毒等外源物,5,2,骨髓,(,颅骨,盆骨,肋骨,胸骨,),1,免疫球蛋白合成过程,血清蛋白电泳的临床应用,第31页,正常浆细胞,多克隆免疫球蛋白,P1 P2 P3 P4 P5,正常电泳结果,免疫球蛋白电泳结果,正常,全部浆淋巴细胞同时合成免疫球蛋白,=,多克隆免疫球蛋白,32,血清蛋白电泳的临床应用,第32页,浆细胞恶性增殖,多克隆免疫球蛋白,单克隆免疫球蛋白,异常,电泳结果,M,蛋白,免疫球蛋白电泳结果,骨髓瘤,33,血清蛋白电泳的临床应用,第33页,IgG,Lambda,IgG,Kappa,IgM,Kappa,IgM,Lambda,IgA,Lambda,IgA,Kappa,200 nm,34,血清蛋白电泳的临床应用,第34页,多克隆,Igs,单克隆,Ig,-,“,M,”,蛋白,正常,异常,血清蛋白电泳的临床应用,第35页,什么是,M,蛋白,单克隆浆细胞恶性增殖产生均一蛋白,“,M,”,M,ultiple,M,yeloma,多发性骨髓瘤,M,acroglobulinemia,巨球蛋白血症,M,alignant lymphoma,恶性淋巴瘤,M,onoclonal Gammapathies,单克隆丙种球蛋白病,电泳曲线：,单株峰,血清蛋白电泳的临床应用,第36页,恶性浆细胞增殖,仅次于白血病（血液肿瘤）,发病率,占全部肿瘤,12%,，血液肿瘤,10%,美国：白人,4/10,万；黑人,10/10,万,欧洲：,2.53.0/10,万,亚洲：,12/10,万,中国：无确切数据,发病年纪,老年病,，随年纪,发病率,欧美：高峰,65,70,岁，中位年纪,68,岁,中国：,高峰,55,65,岁，中位年纪,57,岁,男女百分比 男：女,=,2,2.5:1,多发性骨髓瘤,(Multiple Myeloma,MM),血清蛋白电泳的临床应用,第37页,多发性骨髓瘤临床表现,/,并发症,C,alcium,R,enal,A,nemia,B,one,CRAB,38,血清蛋白电泳的临床应用,第38页,骨髓瘤相关器官,/,组织损伤（,ROTI,）,CRAB,血清钙升高,2.8 mmol/L,或 升高,0.25mmol/L,以上,肾功效不全,肌酐,176.8mmol/L,贫血,60%,多发性骨髓瘤诊治现实状况,晚,骨折,预后差,增加负担,感染发生率高,肾脏病变不可逆,死亡率,46,血清蛋白电泳的临床应用,第46页,多发性骨髓瘤,误诊,分析,47,血清蛋白电泳的临床应用,第47页,1557,例,多发性骨髓瘤,误诊,分析,吕鸿雁,张金巧,.,河北医药,.,31(9):1052-54,误诊率：,65.17%,重视试验诊疗,39.8%,15.6%,19.8%,7.6%,15.6%,血清蛋白电泳的临床应用,第48页,国际骨髓瘤基金会,推荐,M,蛋白早期筛查流程,49,血清蛋白电泳的临床应用,第49页,多发性骨髓瘤分型,M,蛋白,骨髓克隆性浆细胞,/,浆细胞瘤,ROTI,有症状,MM,10%,无症状,MM(,冒烟型,SMM),10%,意义未明,M,蛋病,MGUS,10%,早发觉、早诊疗、早治疗,早发觉,、,早诊疗,、早治疗,肿瘤,血清蛋白电泳的临床应用,第50页,多发性骨髓瘤分型,M,蛋白,骨髓克隆性浆细胞,/,浆细胞瘤,ROTI,有症状,MM,10%,无症状,MM(,冒烟型,SMM),10%,意义未明,M,蛋病,MGUS,200 mg/L,Gamma,区：多克隆,Ig,，异常峰,C,反应蛋白,-,CRP,血清蛋白电泳的临床应用,第68页,Alb,a,1,a2,b,1,b,2,g,-1,抗胰蛋白（,A1AT,）缺乏症,血清蛋白电泳的临床应用,第69页,Alb,a,1,a2,b,1,b,2,g,-1,抗胰蛋白（,A1AT,）杂合子表型,血清蛋白电泳的临床应用,第70页,表型,I-II,表型,I-I,表型,II-II,2,区：触珠蛋白不一样表型,血清蛋白电泳的临床应用,第71页,寡克隆免疫球蛋白异常电泳图谱,血清蛋白电泳的临床应用,第72页,常见于,:,本身免疫病,类风湿关节炎，干燥综合症，红斑狼疮等,),病毒、细菌和寄生虫引发感染,H.I.V.,病毒性肝炎,巨细胞病毒感染,与移植相关本身免疫反应,免疫抑制治疗,寡克隆免疫球蛋白,血清蛋白电泳的临床应用,第73页,M,蛋白可能类型,完整免疫球蛋白分子,重链,轻链,半分子,IgM,单体（,7S-IgM,）,血清蛋白电泳的临床应用,第74页,型别 例数,%,IgG,型骨髓瘤,205 31.73,IgA,型骨髓瘤,93 14.40,IgM,型骨髓瘤,56 8.67,IgD,型骨髓瘤,12 1.86,重链病,5 0.77,轻链病,214 33.13,半分子病,1 0.15,7S IgM 2 0.31,BMG 49 7.59,双,M,蛋白病,8 1.24,上海新华医院,年,出现异常血清蛋白结果,需要免疫分型电泳深入确认,646,例,M,蛋白类型分类,血清蛋白电泳的临床应用,第75页,免疫分型,:,检测请求,在血清蛋白电泳程序下,:“IT Request”,76,血清蛋白电泳的临床应用,第76页,稀释液,(380 L),L K M A G ELP,抗血清,/ELP solution(20 L),免疫分型,:,抗血清稀释杯,+,上机、分析,血清蛋白电泳的临床应用,第77页,K,L,Ig G,Ig A,Ig M,ELP,Ig,G,X,Ig,A,X,Ig,M,X,Ig,k,Ig,l,ELP,G,A,M,k,l,DILUENT,抗血清,参考,稀释液,血清蛋白电泳的临床应用,第78页,免疫分型,:,全自动化,血清稀释,样本与,5,种抗血清反应,(IgG,IgA,IgM,),在液态环境中,抗原抗体反应非常快速,无需专门孵育,未加入抗血清标本,作为参考条带,(ELP),毛细管电泳分析,稀释液,(380 L),L K M A G ELP,抗血清,/ELP,液,(20 L),血清蛋白电泳的临床应用,第79页,对照曲线与反应曲线自动叠加,单克隆免疫球蛋白,(M,蛋白,),判定,免疫减法,与对应抗血清发生反应后,M,蛋白峰,消失,免疫分型,:,结果分析,血清蛋白电泳的临床应用,第80页,IgG,Lambda,IgG,Kappa,IgM,Kappa,IgM,Lambda,IgA,Lambda,IgA,Kappa,Anti-Kappa,血清蛋白电泳的临床应用,第81页,IgG,Lambda,IgG,Kappa,IgM,Kappa,IgM,Lambda,IgA,Lambda,IgA,Kappa,Anti-IgG,血清蛋白电泳的临床应用,第82页,参考曲线,加入,IgG,抗血清后电泳曲线,加入,IgA,抗血清后电泳曲线,加入,IgM,抗血清后电泳曲线,加入,Kappa,抗血清后电泳曲线,加入,Lambda,抗血清后电泳曲线,血清蛋白电泳的临床应用,第83页,80%IgG,15%IgA,5%IgM,2/3 Kappa,1/3 Lambda,ELP,G,A,M,K,L,血清蛋白电泳的临床应用,第84页,Ig G Ig A Ig M Kappa Lambda,M,蛋白类型判定：,减法,血清蛋白电泳的临床应用,第85页,申请做,IT,患者,1:,血清蛋白电泳结果图谱,M,蛋白,血清蛋白电泳的临床应用,第86页,Zoom,放大,患者,1:,免疫分型（,IT,）检测结果,血清蛋白电泳的临床应用,第87页,IgG Lambda,患者,1:,免疫分型（,IT,）结果,血清蛋白电泳的临床应用,第88页,Gamma,区曲线异常,患者,2:,血清蛋白电泳图谱,申请做,IT,血清蛋白电泳的临床应用,第89页,Zoom,放大,患者,2:,免疫分型（,IT,）结果,血清蛋白电泳的临床应用,第90页,IgM Kappa,患者,2:,免疫分型（,IT,）结果,血清蛋白电泳的临床应用,第91页,Beta 2,区异常升高,患者,3:,血清蛋白电泳图谱,申请做,IT,血清蛋白电泳的临床应用,第92页,Zoom,放大,患者,3:,免疫分型（,IT,）检测结果,血清蛋白电泳的临床应用,第93页,IgA Kappa,患者,3:,免疫分型（,IT,）检测结果,血清蛋白电泳的临床应用,第94页,患者,4:,血清蛋白电泳图谱,Beta 1,区异常升高,申请做,IT,血清蛋白电泳的临床应用,第95页,