针刺对穴“迎香-合谷”对变应性鼻炎大鼠Th1、Th2细胞因子及转录因子T-bet_GATA-3的影响.pdf

海南医学院学报 2023，29（15）Journal of Hainan Medical University针刺对穴“迎香合谷”对变应性鼻炎大鼠 Th1、Th2细胞因子及转录因子 Tbet/GATA3的影响胡情1，苏嘉琪1，楼金成1，苗镡允1，尹浩1，吉美奇1，翟春涛1，郝重耀2，吕玉娥1，2（1.山西中医药大学，山西 晋中 030600；2.山西省针灸医院，山西 太原 030006）摘要 目的：探讨“迎香合谷”对穴对过敏性鼻炎大鼠 Th1、Th2 相关细胞因子及转录因子 Tbet、GATA3的影响。方法：大鼠随机分成空白组、模型组、对穴组 3组。建立卵清蛋白（OVA）AR大鼠模型，观察大鼠一般情况并进行行为学评分，造模成功后第 2 天开始对对穴组行针刺干预，1 次/d，20 min/次，共 10 d。干预结束后观察大鼠一般行为、行为学评分及鼻黏膜组织形态学改变，鼻腔灌洗液涂片染色后镜检计数嗜酸性粒细胞（EOS），ELISA 检测大鼠血清总 IgE、IFN、IL12、IL4、IL5 含量，Western blot法和免疫组化法（IHC）检测大鼠鼻黏膜组织特异性转录因子 Tbet、GATA3蛋白水平和阳性蛋白的表达情况。结果：造模后，除空白组外，模型组、对穴组大鼠行为学观察评分均大于 5 分，提示造模成功。针刺对穴“迎香合谷”干预后，对穴组、西药组大鼠行为学评分较模型组明显下降（P0.05）。镜检示模型组鼻黏膜结构明显破坏，纤毛排列不连续，参差不齐，局部充血肿胀，上皮细胞大量脱落坏死，杯状细胞增生，有明显炎症细胞浸润。对穴组鼻黏膜病理程度较模型组明显减轻。与模型组比较，经对穴针刺干预后大鼠血清中的 IFN、IL2、IL12明显升高（P0.05），而 IgE、IL4、IL5、IL6明显降低（P0.05），鼻黏膜 GATA3蛋白及阳性表达明显降低，Tbet明显升高（P0.05）。结论：针刺对穴“迎香合谷”能有效改善 AR 大鼠鼻部敏感症状、达到控制鼻部炎症的目的，其机制可能是针刺对穴干预后上调了 Tbet 的表达，降低 GATA3 水平，并促进Th1型细胞因子的生成，抑制 Th2细胞的合成与分泌，从而使 Th1、Th2恢复免疫平衡状态。关键词 变应性鼻炎；对穴；“迎香”穴；“合谷”穴；辅助性 T 细胞；细胞因子；GATA 结合蛋白 3；T盒子转录因子中图分类号 R245 文献标识码 A 文章编号 1007-1237（2023）15-1135-09Effect of acupuncture on acupoint YingxiangHegu on Th1,Th2 cytokines and Tbet/GATA3 of allergic rhinitis ratsHU Qing1，SU Jiaqi1，LOU Jincheng1，MIAO Xinyun1，YIN Hao1，JI Meiqi1，ZHAI Chuntao1，HAO Zhongyao2，LV Yue1，2（1.Shanxi University of traditional Chinese Medicine，Jinzhong 030600，China；2.Shanxi Acupuncture Hospital，Taiyuan 030006，China）Foundation Project：Lv Jingshan Acupuncture and Medicine Combination Technology Innovation Team（2019TD003）；Lv Jingshan Acupuncture and Moxibustion and Bioelectronic Medicine Innovation Team（2022TD1006）Author：HU Qing，Email：.Correspondence to：LV Yue，Chief Physician，Email：.Received：20230226 Revised：20230611 JHMU，2023；29（15）：11351143View from specialist:It is creative,and of certain scientific and educational value.DOI：10.13210/ki.jhmu.20230613.003网络出版地址：https：/ 吕景山针药结合科技创新团队（2019TD003）；吕景山针灸与生物电子医学创新团队（2022TD1006）作者简介 胡情，Email：。通讯作者 吕玉娥，主任医师，Email：。收稿日期 20230226 修回日期 20230611 网络出版时间：20230614 17：01：111135海南医学院学报 Vol.29 No.15 Aug.2023ABSTRACT objective：To explore the effect of YingxiangHegu on Th1，Th2related cytokines and transcription factors Tbet and GATA3 in rats with allergic rhinitis.Methods：Rats were randomly divided into three groups：blank group，model group and acupoint group.The rat model of ovalbumin（OVA）AR was established，and the general condition of the rats was observed and scored.Acupuncture intervention was performed on the acupoint group on the second day after successful modeling，once per day for 20 minutes for 10 days.After intervention，the general behavior，behavioral score and histomorphological changes of nasal mucosa were observed.Eosinophils（EOS）were counted under microscope after nasal lavage smear staining，and the contents of total IgE，IFN，IL12，IL4 and IL5 in serum were detected by ELISA.Westernblot and IHC were used to detect the protein level and positive protein expression of specific transcription factors Tbet and GATA3 in rat nasal mucosa.Results：After the establishment of the model，except for the blank group，the behavioral observation scores of rats in the model group and acupoint group were more than 5 points，indicating that the model was successful.After acupuncture intervention on acupoint YingxiangHegu，the behavioral score of rats in the acupoint group and western medicine group was significantly lower than that in the model group（P0.05）.Microscopic examination showed that the structure of nasal mucosa in the model group was obviously damaged，cilia were arranged discontinuously，uneven，local congestion and swelling，a large number of epithelial cells exfoliated and necrotic，goblet cell proliferation，obvious inflammatory cell infiltration.The pathological degree of nasal mucosa in the pair point group was significantly less than that in the model group.Compared with the model group，the levels of IFN，IL2 and IL12 in serum were significantly increased，while IgE，IL4，IL5 and IL6 were significantly decreased，GATA3 protein and positive expression in nasal mucosa were significantly decreased and Tbet was significantly increased after acupuncture.Conclusion：Acupuncture at YingxiangHegu can effectively improve the nasal sensitive symptoms and control nasal inflammation in AR rats.The mechanism may be that acupuncture at YingxiangHegu can upregulate the expression of Tbet，decrease the level of GATA3，promote the production of Th1 cytokines and inhibit the synthesis and secretion of Th2 cells，thus restoring the immune balance of Th1 and Th2.KEYWORDS Allergic rhinitis；Paired points；Yingxiang acupoint；Hegu acupoint；Helper T cells；Cytokines；GATA binding protein 3；T box transcription factor变应性鼻炎（allergic rhinitis，AR）又称过敏性鼻炎，是一种由免疫球蛋白 E（IgE）介导的、以 2 型辅助 T 细胞（type 2 helper T cell，Th2）免疫反应为主的鼻黏膜非感染性慢性炎症性疾病，临床主要表现为阵发性喷嚏、流清涕、鼻塞鼻痒等，严重者甚至出现嗅觉减退等1。AR 的发病与环境暴露、遗传、气候变化和生活方式等多方面因素有关，屋尘螨、霉菌、动物皮毛是其主要的致敏来源2-4。近年来该病在中国的患病率一直呈上升趋势5。AR 的患病人群从儿童到成年人均易发生，约有 19%38%的AR 患者伴有哮喘6，还易导致睡眠障碍，给患者的社会生活、学习和工作带来极大痛苦7。AR易反复发作，临床上治疗 AR 主要有药物治疗、免疫治疗、环境控制、健康教育等8。针刺治疗 AR 具有一定优势9，越来越受到人们的关注。目前主要认为其发 病 机 制 主 要 为 Th1/Th2、Th17/调 节 性 T 细 胞（regulatory T cells，Treg）细胞间的免疫失衡10，其中，Th1、Th2失衡被认为是 AR发生的基础11，因此治疗 AR 的关键在于调整 Th1/Th2 细胞的比例、恢复 Th1/Th2之间的免疫平衡。“国医大师”吕景山教授在 AR 的诊治方面有丰富的临床经验，通过运用针刺对穴“迎香合谷”在临床治疗 AR 中取得了显著疗效，且复发率低，能有效提高患者治疗后的生活质量12，但针刺对穴治疗 AR 的作用机制尚不明确，以卵清蛋白（ovalbumin，OVA）构建 AR 大鼠模型能较好地模拟 AR 的临床症状，因此本研究主要从 Th1、Th2 细 胞 间 的 免 疫 平 衡 入 手，通 过 构 建OVA AR 大鼠模型，观察针刺“迎香合谷”对穴对AR 大鼠 Th1、Th2细胞因子及转录因子 Tbet/GATA3的影响，探讨对穴干预 AR的作用机制。1 材料与方法 1.1实验动物及分组SPF 级 SD 大鼠 30 只，雌雄各半，46 周龄，（20040）g，由斯贝福（北京）生物技术有限公司提供，许可证号：SCXK（京）20190010。饲养于山西中医药大学科研楼针灸针法实验室，温度 2023，湿度 40%60%。适应性喂养 7 d 后将大鼠按 130编号，采用随机数字表法将大鼠随机分为空白组、模型组、对穴组 3 组（10 只/组）。空白组正常喂养不造模，其余 2 组均进行造模。实验过程中均遵守动物伦理原则，本研究经山西中医药大学实验动物伦理委员会批准（批准编号：AWE202209144）。主要仪器与试剂 卵清蛋白（OVA，A5503，美国sigma公司）；氢氧化铝干粉（Al（OH）3，A800854，1136胡情等.针刺对穴“迎香合谷”对变应性鼻炎大鼠 Th1、Th2细胞因子及转录因子 Tbet/GATA3的影响上 海 基 屹 生 物 科 技 有 限 公 司）；Rat（IgE）（W20015413）、Rat（IL5）（W20015414）ELISA 试剂 盒，华 美 生 物；IL4（L220715832）、IL12（L221010663）ELISA 试 剂 盒，优 尔 生 生 物；Rat IFN（A38020124）、Rat IL2（A30211236）、Rat IL6（A30611235）ELISA 试剂盒，联科生物。Actin一 抗，（Actin 一 抗，1 3 000，GB15003）、二 抗HRP山羊抗兔（1 5 000，GB23303），Servicebio 公司；GATA3 一 抗（1 1 000，AF6233），Affinity 公司；Tbet一抗（1 1 000，ab91109），Abcam 公司。酶标仪（BioTek，型号Eproch）；台式高速冷冻离心机（大龙，D3024R）；研磨仪（Servicebio 公司，KZ）；转印电泳仪（Servicebio 公司，SVT2）；超声波细胞破碎仪（宁波新芝，JY9211N）；扫描仪（EPSON 公司，V370）；正置光学显微镜（日本尼康，Nikon Eclipse E100）；图像分析软件（Adobeg 公司，Adobe PhotoShop）；成像系统（日本尼康，NIKON DSU3）；一次性无菌针灸针（规格0.25 mm13 mm，苏州医疗用品厂有限公司）。2 方法 2.1造模方法参照文献 13，14 造模方法，AR 造模共分为 3个阶段，（1）基础致敏：将 0.3 mg OVA+30 mg Al（OH）3+1 mL 生理盐水制成混悬液以备用，模型组、对穴组每只大鼠均进行腹腔注射，空白组用不含 OVA 的混悬液替代，隔日 1 次，共 7 次；（2）强化激发：第 1420 d，以每侧 5%OVA 生理盐水混悬液 50 L 滴鼻，空白组以等量生理盐水替代滴鼻，每日 1 次，共 7 d；（3）模型维持：第 2130 d，每次干预结束 30 min 后给予每侧 5%OVA 氯化钠溶液混悬液 20 L 滴鼻，空白组以等量生理盐水替代滴鼻，每日 1次，共 10 d。（注：因 AR属于变态反应性疾病，造模后机体为致敏状态，但只有在接触变应原后才会触发变态反应，因此造模成功后仍需进行模型的维持）2.2模型评价最后 1次激发结束 30 min后对大鼠鼻敏感症状进 行 观 察 评 分，若 累 积 总 分 5 分，则 提 示 造 模成功。2.3干预方法造模结束后第 2 天（即第 22 天）开始进行干预。空白组正常喂养，不干预。对穴组于每次激发前对“迎香合谷”穴位行针刺干预，迎香、合谷穴的定位参照郭义15主编的 实验针灸学“动物针灸穴位图谱”有关内容。迎香穴：大鼠直视时，鼻孔外侧与眼球中心交界处，即大鼠两鼻孔外侧约 3 mm，皮肤毛交界处；合谷穴：位于大鼠前肢第一与第二掌骨之间，当第 2掌骨桡侧缘的中点处。具体操作为：将大鼠套上防咬环后绑缚固定，穴区常规消毒，合谷穴直刺进针，迎香穴斜刺进针，深度约为 0.3 cm，留针20 min，合谷穴同步行针，10 min/次，每日 1 次，共10 d，模型组同对穴组一样绑缚 20 min，不予针刺。2.4行为学观察评分于造模前、后及最后一次干预结束、鼻部激发后采用症状叠加量化计分法16观察大鼠鼻部过敏症状并进行评分，评分标准详见表 1。2.5取材于干预结束第 2 天取材。大鼠称重、腹腔注射麻醉（3%30 mg/kg 戊巴比妥钠）后采血，静置后离心 15 min（3 000 r/min），取上清至冻存管。然后用注射器经后鼻道推注生理盐水灌洗鼻腔，同时用1.5 mL EP 管在鼻孔处收集灌洗液。随即剥离大鼠双侧鼻黏膜组织，一侧置于 4%中性多聚甲醛溶液中固定，另一侧锡纸包裹液氮速冻后转存至80 冰箱。2.6鼻黏膜组织形态学观察取固定好的鼻黏膜组织依次经脱水、包埋、烤干后二甲苯透明、脱蜡水洗后进行 HE 染色，中性树胶封片，镜下观察组织形态学病理改变。2.7鼻腔灌洗液涂片 EOS计数将鼻腔灌洗液离心 3 000 r/min，10 min，沉淀物涂片，干透后固定，石蜡划线后滴加瑞氏染液，静置1 min，滴加 PBS 缓冲液，5 min 后流水冲洗，待干透后镜检进行 EOS计数。2.8 ELISA 检 测 大 鼠 血 清 总 IgE、IFN、IL2、IL12、IL4、IL5、IL6水平将收集的血样本离心 3 000 r/min，10 min，取上清，放 4 冰箱，待测。然后按照试剂盒说明书步骤分别检测大鼠血清 IgE、IFN、IL2、IL12、IL4、表 1 鼻部过敏症状评分标准Tab 1 Scoring criteria for nasal allergy symptoms挠鼻无偶尔（15次）频繁（610次）抓不停（11次）喷嚏无1341011流涕无流至前鼻孔流出前鼻孔涕流满面记分01分2分3分1137海南医学院学报 Vol.29 No.15 Aug.2023IL5、IL6含量。2.9Western blot检测大鼠鼻粘膜组织 Tbet、GATA3蛋白水平取鼻黏膜组织加入裂解液匀浆提取蛋白，配制SDSPAGE 上样电泳，电泳至溴酚蓝里最底部约 1 cm 后 300 mA 恒流转膜 30 min（湿转），转印后清洗并加入脱脂牛奶脱色，室温封闭后加入一抗（GATA3 1 1 000；Tbet 1 1 000；Actin 1 3 000），4 过夜，洗膜后加入二抗（HRP山羊抗兔 1 5 000），室温孵育后再次洗膜，ECL 溶液发光显影，扫描胶片存档，采集图片，分析各组蛋白条带。2.10免疫组化检测大鼠鼻黏膜中 Tbet、GATA3的表达情况鼻黏膜组织石蜡切片依次脱蜡至水，自然冷却后在脱色摇床上洗涤，在组化圈内滴加 3%BSA，室温封闭，滴加一抗，切片平放于湿盒内 4孵育过夜；滴加二抗，室温孵育后 PBS水洗 3次；滴加 DAB显色液，棕黄色即为阳性区域，自来水冲洗切片终止显色；复染后分化液分化、返蓝，流水冲洗、脱水透明，中性树胶封片。在白光显微镜下进行结果判读。（苏木素染细胞核为蓝色，DAB显色的阳性表达为棕黄色）。2.11统计学处理各项实验数据采用统计软件 SPSS26.0 进行统计学分析处理；采用 Image Pro Plus7.0 进行分析各组免疫组化结果平均吸光度；各组实验数据统计图采用 GraphPad Prism 8.0 软件作图处理；数据资料均用均数标准差（x s）表示；经正态和方差齐性检验后，采用 OneWay ANOVA 进行均数比较，用LSDt 检验进行组间比较，当 P0.05）；造模后，与空白组同期相比，造模各组体质量显著下降（P0.05）；针刺干预后，与模型组同期相 比，对 穴 组 大 鼠 体 质 量 明 显 上 升（P5分，提示造模成功；最后 1次干预后 30 min内再次评分，与模型组比较，对穴组 AR 症状行为学总分明显降低，且小于 5 分（P0.05）。见表 3。3.3鼻黏膜组织形态学观察镜检示空白组鼻黏膜结构完整，纤毛密集，排列整齐，无明显炎症细胞浸润；模型组鼻黏膜结构明显破坏，纤毛排列不连续，参差不齐，局部充血肿胀，上皮细胞大量脱落坏死，杯状细胞增生，有明显炎症细胞浸润。对穴组鼻黏膜病理程度较模型组明显减轻，结构相对完整，未见明显充血水肿，纤毛整齐，少量脱失，上皮细胞排列整齐、分布均匀，未见 明 显 杯 状 细 胞 增 生，有 少 量 炎 症 细 胞 浸 润。见图 1。3.4鼻腔灌洗液细胞涂片 EOS计数与空白组比较，模型组 EOS数量明显增多（P0.05）；与模型组 比 较，对 穴 组、EOS 计 数 明 显 减 少（P0.05）。见表 4。3.5血清 IgE、IFN、IL2、IL12、IL4、IL5、IL6含量比较与 空 白 组 比 较，模 型 组 大 鼠 血 清 中 的 IgE、IL4、IL5、IL6 含 量 显 著 升 高，而 IFN、IL2、IL12水平显著降低（P0.05）；与模型组比较，对穴组大鼠血清中的 IFN、IL2、IL12 含量显著升高，IgE、IL4、IL5、IL6水平明显下降（P0.05造模后241.414.82208.377.17*204.385.81*0.02干预后295.446.50225.936.87*254.749.090.03注：与空白组同期比较，*P0.05；与模型组同期比较，P0.05造模后0.400.706.201.03*5.800.63*0.02干预后0.400.526.100.99*0.800.920.02注：与空白组同期比较，*P0.05；与模型组同期比较，P0.05）。见表 5、6。3.6大鼠鼻黏膜特异性转录因子 Tbet、GATA3蛋白表达情况与空白组比较，模型组大鼠鼻黏膜中的 GATA3蛋白水平显著升高，而 Tbet水平显著降低（P0.05）；与模型组比较，对穴组大鼠 Tbet蛋白表达明显升高，而 GATA3 水平显著降低（P0.05）。见图 2。3.7 免 疫 组 织 化 学 染 色 法 检 测 大 鼠 鼻 黏 膜 中Tbet、GATA3的阳性表达情况棕黄色的部分为阳性表达区域棕黄色的部分为阳性表达区域。（1）从 Tbet 阳性表达情况看，空白组大鼠鼻黏膜固有层炎症细胞胞质内可见棕黄色区域，提示正常鼻黏膜组织中 Tbet 表达程度较A：空白组；B：模型组；C：对穴组图 1各组大鼠鼻黏膜组织 HE染色结果图（200）Fig 1HE staining results of nasal mucosa tissues of rats in each group（200）表4 各组大鼠鼻腔灌洗液涂片EOS计数情况比较（n=10，x s）Tab 4 Comparison of EOS counts on nasal lavage fluid smears of rats in each group（n=10，x s）组别空白组模型组对穴组PEOS计数（个）2.921.3089.3914.25*9.683.090.000 2注：与空白组比较，*P0.05；与模型组比较，P0.05。与空白组比较，*P0.05；与模型组比较，P0.05图 2各组大鼠鼻黏膜 Tbet、GATA3蛋白表达Fig 2Comparison of Tbet and GATA3 protein expression in the nasal mucosa of rats in each group 1139海南医学院学报 Vol.29 No.15 Aug.2023高；模型组棕黄色染色范围较小，Tbet表达程度较低；对穴组可见阳性表达范围较大，Tbet表达程度较模型组高。（2）从 GATA3 阳性表达情况看，GATA3 在胞质内表达较多，空白组大鼠鼻黏膜组织在固有层中有较小范围的棕黄色区，且染色较浅，这说明在正常鼻黏膜组织中 GATA3表达较少；模型组大鼠鼻黏膜组织在固有层炎症细胞胞质内有大面积阳性区域，且颜色较深，呈棕褐色，GATA3表达程度较高；对穴组大鼠鼻黏膜组织固有层可见表 5 大鼠血清 IgE、IFN、IL2、IL12含量比较（n=10，x s）Tab 5 IgE，IFN、IL2 and IL12 levels in serum of rats（n=10，x s）组别空白组模型组对穴组PIgE（ng/mL）21.002.0186.184.59*36.7710.110.000 1IFN（pg/mL)227.1634.4480.0018.23*182.967.150.000 6IL2（pg/mL)289.0741.4598.915.70*294.7327.570.000 3IL12（pg/mL)3.310.540.450.14*2.700.370.000 2注：与空白组比较，*P0.05；与模型组比较，P0.05。表 6 大鼠血清 IL4、IL5、IL6含量比较（n=10，x s）Tab 6 Comparison of IL4，IL5，and IL6 levels in serum of rats（pg/mL，n=10，x s）组别空白组模型组对穴组PIL463.072.84134.2524.90*83.996.920.003 0IL524.997.0997.1812.24*37.118.040.000 2IL661.1711.01161.3521.70*83.697.300.000 4表 7 大鼠鼻黏膜 Tbet、GATA3蛋白表达比较（Tbet/Actin，GATA3/Actin，x s）Tab 7 Comparison of Tbet and GATA3 protein expression in nasal mucosa of rats（Tbet/Actin，GATA3/Actin，x s）组别空白组模型组对穴组PTbet0.550.110.190.04*0.580.120.000 1GATA30.580.051.050.10*0.740.080.000 6表 8 各组大鼠 Tbet、GATA3平均吸光度比较（n=10，x s）Tab 8 Comparison of average absorbance of Tbet and GATA3 in each group of rats（n=10，x s）组别空白组模型组对穴组PTbet57.162.406.841.19*52.964.020.000 1GATA324.997.0997.1812.24*37.118.040.000 3免疫组织化学法，箭头示阳性表达。A：空白组；B：模型组；C：对穴组。图 3各组大鼠鼻黏膜组织中 Tbet阳性表达结果比较Fig 3Comparison of Tbet positive expression results in nasal mucosa tissues of rats in each group1140胡情等.针刺对穴“迎香合谷”对变应性鼻炎大鼠 Th1、Th2细胞因子及转录因子 Tbet/GATA3的影响较少面积的棕黄色区域，颜色较浅，GATA3 呈低表达。（3）从平均光密度来看，模型组 GATA3平均吸光度较空白组明显提高，Tbet 则明显下降（P0.05）；与模型组相比，对穴组的 GATA3平均吸光度明显降低，Tbet 表达量明显增加（P5 分，提示造模成功，且模型组大鼠血清中 Th1 相关细胞因子 IFN、IL2、IL12水平明显降低，Th2 细胞因子 IL4、IL5、IL6 水平显著升高，进一步验证了 Th1/Th2免疫失衡参与了AR 的发病过程，这与以往的研究结果一致43。针刺对穴“迎香合谷”干预后，对穴组 AR 大鼠行为学评分明显下降，且5分，鼻腔灌洗液中 EOS计数明显减少，大鼠鼻黏膜组织炎症浸润情况明显好转，鼻黏膜 GATA3 表达明显降低、Tbet 水平显著，Th1 细胞 IFN、IL2、IL12 水平明显升高，Th2 细胞因子 IL4、IL5、IL6水平明显降低，纠正了 Th1/Th2细胞间的免疫失衡，从而缓解了局部炎症反应。因此，针刺对穴“迎香合谷”的干预作用可能是通过降低 Th2 特异性转录因子 GATA3 的水平，阻止Th0 细胞分化成 Th2 细胞，进而减少 Th2 型细胞因子促炎因子 IL 4、IL5、IL6的分泌；同时，提高 Th1特异性转录因子 Tbet 的表达，促进 Th1 细胞分化发挥免疫抑制作用、使 Th1/Th2恢复免疫平衡状态实现的。本研究主要探讨针刺对穴“迎香合谷”对AR大鼠 Th1/Th2相关细胞因子及特异性转录因子的影响，阐述了针刺对穴干预 AR 的作用机制，给临床提供了一定的循证医学证据。参考文献1中华耳鼻咽喉头颈外科杂志编辑委员会鼻科组，中华医学会耳鼻咽喉头颈外科学分会鼻科学组.中国变应性鼻炎诊断和治疗指南（2022 年，修订版）J.中华耳鼻咽喉头颈外科杂志，2022，57（2）：106129.2Zhang Y，Lan F，Zhang L.Advances and highlights in allergic rhinitis J.Allergy，2021，76（11）：33833389.3Ciprandi G，Tosca MA.House dust mitesdriven allergic rhinitis：Could its natural history be modified J.Expert Rev Clin Immunol，2021，17（2）：109114.4Siddiqui ZA，Walker A，Pirwani MM，et al.Allergic rhinitis：Diagnosis and managementJ.Br J Hosp Med（Lond），2022，83（2）：19.5王孟，郑铭，王向东，等.中国过敏性鼻炎流行病学研究进展 J.中国耳鼻咽喉头颈外科，2019，26（8）：415420.6Bousquet J，Anto 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