GBZ_T 309—2018 尿中丙酮的测定 顶空—气相色谱法 (1).pdf

ICS 13.100 C 52 中 华 人 民 共 和 国 国 家 职 业 卫 生 标 准中 华 人 民 共 和 国 国 家 职 业 卫 生 标 准 GBZ/T 3092018 尿中丙酮的测定 顶空-气相色谱法 Determination of acetone in urine Headspace-gas chromatography method 2018-08-16 发布 2019-01-01 实施 中华人民共和国国家卫生健康委员会 发布 GBZ/T 3092018 I 前 言 根据中华人民共和国职业病防治法制定本标准。本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。本标准主要起草单位：武汉科技大学医学院、湖北中医药大学、武汉市职业病防治院。本标准主要起草人：梅勇、周婷、宋世震、叶方立、吴磊、孙丹陵、姚群峰、江金凤。GBZ/T 3092018 1 尿中丙酮的测定 顶空-气相色谱法 1 范围范围 本标准规定了测定尿中丙酮的顶空-气相色谱法。本标准适用于职业接触人员尿中丙酮的测定。2 规范性引用文件规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GBZ/T 295 职业人群生物监测方法 总则 GB/T 6682 分析实验室用水规格和实验方法 3 原理原理 尿液样品（以下称尿样）中丙酮经过顶空技术预处理后，取一定量的顶空气体注入气相色谱仪，经过毛细管柱分离，氢火焰离子化检测器检测，保留时间定性，峰高或峰面积定量。4 仪器仪器 4.1 玻璃顶空瓶：20 mL，配硅胶密封垫。4.2 恒温水浴锅：控温精度 1。4.3 涡旋混合仪。4.4 电子天平。4.5 微量注射器：100 L。4.6 气密性注射器：1 mL。4.7 聚乙烯塑料瓶：50 mL。4.8 尿比重计。4.9 气相色谱仪，氢火焰离子化检测器，仪器操作参考条件：a)色谱柱：30 m 0.32 mm 0.25 m，二甲基聚硅氧烷（100%）毛细管色谱柱，或硝基对苯二甲酸改性的聚乙二醇毛细管柱；或者使用相同极性的毛细管色谱柱。b)柱温：60；GBZ/T 3092018 2 c)进样口温度：150；d)检测器温度：200；e)载气（氮气）流量：1.2 mL/min；f)氢气流量：30 mL/min；g)分流比：10:1。5 试剂试剂 5.1 实验用水：按照 GB/T 6682 执行。5.2 丙酮，色谱纯。5.3 盐酸，分析纯。5.4 无水硫酸钠，分析纯。5.5 丙酮标准溶液：于 100 mL 容量瓶中预先加入 50.0 mL 水，用微量注射器准确量取 100.0 L 丙酮加入容量瓶中，加水至刻度，充分混匀，此溶液为 788.0 mg/L 丙酮标准溶液或使用购买的标准物质。6 样品的采集、运输和保存样品的采集、运输和保存 用聚乙烯塑料瓶采集丙酮接触者下班前 1 h 内班末尿，盖紧密封，送回实验室，测量比重后，按 100:1的比例加入 1:1 的盐酸作防腐剂，尽快测定。尿样在 4 冰箱中可保存一周。7 分析步骤分析步骤 7.1 样品处理：当天采集的尿样测定前混匀；4 冰箱保存的尿样，取出恢复至室温，充分摇匀后测定。7.2 标准曲线的绘制：用去离子水将丙酮标准溶液稀释成 0.0 mg/L、5.0 mg/L、10.0 mg/L、20.0 mg/L、40.0 mg/L、80.0 mg/L、160.0 mg/L 的标准系列溶液。分别取 3.0 mL 标准系列溶液至顶空瓶中，加入 4.0 g 无水硫酸钠（可加入 4.0 g 氯化钠代替无水硫酸钠），然后立即用配套瓶盖封紧瓶口，涡旋混匀 30 s后，放入 50 恒温水浴中平衡 20 min，用 1 mL 注射器抽取瓶内上部气体 1.0 mL，迅速注入气相色谱仪，按照 4.9 的操作条件测定，每个浓度平行进样 3 次。以峰高或峰面积均值为纵坐标，丙酮浓度（mg/L）为横坐标，绘制标准曲线或计算回归方程。7.3 样品测定：取样品及空白尿样各 3.0 mL，置于顶空瓶中，按照标准系列的操作条件测定，根据峰高或峰面积由标准曲线或回归方程得所对应尿中丙酮的浓度（mg/L）。8 计算计算 8.1 按式（1）计算尿样换算成标准比重（1.020）下的浓度校正系数（k）。GBZ/T 3092018 3 1.0201.0001.000k实测比重(1)8.2 按式（2）计算尿中丙酮的浓度 C C0k (2)式中：C 尿中丙酮的浓度，mg/L；C0 由标准曲线或回归方程得到的丙酮浓度，mg/L；k 尿样换算成标准比重（1.020）下的浓度校正系数。9 说明说明 9.1 本法的最低检出浓度为0.67 mg/L，定量下限为2.2 mg/L；测定范围为2.2 mg/L157.6 mg/L，相对标准偏差为5.7%9.3%，平均加标回收率为93.9%104.5%。9.2 尿样采集结束后应尽快密封常温运输，运回实验室后尽快测定，4可保存一周。9.3 丙酮易挥发，顶空瓶的气密性需良好，防止水浴加热过程中丙酮挥发造成损失。9.4 可参照本实验顶空条件采用全自动顶空分析仪进行分析。9.5.尿中若同时存在甲醇、二氯甲烷和甲基乙基酮等挥发物质不干扰丙酮的测定；职业接触异丙醇可导致尿丙酮增高，应注意识别空气中是否同时存在异丙醇。9.6.整个检测过程的质量保证应按照 GBZ/T 295 的要求进行。_