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高三生物复习专题八-生物技术实践省名师优质课赛课获奖课件市赛课一等奖课件.ppt

1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,本资料仅供参考,不能作为科学依据。谢谢,专题八 生物技术实践,第1页,微生物利用,(1)微生物分离和培养,(2)某种微生物数量测定,(3)培养基对微生物选择作用,(4)利用微生物发酵来生产特定,产物以及微生物在其,他方面应用,酶应用,(5)酶活力测定普通原理和方法,(6)酶在食品制造和洗涤等方面应用,生物技术在食品加工及其它方面应用,(7)植物组织培养,(8)蛋白质提取和分,离,(9)PCR 技术基本操作和应用,实,验,与,探,究,能,力,第2页,酵母菌,20,醋酸菌,氮源,稀释涂布平板法,二苯胺,第3页,

2、微生物培养与应用,1果酒、果醋、腐乳、泡菜制作过程中所用菌种及控制条,件比较:,比较项目,果酒,果醋,腐乳,泡菜,菌种,酵母菌,醋酸菌,毛霉,乳酸菌,O2有没有,前期:有氧,后期:无氧,有氧,有氧,无氧,最适温度,18,25,30,35,15,18,常温,第4页,2.培养基主要种类:,特点,用途,选择,培养基,培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要微生物生长,促进所需要微生物生长,培养、分离出特定微生物,如:培养酵母菌和霉菌,可在培养基中加入青霉素;培养金黄色葡萄球菌,可在培养基中加入高浓度食盐,判别,培养基,依据微生物代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品,判别不一样种类微生物,如可用

3、伊红美蓝培养基判别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有,菌落呈深紫色,并带有金属光泽),第5页,3.培养基营养成份:,营养要素,起源,碳源,无机碳源,CO,2,、NaHCO,3,等含碳无机物,有机碳源,糖、脂、蛋白质、有机酸、石油等,氮源,无机氮源,NH,3,、铵盐、硝酸盐、N,2,等,有机氮源,牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸等,生长因子,维生素、氨基酸、碱基等,第6页,4.消毒和灭菌区分:,条件,结果,惯用方法,应用范围,消毒,较为温和物理或化学方法,仅杀死物质表面或内部一部分对人体有害微生物,煮沸消毒法,普通物品,巴氏消毒法,不耐高温液体,化学药剂消毒法,用酒精擦拭双手,用氯气消毒水源

4、等,灭菌,强烈理化原因,杀死物体内外全部微生物,包含芽孢和孢子,灼烧灭菌,接种工具,干热灭菌法,玻璃器皿、金属工具,高压蒸汽灭菌法,培养基及容器灭菌法,第7页,5.微生物分离和计数:,(1)土壤中分解尿素细菌分离与计数:,筛选菌株:利用选择培养基筛选菌株(以尿素为唯一氮,源)。,测定微生物数量惯用方法:活菌计数法和显微镜直接,计数法。,过程:土壤取样样品稀释选择培养与观察。,(2)分解纤维素微生物分离:,试验原理:,第8页,即:可经过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。,流程:土壤取样判别培养梯度稀释涂布平板挑,选菌落。,第9页,【典例,1,】,(,年江苏高考改编,双选,),以下关于制作果酒,、

5、果醋和腐乳叙述中,合理是(,),A在果酒发酵后期拧开瓶盖间隔时间可延长,B条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中糖分解成醋酸,C果酒发酵过程中发酵液密度会逐步变大,D将长满毛霉豆腐装瓶腌制时,底层和近瓶口处,需加,大用盐量,第10页,名师点拨,在果酒发酵后期,因为瓶中营养物质降低,,单位时间内产生,CO,2,量降低,所以拧开瓶盖间隔时间可,以延长;在糖源、氧气充分条,件下,醋酸菌可将葡萄汁中,糖分解成醋酸;果酒发酵过程中,营养物质被消耗,而且有水,生成,密度会逐步减小;将长满毛霉豆腐装瓶腌制时,近,瓶口表面盐要铺厚一些,但底层不需要大量用盐,,D,错误。,答案,AB,第11页,【典例,2,】,(,年全

6、国新课标,),关于细菌叙述中,正确,是(,),A不一样种类细菌生长均需要相同碳源,B惯用液体培养基分离取得细菌单菌落,C细菌大量培养过程中,芽孢形成于细菌生长调整期,D培养基中含有高浓度 NaCl 有利于金黄色葡萄球菌筛,选,名师点拨,细菌碳源与其新陈代谢类型相关,,A 错误;,菌落形成需要固体培养基,B 错误;芽孢大量形成于衰亡期,,C,错误;金黄色葡萄球菌能耐高盐,,D,正确。,答案,D,第12页,【典例,3,】,(,年深圳六校联考,),有些细菌可分解原油,,从而消除由原油,泄漏造成土壤污染。某同学欲从污染土壤,中筛选出高效降解原油菌株。回答下列问题:,(1)在 筛 选 过 程 中,应 将

7、土壤样品 稀 释 液 接 种 于以,_为唯一碳源固体培养基上,从功效上讲,,该培养基属于_培养基。,(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采取接种方法有两,种,即_和_。,(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈大,小,分解圈大说明该菌株降解能力_。,第13页,(4)通常情况下,在微生物培养过程中试验室惯用灭菌方,法有灼烧灭菌法、_和_。无菌技术,要求试验操作应在酒精灯_附近进行,以防止周围,环境中微生物,污染。,名师点拨,(1),因为该细菌能,够分解原油,所以应该以原油,为唯一碳源来筛选,这种培养基称为选择培养基。,(2),菌株接种方法,惯用有两种:平板划线法和稀释涂,布平板法。,(3

8、),菌株分解周围营养物质,出现分解圈,分解圈大说明,该菌株降解能力强。,第14页,(4),试验室惯用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸,汽灭菌;微生物培养要求严格无菌技术,操作时在酒精灯,火焰附近进行,在酒精灯火焰处操作可防止杂菌干扰。,选择,稀释涂布平板法,答案,(1)原油,(2)平板划线法,(3)强,(4)干热灭菌法,高压蒸汽灭菌法,火焰,第15页,DNA,和血红蛋白分离与提纯,1提取方法总结:,提取,物质,提取,方法,提取原理,步骤,DNA,盐析法,DNA在不一样浓度NaCl溶液中溶解度不一样(2mol/L NaCl溶液溶解DNA;0.14mol/L NaCl溶液析出DNA),DNA不

9、溶于酒精,选取材料破碎细胞获取含DNA滤液去除滤液中杂质DNA析出与判定,血红,蛋白,凝胶色谱法,依据相对分子质量大小,样品处理粗分离纯化纯度判定,电泳法,依据各种分子带电性质差异及分子本身大小、形状不一样产生不一样迁移速度,第16页,2.DNA 粗提取与判定:,(1)哺乳动物成熟红细胞中不含细胞核,不适于作 DNA,提取材料,但却是提取血红蛋白理想材料。,(2)试验过程中两次用到蒸馏水:,第一次目标:使成熟鸡血细胞涨破释放出 DNA。,第二次目标:稀释 NaCl 溶液。,(3)判定 DNA 方法:加入,二苯胺试剂并沸水浴加热,观,察是否出现蓝色。,第17页,3血红蛋白提取和分离操作程序:,(

10、1)样品处理:红细胞洗涤(除去血浆蛋白等杂质)血红,蛋白释放(蒸馏水和甲苯使红细胞破裂)分离血红蛋白溶液,(离心、分液)。,(2)粗分离透,析:除去样品中分子量较小杂质。,(3)纯化:普通用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离,和纯化。,(4)纯度判定:普通用 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳来测定蛋,白质分子量。,第18页,4PCR 技术扩增 DNA 片段:,(1)过程:,变性:加热至 90 95,DNA 解链。,复性:冷却至 50 55,引物结合到互补 DNA 链。,延伸:加热至 70 75 ,热稳定 DNA 聚合酶从引物,开始互补链合成。,(2)原料与特点:需要耐热(,Taq,)DNA 聚合酶、引物、高

11、温、,DNA 模板、4 种脱氧核苷酸、缓冲溶液,不需要 ATP,可在体,外快速扩增。,第19页,【典例,1,】,(,年深圳三校联考,),在利用鸡血进行“DNA,粗提取与判定”试验中,相关叙述正确是(,),A用蒸馏水将 NaCl 溶液浓度调至 0.14 mol/L,滤去析出,物,B调整 NaCl 溶液浓度或加入木瓜蛋白酶,都能够去除部,分杂质,C将丝状物溶解在 2 mol/L NaCl 溶液中,加入二苯胺试,剂即呈蓝色,D用菜花替换鸡血作为试验材料,其试验操作步骤,相同,第20页,名师点拨,利用,DNA,在不一样浓度,NaCl,溶液中会溶解或,析出特点,能够除去蛋白质等杂质,而选取木瓜蛋白酶,则

12、可借助酶作用特异性,水解蛋白质,进而除去杂质。当,NaCl,溶液浓度被调至,0.14 mo,l/L,时,,DNA 在其中溶解度最小,会,大量析出,此时应滤取,而不是,滤去析出物,,A,错;,C 项描述,中缺乏加热;可用菜花作材料,但因为菜花是植物材料,需加,上研磨,操作,,D,错误。,答案,B,第21页,【典例,2,】,(,年广东模拟,),以下关于猪血红蛋白提纯,描述,不正确是(,),A洗涤红细胞时,使用生理盐水可预防红细胞破裂,B猪成熟红细胞中缺乏细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白,较少,C血红蛋白颜色可用于凝胶色谱法分离过程监测,D在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白比分子量较小,杂蛋白移动慢,第22页,名师点拨,洗涤目标,是去除杂蛋白以利于后续步骤分,离纯化,加入是生理盐水,红细胞内液与生理盐水是等渗,,所以能够预防细胞破裂。哺乳动物成熟红细胞没有细胞核与,众多细胞器,提纯时杂蛋白较少。血红蛋白是有色蛋白,因,此在凝胶色谱分离时能够经过观察颜色来判断什么时候应该收,集洗脱液,这使得血红蛋白分离过程非常直观,简化了操作。,D,项考查凝胶色谱法分离蛋白质原理,相对分子质量越大,物质经过凝胶色谱柱速度越快,故,D,错误。,答案,D,第23页,

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