晚期肝癌免疫微环境CD38...D-1抑制剂疗效相关性分析_孙小虎.pdf

肝脏 年月第 卷第期肝癌晚期肝癌免疫微环境 表达水平与 抑制剂疗效相关性分析孙小虎王璐白静慧于洪基金项目：辽宁省科学技术厅 年省重点研发计划指导计划项目（）作者单位：沈阳中国医科大学肿瘤医院、辽宁省肿瘤医院胸部放疗病区（孙小虎，于洪），综合内科（王璐，白静慧）通信作者：于洪，：【摘要】目的探索晚期肝癌（）患者 表达水平与 抑制剂疗效的相关性。方法选取 年月日至 年 月 日辽宁省肿瘤医院接受 抑制剂治疗的晚期肝癌患者 例。采用肝穿刺的方法选取晚期肝癌患者的肿瘤组织，取同期行手术治疗的 份 癌旁正常组织作为对照。采用生物信息学分析的方法分析 的表达与 患者预后的关系；采用免疫组化的方法检测 及癌旁正常组织中 的表达；对使用 抑制剂治疗的 患者进行随访观察，对比 的表达水平与患者预后的关系；采用单因素分析的方法筛选出影响晚期 患者预后的危险因素。结果 数据库显示在（，：，）及晚期（，：，）样本中，表达越高，患者的 越长。晚期 患者中 的表达明显低于癌旁正常组织（，）；高表达的患者使用 抑制剂的效果优于 低表达的患者（，），的表达与 抑制剂的效果之间具有一定的相关性（，）。相对于 低表达的患者，高表达的患者具有更长的总生存时间（）周比（）周 和无进展生存时间（）周比（）周（）。分期、分级及 的表达可能与患者的 相关。结论晚期 患者的 表达低，高表达的 预示患者 抑制剂效果较好。【关键词】晚期肝癌；免疫微环境；免疫治疗；抑制剂 ，.，；.，：，：.【】（），；（，：，）（，：，），；（，）；（，），（，）；（，）（，）（）；，DOI:10.14000/ki.issn.1008-1704.2023.01.017 ，（），【】；肝细胞癌（，）是第三大癌症相关死亡原因，仅次于肺癌和胃癌，。目前多采用手术切除和肝移植的方法治疗早期 ，但早期手术切除的年生存率仍较低，且术后的复发率高达 。目前，多激酶靶向抑制剂索拉非尼及乐伐替尼被用于晚期 的一线治疗，主要通过抑制血管内皮生长因子发挥作用。随着研究的进展，免疫检查点抑制剂（，）逐步被应用到晚期 的治疗中，如 抑制剂纳武尤利单抗（）等，但 当 前 的 临 床 试 验 显 示 仅 有 约 的患者对治疗有反应。研究表明，晚期 患者中 免疫细胞的表达与预后有关。本研究探索晚期 中 分子的表达水平与 抑制剂治疗效果的相关性。资料与方法一、一般资料选取 年月日至 年 月 日辽宁省肿瘤医院接受免疫治疗（抑制剂）晚期肝癌患者 例，其中男性 例，女性 例。纳入标准：年龄 岁；肝癌临床分期为 及 期，已无手术指 征；既 往 未 接 受 过 免 疫 治 疗（抑制剂）；无肝穿刺禁忌；一般情况尚可，评分为分，肝功能 为或级，预期寿命个月；治疗前临床资料完整。排除标准：合并严重肝、肾损伤或自身免疫性疾病；对本研究使用药物过敏的患者；合并其他恶性肿瘤的患者；门静脉主干或腔静脉存在癌栓的患者。所有患者签署相关知情同意书。本研究获得医院伦理委员会的批准。二、生物信息学数据从 数 据 库（：？）中 搜 索 在 中的信息，绘制相对于正常组织而言，在 及晚期 中的生存分析曲线。收集患者性别、年龄、甲胎蛋白（）水平、当前 抑制剂为几线治疗方案、是否为乙肝或丙肝患者、分级、分期、评分、是否存在血管侵犯、既往是否行外科手术或介入治疗及影像学资料等。所有患者在使用 抑制剂前均进行血液检查包括血清胆红素、血浆白蛋白、凝血功能等，影像学检查包括原发肿瘤灶、腹水、转移情况。三、肝穿刺活检采用 （意大利）及 型超声诊断仪进行超声定位下穿刺，检查前空腹 以上。患者取左侧卧位，常规消毒右侧腋前线 肋间隙，利多卡因局部麻醉，在超声引导下进针至肝包膜下 处，使 用 一 次 性 自 动 活 检 针 迅 速 取 肝 组 织 ，固定。每例患者多点取材（次）。取同期手术切除 患者的癌旁组织 份作为对照。四、免疫组织化学检查采用 系列试剂盒进行免疫组织化学染色，石蜡切片脱蜡至水蒸馏水冲洗 浸泡 抗原修复 室温孵育 冲洗加入 山羊血清孵育 后加入一抗（鼠抗人 单克隆抗体，购自 公司，稀释为 ）低温过夜 冲洗二抗 孵育 冲洗添加标记好的链霉卵白素孵育 冲洗 显色苏木精复染。结果判读：将所有的染色切片在光镜下观察并进行图像采集。表达于 癌巢中部分肿瘤细胞、间质细胞及细胞外基质。高倍镜下选取个视野进行拍照记录。视野内未见浅黄色及棕黄色部分为 阴性（），视野内浅黄色阳性率在 为 弱阳性（），视野内浅黄色部分超过 或棕黄色部分超过 为 表达强阳性（），（）及 （）为低表达，（）为高表达。五、抑制剂治疗患者使用的 抑制剂的种类不同，其中特瑞普利单抗 例，卡瑞丽珠单抗 例，信迪利单抗 例。特瑞普利单抗为每周次，每次 ，静脉滴注；卡瑞利珠单和信迪利单抗为每周次，每次 ，静脉滴注。六、观察指标主要观察指标为无进展生存期（肝脏 年月第 卷第期 ，），次要 观察指标为总 生存期（，）。治疗效果的评估采用 标准，完全缓解（，）：患者所有目标病灶腹部 示动脉期增强显影（目标病灶）均消失；部分缓解（，）：腹部 示目标病灶直径总和缩小；疾 病稳 定（，）：目标病灶缩小未达到 或增大未达到；疾病进展（，）：目标病灶的直径总和增大 或出现新的病灶。患者每次入院接受治疗前均行腹部增强 检查以评估疾病情况，记录个疗程后的治疗效果。治疗有效 。治疗结束后随访时间至 年 月日。七、统计学分析采用 软件进行统计学处理。计数资料以例数表示，比较采用检验，相关性分析采用 检验，单因素分析采用 法，并绘制生存分析曲线。为差异有统计学意义。结果一、在肝癌组织中的表达在 数据库中，所有肝癌患者及晚期肝癌患者的 低表达均预示 更短（），如图 和 所示。本研究 例晚期肝癌患者肝癌组织中，（）例，（）例，（）例；手术切除的 患者 份癌旁组织样本中 表达阴性例，（）例，（）例；差异有统计学意义（，）。二、表达与 抑制剂治疗效果的相关性 例患者中，低表达 例，高表达 例。个治疗周期后，达到 患者例，患者例 （）例，（）例，患者 例 （）例，（）例，（）例，患者 例 （）例，（）例，（）例，治疗有效 例，无效 例。治疗有效患者中 低表达例、高表达 例；治疗无效患者中 低表达 例，高表达 例，差异有统计学意义（，）。检测 表达与 抑制剂治疗效果之间存在明显相关性（，）。三、表达与患者生存的关系至随访期结束，例患者中共有 例（）患者死亡，有例（）患者出现疾病进展，例（）患者疾病未进展，高表达及低表达组的 及 如图、所示。：数据库中 在晚期 中的 生存曲线（）；：数据库中 在总 样本中的 生存曲线（）；癌旁正常组织 的表达情况；：晚期 患者肝组织 的表达情况图 在肝癌组织中的表达情况：高表达患者与低表达患者 曲线；：高表达与低表达患者 曲线图 表达与患者生存的关系 ，四、影响晚期肝癌患者 的相关因素分析单因素分析显示 分期、分级及 的表达可能与患者的 相关（），见表所示。表影响患者 的相关因素分析影响因素 值肝炎病毒感染 肝硬化 脉管侵犯 评分 分级 远处器官转移 分期 抑制剂 既往治疗史 表达 讨论不同于细胞毒性治疗、小分子靶向抑制剂等治疗方式，免疫治疗可直接靶向肿瘤本身和肿瘤免疫微环境，是一种具有前景的新型治疗方法。抑制剂在某些癌症的反应率相对较低，限制了其临床使用。可能与患者的肿瘤免疫微环境存在着明显差异有关。机体正常细胞上 的表达与其激活状态有关。其在不同类型的肿瘤中表达不一，可通过促进能量代谢的方式促进鼻咽癌的进展，也可以通过抑制肿瘤的能量代谢而抑制前列腺癌的进展。在 中，表达的增加与 巨噬细胞的激活相关，这一过程的特点是 表达增加，及 的分泌增加，这些细胞因子有助于提高抗肿瘤免疫。使 可作为 免疫治疗的一个潜在的靶点。本研究结果显示，发挥抑制 进展的作用，高表达的患者具有更长的 。通过对比 抑制剂治疗患者的 的表达水平，显示出 的水平与 抑制剂治疗效果的相关性。对骨髓移植后的患者外周血淋巴细胞亚群分析显示，移植者外周血出现明显增多的 细胞，细胞发挥出较高的细胞溶解及产生干扰素的潜能，具 有 一 定 的 免 疫 器 官 损 伤 的 作 用。在 中，与巨噬细胞特异性标志物 共同表达，巨噬细胞的密度与 患者术后的良好预后相关。表达的增加通常与 抑制治疗的临床疗效较好相关，但并非适用于所有肿瘤 。其中一个可能的机制是细胞外的腺苷通过肿瘤固有免疫的作用而发挥免疫抑制效应。在一部分治疗所诱导的免疫细胞亚群中具有较高的表达，被认为是一类具有潜力的分子。有研究认为，抑制剂会因高表达的 而出现耐药，在肿瘤免疫微环境中全反式维甲酸和 释放之后出现，是通过腺苷途径抑制 细胞的效应，而本研究中发现高表达的 与 患者的预后相关，这表明 与 之间的生物学联系仍有待探索。本研究通过对晚期 患者的临床资料及肿瘤组织进行分析，表明高表达的 预示着 患者的良好预后。但本研究样本数量少，随访时间短，有待后续研究的进一步开展。利益冲突声明：所有作者均声明不存在利益冲突。参考文献 ，：，（）：芦东徽，郝文胜，费振乐，等索拉非尼治疗 例晚期原发性肝癌临床疗效观察实用肝脏病杂志，（）：，：，（）：汪华，赵亚宁索拉菲尼治疗进展期原发性肝癌患者有效性及安全性研究实用肝脏病杂志，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：（下转第 页），：，（）：，（）：，（）：，：，（）：，（）：，：，（）：，（）（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，：，：，：，（）：，：，（）：，：，（）：（收稿日期：）（本文编辑：钱燕）（上接第 页），（），（）：，：，（）：，：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：（收稿日期：）（本文编辑：钱燕）