子宫平滑肌瘤中TRIP6蛋白及mRNA的表达.pdf

网络出版时间：网络出版地址：子宫平滑肌瘤中 蛋白及 的表达李秀明，石晨曦，陈志，郭霞，郭凌川摘要：目的探讨甲状腺激素受体相互作用蛋白 （，）在子宫平滑肌瘤中的表达及临床靶向药物治疗中的意义。方法采用 法检测子宫平滑肌瘤和瘤旁正常子宫平滑肌组织中 蛋白表达，应用 检测子宫平滑肌瘤和瘤旁正常子宫平滑肌组织中 表达。结果 例子宫平滑肌瘤组织中，有 例（，）蛋白表达低于正常子宫平滑肌组织（）；有 例（，）表达显著低于正常子宫平滑肌组织（）；其中，有 例（，）蛋白与 表达水平一致降低。结论 在子宫平滑肌瘤中的表达降低，提示 表达降低可能与子宫平滑肌瘤的发生、发展相关。关键词：子宫平滑肌瘤；中图分类号：文献标志码：文章编号：（）：接受日期：作者单位：苏州大学附属第一医院病理科，苏州 作者简介：李秀明，男，博士，主治医师。：郭凌川，男，博士，主任医师，通讯作者。：子宫平滑肌瘤是好发于女性生殖系统的良性肿瘤，患者年龄多为 岁，发病率较高 ，严重影响女性的生育能力及生活质量。平滑肌瘤的发生、发展受多种因素的影响，对其发病机制的探索主要集中在激素、激素受体方面的研究 。最近细胞分子生物学、细胞学、分子遗传学研究表明，子宫平滑肌瘤与干细胞突变、异常信号通路活化、染色体异常、表观遗传学改变等密切相关 ；如 信号在平滑肌瘤中处于激活状态，而在正常子宫肌层中未见激活 。甲状腺激素受体相互作用蛋白 （，）是 家族的一种骨架蛋白与穿梭蛋白，参与细胞骨架的重组及细胞迁移等。研究表明，可在胞质或胞核通过不同的分子机制，参与不同的信号通路，调控多种肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移，如子宫内膜癌、卵巢癌、乳腺癌、结直肠癌等 。目前，国内外尚未见 在子宫平滑肌瘤中作用的相关报道。本文探讨 在子宫平滑肌瘤中的表达及临床意义，为子宫平滑肌瘤的药物治疗提供可能的生物学标志物。材料与方法 材料收集 年 月我院存档的 例手术切除的子宫平滑肌瘤组织和瘤旁正常子宫平滑肌组织（未经药物治疗），标本均经术后病理诊断为普通型平滑肌瘤。主要试剂兔抗人 单克隆抗体购自 公司；鼠抗人 抗体购自 公司；、购自 公司；上游引物：，下游引物：；上 游 引 物：，下游引物：，引物序列由金唯智公司合成。方法 法将收集的组织置于液氮中充分研磨，用 蛋白裂解液提取总蛋白，试剂盒测量各样品浓度，调整各样品蛋白量相一致。将样品置于 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（）进行蛋白分离，分离适当程度后将蛋白转移至聚偏二氟乙烯（）膜上。经 脱脂奶粉封闭 ，加入 （）一抗 孵育 ，洗膜后加入二抗（），洗膜后 显影蛋白成像。将收集的组织置于液氮中充分研磨，加入 裂解 ，依次加入氯仿、异丙醇提取 ，测量记录 浓度。使用逆转录试剂盒将提取的 反转录成 ，将样品 与 引物混合体系上机进行 反应，定量检测样品中 表达量。统计学分析本组各项实验独立重复 次，所有数据应用 软件进行统计学分析，计量数据以珋 表示，两组数据比较采用独立 检验。以 为差异有统计学意义。结果 子宫平滑肌瘤、正常子宫平滑肌组织中 蛋白表达 检测结果显示：子宫平滑肌瘤组织中有 例（，）蛋白表达低于正常子宫平滑肌组织，差异有统计学意义（）；有 例（，）蛋白表达高于正常子宫平滑肌组织（），例（，）蛋白在两组中差异无统计学意义（，图 ）。以上结果表明，多数子宫平滑肌瘤组织中 表达低于正常子宫平滑肌组织。临床与实验病理学杂志 ；（）图 法检测不同组织中 蛋白表达：平滑肌瘤组织（）与正常子宫平滑肌组织（）中 蛋白表达；蛋白表达与内参蛋白 灰度值比；，子宫平滑肌瘤、正常子宫平滑肌组织中 的表达 检测显示：例平滑肌瘤组织中有 例（，）表达显著低于正常子宫平滑肌组织（），例（，）表达高于正常子宫平滑肌组织（），例（，）表达在两组中差异无统计学意义（，图 ）。上述结果提示，子宫平滑肌瘤组织中 表达低于正常子宫平滑肌组织（，图 ），与 蛋白在子宫平滑肌瘤与正常子宫平滑肌组织中的表达差异一致。讨论子宫平滑肌瘤是女性常见的良性肿瘤，目前手术治疗是治愈子宫平滑肌瘤有效的方法，主要适用于肌瘤量多、体积大以及无生育要求的患者；对于年轻女性患者，手术治疗对其生育能力有一定的影响。由于长期的药物治疗存在复发风险和不良反应，而短期治疗主要目的是缓解子宫出血症状、缩小肌瘤大小、改善相关症状，为后续的手术治疗或妊娠创造条件。因此，针对子宫平滑肌瘤药物治疗、寻找可长效应用的潜在靶向标志物，对患者的药物治疗及预后具有重要意义。基因位于染色体 区，编码蛋白相对分子质量为 。蛋白包含多个结构域，如：、结合基序，不同的区域可与不同的蛋白质发生相互作用，从而参与不同的细胞生理学功能 。可参与细胞骨架蛋白和迁移蛋白的构成，如 可与外周膜蛋白 结合导致细胞黏着斑结构和功能的丧失 ；此外，还可与原肌球蛋白 相互作用影响破骨细胞的骨吸收和黏附能力 。作为衔接蛋白可参与细胞图 检测不同组织中 表达：子宫平滑肌瘤组织（）与正常子宫平滑肌组织（）中 表达；子宫平滑肌瘤组织（）与正常子宫平滑肌组织（）平均表达水平；信号传递和基因转录，如 可与小磷脂 相互作用，穿梭于胞质和胞核，从而将 介导的信号由质膜传递质细胞核，并调节其靶基因的表达 。可与 庇护素复合物结合，保护端粒稳定性、基因组稳定性 。研究表明，与多种女性生殖系统恶性肿瘤的发生、发展密切相关。文献报道子宫内膜癌中 可作为 的直接作用靶点，在抑制子宫内膜癌细胞增殖、迁移和侵袭中发挥重要作用 ；在卵巢癌细胞中，可以拮抗去泛素化酶 和 向 的募集，进而促进溶血磷脂酸 诱导的 和 的激活，最终导致慢性炎症、细胞凋亡抵抗、细胞侵袭 。此外，过表达增强了 诱导的 卵巢癌细胞迁移 ；在子宫颈癌中，过表达可以阻断 磷酸化从而激活 通路，加速癌细胞增殖和侵袭 ；在乳腺癌中，通过激活 信号通路促进癌细胞的增殖 。然而，目前国内外有关 在子宫平滑肌瘤中的表达及其发生、发展中的作用尚未见报道。本组分析子宫平滑肌瘤、正常子宫平滑肌组织中 表达差异，结果显示：与正常子宫平滑肌组织相比，子宫平滑肌瘤中有 （）的 蛋白表达降低（）；有 （）的 蛋白表达升高（）；有 （）的 蛋白表达差异无统计学意义（）；提示多数子宫平滑肌瘤组织中 蛋白表达低于正常子宫平滑肌组织。本组还发现与正常子宫平滑肌组织相比，子宫平滑肌瘤中有 （）的 表达水平降低（）；有 （）的 表达升高（）；有 （）的 临床与实验病理学杂志 ；（）表达差异无统计学意义（）；此外，有 （）的同一组织中 蛋白、表达水平一致降低，表明 表达差异与子宫平滑肌瘤中 蛋白表达差异一致。以上实验结果表明：子宫平滑肌瘤中 蛋白、的表达水平均低于瘤旁正常子宫平滑肌组织，提示 在子宫平滑肌瘤的发生、发展中起一定的抑制作用，与以往研究报道的平滑肌瘤中 所在染色体 区段存在缺失相一致 。综上所述，蛋白、在子宫平滑肌瘤中均表达下调，提示 蛋白在子宫平滑肌瘤的发生、发展中有重要的调控作用，可作为药物治疗的潜在靶点，但其在子宫平滑肌瘤中具体作用的分子机制有待进一步探讨。参考文献：，（）：，（），（）：，：，（）：，：，（）：，（）：，（）：，：，（）：，（）：，（）：，（）：，：，（）：，（）：，（）：，（）：，（），（）：，（）：，（）：，（）：，（）：本刊网站投稿：临床与实验病理学杂志 ；（）