艾塞那肽减轻卡那霉素加呋塞米诱导的小鼠螺旋神经元损伤.pdf

实验研究国家自然科学基金青年科学基金项目()、重庆市技术创新与应用发展专项重点项目(C S T C j s c x g k s b N )重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科(重庆 )作者简介:邬红霞,女,重庆人,硕士研究生,主治医师,主要研究方向为耳科学.通讯作者:陈弢(E m a i l:c h e n t a o c q m u c o m);康厚墉(E m a i l:k a n g h o u y o n g s o h u c o m)艾塞那肽减轻卡那霉素加呋塞米诱导的小鼠螺旋神经元损伤邬红霞欧阳曦范肖霞戴光炆赵旭旭陈弢康厚墉【摘要】目的探讨高血糖素样肽 受体(g l u c a g o nl i k ep e p t i d e r e c e p t o r,G L P R)激动剂艾塞那肽(e x e n d i n )对卡那霉素加呋塞米诱导的小鼠螺旋神经元(s p i r a lg a n g l i o nn e u r o n s,S GN s)损伤的作用.方法原代培养的小鼠S G N s进行免疫荧光染色、小鼠耳蜗切片免疫组化染色,验证G L P R在S G N s上的表达.将 只C B L/J小鼠分成组,每组 只,卡那霉素加呋塞米组一次 性腹 腔注 射硫 酸 卡那 霉素g/k g及呋 塞米 g/k g;艾塞那肽组卡那霉素和呋塞米注射前d开始腹腔注射艾塞那肽 g/k g,每天次,直到卡那霉素和呋塞米给药后第d;对照组腹腔注射等量生理盐水.分组处理后,使用HE染色观察S GN损伤情况并计数骨螺旋板里S G N s数量;采 用W e s t e r nb l o t技术 检测 各 组耳 蜗组 织G L P R及 凋 亡 相 关 蛋 白B a x、B c l 、C l e a v e d c a s p a s e 的表达.结果免疫荧光及免疫组化染色结果显示,G L P R表达于S GN s.HE染色显示,与对照组比较,卡那霉素加呋塞米组S GN s数量下降,艾塞那肽组S G N s数量有所恢复(P );W e s t e r nb l o t结果显示,卡那霉素加呋塞米组G L P R蛋白表达下降,促凋亡蛋白C l e a v e d c a s p a s e 、B a x蛋白水平升高,抗凋亡蛋白B c l 表达水平下降;艾塞那肽组G L P R蛋白表达较卡那霉素加呋塞米组升高,C l e a v e d c a s p a s e 、B a x表达降低,B c l 表达升高(P ).结论G L P R激动剂艾塞那肽可能通过减轻细胞凋亡,拮抗卡那霉素加呋塞米诱导的小鼠S G N s损伤.【关键词】高血糖素样肽 受体;艾塞那肽;小鼠;螺旋神经元D O I:/j i s s n 网络出版时间:/:网络出版地址:h t t p s:/l i n k c n k i n e t/u r l i d/R 【中图分类号】R 【文献标识码】A【文章编号】()E x e n d i n A l l e v i a t e sS p i r a lN e u r o n I n j u r y I n d u c e db yK a n a m y c i na n dF u r o s e m i d e i nM i c eW uH o n g x i a,O u y a n gX i,F a nX i a o x i a,D a iG u a n g w e n,Z h a oX u x u,C h e nT a o,K a n gH o u y o n g(D e p a r t m e n t o fO t o r h i n o l a r y n g o l o g y,t h eF i r s tA f f i l i a t e dH o s p i t a l o fC h o n g q i n gM e d i c a lU n i v e r s i t y,C h o n g q i n g,C h i n a)【A b s t r a c t】O b j e c t i v eT oi n v e s t i g a t et h ee f f e c to fe x e n d i n ,ag l u c a g o n l i k ep e p t i d e r e c e p t o ra g o n i s t,o ns p i r a l g a n g l i o nn e u r o n s(S GN s)i n j u r y i n d u c e db yk a n a m y c i na n df u r o s e m i d e i nm i c e M e t h o d s T h ee x p r e s s i o no fG L P Ro nS G N sw a sv e r i f i e db yi mm u n o f l u o r e s c e n c es t a i n i n go fp r i m a r yc u l t u r em o u s eS G N sa n di mm u n o h i s t o c h e m i c a l s t a i n i n go fm o u s ec o c h l e as e c t i o n s T h i r t yC B L/Jm i c ew e r ed i v i d e di n t ot h r e eg r o u p sw i t h m i c e i ne a c hg r o u p K a n a m y c i na n df u r o s e m i d eg r o u pw a sg i v e nk a n a m y c i ns u l f a t eg/k ga n df u r o s e m i d e g/k g i n t r a p e r i t o n e a l l y E x e n d i n g r o u pw a s i n j e c t e dw i t he x e n d i n g/k gi n t r a p e r i t o n e a l l yd a y sb e f o r ek a n a m y c i na n df u r o s e m i d e i n j e c t i o n,a n dc o n t i n u e di n j e c t i o nu n t i ld a y so fk a n a m y c i na n df u r o s e m i d ew e r eg i v e n T h ec o n t r o lg r o u pw a sg i v e n i n t r a p e r i t o n e a l i n j e c t i o no f t h es a m ea m o u n to fn o r m a l s a l i n e A f t e rg r o u pt r e a t m e n t,HEs t a i n i n gw a su s e dt oc o u n t t h en u m b e ro fS GN s i nt h es p i r a lp l a t e s T h ee x p r e s s i o n so fG L P Ra n da p o p t o s i s r e l a t e dp r o t e i n sB a x,B c l ,C l e a v e dc a s p a s e w e r ed e t e c t e db yW e s t e r nb l o t R e s u l t s I mm u n o f l u o r e s c e n c e a n d i mm u n o h i s t o c h e m i s t r ys h o w e dt h a tG L P Rw a s e x p r e s s e d i nS G N s HEs t a i n i n gs h o w e d t h a t t h eS G N sd e n s i t yd e c r e a s e d i nk a n a m y c i na n df u r o s e m i d e t r e a t m e n tg r o u p,b u t r e c o v e r e d i ne x e n d i n t r e a t m e n tg r o u p(P )W e s t e r nb l o t r e s u l t ss h o w e d t h a t t h e e x p r e s s i o no fG L P R,c l e a v e d c a s p a s e a n dB a xw e r e i n c r e a s e d i n t h ek a n a m y c i na n d f u r o s e 听力学及言语疾病杂志 年第 卷第期J o u r n a l o fA u d i o l o g ya n dS p e e c hP a t h o l o g y V o l N o m i d eg r o u p,B c l e x p r e s s i o nw a sd e c r e a s e d,a n dt h e s er e s u l t sw e r ep a r t i a l l yr e v e r s e di nt h ee x e n d i n t r e a t m e n tg r o u p,c o m p a r e dw i t ht h ek a n a m y c i ng r o u p(P )C o n c l u s i o nG L P Ra g o n i s te x e n d i n m a ya n t a g o n i z et h eS GN s i n j u r y i n d u c e db yk a n a m y c i na n df u r o s e m i d e i nm i c eb ya l l e v i a t i n ga p o p t o s i s【K e yw o r d s】G l u c a g o nl i k ep e p t i d e r e c e p t o r;E x e n d i n ;M o u s e;S p i r a l g a n g l i o nn e u r o n s螺旋神经元(s p i r a l g a n g l i o nn e u r o n s,S GN s)是内耳听觉神经元,将毛细胞传递的声音信号传导到脑干中的耳蜗核.人工耳蜗需要一定数量的S GN s才能发挥作用,因此预防或减轻感觉上皮细胞丢失后耳蜗神经纤维和S GN s的损伤是至关重要的.既往研究表明,使用渗透泵将外源性神经营养因子直接 输 送 到 耳 蜗,可 以 改 善 因 各 种 损 伤 引 起 的S GN s存活率;过表达凋亡抑制基因X I A P可以延缓小鼠耳聋的发展和减轻S GN s的损失.这些方法有助于保存S GN s,但还需要进一步的证据来证明其有效性、特异性和安全性,仍然需要寻找理想的方法来防止耳聋后S GN s的变性退化.因此,探索防止S GN s损伤、促进S GN s修复的有效药物可以为听力损失提供新的治疗和预防策略.高血糖素样肽 受体(g l u c a g o nl i k ep e p t i d e r e c e p t o r,G L P R)广泛表达于肺、胰腺、胃、肾、下丘脑和心脏等组织.艾塞那肽(e x e n d i n )是一种 个氨基酸组成的多肽,它是一种G L P R激动剂,目前广泛用于型糖尿病的临床治疗.越来越多的研究表明,艾塞那肽除了具有降糖作用外,还可能具有神经保护作用.艾塞那肽可以减轻红藻氨酸诱导的小鼠海马神经元死亡,减轻缺血缺氧性脑病的小鼠模型的脑组织损伤,在帕金森病等神经退行性疾病中具有神经保护作用.然而G L P R是否在内耳神经细胞中表达,G L P R激动剂艾塞那肽对内耳神经细胞是否有作用尚无相关研究.因此,本研究使用常见的耳毒性药物卡那霉素加呋塞米诱导小鼠螺旋神经元损伤,探讨艾塞那肽对螺旋神经元损伤的作用.材料与方法 实验动物及分组实验动物C B L/J小鼠 只(周龄,雄性)购于重庆医科大学实验动物中心.所有的动物都没有耳毒性药物损伤或噪声暴露史,都被安置在标准的实验室条件下.将小鼠随机分为组,每组 只:卡那霉素加呋塞米组小鼠一次性腹腔注射硫酸卡那霉素g/k g,m i n后予以呋塞米 g/k g腹腔注射;艾塞那肽组在卡那霉素和呋塞米注射前d开始给与腹腔注射艾塞那肽 g/k g,每天次,直到给卡那霉素和呋塞米后第d,在给药后 天处死小鼠并进行下一步处理.空白对照组腹腔注射等量生理盐水.所有动物护理和实验方案均经重庆医科大学伦理委员会批准(伦理审批号:K ).主要试剂硫酸卡那霉素购自北京酷来搏科技有限公司;艾塞那肽(e x e n d i n )购自美国MC E公司;呋塞米购自阿拉丁控股集团有限公司;G L P R抗体购自美国A b c a m公司;N e u r o f i l a m e n t H抗体购自美国C S T公司;HR P标记山羊抗鼠二抗、HR P标记山羊抗兔二抗购自北京正能生物技术公司;A l e x aF l u o r 标记山羊抗兔二抗、A l e x aF l u o r 标记山羊抗鼠二抗购自北京中杉金桥生物技术有限公司;B C A试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司;胎牛血清购自美国G I B C O公司.实验方法 验证G L P R在S GN s的表达 S GN s的原 代培 养生 后d的C B L/J小鼠用 的乙醇消毒处理后,从枕骨大孔根部处死小鼠,沿头颅矢状缝剪开,去除大脑组织.随后显微镜下在预先冷却的磷酸盐缓冲溶液(P B S)中进行以下步骤:挑开听泡,取出内耳,分离出蜗 轴,在 下 用 胰 酶 消 化 m i n,r p m/m i n离心m i n后,将细胞悬液放入包被聚 L 赖氨酸的 mm细胞培养板中.细胞在添加 胎牛血清、青霉素的DMEM/F 培养液中维持,并将其置于、C O和 空气中的培养箱中.免疫荧光染色S GN s原代培养d后,接种至 孔 板 中 继 续 培 养d,接 种 密 度 约 为.用磷酸盐缓冲液(P B S)清洗细胞次,在室温下用多聚甲醛固定 m i n.用 T r i t o nX 处理 m i n,然后用 正常山羊血清封闭 m i n.细胞与G L P R抗体()、N e u r o f i l a m e n t H抗体()在孵育过夜.对照组使用P B S代替一抗.用P B S洗涤三次后,用A l e x aF l u o r 标记山羊抗兔I g G二抗()、A l e x aF l u o r 标记山羊抗鼠I g G二抗()室温下孵育h.用含D A P I抗荧光淬灭封片液封片后,使用Z E I S S荧光显微镜观察G L P R在S GN的表达.小鼠耳蜗切片及免疫组化染色使用成年的C B L/J小鼠只,使用戊巴比妥麻醉后处死,取下颞骨组织,使用E D T A脱钙液脱钙d后,听力学及言语疾病杂志 年第 卷第期J o u r n a l o fA u d i o l o g ya n dS p e e c hP a t h o l o g y V o l N o 用石蜡包埋组织后切片.切片放置在 烤箱h后,在二甲苯溶液中浸泡两次,每次 m i n,依次在 乙醇、乙醇、乙醇、乙醇中浸泡m i n.滴加过氧化氢孵育 m i n.使用 正常山羊血清封闭 m i n.滴加G L P R(稀释)一抗,在孵育过夜.用P B S洗涤切片三次后,用HR P标记的山羊抗兔二抗(稀释)在室温下孵育h.用苏木素复染m i n,盐酸酒精分化s,氨水反蓝m i n,依次在、酒精中浸泡m i n,在二甲苯溶液中浸泡两次,每次 m i n,使用中性树脂封片液封片.使用Z E I S S显微镜经行观察G L P R在S GN的表达并拍照.小鼠耳蜗切片及HE染色三组实验小鼠使用戊巴比妥麻醉后处死,取下颞骨组织,使用E D T A脱钙液脱钙d后,用石蜡包埋组织后切片.切片放置在 烤箱h后,在二甲苯溶液中浸泡两次,每次 m i n,依次在 乙醇、乙醇、乙醇、乙醇中浸泡m i n.苏木素染色m i n,P B S洗涤次,使用盐酸酒精分化s,P B S洗涤后,使用氨水反蓝m i n.P B S洗涤后,酒精浸泡m i n,伊红染色m i n.依次在 酒精、酒精、酒精中浸泡m i n,在二甲苯溶液中浸泡两次,每次 m i n,使 用 中 性 树 脂 封 片 液 封 片.使 用Z E I S S显微镜经行观察各组S GN的形态变化并拍照.对耳蜗切片中回S GN s进行计数,随机选取个相同大小区域计算S GN s平均数量.免疫印迹实验(W e s t e r nb l o t)耳蜗组织蛋白提取:将耳蜗置于P B S中漂洗两次,弃去P B S后加入裂解液将其置于冷冻高速研磨机中研磨,使用配好的R I P APM S F溶液在冰上裂解 m i n,每 m i n混匀一次,r p m/m i n,离心 m i n,取上清,使用B C A试剂盒检测蛋白质浓度.加入上样缓冲液后,煮 m i n,冷却后冻存备用.免疫印迹实验:取蛋白样品进行电泳,电泳结束后将分离好的蛋白条带转移至N C膜.用快速封闭液室温封闭 m i n,然后加入一抗在摇床过夜.第日使用T B S T缓冲液漂洗蛋白条带,加入二抗,室温孵育h,T B S T漂洗后,用E C L试剂盒显像,采集图像后,I m a g e J软件分析各组G L P R及凋亡相关蛋白C l e a v e d c a s p a s e 、B a x及B c l 的表达灰度值,使用 a c t i n作为内参蛋白.统 计 学 方 法数 据 采 用 单 因 素 方 差 分 析(ANOVA),使用I m a g e J软件分析进行灰度值分析,使用用S P S S 软件包进行统计计算.P 为差异有统计学意义.结果 G L P R在S GN s的表达免 疫荧光检测S GN s是否表达G L P R,结果显示,D A P I标记的细胞核在紫外光下呈现蓝色,N e u r o f i l a m e n t H标记的S GN s在蓝光下呈现绿色.表达G L P R的细胞在绿光下呈现红色荧光.在同一视野下,分别用绿光、蓝光、紫外光激发后,可见G L P R表达于S GN s(图).小鼠耳蜗切片免疫组化染色观察,进一步验证了G L P R在S GN s上的表达(图).艾塞那肽对S GN s损伤的保护作用各组小鼠耳蜗石蜡切片HE染色可见:对照组S GN s排列紧密,卡那霉素加呋塞米组S GN s细胞密度下降,细胞质肿胀,部分细胞边界不清,艾塞那肽组S GN s细胞密度有所恢复(图).对照组、卡那霉素加呋噻米组、艾塞那肽组S GN s计数分别为 、个,与对照组相比,卡那霉素加呋塞米组耳蜗S GN s数量下降(P ),艾塞那肽组S GN s细胞数量有所恢复(P ).各组耳蜗组织的W e s t e r nb l o t结果与对照组相比较,卡那霉素加呋塞米组G L P R蛋白表达降低,促凋亡蛋白C l e a v e d c a s p a s e 、B a x蛋白水平升高,抗凋亡蛋白B c l 表达水平下降;艾塞那肽组G L P R蛋白 表达较卡 那 霉 素 加 呋 塞 米 组 升 高,C l e a v e d c a s p a s e 、B a x表达降低,B c l 表达升高(图、表).表各组耳蜗组织中G L P R、C l e a v e d c a s p a s e 、B a x、B c l 与 a c t i n蛋白灰度值比值比较(xs)组别C l e a v e d c a s p a s e B a xB c l G L P R对照组 卡那霉素加呋噻米组 艾塞那肽组 注:与对照组比较,P ;与卡那霉素加呋塞米组比较,P 讨论袢利尿剂呋塞米可以造成蜗管外壁血管纹缺血缺氧,导致内耳血迷路屏障破坏,同时使用卡那霉素可以使药物经暂时开放的蜗管外壁进入耳蜗淋巴液,导致内 耳毛细胞和耳 蜗支持细胞 损害,引起S GN s及其神经纤维的退行性改变.单次大剂量注射卡那霉素(g/k g)和呋塞米(g/k g),可以通过破坏耳蜗感觉上皮细胞诱导小鼠S GN s变性死亡,.故本研究使用卡那霉素加呋塞米造成小鼠S GN s的损伤.结果,小鼠耳蜗切片显示经过卡那霉素加呋塞米处理的小鼠骨螺旋板内S GN s变性、数量减少;而使用艾塞那肽处理的小鼠骨螺旋板内S GN s变性减轻、数量有所增加.但并不清楚艾塞那肽是减轻了S GN s的损伤,还是促进了S GN s损听力学及言语疾病杂志 年第 卷第期J o u r n a l o fA u d i o l o g ya n dS p e e c hP a t h o l o g y V o l N o 图免疫荧光染色证明S GN s表达G L P Ra 细胞核被D A P I染色;b N e u r o f i l a m e n t H标记的S GN s;c G L P R阳性显示为红色荧光;d 图a、c合并的同一视野.比例尺:m图小鼠耳蜗石蜡切片免疫组化染色证明S GN s表达G L P Ra 耳蜗切片HE染色;b 骨螺旋板内的S GN s经a n t i G L P R标记为阳性;c 使用P B S代替一抗的阴性对照组.比例尺:m图艾塞那肽对卡那霉素加呋塞米诱导的S GN s损伤的保护作用a 耳蜗结构,黑色方框“”示骨螺旋板,为图bd的观察区域;b对照组:可见S GN s排列紧密;c 卡那霉素加呋塞米组:S GN s密度下降,细胞质肿胀,部分细胞边界不清;d 艾塞那肽组:S GN s细胞密度有所恢复.b d图内绿色“”表示随机计数S GN s区域.比例尺:m图各组耳蜗组织G L P R、C l e a v e d c a s p a s e ,B a x以及B c l 蛋白表达a 与对照组相比,卡那霉素加呋塞米组G L P R表达水平下降,艾塞那肽组G L P R表达水平较卡那霉素加呋塞米组升高;b 与对照组相比,卡那霉素加呋塞米组C l e a v e d c a s p a s e 、B a x蛋白水平升高,B c l 表达水平下降,艾塞那肽组C l e a v e d c a s p a s e 、B a x表达较卡那霉素加呋塞米组降低,B c l 表达升高伤后的修复.研究表明,艾塞那肽能改善缺血再灌注的视网膜微血管内皮功能,能保护血脑屏障并减少脑缺血引起的脑部炎症.由于G L P R表达的广泛性,尽管本文未研究G L P R在内耳血管的表达情况,推测艾塞那肽可能通过减轻血管纹的损伤而降低卡那霉素对内耳细胞的伤害.G L P R是G L P 及其类似物在体内作用的主要靶点,G L P R是一种次跨膜的G蛋白偶联受体,G L P 及 其 类 似 物 与G L P R结 合 导 致G L P R构象转换,从而导致一系列转导因子和下游信号的相互作用.艾塞那肽作为G L P 的类似物,是G L P R完全激动剂,其与G L P R亲和力强且 不 易 被 内 源 性G L P 降 解 酶D P P 酶 降解.本研究中免疫印迹实验显示卡那霉素加呋塞米组小鼠耳蜗组织G L P R蛋白表达降低,而使用艾塞那肽干预后G L P R蛋白表达有所提升.艾塞那 肽 通 过 介 导G L P R构 象 的 改 变 而 产 生 作用,本研究中G L P R表达的变化,可能是由于艾塞那肽减轻 了内耳细胞 损 伤 的 同 时 减 少 了G L P R的丢失.听力学及言语疾病杂志 年第 卷第期J o u r n a l o fA u d i o l o g ya n dS p e e c hP a t h o l o g y V o l N o 研究报道卡那霉素会诱导S GN s的凋亡,而艾塞那肽可以通过降低B a x/B c l 比值和抑制细胞色素C的释放来抑制海马神经元的凋亡,因此,本研究检测了凋亡相关蛋白在各组耳蜗组织中的表达变化.免疫印迹实验结果显示,卡那霉素加呋塞米组小鼠耳蜗组织促凋亡蛋白C l e a v e d c a s p a s e 、B a x表达升高,抑凋亡蛋白B c l 表达降低;而使用艾塞那肽干预后部分逆转了这种结果,提示艾塞那肽可能减轻卡那霉素加呋塞米诱导的S GN s损伤,其机制可能与艾塞那肽减轻了S GN s凋亡有关.综上所述,本研究表明,G L P R在S GN s有表达,G L P R激动剂艾塞那肽可能通过减轻细胞凋亡,拮抗卡那霉素加呋塞米诱导的螺旋神经元损伤.因此,G L P R激动剂有望成为听神经保护的药物,为耳聋的防治提供新的研究方向.然而本研究尚有不足之处:首先,尽管目前已证实艾塞那肽是不同细胞类型G L P R的有效激动剂,若能加上G L P R拮抗剂处理或者敲除G L P R基因,实验结果将更有说服力;其次,艾塞那肽是通过何种途径起作用,以及其对下游通路如何调控,有待进一步研究.参考文献 G u oR,L i a oM,M aX,e ta l C o c h l e a r i m p l a n t b a s e de l e c t r i c a c o u s t i cs t i m u l a t i o n m o d u l a t e sn e u r a ls t e m c e l l d e r i v e dn e u r a l r e g e n e r a t i o nJ JM a t e rC h e mB,():M aY,W i s eAK,S h e p h e r dR K,e t a l N e wm o l e c u l a r t h e r a p i e s f o rt h et r e a t m e n to fh e a r i n gl o s sJP h a r m a c o lT h e r,():R u a nQ,Z e n gS,L i uA,e ta l O v e r e x p r e s s i o no fX l i n k e di n h i b i t o ro fa p o p t o t i cp r o t e i n(X I A P)r e d u c e sa g e r e l a t e dn e u r o n a l d e g e n e r a t i o n i nt h em o u s ec o c h l e aJG e n eT h e r,():C a n t i n iG,M a n n u c c i E,L u c o n iM P e r s p e c t i v e s i nG L P r e s e a r c h:n e wt a r g e t s,n e wr e c e p t o r sJT r e n d sE n d o c r i n o lM e t a b,():A h nY J,S h i nH J,J e o n gE A,e ta l E x e n d i n p r e t r e a t m e n ta t t e n u a t e sk a i n i ca c i d i n d u c e d h i p p o c a m p a ln e u r o n a ld e a t hJ C e l l s,():R o c h a F e r r e i r aE,P o u p o nL,Z e l c oA,e ta l N e u r o p r o t e c t i v ee x e n d i n e n h a n c e sh y p o t h e r m i at h e r a p yi nam o d e lo fh y p o x i c i s c h a e m i ce n c e p h a l o p a t h yJ B r a i n,():M u l v a n e yC A,D u a r t eG S,H a n d l e yJ,e t a l G L P r e c e p t o ra g o n i s t s f o rP a r k i n s o n sd i s e a s eJ C o c h r a n eD a t a b a s eS y s tR e v,():高可雷,丁大连,李鹏,等氨基糖苷类抗生素对耳蜗螺旋神经节的损害作用J中华耳科学杂志,():Y eB,W a n gQ,H uH,e ta l R e s t o r i n ga u t o p h a g i c f l u xa t t e n u a t e sc o c h l e a r s p i r a l g a n g l i o nn e u r o nd e g e n e r a t i o nb yp r o m o t i n gT F E Bn u c l e a r t r a n s l o c a t i o nv i a i n h i b i t i n gMT O RJA u t o p h a g y,():H uH,Y eB,Z h a n gL,e ta l E f r a i n s u f f i c i e n c ya t t e n u a t e st h ed e g e n e r a t i o no f s p i r a l g a n g l i o nn e u r o n s a f t e rh a i r c e l l l o s sJ F r o n tM o lN e u r o s c i,():Z h a iR,X uH,H uF,e ta l E x e n d i n ,aG L P r e c e p t o ra g o n i s t r e g u l a t e s r e t i n a l c a p i l l a r yt o n ea n dr e s t o r e sm i c r o v a s c u l a rp a t e n c ya f t e ri s c h a e m i a r e p e r f u s i o ni n j u r yJB rJP h a r m a c o l,():S h a nY,T a nS,L i nY,e t a l T h e g l u c a g o n l i k ep e p t i d e r e c e p t o ra g o n i s tr e d u c e si n f l a mm a t i o na n db l o o d b r a i nb a r r i e rb r e a k d o w n i na na s t r o c y t e d e p e n d e n tm a n n e r i ne x p e r i m e n t a ls t r o k eJ JN e u r o i n f l a mm a t i o n,():D e g a n u t t iG,L i a n gY L,Z h a n gX,e ta l D y n a m i c so fG L P Rp e p t i d ea g o n i s t e n g a g e m e n t a r e c o r r e l a t e dw i t hk i n e t i c so fGp r o t e i na c t i v a t i o nJN a tC o mm u n,():郭宗儒控制血糖药物利拉鲁肽和艾塞那肽的研发J药学学报,():Z h a oP,T r u o n gT T,M e r l i nJ,e t a l I m p l i c a t i o n so f l i g a n d r e c e p t o rb i n d i n gk i n e t i c so nG L P Rs i g n a l l i n gJB i o c h e mP h a r m a c o l,():L i uY Y,W a n gG P,P e n gZ,e t a l E F C D K p a t h w a ya c t i v a t i o ni nk a n a m y c i n i n d u c e ds p i r a lg a n g l i o nc e l la p o p t o s i sa n dt h ep r o t e c t i v ee f f e c t o fC R J N e u r o s c iL e t t,():(收稿)(本文编辑曹永茂)听力学及言语疾病杂志 年第 卷第期J o u r n a l o fA u d i o l o g ya n dS p e e c hP a t h o l o g y V o l N o