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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,第四十八课时,基因工程应用、蛋白质工程崛起,第1页,第2页,第3页,Bt,毒蛋白基因,病毒外壳蛋白基因,抗毒素合成基因,第4页,蛋白质,抗冻蛋白基因,抗除草剂基因,第5页,外源生长激素,体外基因治疗,体内基因治疗,第6页,正常基因,基因表示产物,体外基因治疗,某种细胞,第7页,转移基因,第8页,第9页,限制性核酸内切,选择,第10页,T,DNA,筛选取得,T,DNA,片段植物细胞,细胞分裂素浓度,芽顶端合成生长素向基部运输，促进根分化,投放棉铃虫,农药,第11页,第12页,结构规律,生物功效,基因修饰,基因合成,现有蛋白质,新蛋白质,蛋白质结构,氨基酸序列,脱氧核苷酸序列,(,基因,),第13页,第14页,氨基酸序列,(,或结构,),P,P,1,DNA,和,RNA(,或遗传物质,),DNA,RNA,、,RNA,DNA,、,RNA,蛋白质,(,或转录、逆转录、翻译,),第15页,设计蛋白质结构,推测氨基酸序列,功效,第16页,第17页,考点三,DNA,粗提取与判定,【,回扣教材,】,1,DNA,粗提取原理,对于,DNA,粗提取，就是要利用,DNA,和,RNA,、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面差异，提取,_,，去除其它成份。,DNA,第18页,(1),依据,DNA,溶解性来粗提取,DNA,原理：,DNA,和蛋白质等其它成份在不一样浓度,NaCl,溶液中,_,不一样，通常选取,2 mol/LNaCl,溶液溶解细胞中,_,，此时杂质易沉淀；在,0.14 mol/LNaCl,溶液中,DNA,溶解度,_,，可使,_,。酒精是一个惯用有机溶剂，,DNA,却不能溶于酒精,(,尤其是,95%,冷却酒精,),，但细胞中一些,_,可溶于酒精，利用这一点能够将,DNA,和蛋白质深入分离。,溶解度,DNA,最小,DNA,析出,蛋白质,第19页,(2),利用,DNA,对酶、高温和洗涤剂耐受性原理来粗提取,DNA,：,_,能专一性地水解蛋白质而不会对,DNA,产生影响，故可用,_,处理到达粗提取,DNA,目标；,60,80,高温会使大多数,_,，而,DNA,在,80,以上才会变性，故可用,60,80,高温处理材料以到达粗提取,DNA,目标；,_,能够瓦解细胞膜，但对,DNA,没有影响，故可用该试剂来使细胞破裂，更加好提取,DNA,。,总而言之：不一样浓度,_,、,_,、,_,、,60,80,_,及,_,均可用来提取,DNA,。,蛋白酶,蛋白酶,蛋白质变性,洗涤剂,NaCl,溶液,酒精,蛋白酶,高温,洗涤剂,第20页,2,DNA,判定原理,在,_,条件下，,DNA,遇二苯胺展现,_,，所以，,_,能够作为判定,DNA,试剂。,原理总结：经过利用不一样浓度,NaCl,溶液溶解或析出,DNA,，能够从细胞中提取和提纯,DNA,；再利用酒精深入将,DNA,与蛋白质分离开来，到达提纯目标；最终利用二苯胺试剂判定提取物质是否是,DNA,。,沸水浴,蓝色,二苯胺,第21页,3,试验设计,(1),试验材料选取：不一样生物组织中,DNA,含量不一样。在选取材料时，应本着,_,、材料易得、便于提取标准。,(2),破碎细胞，获取含,DNA,滤液：假如选取鸡血作材料，可在鸡血细胞液中加入一定量,_(,作用是,_),，并用玻棒搅拌，过滤后搜集滤液；假如用洋葱作材料，则要先切碎洋葱，加入一定量洗涤剂和食盐,(,洗涤剂能,_,；食盐能溶解,_),；进行充分地搅拌和研磨,(,研磨能够,_),，过滤后搜集研磨液。,DNA,含量高,蒸馏水,使血细胞大量吸水而涨裂,瓦解细胞膜,DNA,破碎细胞壁，使,DNA,更多地溶解在,NaCl,溶液中,第22页,DNA,在不一样浓度,NaCl,溶液中溶解度不一样,蛋白酶分解蛋白质,，,不分解,DNA,蛋白质和,DNA,变性温度不一样,第23页,等体积冷却酒精,DNA,NaCl,溶液,二苯胺,沸水浴,第24页,BCD,第25页,第26页,A,第27页,第28页,C,第29页,第30页,D,第31页,第32页,A,第33页,C,第34页,第35页,A,第36页,A,第37页,C,第38页,D,第39页,第40页,B,第41页,第42页,C,第43页,第44页,B,第45页,第46页,第47页,第48页,tms,tmr,卡那霉素,四环素,植物组织培养,害虫抗性接种试验法,第49页,RNA,逆转录酶,cDNA(,或,DNA),抗体,抗原抗体特异性结合,第50页,T(,或,T,淋巴,),监控和去除,第51页,第52页,基因修饰或基因合成,现有蛋白质,新蛋白质,密码子,信使,RNA,碱基互补配对,第53页,基因工程,对大多数蛋白质高级结构了解还不够,第54页,第55页,第56页,C,、,D,人血浆中没有细胞结构，成熟红细胞中没有细胞核，选取这些材料得不到,DNA,或得到,DNA,极少,C,A,、,E,A,冷却酒精对,DNA,凝集效果较佳，该组使用是,25,酒精,菜花细胞在蒸馏水中不能被破坏，得不到,DNA(,应采取研磨方法,),第57页,第58页,
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