血浆hsa_circ_005230在原发性肝细胞癌诊断和预后评估中的临床价值.pdf

年 月第 卷 第 期基础医学与临床 收稿日期：修回日期：基金项目：新疆自治区自然科学基金（）通信作者（）：文章编号：（）临床研究血浆 在原发性肝细胞癌诊断和预后评估中的临床价值依马木买买提江阿布拉，帕哈尔丁白克热，易 超，佟 庆新疆医科大学 第三临床医学院 肝胆胰外科，新疆 乌鲁木齐 摘要：目的 检测原发性肝细胞癌（）血浆中环状（）表达水平，探讨其在 诊断和预后评估的临床价值。方法 利用 数据库中的非编码 高通量测序数据筛选（癌组织 癌旁组织）的 表达情况。检测 例、例乙型肝炎和 名健康人血浆中 表达水平，并分析其与 患者临床病理特征的关系。应用受试者工作特征（）曲线评估 诊断 的临床价值。应用 法进行生存分析，回归进行预后多因素分析。结果 从 数据库中筛选出上调表达最明显的为，患者血浆中 表达水平显著高于乙型肝炎组和健康人组（）；表达的增加与肿瘤大小（）和肿瘤淋巴结转移阶段密切相关（）；分析显示，血浆鉴别 与健康人的曲线下面积（）为 ，敏感度为，特异度为。高 水平患者的总生存率显著低于低 水平患者。单因素分析显示，甲胎蛋白（）（）和（）为影响 预后的相关因素。多变量分析显示是 患者的独立预后指标。结论 可能作为诊断 和预后评估的新的生物学标志物。关键词：肝细胞癌；环状；诊断；预后中图分类号：；文献标志码：，：（）（），（），（），（）；（）（）；（），基础医学与临床 （）（）（）（）：；肝细胞癌（，）是全球最常见的恶性肿瘤，其 年总生存率不到。传统上甲胎蛋白（，）广泛用于 的临床诊断。但 的临床诊断价值有限（尤其是早期诊断）。因此揭示 发生的机制，并探索新的靶点或生物标志物，对 的早期诊断和治疗有重要意义。环状（，）广泛存在于血液、脑脊液、尿液等体液中，由于其特殊的稳定结构，已成为竞争性内源性 研究的最新焦点。研究证实，通过调节多重生物过程如增殖、侵袭和分化等影响疾病的进展。如 和 可作为 进展相关的生物标志物。前期研究发现，显著高表达于 癌组织中（未发表）。因此，本研究旨在检测 在 血浆中的表达水平，探讨其在 诊断及预后评估的临床价值。材料与方法 材料 研究对象：该研究经新疆医科大学第三附属医院伦理委员会批准，所有实验程序均根据赫尔辛基原则宣言进行。收集 年 月至 年 月在新疆医科大学第三附属医院诊治的行 切除术且病理诊断为 的患者共 例，患者者术前均未接受放射治疗和化学治疗（放化疗），收集 例患者术前的空腹静脉血，随访至 年 月。同时期健康人群和乙型肝炎人群各 名 例。所有患者均在入组前知情，并在收集患者样本进行实验前签署知情同意书。试剂：提取试剂盒（北京全式金生物技术有限公司）；反转录（）试剂盒，试剂（普洛麦格（北京）生物技术有限公司）；（靶基因），甘油醛 磷酸脱氢酶（，内参基因）引物（上海生工生物有限公司）。方法 组织中 表达谱分析：首先从美国国立生物技术信息中心公共数据平台（：？）下载基因芯片数据集，下载完成后借助 包对上述所查询出的数据进行标准化处理。使用 语言 包基于贝叶斯函数鉴定数据集的差异表达。差异基因需满足以下条件：绝对值，所得的差异基因用火山图进行可视化处理。血液及组织样本采集：用含 抗凝剂的采血管空腹从所有受试者获得的静脉血样品，静置一夜后，离心 后分离得到血浆。相邻正常和 组织分离后 保存直至使用。检测：按照试剂盒说明书提取血液和组织中的总。分光光度计（，）测量总 样品的浓度和纯度。按照反转录试剂盒说明书将 反转录为：包括 总、随机引物、（）引物、核苷酸混合物、重组 和 反转录酶，孵育。在 实时 系统上使用 （）进行实时荧光定量（）。引物使用（：）设计并由生工生物技术公司合成。引物序列如下：（靶基因）：和；，和。通过熔解曲线分析确认扩增特异性。的数据通过方法进行分析。统计学分析数据结果以平均值标准差（）表示。通过依马木买买提江阿布拉 血浆 在原发性肝细胞癌诊断和预后评估中的临床价值 （）软件包（，）和 （，）中的 检验或单因素方差分析评估组间的定量数据差异。通过 精确检验评估 表达与临床特征之间的关系。根据 血浆中 表达中位值将所有患者分为高和低表达组，通过单变量和多变量分析分析了 的预 后 价 值。建 立 受 试 者 工 作 特 征（，）曲线以评估诊断能力。结果 组织中 表达谱分析 个配对的人类 和肿瘤旁组织组间差异表达的具有统计学意义的（图）。组织和肿瘤旁组织之间的 表达模式有显著差异。共发现 个 表达变化超过两倍。其中，在肿瘤组织中上调和下调 分别为 个和 个（图）。列出了（表），其中上调表达最明显的为。图 及癌旁组织差异 筛选 表 组织中前 位上调和下调 信息 基础医学与临床 （）不同分组血浆中 的表达水平 患者血浆中 表达水平显著高于乙型肝炎组和健康人组（）（图）。图 在、乙型肝炎和 健康人中表达 ，（，）血浆 表达水平与 临床病理特征的相关性 表 达 的 增 加 与 肿 瘤 大 小（）和肿瘤淋巴结转移阶段（）密切相关。其他临床特征，如吸烟状况、酒精性肝硬化、乙型肝炎病毒感染、甲胎蛋白水平和分化程度，与表达无关（表）。血浆 的诊断价值 区别于健康人的 曲线结果显示，为，敏感度为，特异度为，表明 具有较好的临床诊断 的价值（图）。血浆 的预后价值高 水平患者的 年总生存率显著低于低 水平患者（）（图）。患者总生存时间预后因素的单变量和多变量分析单因素分析显示，（）和（）为影响 预后的相关因素。多变量分析影响 预后的相关因素，结果显示 是 患者的独立风险预后指标（）（表）。讨论肝细胞癌是世界范围内最常见的肝脏恶性肿瘤表 患者 的表达及临床病理特征 （）（）：；图 诊断原发性肝细胞癌的临床价值 依马木买买提江阿布拉 血浆 在原发性肝细胞癌诊断和预后评估中的临床价值图 表达水平与 患者预后 生存时间的关系 之一，病死率较高。尽管现有的临床干预措施，包括手术和栓塞治疗，显著提高了治疗效果，但高水平的复发和转移仍然是基础和临床领域的挑战。因此，探索肝癌发生的机制变得越来越迫切。最新研究表明，在基因组中广泛转录，并与人类疾病相关。以复杂的组织、细胞或发育阶段特异性方式表达，可能作为人类癌的潜在生物标志物发挥作用。如、和 分别被报道有希望成为成骨肉瘤、膀胱癌、乳腺癌、和结直肠癌的的预后生物标志物。本研究通过生物信息学方法分析揭示了 个配对的人类 和肿瘤旁组织中的 表达谱。结果显示 样本中的 表达水平与癌旁组织不同，在 对肝细胞癌患者样本中进行比较和分析，结果肿瘤组织中上调最明显的 为。研究证实，是从基因（对 链 反 义，基 因：）剪接而来，该基因产生一种非编码（），参与 和 的形成。已有的报道证实了这些 在肝细胞癌中表达下调。由于 是无末端的，其对传统 降解途径的消化具有抵抗力，故作为疾病诊断和监测的生物标志物更加可靠。是肝细胞癌监测和诊断中最常用的血清检测方法。但大量临床研究表明，即使以 作为 临界值，诊断敏感性也在左右。本研究中血浆 的诊断价值分析，敏感度和特异性为 和。这些结果表明，具有更好的临床诊断 的价值。进一步对 作为 潜在的诊断及预后分子标志物进行了初步评价，结果显示血浆 在用于区别 与乙型肝炎及健康人时，具有较好的诊断价值。预血浆 高表达后分析发现，和 是影响 患者预后的独立危险因素，患者的总生存时间显著短于低表达患者。这些数据表明 是 中表 患者总生存时间预后因素的单变量和多变量分析 （）（）（）（）（）（）（）（）（）（）；基础医学与临床 （）失调的，可能与 的发病机制密切相关。综上所述，不仅可能成为肝细胞癌诊断的潜在生物标志物，而且在肝癌的发生和转移过程中可能发挥作用。参考文献：，：，：，：，：，：赵钰珊，冀梦蝶，董昱诚，等肝细胞癌中 基因相关的表观遗传调控机制基础医学与临床，：，：，：，：，：黄海良，丁伟伟，李冬雪 过表达促进人肝癌细胞系 增殖和迁移基础医学与临床，：，：，：，：，：，：，：，（）：，：，（），：