资源描述
单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,本资料仅供参考，不能作为科学依据。谢谢,专题八 生物技术实践,第1页,微生物利用,(1)微生物分离和培养,(2)某种微生物数量测定,(3)培养基对微生物选择作用,(4)利用微生物发酵来生产特定,产物以及微生物在其,他方面应用,酶应用,(5)酶活力测定普通原理和方法,(6)酶在食品制造和洗涤等方面应用,生物技术在食品加工及其它方面应用,(7)植物组织培养,(8)蛋白质提取和分,离,(9)PCR 技术基本操作和应用,实,验,与,探,究,能,力,第2页,酵母菌,20,醋酸菌,氮源,稀释涂布平板法,二苯胺,第3页,微生物培养与应用,1果酒、果醋、腐乳、泡菜制作过程中所用菌种及控制条,件比较：,比较项目,果酒,果醋,腐乳,泡菜,菌种,酵母菌,醋酸菌,毛霉,乳酸菌,O2有没有,前期：有氧,后期：无氧,有氧,有氧,无氧,最适温度,18,25,30,35,15,18,常温,第4页,2.培养基主要种类：,特点,用途,选择,培养基,培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要微生物生长，促进所需要微生物生长,培养、分离出特定微生物，如：培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度食盐,判别,培养基,依据微生物代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品,判别不一样种类微生物，如可用伊红美蓝培养基判别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽),第5页,3.培养基营养成份：,营养要素,起源,碳源,无机碳源,CO,2,、NaHCO,3,等含碳无机物,有机碳源,糖、脂、蛋白质、有机酸、石油等,氮源,无机氮源,NH,3,、铵盐、硝酸盐、N,2,等,有机氮源,牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸等,生长因子,维生素、氨基酸、碱基等,第6页,4.消毒和灭菌区分：,条件,结果,惯用方法,应用范围,消毒,较为温和物理或化学方法,仅杀死物质表面或内部一部分对人体有害微生物,煮沸消毒法,普通物品,巴氏消毒法,不耐高温液体,化学药剂消毒法,用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源等,灭菌,强烈理化原因,杀死物体内外全部微生物，包含芽孢和孢子,灼烧灭菌,接种工具,干热灭菌法,玻璃器皿、金属工具,高压蒸汽灭菌法,培养基及容器灭菌法,第7页,5.微生物分离和计数：,(1)土壤中分解尿素细菌分离与计数：,筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株(以尿素为唯一氮,源)。,测定微生物数量惯用方法：活菌计数法和显微镜直接,计数法。,过程：土壤取样样品稀释选择培养与观察。,(2)分解纤维素微生物分离：,试验原理：,第8页,即：可经过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。,流程：土壤取样判别培养梯度稀释涂布平板挑,选菌落。,第9页,【典例,1,】,(,年江苏高考改编,双选,),以下关于制作果酒,、,果醋和腐乳叙述中，合理是(,),A在果酒发酵后期拧开瓶盖间隔时间可延长,B条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中糖分解成醋酸,C果酒发酵过程中发酵液密度会逐步变大,D将长满毛霉豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处,需加,大用盐量,第10页,名师点拨,在果酒发酵后期，因为瓶中营养物质降低，,单位时间内产生,CO,2,量降低，所以拧开瓶盖间隔时间可,以延长；在糖源、氧气充分条,件下，醋酸菌可将葡萄汁中,糖分解成醋酸；果酒发酵过程中，营养物质被消耗，而且有水,生成，密度会逐步减小；将长满毛霉豆腐装瓶腌制时，近,瓶口表面盐要铺厚一些，但底层不需要大量用盐，,D,错误。,答案,AB,第11页,【典例,2,】,(,年全国新课标,),关于细菌叙述中，正确,是(,),A不一样种类细菌生长均需要相同碳源,B惯用液体培养基分离取得细菌单菌落,C细菌大量培养过程中，芽孢形成于细菌生长调整期,D培养基中含有高浓度 NaCl 有利于金黄色葡萄球菌筛,选,名师点拨,细菌碳源与其新陈代谢类型相关，,A 错误；,菌落形成需要固体培养基，B 错误；芽孢大量形成于衰亡期，,C,错误；金黄色葡萄球菌能耐高盐，,D,正确。,答案,D,第12页,【典例,3,】,(,年深圳六校联考,),有些细菌可分解原油，,从而消除由原油,泄漏造成土壤污染。某同学欲从污染土壤,中筛选出高效降解原油菌株。回答下列问题：,(1)在 筛 选 过 程 中，应 将土壤样品 稀 释 液 接 种 于以,_为唯一碳源固体培养基上，从功效上讲，,该培养基属于_培养基。,(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采取接种方法有两,种，即_和_。,(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈大,小，分解圈大说明该菌株降解能力_。,第13页,(4)通常情况下，在微生物培养过程中试验室惯用灭菌方,法有灼烧灭菌法、_和_。无菌技术,要求试验操作应在酒精灯_附近进行，以防止周围,环境中微生物,污染。,名师点拨,(1),因为该细菌能,够分解原油，所以应该以原油,为唯一碳源来筛选，这种培养基称为选择培养基。,(2),菌株接种方法，惯用有两种：平板划线法和稀释涂,布平板法。,(3),菌株分解周围营养物质，出现分解圈，分解圈大说明,该菌株降解能力强。,第14页,(4),试验室惯用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸,汽灭菌；微生物培养要求严格无菌技术，操作时在酒精灯,火焰附近进行，在酒精灯火焰处操作可防止杂菌干扰。,选择,稀释涂布平板法,答案,(1)原油,(2)平板划线法,(3)强,(4)干热灭菌法,高压蒸汽灭菌法,火焰,第15页,DNA,和血红蛋白分离与提纯,1提取方法总结：,提取,物质,提取,方法,提取原理,步骤,DNA,盐析法,DNA在不一样浓度NaCl溶液中溶解度不一样(2mol/L NaCl溶液溶解DNA；0.14mol/L NaCl溶液析出DNA),DNA不溶于酒精,选取材料破碎细胞获取含DNA滤液去除滤液中杂质DNA析出与判定,血红,蛋白,凝胶色谱法,依据相对分子质量大小,样品处理粗分离纯化纯度判定,电泳法,依据各种分子带电性质差异及分子本身大小、形状不一样产生不一样迁移速度,第16页,2.DNA 粗提取与判定：,(1)哺乳动物成熟红细胞中不含细胞核，不适于作 DNA,提取材料，但却是提取血红蛋白理想材料。,(2)试验过程中两次用到蒸馏水：,第一次目标：使成熟鸡血细胞涨破释放出 DNA。,第二次目标：稀释 NaCl 溶液。,(3)判定 DNA 方法：加入,二苯胺试剂并沸水浴加热，观,察是否出现蓝色。,第17页,3血红蛋白提取和分离操作程序：,(1)样品处理：红细胞洗涤(除去血浆蛋白等杂质)血红,蛋白释放(蒸馏水和甲苯使红细胞破裂)分离血红蛋白溶液,(离心、分液)。,(2)粗分离透,析：除去样品中分子量较小杂质。,(3)纯化：普通用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离,和纯化。,(4)纯度判定：普通用 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳来测定蛋,白质分子量。,第18页,4PCR 技术扩增 DNA 片段：,(1)过程：,变性：加热至 90 95，DNA 解链。,复性：冷却至 50 55，引物结合到互补 DNA 链。,延伸：加热至 70 75 ，热稳定 DNA 聚合酶从引物,开始互补链合成。,(2)原料与特点：需要耐热(,Taq,)DNA 聚合酶、引物、高温、,DNA 模板、4 种脱氧核苷酸、缓冲溶液，不需要 ATP，可在体,外快速扩增。,第19页,【典例,1,】,(,年深圳三校联考,),在利用鸡血进行“DNA,粗提取与判定”试验中，相关叙述正确是(,),A用蒸馏水将 NaCl 溶液浓度调至 0.14 mol/L，滤去析出,物,B调整 NaCl 溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都能够去除部,分杂质,C将丝状物溶解在 2 mol/L NaCl 溶液中，加入二苯胺试,剂即呈蓝色,D用菜花替换鸡血作为试验材料，其试验操作步骤,相同,第20页,名师点拨,利用,DNA,在不一样浓度,NaCl,溶液中会溶解或,析出特点，能够除去蛋白质等杂质，而选取木瓜蛋白酶，则,可借助酶作用特异性，水解蛋白质，进而除去杂质。当,NaCl,溶液浓度被调至,0.14 mo,l/L,时，,DNA 在其中溶解度最小，会,大量析出，此时应滤取，而不是,滤去析出物，,A,错；,C 项描述,中缺乏加热；可用菜花作材料，但因为菜花是植物材料，需加,上研磨,操作，,D,错误。,答案,B,第21页,【典例,2,】,(,年广东模拟,),以下关于猪血红蛋白提纯,描述，不正确是(,),A洗涤红细胞时，使用生理盐水可预防红细胞破裂,B猪成熟红细胞中缺乏细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白,较少,C血红蛋白颜色可用于凝胶色谱法分离过程监测,D在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小,杂蛋白移动慢,第22页,名师点拨,洗涤目标,是去除杂蛋白以利于后续步骤分,离纯化，加入是生理盐水，红细胞内液与生理盐水是等渗，,所以能够预防细胞破裂。哺乳动物成熟红细胞没有细胞核与,众多细胞器，提纯时杂蛋白较少。血红蛋白是有色蛋白，因,此在凝胶色谱分离时能够经过观察颜色来判断什么时候应该收,集洗脱液，这使得血红蛋白分离过程非常直观，简化了操作。,D,项考查凝胶色谱法分离蛋白质原理，相对分子质量越大,物质经过凝胶色谱柱速度越快，故,D,错误。,答案,D,第23页,
展开阅读全文
浙ICP备2021020529号-1 | 浙B2-20240490 
