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高考生物人教版总复习选修1-第2讲-微生物的利用.pptx

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单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,课前自主学习,课堂互动探究,生物(人教版),课后巩固提升,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第二讲微生物利用,1/65,课前自主学习,2/65,3/65,4/65,5/65,二、微生物利用,6/65,7/65,课堂互动探究,8/65,1,培养基种类,(1)按物理状态分类,微生物培养与应用,培养基种类,特点,用途,液体培养基,不加凝固剂,工业生产,固体培养基,加凝固剂,(如琼脂),微生物分离、判定,活菌计数,菌种保藏,9/65,(2)按功效分类,种类,制备方法,原理,用途,举例,选择培养基,培养基中加入一些化学物质,依据一些微生物对一些物质抗性而设计,从众多微生物中分离所需微生物,加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌,判别培养基,培养基中加入某种指示剂或化学药品,依据微生物产生某种代谢产物与培养基中特定指示剂或化学药品反应,产生显著特征改变而设计,判别不一样种类微生物,伊红美蓝培养基能够判别大肠杆菌,10/65,2.消毒和灭菌比较,条件,结果,惯用方法,应用范围,消毒,较为温和物理或化学方法,仅杀死物体表面或内部部分对人体有害微生物,煮沸消毒法,日惯用具,巴氏消毒法,不耐高温液体,化学药剂消毒法,用酒精擦拭双手,用氯气消毒水源,灭菌,强烈理化原因,杀死物体内外全部微生物,包含芽孢和孢子,灼烧灭菌法,接种工具,干热灭菌法,玻璃器皿、金属工具,高压蒸汽灭菌法,培养基及容器灭菌,11/65,3.微生物营养,营养,要素,含义,作用,主要起源,碳源,凡能提供所需碳元素物质,组成生物体细胞物质和一些代谢产物,有些是异养生物能源物质,无机化合物:CO,2,、NaHCO,3,;有机化合物:糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等,氮源,凡能提供所需氮元素物质,合成蛋白质、核酸以及含氮代谢产物,无机化合物:N,2,、NH,3,、铵盐、硝酸盐;有机化合物:尿素、牛肉膏、蛋白胨等,生长因子,生长必不可少微量有机物,酶和核酸组成成份;参加代谢过程中酶促反应,维生素、氨基酸、碱基等,水和,无机盐,水不不过优良溶剂,而且可维持生物大分子稳定;无机盐细胞内成份和调整物质,外界摄入,12/65,4.纯化大肠杆菌以及菌种保藏,(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。,(2)纯化大肠杆菌,原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个菌落,这个菌落就是一个纯化细菌菌落。,13/65,方法:平板划线法、稀释涂布平板法。,平板划线法是经过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线操作,将聚集菌种逐步稀释分散到培养基表面;稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列梯度稀释,然后将不一样稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面,进行培养。,(3)菌种保藏,短期保留:固体斜面培养基上4 保留,菌种易被污染或产生变异。,长久保留:20 甘油管在冷冻箱中保藏。,14/65,尤其提醒,平板冷凝后,培养皿盖上会凝结水珠,凝固后培养基表面温度也比较高,将平板倒置,既能够使培养基表面水分更加好地挥发;又能够预防培养皿盖上水珠落入培养基,造成污染。,15/65,1.,(辽宁大连双基测试),以下是相关微生物培养与应用问题,请分析回答。,(1)如图是利用_法进行微生物接种,把聚集菌种逐步_分散到培养基表面。图中右手拿器具称为_。,16/65,(2)分析下面培养基配方;NaNO,3,、KH,2,PO,4,、NaH,2,PO,4,、MgSO,4,7H,2,O、KCl、H,2,O。若用于培养纤维素分解菌,应加入_(物质),为检测纤维素分解菌存在是否,还应加入_染料。,(3)取得菌种假如需要长久保留,能够采取_方法。,答案:,(1)平板划线稀释接种环(2)纤维素粉刚果红(3)甘油管藏,17/65,1,筛选菌株原理,微生物选择培养:在选择培养基配方中,把尿素作为培养基中唯一氮源,标准上只有能够利用尿素微生物才能够生长。,2,统计菌落数目标方法,(1)显微镜直接计数法:,原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积样品中微生物数量。,土壤中分解尿素细菌分离与计算,18/65,方法:用计数板计算。,缺点:不能区分死菌与活菌。,(2)间接计数法(活菌计数法):,原理:当样品稀释度足够高时,培养基表面生长一个菌落,起源于样品稀释液中一个活菌。经过统计平板上菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。,19/65,操作:,a设置重复组,增强试验说服力与准确性。,b为了确保结果准确,普通选择菌落数在30300平板进行计数。,计算公式:每克样品中菌株数(,C,V,),M,,其中,C,代表某一稀释度下平板上生长平均菌落数,,V,代表涂布平板时所用稀释液体积(mL),,M,代表稀释倍数。,20/65,3,试验流程,21/65,22/65,尤其提醒,因为两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到只是一个菌落,所以统计菌落数往往比活菌实际数目低。,23/65,2自然界中微生物往往是混杂生长。人们在研究微生物时普通要将它们分离提纯,然后进行数量测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定试验,请回答相关问题。,试验步骤:,(1)制备稀释倍数为10,2,、10,3,、10,4,、10,5,、10,6,系列稀释液。,(2)为了得到愈加准确结果,你选取_法接种样品。,24/65,(3)适宜温度下培养。,结果分析:,(1)测定大肠杆菌数目时,在对应稀释倍数为10,6,培养基中,得到以下几个统计结果,正确可信是_,其理由是_。,25/65,A一个平板,统计菌落数是230,B两个平板,统计菌落数是220和260,取平均值240,C三个平板,统计菌落数分别是210、50和520,取平均值260,D四个平板,统计菌落数分别是210、300、240和250,取平均值250,26/65,(2)一同学在稀释倍数为10,5,培养基中测得平板上菌落数平均值为234,那么每毫升样品中菌落数是_(涂布平板时所用稀释液体积为0.1 mL)。,(3)用这种方法测定大肠杆菌密度,实际活菌数量要比测得数量_,因为_。,27/65,解析:,本题考查微生物计数方法,可从两种接种方法优缺点和统计菌落数目时应注意问题入手解答该题。为了得到愈加准确结果,应用稀释涂布平板法接种样品。(1)选取多个菌落数相差不大平板计数,取其平均值。(2)2340.1,10,5,2.34,10,8,。(3)因为菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成,所以实际活菌数量要比测得数量多。,28/65,答案:,试验步骤:(2)稀释涂布平板,结果分析:(1)D在设计试验时,一定要涂布最少三个平板作为重复组,才能增强试验说服力与准确性;在分析试验结果时,要考虑所设置重复组结果是否相当(2)2.34,10,8,(3)多当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到是一个菌落,29/65,1,筛选原理,分解纤维素微生物分离,30/65,31/65,3,两种刚果红染色法比较,32/65,方法,先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,在倒平板时就加入刚果红,优点,显示出颜色反应基本上是纤维素分解菌作用,操作简便,不存在菌落混杂问题,缺点,操作繁琐,加入刚果红会使菌落之间发生混杂,因为纤维素和琼脂、土豆汁中都含淀粉类物质,可能使产生淀粉酶微生物也形成透明圈,即假阳性反应,有些微生物含有降解色素能力,它们在长时间培养过程中会降解刚果红形成显著透明圈,与纤维素分解菌不易区分,33/65,3如图为分离并统计分解纤维素微生物试验流程,据此回答相关问题:,34/65,(1)要从富含纤维素环境中分离纤维素分解菌,从高温热泉中寻找耐热菌,这说明_。,(2)接种微生物最惯用是平板划线法和稀释涂布平板法,本试验宜采取_法,原因是_。,(3)用稀释涂布平板法统计菌落数目时,最好选择菌落数在_间平板进行计数。若统计出在一稀释倍数为10,5,平板上平均菌落数为30个,所用稀释液体积为0.2 mL,则每克样品中菌落数为_。,35/65,答案:,(1)依据目标菌株对生存环境要求,到对应环境中去寻找,(2)稀释涂布平板平板划线法难以依据稀释体积计算每克样品中细菌数,(3)303001.5,10,7,个,36/65,1以下惯用无菌操作中错误是(),A无菌操作目标是预防杂菌污染,B用酒精擦拭双手方法对操作者进行消毒,C试验操作过程应在酒精灯火焰附近进行,D玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭,37/65,解析:,对操作者应用较温和方法进行消毒。试验操作过程应在酒精灯火焰附近进行,预防瓶口微生物污染培养基。对无菌操作用到玻璃器皿要用干热灭菌方法彻底毁灭其中微生物,用酒精擦拭不能到达目标。,答案:,D,38/65,2平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物两种惯用方法,以下描述正确是(),A都要将菌液进行一系列梯度稀释,B平板划线法是将不一样稀释度菌液经过接种环在固体培养基表面连续划线操作,C稀释涂布平板法是将不一样稀释度菌液倒入液体培养基进行培养,D都会在培养基表面形成单个菌落,39/65,解析:,平板划线法不需要进行梯度稀释,稀释涂布平板法需要将不一样稀释度菌液滴加到固体培养基表面。平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个菌落。,答案:,D,40/65,3,(山东青岛调研),在农田土壤表层自生固氮菌较多,用表层土制成稀泥浆接种到特制培养基上培养,可将自生固氮菌与其它细菌分开,对培养基要求是(),加抗生素,不加抗生素,加氮素,不加氮素,加葡萄糖,不加葡萄糖,37,恒温箱中培养,2830,温度下培养,A,B,C,D,41/65,解析:,细菌反抗生素敏感,故培养基中应不加抗生素;自生固氮菌有固氮功效,故培养基中不需要加氮素,自生固氮菌是异养,应该加葡萄糖,其生长繁殖适宜温度是2830,。,答案:,C,42/65,4,(重庆高考),以下相关细菌培养叙述,正确是(),A在琼脂固体培养基上长出单个菌落含有各种细菌,B在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长,C向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌生长,D在半固体培养基中接种细菌培养后能够观察其运动,43/65,解析:,单个菌落中只含有一个细菌;青霉素能抑制细菌生长,而对真菌没有影响;破伤风杆菌是厌氧型细菌,通入氧气会抑制其生长。,答案:,D,44/65,5关于灭菌和消毒不正确了解是(),A灭菌是指杀灭环境中一切微生物细胞、芽孢和孢子,B消毒和灭菌实质上是完全相同,C接种环用灼烧法灭菌,D惯用灭菌方法有灼烧法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法,45/65,解析:,消毒是使用较为温和物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害微生物(不包含芽孢和孢子),灭菌则是使用强烈理化原因杀死物体内外全部微生物,包含芽孢和孢子。,答案:,B,46/65,6制备牛肉膏蛋白胨固体培养基以下操作中,不正确是(),A操作流程是计算、称量、溶化、灭菌和倒平板,B将称好牛肉膏连同称量纸一同倒入烧杯中再加水、去纸,C灭菌后向牛肉膏蛋白胨溶液中加2%琼脂,并使其溶解,D将培养基冷却到约50,时,在酒精灯火焰附近倒平板,47/65,解析:,琼脂加入到牛肉膏蛋白胨溶液中,溶化后再灭菌。,答案:,C,48/65,7.,(无锡模拟),如右图是微生物平板划线示意图。划线次序为1、2、3、4、5。以下操作方法正确是(),A操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌,B划线操作须在火焰上进行,C在5区域中才能够得到所需菌落,D在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌,49/65,解析:,在每次划线前后都要对接种环进行灭菌,接种环灭菌方法应是在火焰上灼烧,接种时划线操作是在火焰边进行。在5个区域中,只要有单个活细菌,经过培养即可取得所需菌落。,答案:,D,50/65,8,(江苏高考),某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。以下叙述正确是(),A培养基分装到培养皿后进行灭菌,B转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线,C接种后培养皿须放在光照培养箱中培养,D培养过程中每隔一周观察一次,51/65,解析:,微生物分离中培养基制备应是先灭菌再倒平板,A项错误;每一次划线前都要灼烧接种环,以杀死上次划线结束后接种环上残留菌种,B项正确;接种后培养皿应在恒温培养箱中进行培养,光照会影响温度等条件,C项错误;培养过程中观察间隔时间不能太长,适宜条件下普通不超出24 h,D项错误。,答案:,B,52/65,9,(泰州模拟),以下关于微生物分离和培养相关叙述,错误是(),A微生物培养前,需对培养基进行消毒,B测定土壤样品中细菌数目,惯用菌落计数法,C分离土壤中不一样微生物,要采取不一样稀释度,D分离能分解尿素细菌,要以尿素作为培养基中唯一氮源,53/65,解析:,微生物培养前,需对培养基进行灭菌,而不是消毒;测定土壤样品中细菌数目,惯用菌落计数法而普通不用活菌计数;分离土壤中不一样微生物,要采取不一样稀释度方便能从中选择出菌落数在30300间平板进行计数;分离能分解尿素细菌,要以尿素作为培养基中唯一氮源。,答案:,A,54/65,10,(新课标全国卷,),临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药试验。试验时,首先要从病人身上获取少许样本,然后按照一定试验步骤操作,以确定某致病菌对不一样抗生素敏感性。,回答以下问题:,(1)为了从样本中获取致病菌单菌落,可用_法或_ 法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、判别等步骤取得。,55/65,(2)取该单菌落适当稀释,用_法接种于固体培养基表面,在37,培养箱中培养24 h,使其均匀生长,充满平板。,(3)为了检测该致病菌对于抗生素敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素滤纸片均匀置于该平板上不一样位置,培养一段时间后,含A滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌反抗生素A_;含B滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌反抗生素B_;含C滤纸片周围透明圈比含A小,说明_;含D滤纸片周围透明圈也比含A小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染情况下,此菌落很可能是抗生素D_。,56/65,(4)依据上述试验结果,为到达抗菌目标,最好应选取抗生素_。,解析:,(1)试验室中对微生物纯化培养时,惯用接种方法有划线法和稀释涂布法。(2)若让已经取得单个菌落在固体培养基上大量且均匀繁殖,惯用涂布器把稀释菌液均匀涂满整个平板。,57/65,(3)对某种抗生素越敏感致病菌,在该抗生素存在范围内,越不易生存,形成透明圈就越大。不过,假如在透明圈中还有菌落生存,则说明这个菌落细菌耐药性很强。(4)经过(3)可知,在应用时,要想杀死某致病菌,就得选择能使该致病菌大量死亡,即产生透明圈大那种抗生素。,答案:,(1)划线稀释涂布(或涂布)(2)涂布,(3)敏感不敏感该致病菌对C敏感性比对A弱耐药菌(4)A,58/65,11急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒经过消化道进入人体造成。所以检验饮用水细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生必要办法,请回答以下与检验饮用水相关问题:,(1)检验大肠杆菌含量时,通常将水样进行一系列梯度稀释,然后将不一样稀释度水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基表面进行培养,统计菌落数量,这种方法称为_。在下面所表示四种菌落分布图中,不可能是用该方法得到是_。,59/65,60/65,(2)用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组?_。为何?_。,(3)如分别取0.1 mL已稀释10,3,倍水样分别涂布到三个琼脂固体培养基表面进行培养,培养基统计到大肠杆菌菌落数分别为55、56、57,则每升原水样中大肠杆菌数为_。,(4)已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气,现提供足量已灭菌乳糖蛋白胨培养液和具塞试管,应怎样判断待检水样中是否含有大肠杆菌?_。,61/65,解析:,纯化大肠杆菌方法稀释涂布平板法和平板划线法。删除偏差太大数据,对剩下多个培养数据进行平均处理就能够得到水样中大肠杆菌数。大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气,经过密封培养,大肠杆菌能够进行无氧呼吸产生气体,以气泡形式释放出来。,62/65,答案:,(1)稀释涂布平板法D(2)需要因为需要判断培养基是否被杂菌污染(培养基灭菌是否合格),(3)5.6,10,8,(4)经过无菌操作向试管内注入一定量待检水样,再注入已灭菌乳糖蛋白胨培养液将试管充满,塞上塞子,混匀后置于37,恒温箱培养24 h。若试管内有气泡生成,则说明水样中有大肠杆菌,63/65,课后巩固提升,64/65,谢谢观看!,65/65,
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