IL-6、IL-17、Th17与Treg在诊断新生儿败血症中的价值.pdf

20在线投稿网址http：/m c h c h i n a.x j t u.e d u.c nIL-6、I L-17、T h 17 与Treg在诊断新生儿败血症中的价值曹艳林，龚永禄，何青?，吴建华，陈丽华（1.常德市第一人民医院检验科，湖南常德4150 0 0；2.常德市第一人民医院儿科，湖南常德4150 0 0；3.中南大学湘雅三医院检验科，湖南长沙410 0 13)摘要 目的探讨外周血白细胞介素-6(IL-6）、I L-17、辅助性T细胞17（Th17)与调节性T细胞（Treg)在新生儿败血症治疗前后表达水平的变化。方法收集2 0 2 0 年8 月至2 0 2 2 年1月期间常德市第一人民医院的新生儿败血症患者8 6 例作为观察组，12 9例新生儿非败血症患者作为对照组。检测患儿外周血中IL-6、I L-17、T h 17、T r e g、T h 17/T r e g 的表达水平，比较上述指标在观察组治疗前后和对照组之间的差异，分析其在治疗前的相关性。结果观察组治疗前后和对照组的IL-6、T r e g、T h 17/Treg检测值的差异均具有统计学意义（H值分别为2 8.90 0、9.6 10、6.7 8 0,P0.05）。观察组早产儿治疗后的IL-6、I L-17、Th17/Treg水平均低于治疗前（Z值分别为一2.8 50、一2.150、一3.40 0,P0.05）；观察组早产儿治疗后的Treg水平高于治疗前（t=一2.440,P0.05）。观察组足月产儿治疗后的IL-6、T h 17/T r e g 水平均低于治疗前（Z值分别为一4.57 0、一3.0 2 0,P0.05），观察组足月产儿治疗后的Treg水平高于治疗前（Z=一2.6 40,P0.05）。观察组患儿治疗前外周血IL-6、I L-17 与Th17表达水平呈正相关（r值分别为0.50 7、0.7 30,P0.05）;IL-6 与Treg表达水平呈负相关（r=一0.336,P0.05)。结论Th17与Treg细胞免疫平衡稳态的打破与新生儿败血症的发生发展密切相关。IL-6介导新生儿败血症Th17与Treg细胞免疫平衡稳态的打破。关键词 白细胞介素-6；白细胞介素-17；辅助性T细胞17;调节性T细胞；败血症；新生儿Doi:10.3969/j.issn.16735293.2023.07.003中图分类号 R174文献标识码 A文章编号16 7 352 93（2 0 2 3)0 7 0 0 2 0 0 8Diagnostic values of IL-6,IL-17,Th17 and Treg for neonatal sepsisCAO Yanlin,GONG Yonglu,HE Qing,WU Jianhua,CHEN Lihua3(1.Department of Laboratory Medicine;2.Department of Pediatrics,The First Changde Municipal Peoples Hospital,Hunan Changde 4150o0,China;3.Department of Laboratory Medicine,The Third Xiangya Hospital ofCentral SouthUniversity,HunanChangsha 410013,China)Abstract Objective To investigate changes in expression levels of cytokines interleukin-6(IL-6),interleukin-17(IL-17),helper Tcell 17(Th17)and regulatory T cell(Treg)in peripheral blood and Th17/Treg of neonates with sepsis before and after treatment.Methods 86 neonates with septicemia who were treated in The First Changde Municipal Peoples Hospital from August 2020 toJanuary 2022 were selected as observation group,and 129 neonates without septicemia in the same period in the same hospital wereselected as control group.The expression levels of IL-6,IL-17,Th17 and Treg in peripheral blood of the neonates were detected.The differences in the five indexes(IL-6,IL-17,Th17,Treg and Th17/Treg)between the observation group and the control groupbefore and after treatment were compared.The correlations among the five indexes of the neonates in the observation group beforetreatment were analyzed.Results The differences in IL-6,Treg,and Th17/Treg levels before and after treatment between the ob-servation group and the control group were statistically significant(H=28.900,9.610 and 6.780 respectively,all P0.05).Thelevels of IL-6,IL-17 and Th17/Treg of the premature infants in the observation group after treatment were lower than those beforetreatment(Z=-2.85,-2.150 and-3.400 respectively,all P0.05),while the Treg level of the premature infants in the obser-vation group after treatment was higher than that before treatment(t=-2.440,P0.05).The levels of IL-6 and Th17/Treg ofthe full-term infants in the observation group after treatment were lower than before treatment(Z=-4.570 and-3.020 respec-tively,both Po.05),while the Treg level of the full-term infants in the observation group after treatment were higher than thatbefore treatment(Z=-2.640,P0.05).Before treatment,the expression levels of IL-6 and IL-17 of the neonates in the obser-收稿日期 2 0 2 2 一0 8-0 9【基金项目湖南省自然科学基金面上项目（2 0 2 1JJ3099）；常德市科学技术研究与开发资金项目（2 0 19S169）作者简介曹艳林（197 8 一），女，副主任检验师，主要从事临床检验的研究。21ChineseJournal of WomanChildHealthResearchJul.20232023年7 月Vol.34No.7中国妇幼健康研究第34卷第7 期vation group were both positively correlated with the expression level of Th17(r=0.507 and 0.730 respectively,both P0.05);while the expression level of IL-6 was negatively correlated with the expression level of Treg(r=-0.336,P0.05).Conclusion The disruption of Th17 and Treg cellularimmune homeostasis is closely correlated to occurrence and development of neonatal sepsis.IL-6 mediates the disruption of Th17and Treg cellular immune homeostasis in the neonates with sepsis.Key words interleukin-6(IL-6);interleukin-17(IL-17);helper T cell 17(Th17);regulatory T cells(Treg);septicemia(sepsis);neonate新生儿败血症是指病原体侵人新生儿血液循环并生长繁殖而引起的全身炎性反应综合征，从患儿血液、脑脊液等无菌腔隙体液能培养出致病菌 1患儿病情大多比较严重，病死率也较高 2 。该病治疗费用相对较高，对家庭和社会造成了沉重的负担 3。范含笑等 4 研究报道，目前我国新生儿败血症发病率在活产婴儿中占0.1%1.0%，住院新生儿病死率高达10.3%，且发生机制尚不清楚，败血症的早期诊断对提高患儿的预后有重要的临床意义。目前，对于新生儿败血症的实验室诊断、免疫学研究及相关治疗的问题呕待解决。辅助性T细胞17(helper Tcell 17,Th17)和调节性T细胞（regulatoryT,Treg)是当前免疫学研究的热点之一 5。周洋等 6 和Punt等 7 研究发现，Th17/Treg细胞平衡机制及其相关因子的变化，对促进机体清除病原体的人侵和抵制炎症反应发挥了重要作用。而白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）作为免疫调节性细胞因子，不仅参与炎症反应，也介导了Th17与Treg细胞的增殖和分化。Ye等 8 研究发现，IL-6是早期诊断新生儿败血症最具敏感性的炎症指标。我们的前期研究证实：新生儿败血症患儿外周血中IL-6水平出现了明显变化 9。因此，我们推测败血症患儿体内IL-6水平的变化可能打破了患儿的免疫平衡，进而影响疾病的发生发展。为了证实该问题，本研究探讨了外周血中IL-6、IL-17、Th17与Treg细胞在新生儿败血症治疗前后表达水平的变化及临床价值，旨为新生儿败血症的临床诊断及治疗提供科学依据。1资料与方法1.1研究对象收集常德市第一人民医院2 0 2 0 年8 月至2 0 2 2年1月期间确诊为新生儿败血症患者8 6 例作为观察组（其中早产儿47 例，足月儿39例），人选标准按照2019年中华医学会儿科学分会新生儿学组制订的专家共识11：疑似诊断，即出生3日龄内的新生儿有下列任何一项者：异常临床表现、母亲有绒毛膜羊膜炎、早产胎膜早破大于18 h。如无异常临床表现，血培养阴性，间隔2 4h的连续2 次血非特异性检查2 项以下阳性，则可排除败血症。有异常临床表现，同时满足下列条件中任何一项：有2 项以上的血液非特异性检查阳性；脑脊液检查为化脓性脑膜炎改变；血中检出致病菌DNA。确定诊断为有临床表现，血培养或脑脊液(或其他无菌腔液)培养阳性。新生儿晚发型败血症临床诊断和确定诊断发生在3日龄以上的新生儿，其余条件同新生儿早发型败血症。排除标准：近7 d内使用影响造血功能及免疫功能的药物；确诊为白血病等血液系统疾病者;产妇患有其他基础疾病者；产妇为少数民族者；产妇有吸烟嗜酒史者。选取同期收治的12 9例新生儿科非败血症患者作为对照组。本研究获得我院医学伦理委员会批准实施（编号：2 0 2 0-0 8 9-0 1）。所有患儿家长都知情并自愿签署书面知情同意书。1.2细胞因子的检测方法1.2.1仪器与试剂人淋巴细胞分离液（批号：KLSH2001，规格：100mL)，佛波酯（Phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)+Ionomycin（离子霉素）淋巴细胞刺激物批号：PI-2014，规格：50（test，T)和RPMI-1640培养基（批号：RPMI12003，规格：50 0 mL）购自深圳市达科为生物工程有限公司。PEanti-humanFOXP3（批号：B279946,规格：10 0 T),FOXP3Fix/PermBufferSet(批号：B335925，规格：10 0 T),PerCP/Cyanine5.5anti-humanIL-17A(批号：B327457,规格：10 0 T),PEMouse IgGl,k Isotype Ctrl(ICFC)（批号:B338362,22在线投稿网址http：/规格:2 5T),PerCP/Cyanine5.5 Mouse IgGl,k Iso-type Ctrl(批号:B286218,规格:2 5T),Monensin So-lution（10 0 0 X，批号：B323668，规格：1mL）和BDFACSCantoI 流式细胞仪购自美国BioLegend公司。IL-6、I L-17 试剂盒（批号：2 10 90 2，规格：10 0 T）购自青岛瑞斯凯尔生物科技有限公司。1.2.2标本采集和制备采集观察组治疗前后和对照组（未接受治疗前）患儿清晨空腹外周静脉血1.5mL，血液样本经EDTA抗凝后于4冷藏。密度梯度离心在2 h内以2000rpm的速度进行2 0 min分离血清，一7 0 下保存,用于随后的细胞因子检测。将外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)悬液浓度调整为110 6 8/mL，充分混匀后接种到添加RPMI1640培养液的2 4孔细胞培养板上。培养板上所有孔细胞再分别加人PMA（A b c a m，50 n g/m L）、离子霉素（Abcam,2g/mL)5L、莫能菌素（Monen-sinsolution，M S)5L后混匀，并置于温箱（37，5%COz条件下）避光孵育5h。1.2.3细胞因子IL-6、I L-17 的检测流程样本管中加入2 5L实验缓冲液，再加人2 5L样品血浆后，向所有管中加入2 5uL捕获微球抗体（微球加人前充分混匀）和2 5L检测抗体，室温避光震荡孵育2 h（40 0 50 0 r/m in），向所有管中加人2 5LSA-PE，室温避光震荡孵育0.5h（40 0 500r/min），向每管中加人10 0 0 L1洗涤缓冲液，涡旋数秒，40 0 g离心5min，缓慢倒出液体，倒扣于吸水纸上；向每管中加2 0 0 L洗涤缓冲液，涡旋10 s将微球重悬，立即上机检测。样本检测完毕后，保存数据源文件至定义的文件夹内，用分析软件LEG-ENDplex8.0分析同批号标准曲线和标本数据后自动计算输出检测结果（包括IL-6、IL-17 等）。1.2.4Th17、T r e g 细胞的检测流程按1份细胞核固定液配3份磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer solution,PBS）配制细胞核固定液，按1份细胞核破膜液（FOXP3permea-bilizationbuffer，FO X P3Pe r m Bu f f e r）配9份PBS配制FOXP3PermBuffer工作液。收获培养板培养的PBMC于流式管中，离心后去上清，用50 0 LPBS重悬混匀，向所有管加人50 0 L配制的细胞核固定液，室温下避光震荡孵育0.5h(102 0 r/mi n），离心后弃上清，向所有管加人1mL配制的FOXP3Perm-Buffer混匀，30 0 0 rpm，5m i n 离心后去上清，洗涤2次，留30 0 L液体混匀。其中正常对照管加30 0 LPBS混匀后平均分成两管（一管作为正常对照管，一管作为同型对照管）。正常对照管和样本管中均加人5L异硫氰酸荧光素（fluoresceine isothiocya-nate,FITC）抗人 CD4 FITC（a n t i-h u m a n CD 4）、5lPerCP/Cyanine5.5（复合染料）anti-humanIL-17A、5L藻红蛋白（P-phycoerythrin，PE）a n t i-h u-manFOXP3后混匀；同型对照管分别加入5LFITCanti-humanCD4,5L PerCP/Cyanine5.5 Mouse IgG1,kIsotypeCtrl（同型对照一流式抗体）、5LPEMouse IgGl，k Is o t y p e Ct r l(ICFC)（同型对照一流式抗体）后混匀，所有管室温下避光震荡孵育1.5h(102 0 r/m in）。再向所有管加人1mL配制的FOXP3PermBuffer，30 0 0 r p m，5m i n 离心后去上清，用PBS重悬并通过流式细胞术检测。1.3统计学方法使用SPSS24.0软件完成数据分析，用Graph-padPrism8完成绘图。计数资料采用例数（n）和百分比（%）表示，率的比较采用检验或Fisher确切概率法。计量资料采用均数土标准差（x土s）表示，先进行正态分布和方差齐性检验。符合正态分布和方差齐，两组比较采用t检验；非正态性分布和/或方差不齐的计量资料以中位数（四分位数)M(P25P7 s）表示，总体差异比较，采用多个独立样本的非参数检验；差异有统计学意义时采用Bonferroni法进行两两比较。IL-6、I L-17 与Th17、T r e g 表达水平的相关性分析采用Spearman相关性分析。P0.05），两组具有可比性。见表1。23ChineseJournal oiVvadChildHealthResearchJul.220232023年7 月Vol.34 No.7中国妇幼健康研究第34卷第7 期表1内两组资料比较【n（%），x 土sTable1Comparison of general linear data of the neonates between the observation group and the control group n(%),X s项目对照组（n=129)观察组（n=86)P性别（男/女）67(51.94)/62(48.06)44(51.16)/42(48.84)0.0120.911母亲孕龄（岁）31.005.2130.603.860.6460.520胎龄(周）35.593.7435.433.970.3000.765体重(kg)2.600.922.411.031.4140.1591minApgar评分（分）8.371.638.450.960.4520.6525minApgar评分（分）9.201.229.300.910.6870.493新生儿发病时间（天）11.7510.4211.5811.380.1130.9102.2观察组与对照组Th17、T r e g 细胞表达水平用两色荧光标记法检测细胞因子的水平：用CD4+IL17+标识Th17细胞,对照组与观察组治疗前、观察组治疗后的Th17细胞表达见图1。用CD4+FOXP3+标识Treg细胞，对照组与观察组治疗前、观察组治疗后的Treg细胞表达见图2。01.2501.620.31LI-TI-TILI-TI098.7098.499.7SSCSSCSSC对照组观察组治疗前观察组治疗后图1观察组治疗前后及对照组的Th17细胞表达图Fig.1 Expression diagrams of Th17 cells of the neonates before and after treatment in theobservation group and in the control group7.3201.6212.392.7098.487.7SSCSSCSSC对照组观察组治疗前观察组治疗后图2观察组治疗前后及对照组的Treg细胞表达图Fig.2Expression diagrams of Treg cells of the neonates in the observation group before andafter treatment and in the control group2.3观察组与对照组的IL-6、I L-17、T h 17Treg,Th17/Treg表达水平的差异观察组治疗前、治疗后及对照组的 IL-6、T r e g、Th17/Treg差异均有统计学意义（P0.05）。I L-6水平：对照组低于观察组（Z=一5.0 30，P0.05），观察组治疗后低于治疗前（Z=一4.0 50，P0.05）；24IL-17在线投稿网址http：/Treg:观察组治疗后高于治疗前（Z=一2.7 30,P0.05），观察组治疗前低于对照组（Z=一2.310,P0.05）。T h 17/T r e g：观察组治疗后低于治疗前（Z=一2.550，P0.05），见表2。表2观察组与对照组IL-6、IL-17、T h 17、T r e g、T h 17/T r e g 表达水平的差异M(P25Pr s）Table 2Differences in expression levels of IL-6,IL-17,Th17,Treg and Th17/Treg before and after treatmentin the observation group and the control group M(P2s-P7s)组别IL-6(ng/L)IL-17(ng/L)Th17(%)Treg(%)Th17/Treg对照组(n=65)4.21(3.1723.33)6.30(5.026.83)0.49(0.191.49)3.77(2.155.25)0.16（0.0 5 0.48)观察组(n=86)治疗前38.02(10.18199.19)7.61(5.2314.65)0.45(0.141.26)1.84(0.915.20)0.25(0.100.50)治疗后6.47(3.929.59)6.29(5.238.73)0.29(0.141.37)5.40(2.077.19)0.09(0.040.34)H28.9004.9200.9509.6106.780P0.0010.0900.6200.0080.0302.4观察组早产儿治疗前后的IL-6Th17、T r e g、T h 17/T r e g 表达水平的差异观察组早产儿治疗后的IL-6、I L-17、T h 17/Treg水平均低于治疗前（P0.05），T r e g 水平高于治疗前(t=-2.440,P0.05)，见表3。表3观察组早产儿治疗前后IL-6、IL-17、T h 17、T r e g、T h 17/T r e g 表达水平M(P25P7 s），x 士s，n=47 Table3Differences in expression levels of IL-6,IL-17,Th17,Treg and Th17/Treg of the preterm infants in the observationgroup before and after treatment M(P25-P7s),xs,n=47组别IL-6(ng/L)IL-17(ng/L)Th17(%)Treg(%)Th17/Treg治疗前34.87(7.892140.66)8.96(5.2317.78)0.63(0.112.60)3.082.510.37(0.090.55)治疗后8.45(5.9915.12)6.40(5.028.62)0.28(0.150.61)6.323.560.08(0.030.13)Z/t-2.850-2.150-1.250-2.440-3.400P0.0040.0300.2100.0200.0012.5观察组足月产儿治疗前后的IL-6、I L-17、Th17、T r e g、T h 17/T r e g 表达水平观察组足月产儿治疗后的IL-6、T h 17/T r e g 水平均低于治疗前（P0.05）,I L-17 水平均高于治疗前（P0.05），见表4。表4观察组足月产儿治疗前后的IL-6、IL-17、T h 17、T r e g、T h 17/T r e g 表达水平M(P25Pr s），n=39Table 4 Differences in expression levels of IL-6,IL-17,Th17,Treg and Th17/Treg of full-term infantsin the observation group before and after treatment M(P25-Pzs),n=39组别IL-6(ng/L)IL-17(ng/L)Th17(%)Treg(%)Th17/Treg治疗前38.02(7.89109.18)6.08(5.2313.67)1.05(0.241.87)1.12(0.563.08)0.50(0.251.22)治疗后4.40(2.476.68)6.51(5.4410.35)0.19(0.110.77)4.38(1.356.66)0.09(0.040.30)Z一4.57 0-0.100-1.690-2.640-3.020P0.0010.9300.0900.0080.0032.6 观察组治疗前外周血 IL-6、I L-17 与 Th17、Treg表达水平的相关性分析Spearman相关性分析显示：观察组治疗前外周血IL-6与Th17的表达水平呈正相关（r=0.507，P0.05),见图3A；观察组治疗前外周血IL-6与Treg的表达水平呈负相关（r=一0.336,P0.05），见图3B;观察组治疗前外周血IL-17与Th17的表达水平呈正相关（r=0.730，P0.05），见图3D。25Jul.22023Chinese Journal of Woman and Child HealthResearch2023年7 月Vol.34 No.7中国妇幼健康研究第34卷第7 期A1=0.5074Br-0.336115000-15000P-0.001.3P-0.0317(T/Bu)9-TI(1/au)9-TI10000-10000-5000-5000-00024601015Th17 cell(%)Treg(%)C1=0.7304D80780r-0.1009P0.0001P=0.5764(1/au)LI-TI60-(1/au)LI-TI6040402020000246051015Th17 cell(%)Treg(%)注：A.IL-6与Th17表达水平的相关性;B.IL-6与Treg表达水平的相关性;C.IL-17与Th17表达水平的相关性;D.IL-17与Treg表达水平的相关性。图3观察组患儿治疗前外周血IL-6、IL-17 与Th17、T r e g 表达水平的散点图Fig.3 Scatter diagrams of correlations among IL-6,IL-17,Th17 and Treg expression levels in peripheralblood of the neonates in the observation group before treatment3讨论3.1新生儿败血症的早期预警生物学标志物仍然缺乏新生儿细菌性败血症诊断的“金标准”是血培养阳性，但其诊断周期较长，一般在2 3d，易出现假阴性或假阳性结果，故早期诊断异常困难，易误诊或漏诊。因此，寻找一种针对新生儿败血症的敏感和特异的生物学标志物作为早期预警的指标，对于该病的早期诊断、治疗效果监测和预后判断均具有重要的临床价值。3.2IL-6、T h 17 和Treg与新生儿败血症的以往研究IL-6是一种重要的促炎因子。Hotoura医师研究发现新生儿败血症时导致新生儿死亡的最主要原因是炎性反应失控，而在人体炎性反应中最活跃的细胞因子之一是IL-6。诊断新生儿败血症时IL-6水平较高提示新生儿存在败血症可能10。本实验结果与其相符，新生儿败血症在发病时IL-6水平明显升高，说明患儿体内炎性反应明显；随着病情好转患儿血浆IL-6浓度明显降低，说明其体内炎性反应减弱。陈硕等11研究表明：在分化和维持期间CD4+T细胞及各种亚型有显著可塑性;CD4+T细胞新亚型Th17细胞与Treg细胞间也存在很灵活的可塑性。Liu等12 研究发现：在炎症因子信号（如IL-1、IL-6、I L-2 1、I L-2 3）作用下Treg细胞能够转化为Th17细胞。Ono等13 研究报道：在IL-6缺乏时，通过信号通路强化FoxP3作用并促进Treg细胞发育。邢超等14研究证实，根据人胸腺、淋巴结、扁桃体和外周血中对Th17、T r e g 细胞的检测，证实Th17细胞可产生强烈的致炎效应，参与多种疾病的促炎症反应。Yan等15 研究表明Th17和Treg细胞的不平衡是炎性疾病的特征。3.3 IL-6、I L-17、T h 17、T r e g 和 Th17/Treg 与新生儿败血症的新发现本实验结果中，败血症患儿与对照组比较，发病初期血浆IL-6、IL-17 浓度升高明显，同时Treg细胞比例显著降低，而且Th17/Treg细胞比值明显上升，提示新生儿败血症患儿体内炎症反应强烈，26在线投稿网址http：/Th17与Treg细胞免疫平衡的打破参与患儿疾病的发生发展过程。观察组早产儿治疗后的IL-6、I L-17、T h 17/Treg水平均低于治疗前，差异均具有统计学意义。观察组足月产儿治疗后的IL-6、T h 17/T r e g 水平均低于治疗前，差异均有统计学意义。以上结果提示早产儿发生败血症更为严重。其他的学者研究表明IL-6可以促进Th17细胞的分化发育并调控其功能，而且IL-6抑制Treg细胞的分化发育,Treg细胞可以通过与Th17细胞的相互作用来调节Th17细胞的功能16-19 。本研究结果显示，治疗前败血症新生儿外周血IL-6与Th17的表达呈正相关，另与Treg细胞比例呈负相关;IL-17与Th17细胞比例呈正相关，而与Treg细胞比例无明显相关性，提示IL-6参与了败血症患儿体内免疫平衡稳态的破坏。发病初期败血症患儿Th17比例变化不明显而其血浆IL-6、I L-17 水平明显增高，推测发病初期IL-6水平的变化可能仅仅促进Th17细胞功能增强，这还需要后期实验的进一步证实；本研究显示与治疗前相比，患儿治疗后其血浆IL-6、I L-17 水平与Th17细胞比例下降，同时Treg细胞比例上升，从而使得Th17/Treg细胞比值明显降低，进一步证实新生儿败血症患儿IL-6水平的变化导致其体内免疫平衡稳态的变化。由此可见，随着新生儿败血症的发生发展，Th17与Treg细胞所介导的免疫反应发挥着举足轻重的作用。此外，对败血症新生儿外周血Th17与Treg细胞比例及其相关炎性因子IL-6等进行动态监测，能够对临床治疗效果进行准确地评估。3.4 IL-6、I L-17、T h 17、T r e g 和 Th17/Treg 参与新生儿败血症发生发展过程的机制尚待明确IL-6、I L-17、T h 17、T r e g 和 Th17/Treg参与新生儿败血症发生发展过程的机制还需进一步实验研究，本研究通过干预新生儿败血症患儿体内IL-6水平从而为改善患儿病情提供了一个新的研究方向。综上所述，在新生儿败血症的进展过程中，Th17与Treg细胞免疫平衡稳态的打破与之密切相关。加强对败血症新生儿外周血Th17细胞、Treg细胞、Th17/Treg细胞比值及其相关炎性因子IL-6的动态监测,能够对新生儿败血症的病情及临床治疗效果评估提供重要依据。参考文献1中华医学会儿科学分会新生儿学组，中国医师协会新生儿科医师分会感染专业委员会.新生儿败血症诊断及治疗专家共识（2 0 19 年版）J.中华儿科杂志，2 0 19，57（4）：252-257.2吴文案，彭琪，黄天丽，等.新生儿危重症评分联合Bcl-xL蛋白在脓毒症新生儿早期危重状态评估中的应用J.广东医学，2 0 19，40（12）：17 6 3-17 6 7.3王美娟，宁兴旺，王孟清，等.PCT、h s-CR P及IL-6水平检测在新生儿毒症诊断中的价值分析J.河北医药，2018,40(24):3788-3790,3794.4 范含笑，韩笑.新生儿脓毒症研究进展J.中国小儿急救医学，2 0 14,2 1（8）：539-542.5Han K,Singh K,Rodman M J,et al.Fasting-inducedFOXO4 blunts human CD4+T helper cell responsivenessJ.Nat Metab,2021,3(3):318-326.6周洋，陈芳芳，王桂兰，等.Th17、T r e g 细胞在小儿EB病毒感染中的表达及临床意义J.中国实验诊断学，2 0 2 1，25(8):1169-1171.7JPunt S,Langenhoff J M,Putter H,et al.The correlationsbetween IL-17 vs.Th17 cells and cancer patient survival:a systematic reviewJ.Oncoimmunology,2015,4(2):e984547.8JYe Q,Du L Z,Shao W X,et al.Utility of cytokines topredict neonatal sepsis J.Pediatr Res,2017,81(4):616-621.9JLiu C,Fang C,He Q,et al.The value ofinterleukin-6(IL-6)within 6 hours after birth in the prompt diagnosisof early-onset neonatal sepsisJJ.Transl Pediatr,2020,9(5):629-635.10柳秋菊.新生儿脓毒症的诊治进展J.中国保健营养，2018,26(9):50.11陈硕，聂汉祥，刘琳琳.Treg细胞和Th17细胞的研究进展J.临床肺科杂志，2 0 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