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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,萧县郝集中学,本资料仅供参考，不能作为科学依据。谢谢。本资料仅供参考，不能作为科学依据。本资料仅供参考，不能作为科学依据。谢谢。本资料仅供参考，不能作为科学依据。,1/19,课题目标,说明植物组织培养基本原理。,学习植物组织培养基本技术，进行菊花或其它植物组织培养。,课题重点与难点,课题重点：植物组织培养过程中使用无菌技术。,课题难点：植物组织培养过程中使用无菌技术。,2/19,快速繁殖。,生产药品、食品添加剂、香料、色素、和杀虫剂等。比如：紫杉醇，生物碱、紫草素等。,转基因植物培育。,培养无病毒植株。,一、植物组织培养意义：,3/19,二、细胞分化与全能性,细胞分化：个体发育中，细胞在形态、结构和生理功效上出现,稳定性,差异过程。,细胞全能性：含有某种生物全套,遗传信息,任何一个活细胞，都含有发育成,完整个体,能力，即每个生物细胞都含有,全能性,。,4/19,1、植物学家将胡萝卜韧皮部细胞分离出来，将单个细胞放在特定培养基中培养，取得了许多完整植株，这些植株特点是(),.彼此性状极为相同.都是单倍体植株,.植株变异频率较高.都是纯合体植株,2、依据分裂潜能，干细胞可分为全能干细胞（可发育成完整个体）、多能干细胞（可发育成各种组织和器官）和专能干细胞（发育成专门组织和器官），则这些细胞在个体发育中分化次序是(),.全能专能多能 .全能多能专能,.多能全能专能 .专能全能多能,练 习：,5/19,三、植物组织培养基本过程,6/19,什么叫脱（去）分化、再分化？,愈伤组织细胞有什么特点？,怎样控制细胞脱分化与去分化？,思索题：,7/19,四、影响植物组织培养原因：,1、外植体选取,不一样植物组织培养难度不一样,同一个植物不一样组织培养难度不一样,2、培养基配制(MS培养基),大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S,微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co,有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等,植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等,8/19,3、不一样植物激素使用次序和使用量,使用次序,试验结果,先生长素，,后细胞分裂素,有利于分裂但不分化,先细胞分裂素，,后生长素,细胞既分裂也分化,同时使用,分化频率提升,生长素细胞分裂素比值,结果,比值高时,促根分化，,抑芽形成,比值低时,促芽分化，,抑根形成,比值适中,促进愈伤组织生长,9/19,3、不一样植物激素使用次序和使用量,生长素细胞分裂素比值,结果,比值高时,促根分化，,抑芽形成,比值低时,促芽分化，,抑根形成,比值适中,促进愈伤组织生长,10/19,4、消毒,在培养整个过程中，都需要是一个无菌环境原因：,5、pH、温度、光照,菊花：pH=5.8 温度控制在1822 每日光照12h,11/19,制备MS固体培养基,外植体消毒,接种,培 养,栽 培,四、试验操作,移 栽,冲洗酒精无菌水冲洗氯化汞无菌水冲洗最少三次之上,12/19,此时组织或细胞为离体，即细胞所生活环境为液体有机物营养环境，而不是能表达其整个植物体光能自养,在培养过程中，是脱分化、再分化过程，伴随芽和根形成，就含有了自养能力，是由细胞到一个个体演变过程,1、高等植物是光能自养型生物，为何在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基？,2、培养过程中为何需要进行光照,思 考,？,13/19,1、培养基灭菌（高压蒸汽灭菌）,2、外植体消毒（酒精、氯化汞）,3、接种无菌操作（酒精、酒精灯灼烧）,4、无菌箱中培养；,5、移栽到消过毒环境中生存一段时间。,3、在整个操作过程中，是怎样来实现无菌环境？,14/19,结果分析与评价,（一）对接种操作中污染情况分析,（二）是否完成了对植物组织脱分化和再分化,（三）是否进行了统计、对照与统计,（四）生根苗移栽是否合格,15/19,课题延伸（略）,练习,1.答：植物组织培养所利用植物材料体积小、抗性差，对培养条件要求较高。用于植物组织培养培养基一样适合于一些微生物生长，如一些细菌、真菌等生长。而培养物一旦受到微生物污染，就会造成试验前功尽弃，所以要进行严格无菌操作。,2.答：外植体生理状态是成功进行组织培养主要条件之一。生长旺盛嫩枝生理情况好，轻易诱导脱分化和再分化。,16/19,方法：酶解法,在温和条件下，用纤维素酶、果胶酶分解,物理法：离心、振动、电刺激等,化学法：用聚乙二醇（PEG）等试剂作为诱导剂,包含膜融合和核融合,形成各种杂种细胞,AA、AB、BB等,植物组织培养过程,17/19,右图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答：（1）步骤是,，最惯用方法是,。（2）步骤普通惯用化学试剂是,，目标是,。,(3)在利用杂种细胞培育成为杂种植株过程中，利用技术伎俩是,，其中步骤相当于,，步骤相当于,。,（4）植物体细胞杂交目标是取得新杂种植株。使,能够在新植物体上有所表现，其根本原因是,。,去掉细胞壁，分离原生质体,酶解法,聚乙二醇（PEG）,诱导植物原生质体融合,植物组织培养,脱分化,再分化,远缘杂交亲本,遗传特征,杂种植株取得双亲遗传物质,18/19,（,5,）若远源杂交亲本,A,和,B,都是二倍体，则杂种植株为,倍体。,（,6,）从理论上讲，杂种植株育性,。若利用传统有性杂交方法能否实现？,。,并说明现由,。,所以，这项研究对于培养作物新品种方面重大意义在于,。,（,7,）利用植物体细胞杂交方法培育作物新品种过程中，遗传物质传递是否遵照孟德尔遗传规律？为何？,。,四,可育,不能,因为不一样种生物之间存在生殖隔离,克服远缘杂交不亲和障碍，大大,扩展了可用于杂交亲本组合范围,不遵照。因为在生物进行有性生殖过程中，才遵照,孟德尔遗传规律，而植物体细胞杂交育种过程不属于有性生殖,19/19,
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