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1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,萧县郝集中学,本资料仅供参考,不能作为科学依据。谢谢。本资料仅供参考,不能作为科学依据。本资料仅供参考,不能作为科学依据。谢谢。本资料仅供参考,不能作为科学依据。,1/19,课题目标,说明植物组织培养基本原理。,学习植物组织培养基本技术,进行菊花或其它植物组织培养。,课题重点与难点,课题重点:植物组织培养过程中使用无菌技术。,课题难点:植物组织培养过程中使用无菌技术。,2/19,快速繁殖。,生产药品、食品添加剂、香料、色素、和杀虫剂等。比如:紫杉醇,生物碱、紫草素等。,转基因植物培育。,培养无病毒植株。,一、植

2、物组织培养意义:,3/19,二、细胞分化与全能性,细胞分化:个体发育中,细胞在形态、结构和生理功效上出现,稳定性,差异过程。,细胞全能性:含有某种生物全套,遗传信息,任何一个活细胞,都含有发育成,完整个体,能力,即每个生物细胞都含有,全能性,。,4/19,1、植物学家将胡萝卜韧皮部细胞分离出来,将单个细胞放在特定培养基中培养,取得了许多完整植株,这些植株特点是(),.彼此性状极为相同.都是单倍体植株,.植株变异频率较高.都是纯合体植株,2、依据分裂潜能,干细胞可分为全能干细胞(可发育成完整个体)、多能干细胞(可发育成各种组织和器官)和专能干细胞(发育成专门组织和器官),则这些细胞在个体发育中分

3、化次序是(),.全能专能多能 .全能多能专能,.多能全能专能 .专能全能多能,练 习:,5/19,三、植物组织培养基本过程,6/19,什么叫脱(去)分化、再分化?,愈伤组织细胞有什么特点?,怎样控制细胞脱分化与去分化?,思索题:,7/19,四、影响植物组织培养原因:,1、外植体选取,不一样植物组织培养难度不一样,同一个植物不一样组织培养难度不一样,2、培养基配制(MS培养基),大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S,微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co,有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等,植物激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素等,8/19,3、不一样植物激素使用

4、次序和使用量,使用次序,试验结果,先生长素,,后细胞分裂素,有利于分裂但不分化,先细胞分裂素,,后生长素,细胞既分裂也分化,同时使用,分化频率提升,生长素细胞分裂素比值,结果,比值高时,促根分化,,抑芽形成,比值低时,促芽分化,,抑根形成,比值适中,促进愈伤组织生长,9/19,3、不一样植物激素使用次序和使用量,生长素细胞分裂素比值,结果,比值高时,促根分化,,抑芽形成,比值低时,促芽分化,,抑根形成,比值适中,促进愈伤组织生长,10/19,4、消毒,在培养整个过程中,都需要是一个无菌环境原因:,5、pH、温度、光照,菊花:pH=5.8 温度控制在1822 每日光照12h,11/19,制备MS

5、固体培养基,外植体消毒,接种,培 养,栽 培,四、试验操作,移 栽,冲洗酒精无菌水冲洗氯化汞无菌水冲洗最少三次之上,12/19,此时组织或细胞为离体,即细胞所生活环境为液体有机物营养环境,而不是能表达其整个植物体光能自养,在培养过程中,是脱分化、再分化过程,伴随芽和根形成,就含有了自养能力,是由细胞到一个个体演变过程,1、高等植物是光能自养型生物,为何在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基?,2、培养过程中为何需要进行光照,思 考,?,13/19,1、培养基灭菌(高压蒸汽灭菌),2、外植体消毒(酒精、氯化汞),3、接种无菌操作(酒精、酒精灯灼烧),4、无菌箱中培养;,5、移栽到消过毒环境中

6、生存一段时间。,3、在整个操作过程中,是怎样来实现无菌环境?,14/19,结果分析与评价,(一)对接种操作中污染情况分析,(二)是否完成了对植物组织脱分化和再分化,(三)是否进行了统计、对照与统计,(四)生根苗移栽是否合格,15/19,课题延伸(略),练习,1.答:植物组织培养所利用植物材料体积小、抗性差,对培养条件要求较高。用于植物组织培养培养基一样适合于一些微生物生长,如一些细菌、真菌等生长。而培养物一旦受到微生物污染,就会造成试验前功尽弃,所以要进行严格无菌操作。,2.答:外植体生理状态是成功进行组织培养主要条件之一。生长旺盛嫩枝生理情况好,轻易诱导脱分化和再分化。,16/19,方法:酶

7、解法,在温和条件下,用纤维素酶、果胶酶分解,物理法:离心、振动、电刺激等,化学法:用聚乙二醇(PEG)等试剂作为诱导剂,包含膜融合和核融合,形成各种杂种细胞,AA、AB、BB等,植物组织培养过程,17/19,右图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答:(1)步骤是,,最惯用方法是,。(2)步骤普通惯用化学试剂是,,目标是,。,(3)在利用杂种细胞培育成为杂种植株过程中,利用技术伎俩是,,其中步骤相当于,,步骤相当于,。,(4)植物体细胞杂交目标是取得新杂种植株。使,能够在新植物体上有所表现,其根本原因是,。,去掉细胞壁,分离原生质体,酶解法,聚乙二醇(PEG),诱导植物原生质体融合,植物组织培养

8、脱分化,再分化,远缘杂交亲本,遗传特征,杂种植株取得双亲遗传物质,18/19,(,5,)若远源杂交亲本,A,和,B,都是二倍体,则杂种植株为,倍体。,(,6,)从理论上讲,杂种植株育性,。若利用传统有性杂交方法能否实现?,。,并说明现由,。,所以,这项研究对于培养作物新品种方面重大意义在于,。,(,7,)利用植物体细胞杂交方法培育作物新品种过程中,遗传物质传递是否遵照孟德尔遗传规律?为何?,。,四,可育,不能,因为不一样种生物之间存在生殖隔离,克服远缘杂交不亲和障碍,大大,扩展了可用于杂交亲本组合范围,不遵照。因为在生物进行有性生殖过程中,才遵照,孟德尔遗传规律,而植物体细胞杂交育种过程不属于有性生殖,19/19,

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