红细胞血型检测讲义.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,红细胞血型检测,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,红细胞血型检测,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,红细胞血型检测,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,红细胞血型检测,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,红细胞血型检测,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,红细胞血型检测,*,红细胞血型检测,1,临床输血与检验,红细胞血型检测,红细胞血型检测讲义专家讲座,第1页,红细胞血型检测,2,主要内容,输血前免疫学检验,盐水介质试验技术,酶处理试验技术,抗球蛋白试验技术,聚凝胺介质试验技术,微柱凝集试验技术,吸收放散技术,凝集试验技术,红细胞血型分子生物学检测技术,红细胞血型检测讲义专家讲座,第2页,红细胞血型检测,3,第一节 输血前免疫学检验,目标：使,输入血液成份在受血者体内发挥其有效作用,.,在正常情况下，输入红细胞在受血者体内不溶血，输入血浆成份不破坏受血者红细胞,。,主要程序：,受血者血液标本处理、ABO血型和RhD血型判定、红细胞同种抗体筛查和判定、交叉配血。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第3页,红细胞血型检测,4,一、受血者标本处理,（一）标本采集,输血除了需要到达预期治疗效果外，必须确保输血安全。血样由临床护士完成，应严格恪守一次只能为一位受血者抽取标本，,标本不得从输液管或输液侧筋脉中抽取,。,（二）标本接收,输血科技师接收血样标本时，应认真查对受血者相关信息，尽可能了解受血者有没有输血史、药品史、妊娠史等情况。,假如有输血史，这有必要深入了解最终一次输血日期，若,3,个月内输过血，那么供血者红细胞没有完全代谢消失，可能依然存在于血液循环中，造成血型定型试验中出现混合凝集结果。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第4页,红细胞血型检测,5,（三）标本要求,1.,对输血前检验血液标本应严格要求能代表受血者当前免疫学情况，标本还需经判定和标识，确保其准确无误地来自受血者和供血者，应和血液申请单上内容一致。,2.,预防受血者血液标本稀释和（或）溶血，若采集过程中发生溶血则不能使用。,3.,受血者配血试验血液标本必须是输血前,3,天内采集。,4.,若受血者使用右旋糖酐、,PVP,等治疗，应注意洗涤被检红细胞。,5.,每次输血后，受血者和供血者标本必须保留于,28,最少,7,天。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第5页,红细胞血型检测,6,二、受血者和供血者,ABO,和,Rh,定型,（一）、原理,依据红细胞膜表面上有没有,A,抗原或,B,抗原，将血型分为,A,型、,B,型、,AB,型、,O,型,4,种。,A,型人血清中含有抗,-B,抗体，,B,型人血清中含有抗,-A,抗体，,O,型人血清中含有抗,-A,抗体和抗,-B,抗体，,AB,型人血清中不含,ABO,抗体。,正定型,：用抗,-A,及抗,-B,试剂与被检红细胞反应，检测红细胞 表面是否存在,A,抗原或,B,抗原。,反定型,：用标准,A,细胞及,B,细胞与被检血清反应，检测血清中是否存在抗体。,因为,ABO,血型系统抗体多数为,IgM,类，在室温盐水介质中就能出现显著凝集反应。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第6页,红细胞血型检测,7,红细胞血型检测讲义专家讲座,第7页,红细胞血型检测,8,正反定型不符分析基本程序：,1,、重新采集标本,2,、查询受血者既往病史、输血史和用药史等,3,、新鲜生理盐水屡次洗涤标本和试剂红细胞,4,、应用抗,-AB,、抗,-A1,和抗,-H,检测红细胞,5,、分析,O,型筛选细胞检测结果,红细胞血型检测讲义专家讲座,第8页,红细胞血型检测,9,反定型意义：,1,、复检正定型结果准确性,2,、发觉含有弱抗原亚型,3,、纠正因红细胞抗原减弱而造成血型错误,4,、排除取得性抗原和冷凝集现象干扰,5,、发觉一些亚型中不规则抗体,红细胞血型检测讲义专家讲座,第9页,红细胞血型检测,10,ABO,定型,最适反应温度为,4,，但在室温反应良好，所以常规,ABO,定型试验仅在室温进行。,1、定型方法：正、反定型试管离心方法当前仍被认为是最可信赖,ABO,定型方法,。,1),定型试剂：有些,ABO,血型诊疗试剂是以人血清汇聚而制成，但必须具备以下条件：第一，高效价,(1,：,128),IgM,抗,A,或抗,B,。第二，具很好亲和性并不含冷凝集素。第三，必需含有检测,A2,，,A2B,血型能力。第四，血清必须经过,HIV,，,HCV,，,HBV,等检验或经病毒灭活。另外一些,ABO,定型试剂是由来自培养细胞株单克隆抗体所制成。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第10页,红细胞血型检测,11,2)ABO,亚型判定：,ABO,亚型判定通常使用以下试剂：抗,A,、抗,B,、抗,A1,、抗,H,、抗,AB,、,A1,红细胞、,A2,红细胞、,B,型红细胞和,O,型红细胞。有些工作者在定型试验中，常规地选择应用抗,AB,抗血清，以防止错误地把弱反应性,A,或,B,型红细胞分类为,O,型。普通抗,AB,试剂对,Ax,型红细胞可增加凝集反应强度。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第11页,红细胞血型检测,12,ABO,定型试验中常见问题：,造成这种正反定型不一致原因主要有：,1),技术和管理错误：这是,ABO,定型中产生异常结果主要原因，包含：标本或试剂搞错；器材不洁；试剂污染或失效；离心过分或不足；阳性反应产生溶血现象未能识别；漏加试剂；结果统计或判断错误；细胞与血清间百分比不适当。,2),血清异常：,血清蛋白引发缗钱状形成，影响反定型结果。,3),红细胞致敏,：受免疫球蛋白致敏红细胞，在含高蛋白介质试剂中，可发生凝集。,4),异常基因型：,ABO,亚型检验中，,A,、,B,抗原可能为弱抗原，难以检出。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第12页,红细胞血型检测,13,5),近期输血：,试验前曾输入过其它,ABO,血型不一致血液，使血液标本成为混合血型红细胞悬液，定型时显示“混合外观凝集”现象。,6),嵌合体血型,：这种血型者体内有两类血型红细胞群体，定型时能够出现“混合外观凝集”现象。,7),疾病原因造成抗原减弱：一些白血病患者和难治性贫血患者中，,ABO,血型系统抗原性可受到抑制，检出困难。,8),红细胞多凝集现象：红细胞因遗传或取得性表面异常，发生多凝集现象。,9),取得性,B,：因为革兰阴性杆菌作用，红细胞可取得“类,B”,活性。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第13页,红细胞血型检测,14,10),血型特异性物质过高：一些卵巢囊肿病例，血型物质浓度很高，可中和抗,A,和抗,B,定型试剂，要得到正确正定型结果，必须洗涤红细胞屡次。,11),近期内进行大量血浆置换治疗：,因为使用大量非同型血浆作置换治疗，标本血清中含有所输供体提供抗,A,或抗,B,抗体，造成反定型错误。,12),异常血浆蛋白：受检者血浆中异常白蛋白、球蛋白百分比和高浓度纤维蛋白原等造成缗钱状形成，造成假凝集现象。,13),不规则抗体存在：受检者血浆中，含有,ABO,血型抗体以外不规则抗体，与试剂红细胞上其它血型抗原系统抗原起反应。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第14页,红细胞血型检测,15,14),低丙种球蛋白血症：低丙种球蛋白血症,(,丙种球蛋白量减低,),病例，可能会因免疫球蛋白水平下降而使血清定型时不凝集或弱凝集反应。,15),药品等原因：药品、右旋糖醉及静脉注射一些造影剂可引发红细胞凝集或类似凝集。,16),年纪原因：免疫系统还未健全婴儿、由母亲被动取得抗体婴儿，或抗体水平下降老人，试验时可出现异常结果。,17),防腐剂原因：患者体内可能含有对防腐剂中成份或对混悬介质抗体，造成,ABO,定型差错。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第15页,红细胞血型检测,16,Rh(D),定型和定型试验中应注意问题：,Rh,定型主要判定,D,抗原（,IgG,抗,D,和,IgM,抗,D,）。,Rh,系统是最为复杂得多一个系统，包括临床主要有,D,、,C,、,c,、,E,、,e,五个抗原，其中,D,抗原免疫原性最强,，仅次于,A,或,B,抗原。,Rh,血型判定方法有：玻片法、试管法、微量板法、微柱凝胶法等，试管法最为经典。当前大部分医院都使用微柱凝胶卡式血型判定，方法简便快捷，准确度较高。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第16页,红细胞血型检测,17,红细胞血型检测讲义专家讲座,第17页,红细胞血型检测,18,造成,Rh,血型判定可能出现假阳性原因：,1),受检细胞已被免疫球蛋白致敏，或标本血清中含有引发红细胞凝集因子。,2),受检细胞与抗血清孵育时间过长，含高蛋白定型试剂会引发缗钱状形成。,3),标本抗凝不妥，受检过程中出现凝血或小纤维蛋白凝块，误判为阳性。,4),定型血清中含有事先未被检测其它特异性抗体，造成假阳性定型结果。,5),多凝集细胞造成定型假阳性。,6),判定用器材或抗血清被污染，造成假阳性。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第18页,红细胞血型检测,19,可能出现假阴性原因,1),受检细胞悬液浓度太高，与抗血清百分比失调。,2),漏加或错加定型血清。,3),定型血清使用方法错误，没有按说明书进行。,4),离心后重悬细胞扣时，摇动用力过分，摇散微弱凝集。,5),抗血清保留不妥，造成失效。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第19页,红细胞血型检测,20,弱,D,型,(Du,型,),血型及其判定,：,Du,型抗原是,RhO(D),弱抗原，这种抗原通常与大部分盐水抗,D,试剂不产生直接凝集反应，而与部分,IgG,抗,D,血型用间接抗球蛋白试验反应阳性。所以当我们首次得到,Rh,阴性结果时，必须进行作,Rh,阴性确认试验，即用三种不一样批号,IgG,抗,D,定型，假如全部阴性方可认为该被检者为,Rh,阴性，不然，只要有一批为阳性，则可认为是,Du,型。,弱,D,人群作为献血者按照,RhD,阳性对待，其血液只能给,Rh,阳性受血者输注；作为受血者按照,RhD,阴性对待，只能接收,RhD,阴性血液。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第20页,红细胞血型检测,21,三、不规则抗体筛选和判定,定义：,不规则抗体是指血清中抗,-A,、抗,-B,以外其它血型抗体，也称意外抗体。,不规则抗体包含同种抗体和本身抗体。,本身抗体：受血者体内产生抗体，针对自己本身红细胞抗原。,同种抗体：不只针对本身抗原，也会同种异型抗原发生反应。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第21页,红细胞血型检测,22,不规则抗体筛查方法,抗体筛选试验标准是让受检血清与已知血型试剂红细胞即筛选红细胞起反应，以发觉在,37,中有反应抗体,1.,盐水介质法：主要用于,IgM,类抗体筛查。优点是：方法简单、操作简单、成本低廉。,缺点是：灵敏度低,2.,聚凝胺法：,优点：与水盐介质法比灵敏度有所提升。,3.,抗球蛋白试验：缺点：操作繁琐、工作量大、耗时等。,4.,酶法：能暴露隐蔽抗原，增强一些稀有抗原检测。但可能 会破坏有些抗原，影响检测。当前临床是已不常使用。,5.,微柱凝胶卡式检测法,红细胞血型检测讲义专家讲座,第22页,红细胞血型检测,23,不规则抗体判定,一旦抗体被检出，应作抗体判定试验，以确定其特异性。抗体判定试验包含以下主要内容：,(1),本身细胞检验,：观察患者,(,受者,),血清与患者,(,受者,),本身细胞反应情况，确定血清内是否有本身抗体或本身抗体和同种抗体二者同时存在。,(2),普红细胞,：使用试剂细胞中谱细胞，应用各种抗体检验技术，检测患者血清，确定其抗体特异性。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第23页,红细胞血型检测,24,四、交叉配血试验,要求和内容,交叉配血要求：,主侧配血要求：,绝对不能够有凝集或溶血现象。,次测配血要求：,供血者血清加受血者红细胞在允许范围内，能够有凝集现象，但不能够有溶血,。,凝集,不凝集,红细胞血型检测讲义专家讲座,第24页,红细胞血型检测,25,交叉配血试验内容,患者,献血者,主侧,次侧,主侧配血,用患者血清与供者红细胞进行试验,次测配血,供血者血清与患者红细胞进行试验,红细胞血型检测讲义专家讲座,第25页,红细胞血型检测,26,交叉配血目标,交叉配血试验是输血前必要步骤，主要是检验受血者血清中有没有能破坏供血者红细胞抗体。主要目标是为了预防输血后产生溶血性反应。,尽可能确保对人和一个病人来说，输了供血者血不会引发有害反应，而且使红细胞在输注后能保持最长存活时间。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第26页,红细胞血型检测,27,结果解释及处理,1.,抗体筛查阴性，交叉配血相容：,绝大部分标本抗体筛查阴性，交叉配血也是相容。,2.,抗体筛查阴性，主侧交叉配合试验阳性,（,1,）复查血型,（,2,）主侧凝集类,B,抗原,（,3,）血清中可能含有一个,ABO,抗体，必要时能够做,ABO,亚型判定,红细胞血型检测讲义专家讲座,第27页,红细胞血型检测,28,3.,抗体筛查试验阳性，主侧交叉配合试验阳性,（,1,）本身对照试验阴性：受血者体内有同种不规则抗体。,（,2,）本身对照试验阳性：受血者血清内可能有本身抗体或同时存在不规则抗体。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第28页,红细胞血型检测,29,影响原因,离子干扰,温度,操作不规范,离心不妥,红细胞血型检测讲义专家讲座,第29页,红细胞血型检测,30,第二节 盐水介质试验技术,盐水介质试验技术惯用于血型判定、血清中,IgM,类抗体筛查和判定、盐水介质交叉配血等。,基本方法,1,.,平板法 用于,ABO,血型和,RhD,抗原定型,特点：简单、快速，但易污染环境。,2.,试管法 为定型试验方法，也可于半定量试验。是输血,前检验最惯用试验方法。,特点：简单、快速、易学，结果准确、可靠。,3.,微孔板法 为定性试验方法。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第30页,红细胞血型检测,31,盐水介质配血方法,患者,献血者,主侧,次侧,离心,看结果,阳性,阴性,红细胞血型检测讲义专家讲座,第31页,红细胞血型检测,32,红细胞血型检测讲义专家讲座,第32页,红细胞血型检测,33,第三节 酶处理试验技术,原理：在酶作用下切断带有负电荷羧基基团唾液酸，降低,Zeta,电位，缩短红细胞之间距离。增强,IgG,抗体对红细胞凝集。,惯用正确酶：木瓜蛋白酶，菠萝蛋白酶，无,花果蛋白酶等,红细胞血型检测讲义专家讲座,第33页,红细胞血型检测,34,酶介质配血方法,患者,献血者,主侧,次侧,主次侧,均加酶,酶,上海市血液中心血,红细胞血型检测讲义专家讲座,第34页,红细胞血型检测,35,37,水浴30分钟,37,离心,看结果,阳性,阴性,红细胞血型检测讲义专家讲座,第35页,红细胞血型检测,36,结果判断,（,1,）阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集,，被检管凝集为阳性，不出现凝集判定为阴性。,（,2,）阳性对照管不凝集和（或）阴性对照管凝集，试验失败分析原因，重新试验。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第36页,红细胞血型检测,37,第四节 抗球蛋白试验技术,基本原理,抗球蛋白试验（,Coombs,试验）主要用于检测血清中不完全抗体如：IgG、IgA和（或）补体如：C3、C4。,在盐水介质中，不完全抗体只能致敏红细胞，而不能使红细胞出现可见凝集反应，加入抗球蛋白试剂后，抗球蛋白分子,Fab,片段与红细胞表面受体结合，而产生红细胞凝集，所以采取此方法能够检测出血清中是否存在不完全抗体。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第37页,红细胞血型检测,38,抗球蛋白试验原理图,红细胞血型检测讲义专家讲座,第38页,红细胞血型检测,39,分类及应用,抗球蛋白试验,直接,间接,致敏红细胞不完全抗体、补体,血清中不完全抗体,应用,直接：,HDN,诊疗、,AIHADE,诊疗、药品诱发型溶血病诊疗,间接：交叉配血及血型判定、器官移植、等,红细胞血型检测讲义专家讲座,第39页,红细胞血型检测,40,抗球蛋白配血方法,患者,献血者,主侧,次侧,37,37,水浴30分钟,三洗,红细胞血型检测讲义专家讲座,第40页,红细胞血型检测,41,加抗球蛋白,抗球蛋白试剂,上海市血液中心血,离心,看结果,阳性,阴性,红细胞血型检测讲义专家讲座,第41页,红细胞血型检测,42,结果判断,直接抗球蛋白试验：,（,1,）阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，被检管凝集，判定为阳性。,（,2,）阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，被检管不凝集，须做阴性确认后判定结果。,（,3,）阳性对照管不凝集和（或）阴性对照管凝集，结果不可信不能发出汇报，分析原因后重做试验。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第42页,红细胞血型检测,43,间接抗球蛋白试验：,（,1,）阳性对照管展现凝集反应，阴性对照管不展现凝集反应，被检管展现凝集反应为阳性结果，表示被检者血,清中含有抗体。,（,2,）阳性对照管不凝集和（或）阴性对照管出现凝集，试验失败，分析原因重做试验。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第43页,红细胞血型检测,44,第五节 聚凝胺介质试验技术,聚凝胺试验技术是一个快速、简便检测红细胞不完全抗体方法，可用来检测,IgG,抗体，但,IgG,抗体抗,-K,抗体除外。,一、试验原理,凝聚胺（,polymatching,）法首先利用低离子介质降低溶液离子强度，降低红细胞周围阳离子云，促进血清（浆）中抗体与红细胞对应抗原结合，再加入带亚电荷高价阳离子多聚物,-,凝聚胺溶液，中和红细胞表面负电荷，缩短细胞间距，形成可逆非特异性聚集，并使,IgG,型抗体直接凝集红细胞。加入中和液后，仅由凝聚胺引发非特异性聚集，会因电荷中和而分散，而由抗体介导特异性凝集则不会分散,红细胞血型检测讲义专家讲座,第44页,红细胞血型检测,45,聚凝胺(,Polybrene),配血方法,患者,献血者,主侧,次侧,室温放置,1 分钟,主次侧均,加聚凝胺,Polybrene,上海市血液中心血,红细胞血型检测讲义专家讲座,第45页,红细胞血型检测,46,离心,聚凝胺引发红细胞非特异性凝集,重悬液,上海市血液中心血,主次侧均,加重悬液,看结果,阳性,阴性,红细胞血型检测讲义专家讲座,第46页,红细胞血型检测,47,应用范围：,血型判定、抗体筛查及交叉配血试验,特点：,灵敏、速度快、准确、操作要求高。,注意事项,1.不能用含有枸橼酸钠和肝素抗凝标本,2.用聚凝胺试验技术交叉配血，出现不配合时，要用抗球蛋白试验重做，结果不一致时，以抗球蛋白试验为主。,3.聚凝胺只能是正常红细胞发生凝集，对缺乏唾液酸细胞（如：T细胞及B细胞）无作用。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第47页,红细胞血型检测,48,第六节 微柱凝集试验技术,一、试验原理,微柱凝集试验本质是凝集反应，在凝胶介质中，红细胞抗原与对应抗体结合，经低速离心，未和抗体结合红细胞则沉于凝胶底部（管底尖部），而与抗体结合或凝集红细胞，位于凝胶上层或悬浮在凝胶中。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第48页,红细胞血型检测,49,一、微柱凝胶试验原理,将红细胞和抗血清加在凝胶上部反应，离心后观察凝集红细胞，被阻挡在小柱中凝胶上部或中央，证实发生凝集反应，判断凝集反应阳性,游离红细胞，被挤过装有过滤介质小柱，而抵达小柱底部，证实未发生凝集判断阴性.,操作及结果判定,红细胞血型检测讲义专家讲座,第49页,红细胞血型检测,50,二、应用,1.,抗球蛋白试验 直接抗球蛋白试验和 间接抗球蛋白试验。,2.ABO,血型判定 可做单纯粹定型，也可同时做正反定型。,3.,其它血型系统检测 如,Rh,其它抗原（,CcEe,）定型,三、特征及优点：,1.,简便,2.,准确：结果清楚明确，可重复性强。,3.,敏感,4.,结果保留时间长,5.,标本用量少,6.,标准化,7.,安全,红细胞血型检测讲义专家讲座,第50页,红细胞血型检测,51,四、微柱凝集试验中可能存在问题,1.,假阳性反应,2.,假阴性反应,3.,溶血反应,红细胞血型检测讲义专家讲座,第51页,红细胞血型检测,52,五、不足与发展前景,微柱凝集抗人球蛋白试验及微柱胶免疫检测技术本质是血凝试验，这理论上为制备抗原抗体包被红细胞为指示红细胞，以间接血凝试验来检测红细胞抗原抗体以外其它血液红细胞、中路标志、病原微生物，以及人体中其它可溶性抗体，如对药品抗体、本身抗体检测等提供了比传统血凝检验更为敏感、准确、简单易行方法。,微柱凝集试验技术奖在临床各个领域有更为辽阔发展。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第52页,红细胞血型检测,53,第七节 吸收放射试验,概念,吸收试验,:,抗原与抗体结合是特异性，所以含有抗体活性血清加入对应抗原后，抗体活性下降或消失，这种作用称为吸收试验。,放散试验是抗原与抗体结合是可逆，在物理条件改变时，抗体又会从抗原抗体复合物上分离下来，将抗体由抗原抗体复合物上分离下来试验称为放散试验,红细胞血型检测讲义专家讲座,第53页,红细胞血型检测,54,冷本身抗体,：,理论上讲凡是,37,与本身红细胞不反应，而只有在低于,37,环境下才能和本身红细胞反应抗体均可称为冷本身抗体。实际上，冷本身抗体大多数只能在很低温度下,(,比如,4),与本身细胞反应。,温本身抗体,：,温本身抗体是指在,37,条件下能和本身红细胞反应抗体。当患者血清中含有温本身抗体时，患者普通都有些贫血或溶血症状。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第54页,红细胞血型检测,55,吸收放散试验应用,证实存在于红细胞上弱抗原,分离、判定混合液体,除去血清中不需要抗体,浓缩低效价抗体,核实抗体特异性,利用吸收放散技术判定引发新生溶血病和免疫性输血反应抗体,研究判别免疫性溶血性贫血抗体,红细胞血型检测讲义专家讲座,第55页,红细胞血型检测,56,第八节 凝集抑制试验,概念,抗体能与有对应抗原红细胞发生特异性凝集，体液中可溶性抗原物质能与该抗体发生特异中和，抑制了抗体凝集红细胞作用。用这种可溶性物质来抑制抗体与红细胞凝集试验，称为凝集抑制试验。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第56页,红细胞血型检测,57,第九节 红细胞血型分子生物学检测,红细胞血型分子生物学检测技术,伴随分子生物学技术发展，检测基因结构和突变方法不停涌新。尤其是,PCR,技术问世后，各种与,PCR,相结合检测技术深入推进了基因研究发展。分子生物学技术应用与红细胞血型检测，使红细胞血型分析技术飞越了一个崭新阶段。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第57页,红细胞血型检测,58,第九节 红细胞血型分子生物学检测,红细胞血型分子生物学检测方法,PCR-SSP,即序列特异性引物引导,PCR,反应,PCR-SSOP,即序列特异性寡核苷酸探针,PCR-SSCP,即单链构象多态性,PCR-RFLP,即限制性片段长度多态性,PCR-RBD,即反向点杂交,PCR-DNA,测序,液相芯片法 又称悬浮点阵技术、,xMAP,（即灵活多元分析平台）、多元流式荧光微球检测技术。,红细胞血型检测讲义专家讲座,第58页,红细胞血型检测,59,应用,ABO,疑难血型判定,发觉,ABO,血型新等位基因,对于,ABO,基因突变研究,新生儿溶血病（,HDN,）辅助诊疗,一些疾病病理研究,法医个体识别,红细胞血型检测讲义专家讲座,第59页,