建立21味寒水石散中没食子酸的含量测定方法.doc

建立 21 味寒水石散中没食子酸的含量测定
方法

【关键词】 21 味寒水石散；,,没食子酸；,,含量测定；,,

高效液相色谱法

摘要：目的建立 21 味寒水石散中没食子酸的含量测定方法。

方法采用高效液相色谱（HPLC）法测定 21 味寒水石散中没食子酸的含

量，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇水（5∶95）为流动相，

检测波长为 274 nm。结果线性范围 0.020 6～0.247 2 mg，平均回收

率为 99.1%，RSD=1.3% (n=9)。结论该方法简便、准确，提供了 21 味

寒水石散中没食子酸的质量控制方法。

关键词：21 味寒水石散； 没食子酸； 含量测定； 高效液

相色谱法

21 味寒水石散为一藏药，藏药名为"木布玉杰日布" 。主要

有寒水石（奶制） 、诃子、余甘子、藏木香、木香、木瓜等 21 味药材

组成，具有制酸，止痛之功效。主要用于培根木布引起的呕吐酸水，

胃部刺痛，大便干燥等症［1］ 。没食子酸又称五倍子酸，在藏药材诃

子、毛诃子、余甘子等中含量丰富，其在 21 味寒水石散中的含量测定

未见报道。没食子酸含量测定方法有光谱法［2］ 比色法［3］ 薄层
、 、

色谱(TLC)［4］和 HPLC 法［5］等，本文采用高效液相色谱(HPLC)法，

制定出该制剂中没食子酸的含量测定方法。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent 1100 型高效液相色谱仪，DAD 检测器，

1

Agilent 1100 色谱工作站；Kromasil C18（250 mm×4.6 mm，5 mm，

大连依利特科学仪器有限公司）色谱柱；KQ3200 超声波清洗器（昆山

市超声仪器有限公司） TG328A 电光分析天平（上海天平仪器厂）
； 。

1.2 试药甲醇（色谱纯） 没食子酸对照品（由中国科学院西 ；

北高原生物研究所胡凤祖副研究员提供，经归一化检测，含量大于

99％） 21 味寒水石散（青海藏医院）
； 。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备 精密称取没食子酸对照品适量， 加甲

醇制成 20.6 mg/ml 的对照品溶液。

2.2 供试品溶液的制备精密称取样品 2.0 g，精密加入甲醇

100 ml，称定重量，超声提取 1 h，放冷，用甲醇补足减失的重量，

过滤，弃去初滤液，续滤液过 0.45 mm 滤膜，即得供试品溶液。

2.3 空白样品溶液的制备将处方中含没食子酸的药材如诃

子、余甘子等去除后，按供试品溶液的制备方法制备。

2.4 色谱条件 色谱柱：Kromasil C18 柱；流动相：甲醇水

（5∶95） 流速：1.0 ml/min；检测波长：274 nm；柱温：30℃；进 ；

样量：5 ml。在此条件下，没食子酸与其它峰分离效果较好，样品与

对照品在同一保留时间有相同的波峰出现， 而空白溶液则无相应的峰，

证明空白样品不干扰，含量测定专属。结果见图 1~3。

2.5 线性关系实验精密吸取对照品溶液 1，3，6，10，12，

15，18 ml 进行测定，以峰面积积分值为纵坐标，没食子酸进样量（m

g）为横坐标，回归方程为：Y＝9 219X+6.051，相关系数 r＝0.999 7。

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结果表明，没食子酸在 0.020 6～0.247 2 mg 之间呈良好的线性。

[NextPage]

2.6 精密度实验取对照品溶液 5 ml，重复进样 6 次，根据

测得的峰面积积分值计算，RSD 为 1.0％。

图 1 对照品 HPLC 色谱图(1.没食子酸) (略)

图 2 样品 HPLC 色谱图(1.没食子酸)(略)

2.7 重复性实验精密称取样品 2.0 g，共 6 份，按 2.2 所述

方法处理，按上述色谱条件进样测定，结果重现性良好，样品中没食

子酸含量的 RSD 为 1.9％。

2.8 稳定性实验 按 2.2 所述方法处理样品 1 份， 按上述色谱

条件测定，间隔 2 h/次，结果 12 h 内稳定性良好。

图 3 空白样品 HPLC 色谱图(略)

2.9 回收率实验 取样品约 2.0 g（n=9） ，精密称定，加入一

定量的没食子酸对照品。按 2.2 所述方法处理并依法测定，计算回收

率结果。见表 1。

表 1 回收率实验结果(略)

2.10 样品测定取 3 批成药样品， 2.2 所述方法制备成供试 按

品溶液，按上述色谱条件进行分析，按外标法以峰面积积分值计算，

求得样品中没食子酸的含量（每批样品测 3 次取平均值）分别为

0.074％、0.073％和 0.073％。

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