点蜂缘蝽试验种群的室内饲养技术.pdf

点蜂缘蝽试验种群的室内饲养技术郭江龙1，李耀发1，安静杰1，党志红1，魏洪亮2，高占林1（1.河北省农林科学院 植物保护研究所/河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心/农业农村部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室，河北 保定 071000；2.保定市植保植检站，河北 保定 071051）摘要：点蜂缘蝽是危害我国大豆生产的重要害虫，采用室内饲养技术提供大量发育一致的标准试虫是研究该虫生物学特性、综合防治、抗药性机制等的重要前提。为提高点蜂缘蝽室内饲养的水平，满足实验室用虫需求，采用新鲜芸豆荚和四季豆荚作为点蜂缘蝽的食料，以直径 12 cm、高 10 cm 的塑料圆形养虫盒为容器，并在其中放置了弯曲纸条增加养虫盒内空间异质性，在室内可控条件下对点蜂缘蝽的生长发育进行研究。结果表明：在温度（25依1）益，湿度 30%50%，光暗比 16 h颐8 h 条件下，取食芸豆荚和四季豆荚的点蜂缘蝽若虫平均发育历期无显著差异，分别为 29.85、31.48 d，并且若虫期平均存活率也无显著差异。然而，取食芸豆荚点蜂缘蝽成虫的产卵期、单雌产卵量、雌虫寿命显著高于取食四季豆荚的成虫，其参数分别为 63.80 d、251.40 粒、74.20d。因此，采用新鲜芸豆荚饲养点蜂缘蝽，能够实现点蜂缘蝽的批量饲养。关键词：点蜂缘蝽；饲养技术；芸豆荚；四季豆荚中图分类号院S433.3文献标志码院ADOI 编码院10.3969/j.issn.10066500.2023.S.023The Laboratory Rearing Technique for the Experimental Population of Riptortus pedestris FabriciusGUO Jianglong1,LI Yaofa1,AN Jingjie1,DANG Zhihong1,WEI Hongliang2,GAO Zhanlin1(1.Plant Protection Institute,Hebei Academy of Agricultural and Forestry Sciences/IPM Center of Hebei Province/Key Laboratory ofIntegrated Pest Management on Crops in Northern Region of North China,Ministry of Agriculture and Rural Affairs,Baoding,Hebei07100,China;2.Plant Protection and Quarantine Station of Baoding,Baoding,Hebei 071051,China)Abstract院Riptortus pedestris is an important pest of soybean in China.The use of laboratory rearing technique to provide a large num鄄ber of uniformly developing insect is an important prerequisite for studying the biological characteristics,integrated management andresistance mechanisms and so on.In order to improve the laboratory rearing and meet the needs of R.pedestris,the growth and devel鄄opment of R.pedestris were studied under controlled indoor conditions using Phaseolus coccineus and Phaseolus vulgaris as food,andthe plastic round box of 12 cm in diameter and 10 cm in heigh was used as a container,in which curved paper strips were placed toincrease the heterogeneity of the box.The results showed that there was no significant difference in developmental period of nymphstage between P.coccineus(29.85 d)and P.vulgaris(31.48 d)groups under the condition of 渊25依1冤 益,30%50%RH,and 16 h颐8 hL颐D.There was also no significant difference in survival rate of nymph stage.However,the oviposition period,egg production and fe鄄male longevity of R.pedestris feeding on P.coccineus were significantly higher than those of R.pedestris feeding on P.vulgaris,withparameters of 63.80 d,251.40 and 74.20 d,respectively.Therefore,the use of P.coccineus as food enables the mass rearing of R.pedestris.Key words院 riptortus pedestris;rearing technique;phaseolus coccineus;phaseolus vulgaris收稿日期：2023-04-06基金项目院河北省重点研发计划（22326513D）；河北省大豆产业技术体系（HBCT2023030206）作者简介院郭江龙（1989），男，河北宁晋人，助理研究员，博士，主要从事农业昆虫与害虫防治研究。通讯作者简介院高占林（1966），男，河北乐亭人，研究员，主要从事农业昆虫与害虫防治研究。天津农业科学 栽蚤葬灶躁蚤灶 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽圆园23袁29渊S冤院111-115誗植物保护点蜂缘蝽（Riptortus pedestris Fabricius）隶属半翅目 Hemiptera 蛛缘蝽科 Alydidae，是一种世界性重要的刺吸式害虫，广泛分布于中国、日本、韩国、印度、马来西亚等东亚和东南亚地区1-2。该虫主要分布在我国广东、福建、台湾、四川、江西、安徽、河南、河北、辽宁、吉林等地区，其最北采集地位于吉林省安图县二道白河镇3。点蜂缘蝽寄主十分广泛，能够危害多种豆科作物，包括大豆（Glycine max）、绿豆（Vigna radiata）、豇 豆（Vigna unguiculata）菜 豆（Phaseolus vulgaris）、赤小豆（Vigna angularis），以及柿子、苹果、柑桔等多种果树4-7。大豆受到点蜂缘蝽危害后主要表现为植株后期不能正常鼓粒或者不鼓粒，正常成熟期叶片、叶柄、豆荚、茎秆等仍保持浓绿色，甚至干枯也不变黄、落叶。我国点蜂缘蝽对大豆的危害也曾因这一症状被称为“症青”现象8。郭建秋等8和常丽丹等9研究发现，喷施菊酯类杀虫剂可天津农业科学第 29 卷以明显降低“症青”发病株率。至此，点蜂缘蝽才逐渐进入科研人员视野并与大豆“症青”现象联系到一起6,10-11。近年来，点蜂缘蝽在我国危害逐年加重，造成大豆严重减产，甚至绝收6-7，而东亚地区包括日本群岛和朝鲜半岛则更早就发现了该虫的危害12-13。该虫在我国 1 年发生 2耀3 代不等，以成虫在田间残留秸秆、落叶和杂草中越冬，具有明显滞育现象。成虫和若虫均可刺吸植株汁液，在大豆结实早期，往往群集危害，致使花蕾凋落、籽粒不饱满、有荚无粒，严重时全株枯死，颗粒无收14。采用室内饲养技术提供大量标准试虫，对于研究害虫行为变化、生理生化，以及筛选高效低毒化学药剂和生物源药剂等具有重要的作用，同时也是提高害虫综合治理水平不可或缺的手段之一。因此，室内人工饲养已成为了当前害虫研究的重要内容。多种害虫的室内饲养技术已经被报道，如陆宴辉等15利用四季豆对绿盲蝽和中黑盲蝽进行了室内饲养探索；金银利等16采用 3 因子 2 水平正交试验设计对绿盲蝽（Apolygus lucorum）人工饲料进行了优化；路子云等17在传统饲养粘虫（Mythimma separata）的方法基础上，改进了饲养技术，进一步提高了粘虫的卵孵化率和存活率；秦启联对18详细介绍了棉铃虫（Helicoverpa armigera）的室内饲养技术与流程。目前，我国对于点蜂缘蝽的研究内容仅限于生物学、形态特征、田间危害症状以及防治技术等方面6,8,10-11。对于室内饲养方面，陈菊红等19曾开展了温度对点蜂缘蝽生长发育和种群繁殖的研究；胡英露等20研究了大豆荚饲养对点蜂缘蝽生殖力和种群趋势的影响。此外，Mainali 等21测定了豇豆、芸豆、无丝豆等 6种豆类种子对点蜂缘蝽生长发育和繁殖力的影响，认为豇豆是最适宜的天然饲料。然而，关于规范化的点蜂缘蝽室内饲养技术与流程还未见报道。因此，考虑到点蜂缘蝽的危害性和室内饲养的重要性，本研究拟探索一套适用于国内点蜂缘蝽的室内饲养技术，筛选最佳的饲养方法，为该虫试验种群的建立、后期防治药剂筛选、生物学特性等方面的研究提供充足的虫源奠定坚实的基础。1材料与方法1.1供试虫源供试点蜂缘蝽于 2019 年 7 月，采自河北省石家庄市平山县近掌村，并在河北省农林科学院植物保护研究所杀虫剂研究室用新鲜豆荚饲养，饲养条件为（25依1）益，湿度 30%50%，光暗比 16 h颐8 h。以新鲜 的芸豆荚（Phaseolus coccineus）和四季 豆 荚（Phaseolus vulgaris）作为点蜂缘蝽备选饲料。1.2豆荚对点蜂缘蝽生长发育和繁殖的影响采集同一天孵化的 200 头 1 龄若虫供试。将初孵若虫用毛笔轻轻挑入底部放有滤纸的 8 cm伊8 cm伊5 cm 养虫盒内，分别以芸豆荚和四季豆荚为饲料，用带孔盒盖盖住，每盒 1 头，于（25依1）益养虫室内进行饲养，成虫羽化后单对放入直径 12cm、高 10cm 的塑料圆形养虫盒内，放入新鲜豆荚和 35 根 1 cm 宽、15 cm 长的弯曲纸条，用 50 目细纱网封口，每天观察记录若虫蜕皮、死亡、羽化、成虫产卵前期、产卵期、产卵量、卵孵化、寿命等情况，并及时更换新鲜豆荚。1.3饲养方法1.3.1饲养条件以直径 12 cm、高 10 cm 的塑料圆形养虫盒为容器，采用 50 目细纱网封口，并确保通风透气。养虫室内温度（25依1）益，湿度 30%50%，光暗比 16 h颐8 h。以新鲜豆荚（市售）为点蜂缘蝽饲料，饲喂前用含有洗洁精的清水和 0.5%次氯酸钠溶液依次浸泡 10 min 后，以去除豆荚表面农药残留，用清水反复冲洗至无异味，放到吸水纸上，室温下自然晾干备用。1.3.2卵的收集取点蜂缘蝽成虫 24 h 内产在纸条或豆荚上的卵，置于养虫盒内，盒底放 1 张吸水滤纸，避免因湿度过大，而造成若虫死亡。每盒卵量约为 50 粒左右，用 50 目细纱网封口待其孵化。盒内放入 1 个直径 3 cm 的小型培养皿，皿内放入吸满蒸馏水的棉球 1 个，以保持养虫盒内湿度。培养 8 d 左右，放入消毒处理后的新鲜豆荚，每盒 2 根，豆荚每2 d 更换 1 次。待点蜂缘蝽卵全部孵化后（约至卵后第 12 天），取出产卵纸条和豆荚，及时更换豆荚。1.3.3若虫的饲养在装有点蜂缘蝽初孵若虫养虫盒内放入 23 根 1 cm 宽、15 cm 长的纸条，并用手揉至弯曲，以增加养虫盒内的空间异质性15，减少个体间的相互干扰，有利于若虫存活。每盒内保持初孵若虫约 4050 头，每 2 d 观察 1 次，并及时更换豆荚。视若虫大小适当增加豆荚数量。1.3.4成虫的饲养点蜂缘蝽若虫饲养约 30 d 左右，待若虫完成 5 次蜕皮、羽化为成虫后，将当天羽化的成虫配对并转入养虫盒中，每盒不超过 15 对成虫。养虫盒中放入3 根新鲜豆荚和 35 根弯曲的纸条作为成虫产卵和活动空间，及时更换豆荚。接虫10 d 左右，点蜂缘蝽开始产卵，并取卵进行下一个饲112增刊饲料产卵前期/d产卵期/d卵历期/d单雌产卵量/粒卵孵化率/%雌虫寿命/d雄虫寿命/d芸豆荚8.75依1.71a63.80依14.34a10.23依0.36a251.40依60.30a92.60依7.74a74.20依10.50a71.60依2.07a四季豆荚9.40依1.34a37.75依20.02b9.16依0.25b80.75依36.48b94.77依4.33a47.20依19.38b67.2依6.38a饲料点蜂缘蝽不同龄期若虫的发育历期/d若虫历期/d1 龄2 龄3 龄4 龄5 龄芸豆荚2.74依0.52a7.19依1.72a6.95依1.55a5.58依0.73a7.97依0.45b29.85依1.13a四季豆荚2.50依0.05a7.26依0.64a6.29依0.17a6.75依0.66a9.04依0.44a31.48依1.28a养周期，直至成虫全部死亡。1.4数据处理本研究所有数据均用平均值依标准误来表示。采用 Microsoft Excle 2013 和 SPSS 20.0 软件对数据进行整理和统计分析。为了明确不同豆荚对点蜂缘蝽生长发育和繁殖能力的影响，若虫发育历期、存活率、成虫寿命、产卵期、单雌产卵量等各项参数的均值差异分析采用 t-测验。数据分析前，先对原始数据进行正态性检验，分析的显著水平为P0.05），取食芸豆荚点蜂缘蝽若虫的平均发育历期为 29.85 d，四季豆荚饲养时，其若虫发育历期为 31.48 d，2 组处理间没有显著性差异（P0.05）。表 1点蜂缘蝽试验种群若虫发育历期注：表中同列数据不同小写字母表示经 t 测验比较差异显著（P0.05）。表 2点蜂缘蝽试验种群若虫存活率饲料不同龄期点蜂缘蝽若虫的存活率/%若虫期存活率/%1 龄2 龄3 龄4 龄5 龄芸豆荚93.33依11.55a79.44依4.19a85.00依4.33a86.90依12.54a84.90依14.37a45.44依1.59a四季豆荚80.95依4.12a85.10依10.73a92.50依6.61a93.27依5.92a83.81依14.67a49.16依6.91a2.3豆荚对成虫生殖发育和卵的影响从点蜂缘蝽成虫繁殖力（表 3）来看，取食 2种豆荚后，其平均产卵前期、卵孵化率、雄虫寿命均无显著差异（P0.05）。从产卵期、单雌产卵量、雌虫寿命来看，取食芸豆荚的点蜂缘蝽成虫明显高于取食四季豆荚的成虫（P0.05），饲喂芸豆荚点蜂缘蝽成虫平均产卵期为 63.80 d，平均单雌产卵量 251.40 粒（产卵量范围 161330 粒），雌虫平均寿命为 74.2 d，而饲喂四季豆荚成虫的平均产卵期为 37.75 d，平均单雌产卵量 80.75 粒（产卵量范围43113 粒），雌虫平均寿命为 47.2 d。而从卵历期来看，食用芸豆荚的平均历期稍长于食用四季豆荚的历期，分别为 10.23、9.16 d，两者差异显著（P0.05）。表 3点蜂缘蝽试验种群成虫发育历期和繁殖能力3讨论与结论本研究为读者提供了一套规范化的点蜂缘蝽室内饲养技术流程，可为科学研究提供充足且发育一致的虫源。本研究针对点蜂缘蝽饲养食料、密度、光周期和种群退化进行讨论，便于科研工作者理解饲养方法中的几个关键技术环节，提高点蜂缘蝽室内饲养技术水平。3.1饲养食料从本研究结果来看，芸豆荚为点蜂缘蝽成虫和若虫繁殖较适宜的食料选择，而 Mainali 等20在测定郭江龙等：点蜂缘蝽试验种群的室内饲养技术113天津农业科学第 29 卷几种豆类对点蜂缘蝽种群繁殖力的研究中，芸豆荚饲养点蜂缘蝽若虫时，其死亡率达到了 93%，其成虫寿命仅为 18 d 左右，明显低于本研究；同时，Mainali 等20研究认为，豇豆是点蜂缘蝽最佳的饲料选择，其单雌产卵量为 218.40 粒卵，低于本研究芸豆荚饲养的 251.40 粒卵。陈菊红等13利用大豆苗和鲜芸豆荚进行点蜂缘蝽成虫饲养时，发现其最佳饲养条件（24益）下，点蜂缘蝽单雌产卵量为 87.39 粒。胡英露等19用鼓粒期鲜豆荚饲养点蜂缘蝽，发现其平均单雌产卵量为 116.32 粒卵，雌雄虫的寿命分别为46.26、52.75 d，显著低于本研究所获得的数据。基于此，本研究认为，在适宜的饲料条件下，室内采用芸豆荚作为点蜂缘蝽食料，可以进行大规模饲养。然而，根据以往的经验，笔者发现市场采购的芸豆荚会有农药残留，可能导致点蜂缘蝽低龄若虫大批量死亡。因此，在饲喂之前，需将芸豆荚依次放入含有洗洁精的清水和 0.5%次氯酸钠溶液中浸泡 10 min，然后再用清水清洗 57 遍，晾干后方可使用。点蜂缘蝽在饲养过程中也会排放一些粪便，容易导致豆荚腐烂，应定期查看和更换豆荚。此外，操作时应避免豆荚在养虫盒内滚动致低龄若虫死亡的发生。3.2饲养密度点蜂缘蝽若虫和成虫活动能力极强，其 25 龄若虫爬行距离为 3.44.28 m h-1，成虫飞行速度可达10.8 km h-1，并且雄虫存在同性斗争行为3。同时，点蜂缘蝽若虫和成虫均会排泄大量液体粪便，导致豆荚易腐烂。因此，在饲养过程中，种群密度不易过大，若虫 4050 头 盒-1，成虫不超过 15 对 盒-1为宜，并定期清理养虫盒、更换新纸条。3.3光周期光周期是昆虫感受外界环境变化重要的信号，对昆虫生殖发育具有重要的影响，可引起昆虫滞育3。点蜂缘蝽作为一种兼性滞育昆虫，在短日照条件下（小于 13.5 h）雌成虫即可进入其生殖滞育状态22。前期研究发现，室内饲养点蜂缘蝽，当光暗比为 12 h颐12 h 时，其雌虫经历 30 d 以上，也未发现交配和产卵行为（未发表数据）。因此，为了保证充足且整齐的虫源，在饲养过程中，每日光照时长应长于14 h，光暗比为 16 h颐8 h 是一个较合适的饲养条件。3.4种群退化问题在室内长期饲养昆虫过程中，无论使用植物自然食料还是人工饲料，昆虫种群的生活力都可能会出现不同程度的衰退现象，甚至出现饲养难以为继，其中病原菌或微孢子虫在体内积累和近缘繁殖是造成该现象的重要因素。针对病原菌或微孢子虫在体内积累问题，应对饲养的装置和空间进行定期杀菌消毒处理，如在饲养过程中发现虫体感染细菌、病毒或在虫体内发现微孢子虫，应立即丢弃，并对饲养空间进行彻底消毒，引入新的虫源；针对近缘繁殖的问题，可以定期采集一些野外亲本，或者选择来自不同地区的种群进行交配，增加种群遗传多样性，延缓生活力衰退23，保证充足的虫源。参考文献院1 LEE S J,YANG Y T,KIM S,et al.Transcriptionalresponse of bean bug(Riptortus pedestris)upon infectionwith entomopathogenic fungus,Beauveria bassiana JEF-007J.Pest Management Science,2019,75(2):333-345.2 KIM S,LIM U T.New soybean variety,Agakong,as a hostof Riptortus pedestris(Fabricius):study on field occurrenceand biological attributes in the laboratoryJ.Journal ofAsia-Pacific Entomology,2010,13(4):261-265.3 高宇,陈菊红,史树森.大豆害虫点蜂缘蝽研究进展J.中国油料作物学报,2019,41(5):804-815.4 LEE H S,CHUNG B K,KIM T S,et al.Damage of sweetpersimmon fruit by the inoculation date and number of stinkbugs,Riptortus clavatus,Halyomorpha halys and PlautiastaliJ.Korean Journal of Applied Entomology,2009,48(4):485-491.5 CHOI D S,KIM K C,LIM 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收录期刊、美国乌利希期刊指南收录期刊、中国核心期刊（遴选）数据库收录期刊、中国学术期刊综合评价数据统计源期刊、全国优秀农业期刊。开设栏目：植物生理与生物技术、作物栽培与设施园艺、土壤肥料与节水灌溉、畜牧兽医与水产养殖、园林绿化、贮藏加工、农业经济与信息技术、农业环境保护、三农问题研究、农业区划等。来稿注意事项:（1）来稿请提供作者真实姓名及联系地址、邮编、电话号码和 E-mail，同时注明第一作者简历（包括出生年、性别、籍贯、学历、职称和主要从事的研究）及基金资助项目的名称和编号。（2）来稿请附中英文文题、摘要、关键词（3耀8个）以及图题、表题。摘要内容应包括研究目的、方法、结果、结论，300 字左右。文中引用他人文献，请在文后顺序列出，并在文中相应位置用方括号标出。（3）投稿方式本刊只接受在线投稿，网址：http:/。请勿一稿多投，一经录用无法撤稿。地址：天津市南开区白堤路 268 号农科大厦2007 室电话：[phone]邮箱：郭江龙等：点蜂缘蝽试验种群的室内饲养技术115