自动筛查保健品口服液中芬太尼类精神活性物质.pdf

建立了液相色谱四极杆 静电场轨道阱高分辨质谱法监测口服液中 种芬太尼类精神药物的定向自动筛查方法。样品在盐析的作用下，乙腈超声提取，固相基质分散净化，在电喷雾正离子模式下，一级四极杆质谱在 隔离窗口下过滤带电分子离子，高分辨静电场轨道阱质谱自动触发子离子全扫描分析，根据芬太尼的精确质量数、同位素丰度比、二级碎片离子建立标准物质数据库，采用 软件自动检索匹配完成目标物的筛查。口服液中 种芬太尼类方法定量限为（），分析物在 浓度范围内线性关系良好，相关系数 ；方法回收率在之间，相对标准偏差为。结果表明，所建立的筛查方法可用于口服液中 种芬太尼类精神药物的自动筛查与测定，具有准确、快速、实用的特点。关键词：液相色谱高分辨质谱；保健品口服液；芬太尼类精神活性药物；自动筛查中图分类号：文献标志码：文章编号：（）（），（）（）（），：；芬太尼是一种作用于中枢神经系统的脂溶性合成镇痛阿片类药物，目前已广泛用于临床麻醉、急慢性疼痛的治疗。芬太尼的化学结构中含有两个苯环与一个哌啶环，通过结构改造和构效关系的研究，设计合成了一系列活性更强的芬太尼类衍生物，现已经成为全球麻醉药品增长最快的品种。由于芬太尼的特殊药理性质和灵活的给药方式，医疗以外的场景具有很高的滥用潜力，人类滥用后会出现吸毒快感、呼吸抑制、心动过缓等副作用。为应对芬太尼类药物的滥用对公：化学研究，（）：第 期祝伟霞等：自动筛查保健品口服液中芬太尼类精神活性物质 众安全产生的威胁，美国食品药品监督管理局、加拿大卫生部曾发布芬太尼安全性公告及警示信息。年 月 日起，我国将芬太尼类物质列入非药用类麻醉药物和精神药品管制品种增补目录。在当前食品安全的背景下，开展保健品中芬太尼类药物监测工作是非常有必要的。目前有关芬太尼的研究方法主要有红外光谱法、拉曼光谱法、核磁共振法、气相色谱质谱法、液相色谱串联质谱法、液相色谱高分辨质谱法等，主要用于药物、血液、尿液、毛发等样本中芬太尼类药物的测定。方法以保健品口服液为分析对象，利用液相色谱四极杆 静电场轨道阱高分辨质谱技术灵敏度高、抗干扰能力强的特点，通过自动触发二级子离子全扫描完成药物筛查，最终建立了一种可准确测定 类芬太尼药物的分析方法。实验部分 仪器、材料和试剂 液相色谱四极杆 静电场轨道阱高分辨质谱（，美 国 公 司）配、软件；超声波清洗剂机（厦门致微仪器公司）；型离心机（日本日立公司）。乙腈和甲酸（色谱纯，质量分数，美国 公司）；填料 和填料 为美国 公司，氯化钠为市售分析纯试剂；种芬太尼标准溶液购于天津阿尔塔公司。标准工作溶液采用阴性基质提取溶液配制成合适浓度，使用前配制；实验用水为 系统制得的高纯水（）。样品前处理准确量取 样品置于 聚丙烯离心管中，加入 使其处于过饱和状态，加入 乙腈，涡旋混匀，超声提取，以 的速度 低温下离心 ，取上清液转移于另一离心管中，加 和 进行固相基质分散净化，离心后取 于氮气流下吹干，加入 乙腈甲酸溶液（体积比，）复溶，经 有机相滤膜过滤后，进行 测定。条件色谱柱：（，）；流动相：乙腈（相）和体积分数为的甲酸溶液（相）；流速：。梯度洗脱程序：，；，；，；，；，；，保持 。检测器：四极杆 静电场轨道阱高分辨质谱；离子化方式：电喷雾正离子（）；蒸发温度：；毛细管温度：；喷雾电压：；鞘气压力：；辅助气压力：；监测模式：全扫描目标物自动子离子全扫描（）；隔离窗口为：；一级全扫描分辨率：；二级分辨率：；一级全扫描自动增益控制：；离子注入时间：；碰撞能量：，聚焦电压：。在模式下，对每种芬太尼进行自动触发子离子碎片扫描，选取信号强度最高的子离子碎片导入高分辨质谱谱库，与相应芬太尼保留时间、精确质量数、中英文名称、号、分子式等信息整合，建立筛查谱库，见表。相应的高分辨质谱图见图。参数：将表 中化合物离子导入，建立酚太尼类药物数据库，设定质量精度阈值为，用于自动定性检索。表 种芬太尼化合物的化学信息 编号中文名称英文名称化学式分子离子峰特征子离子（）羟基芬太尼 ；苯乙基哌啶酮 ；去甲基芬太尼 ；去甲基卡芬太尼 ；甲基去甲基卡芬太尼 ；丁酰基去芬太尼 ；去甲基舒芬太尼 ；瑞芬太尼 ；羟基硫代芬太尼 ；乙酰基芬太尼 ；：化学研究，（）：化 学 研 究 年续表编号中文名称英文名称化学式分子离子峰特征子离子（）奥芬太尼 ；羟基芬太尼 ；苄基呋喃去甲芬太尼 ；阿芬太尼 ；羟基硫代芬太尼 ；丙烯酰芬太尼 ；苄基卡芬太尼 ；呋喃芬太尼 ；（）顺甲基硫代芬太尼 ；对氟芬太尼 ；卡芬太尼 ；氟丁基芬太尼 ；舒芬太尼 ；，司可芬太尼，；戊酰芬太尼 ；乙酰基甲基芬太尼 ；芬太尼 ；顺甲基芬太尼 ；甲基芬太尼 ；丁酰基芬太尼 ；异丁酰基芬太尼 ；图 种芬太尼类药物的高分辨质谱图 ：化学研究，（）：第 期祝伟霞等：自动筛查保健品口服液中芬太尼类精神活性物质 结果讨论 提取与净化方法的选择 芬太尼属弱极性化合物，分别比对了磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液和乙腈的提取效果。采用磷酸盐和硼酸盐缓冲液提取时，高盐溶液不能直接进行质谱分析，需要采用液液萃取将分析物转移至有机相，数据表明溶液在 之间时，乙酸乙酯可萃取 种芬太尼，除 种芬太尼类化合物回收率在 之间，其他 种芬太尼化合物回收率，乙酸乙酯萃取时易产生乳化现象。本方法试验了加入氯化钠盐析试剂，形成饱和的氯化钠溶液，采用乙腈提取的效果，结果表明在饱和氯化钠盐析乙腈提取体系，种分析物提取效率均。为去除乙腈萃取溶液中的有机干扰物，方法设计了 和 填料进行分散固相萃取净化。根据芬太尼类物质结构中含有苯基、烷基和酰胺等基团的性质，反相 可通过与非极性物质作用去除干扰，丙基乙二胺 填料基于极性吸附，对于极性胺类化合物和芳香族化合物有显著的选择性，可有效去除基质中极性成分，减少基质效应的影响。色谱条件的优化芬太尼类药物属弱极性化合物，可在反相 色谱柱中保留，通过对比不同的色谱柱，证明色谱柱获得对称的峰形，同分异构体间分离，种目标物分离度高。比较了甲醇和乙腈作为流动相的效果，实验现象表明甲醇作为流动相出现双峰和拖尾峰，乙腈呈现对称的色谱峰，最终选用乙腈作为有机流动相。方法验证本方法采用阴性口服液添加分析物进行检测，按方法所述前处理与仪器条件进行测定，测得最低定量浓度 为 。采用阴性样品制得阴性基质样品提取液，采用该溶液配制不同质量浓度的标准溶液，种芬太尼标准溶液浓度在 范围内，峰面积与质量浓度呈良好的线性关系（）。选取阴性口服液样品，分别添加、和 质量浓度水平，按本方法进行试验，每个水平平行测定 次。测得 种芬太尼的方法回收率为 ，为 。结论芬太尼类物质属于化学骨架结构管制的精神活性物质，地下非法制毒工厂以芬太尼为先导化合物，通过结构改造和构效关系研究，设计合成并筛选出一系列活性更高的芬太尼类衍生物，新合成的药物不断出现。本方法采用液相色谱四极杆 轨道阱质谱技术，完成了口服液中 种芬太尼类药物的自动筛查和确认，通过比较不同提取和净化方法，在阈值触发二级扫描模式下分析，自动进行结果检索。本方法的建立，可以为保健品质量安全提供技术支撑。参考文献：，：，：李珊，汤文川，王元凤 生物检材中芬太尼类物质检测方法研究进展 分析试验室，（）：，（）：郭项雨，马麟，尚宇瀚，等 芬太尼类新精神活性物质检测技术研究进展 分析测试学报，（）：，（）：，：，：，：，：，：，：化学研究，（）：化 学 研 究 年：，（）：罗耀，张建莹，黄昌雄，等 液相色谱串联质谱法测定固体及液体药物中 种新型毒品芬太尼类物质 分析测试学报，（）：，（）：，：董振霖，杨春光，徐天，等 液相色谱四极杆 飞行时间质谱法分析 种芬太尼类物质及其碎裂机理色谱，（）：，（）：责任编辑：郭续更（上接第 页）董晓，李兆新，孙晓杰，等 固相萃取液相色谱串联质谱法同时测定养殖海水中 种喹诺酮类药物 渔业科学进展，（）：，（）：陈书鑫，王静，何士冲，等 超高效液相色谱串联质谱法测定水体中 种抗生素 中国环境监测，（）：，（）：王娅南，彭洁，谢双，等 固相萃取高效液相色谱串联质谱法测定地表水中 种抗生素 环境化学，（）：，（）：江苏省市场监督管理局 渔业养殖用水中喹诺酮类抗生素测定液相色谱串联质谱法：北京：中国标准出版社，：，吕敏，陈令新 近海环境中抗生素分析样品前处理技术的研究进展 色谱，（）：，（）：中华人民共和国生态环境部 环境监测分析方法标准制订技术导则：北京：中国环境科学出版社，：，责任编辑：吴文鹏：化学研究，（）：