大豆提取液对20种常见致病菌的体外抗菌活性研究.pdf

作者简介 徐海滨(1976-),女,学士,主管技师,主要从事病原微生物检验研究。【论著】大豆提取液对20种常见致病菌的体外抗菌活性研究徐海滨,郭维植,林震宇,董新平(福建省疾病预防控制中心,福州 350001)摘要 目的:观察大豆提取液对20种常见致病菌的体外抗菌作用。方法:采用试管稀释法测定大豆提取液对20种常见致病菌的最低抑菌浓度(M IC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果:大豆提取液对大肠杆菌、铜绿假单胞菌、鼠伤寒沙门菌、福氏志贺菌、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、霍乱弧菌等20种常见致病菌的M IC范围在1 600204 800g/ml;MBC范围在1 600102 400g/ml。结论:大豆提取液具有较强的抗菌活性和较广的抗菌谱。关键词 大豆提取液;致病菌;抗菌活性中图分类号R378文献标识码A文章编号1004-8685(2006)02-0167-02Study on antibacterial activity of soybean extract aga inst 20 pathogens in vitroXu Hai2bin,GuoW ei2zhi,L in Zhen2yu,Dong Xin2ping(Fujian Center forDisease Control and Prevention,Fuzhou 350001,China)AbstractObjective:To investigate the antibacterial activity of the soybean extract against 20 common pathogens invitro1M ethods:The minimal inhibitory andminimal bactericidal concentrations(M IC andMBC respectively)were tested by usingthe tube dilution method1Results:TheM I C of this soybean extract on the 20 pathogens was from 1 600 to 204 800g/ml,theMBC was from 1 600 to 102 400g/ml1Conclusion:The soybean extract holds high antibacterial activity and broad spectrum onthose common pathogens1 Key wordsSoybean extract;Pathogens;Antibacterial activity 大豆提取液(A1SAP抗菌剂)是1996年在日本研发的,从谷物中提取的含有酒精和游离重金属的一种抗菌剂和除臭剂。近年来在日本被广泛应用于餐馆、食品加工厂和医院等,为了解它的抗菌效果,我们研究了它对20种常见致病菌的抗菌活性。1 材料与方法111 材料11111 大豆提取液 由福州亚太蓝星科技有限公司提供。11112 实验用菌种 大肠杆菌ATCC25922、致病性大肠杆菌EPEC、产毒性大肠杆菌ETEC、铜绿假单胞菌ATCC27853、鼠伤寒沙门菌、福氏志贺菌F1b、奇异变形杆菌、肺炎克雷伯菌、李斯特 菌、蜡 样 芽 胞 杆 菌、枯 草 芽 胞 杆 菌、白 色 念 珠 菌ATCC10231、金黄色葡萄球菌ATCC6538、腐生葡萄球菌、白色葡萄球菌均购自北京生物制品研究所,出血性大肠杆菌O157由中国疾控中心流行病研究所微生物实验室提供,O1群霍乱弧菌、O139群霍乱弧菌、副溶血性弧菌均由本疾控中心提供。11113 培养基 MH肉汤培养基、血清肉汤培养基、血琼脂培养基。112 方法111211 菌液制备 将上述菌种接种到相应的肉汤培养基中培养,李斯特菌35培养24 h,其它菌种35振摇孵育5 h。生长后的菌液用35 ml的生理盐水校正浓度至015麦氏比浊标准,再用相应的肉汤培养基110稀释,使含菌量约为107cfu/ml。11212M I C的测定 取无菌试管若干支,用相应的肉汤培养基等倍稀释抗菌剂后,各管加011 ml供试菌液,同时设培养基对照管和菌液对照管。35培养24 h后观察结果,抑制检测菌肉眼可见生长的最低药物浓度为该药对检测菌的最低抑菌浓度(M IC)。11213MBC的测定 含菌量稀释至107cfu/ml的待测菌液在接种的同时用相应的肉汤培养基以110的方式连续稀释4次,然后分别取011 ml加到二个血琼脂平板上,用L型玻棒均匀涂布接种,35孵育过夜。次日对每个平板进行菌落计数并计算其平均数N,按下列方式计算代表011%最初接种菌量的菌落数(I):I=N/2+2(N/2)1/2。将M IC测试中未见细菌生长的各管旋涡混匀15 s后再孵育4 h,再次旋涡混匀后从无肉眼可见生长的各管中分别取011 ml加到二个血琼脂平板上,用L型玻棒均匀涂布接种,35孵育过夜。次日进行菌落计数并计算其平均数。菌落计数等于或小于011%最初接种菌量的最低药物浓度为该药对检测菌的最低杀菌浓度(MBC)。2 结果大豆提取液对20种常见致病菌的最低抑菌浓度(M I C)和761中国卫生检验杂志2006年2月 第16卷 第2期 Chinese Journal of Health Laboratory Technology,Feb 2006;Vol 16No 2 1994-2006 China Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved.http:/最低杀菌浓度(MBC)结果见表1。从表1可以看出,大豆提取液对20种常见致病菌均有较好的M IC和MBC值。其中对腐生葡萄球菌的M IC值最高,达到204 800g/ml;对奇异变形杆菌的M IC值最低,为1 600g/ml。对金黄色葡萄球菌和藤黄微球菌的MBC值最高,达到102 400g/ml;对奇异变形杆菌的MBC值最低,为1 600g/ml。表1 大豆提取液对20种常见致病菌的最低抑菌浓度(M I C)和最低杀菌浓度(M BC)菌株大豆提取液浓度(g/ml)100 200 400 800160032006400128002560051200102400204800409600M IC(g/ml)MBC(g/ml)ATCC25922-[phone]EPEC-[phone]ETEC-[phone]O157-[phone]铜绿假单胞菌-[phone]鼠伤寒沙门菌-[phone]志贺菌-[phone]奇异变形杆菌-[phone]肺炎克雷伯菌-[phone]李斯特菌-[phone]蜡样芽胞杆菌-[phone]枯草芽胞杆菌-[phone]白色念珠菌-[phone]金黄色葡萄球菌-[phone]藤黄微球菌-[phone]腐生葡萄球菌-[phone]白色葡萄球菌-[phone]O1霍乱弧菌-[phone]O139霍乱弧菌-[phone]副溶血性弧菌-[phone]+为肉眼可见生长;-为无肉眼可见生长3 讨论近年来随着旧传染病的抬头和新发传染病的不断出现2,如O139群霍乱弧菌、军团病、艾滋病、SARS、禽流感等,都给社会和人民健康带来重大的影响。因此采取有效的预防措施尤其重要。杀菌消毒在有效的预防措施中占有重要的地位,同时也是切断传播途径的重要手段。但目前国内常用的多为化学消毒剂,不仅会造成资源浪费,还可能会产生环境污染,特别是滥用的含氯消毒剂大量排放到地下水中,会造成水源污染和严重的生态问题3。而大豆提取液作为一种国外新推荐的纯植物消毒剂,不但具有良好的抗菌效果和较广的抗菌谱,而且无毒无副作用,不会造成二次污染。我们引用该提取液对20种常见致病菌进行M IC和MBC测定结果,M IC范围在1 600204 800g/ml;MBC范围在1 600102 400g/ml之间。尽管各种菌对该提取液的敏感性不一,但总体来看,抑菌和杀菌效果良好,可适用于蔬菜、水果类和食器、饭盒类的洗净及食品、水果、鲜花等的鲜度保持;各种场所如医院、保育院及旅游场所、交通工具等的洁净消毒;食品制造、餐馆食店、公共设施、体育设施、娱乐场所等的消毒工作。正如薄玉霞所述4,植物消毒剂有其特有的潜力和优势,我们应加强对其性能、杀菌机理和消毒效果的研究,为植物消毒剂的广泛应用进一步提供科学依据。参考文献1 李影林 1临床微生物学及检验M 1北京:人民卫生出版社,1995177-9012 于恩庶 1新发现的传染病M 1福州:福建教育出版社,199711-513 杨华明 1对SARS病毒污染消毒措施的建议 J 1中国消毒学杂志,2003,20(2):113-11514 薄玉霞,王歆宇,孟光,等 1一种纯植物消毒剂性能的试验观察J 1中国消毒学杂志,2004,21(2):98-1011(收稿日期:2005-11-15)861中国卫生检验杂志2006年2月 第16卷 第2期 Chinese Journal of Health Laboratory Technology,Feb 2006;Vol 16No 2 1994-2006 China Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved.http:/