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第十三章 肝功能检验
掌握:黄疸的发生机理、类型及实验室鉴别诊断要点；肝功能实验生化检查指标的种类和重点项目的测定方法及评价。
（一）胆红素代谢障碍（黄疸）
黄疸分类: 溶血性黄疸、肝细胞性黄疸、阻塞性黄疸

（二）胆汁酸代谢障碍
1、胆汁酸合成障碍、2、胆汁酸向肠道排出障碍、3．胆汁酸肠肝循环紊乱、4．胆汁瘀积病变时胆汁酸代谢紊乱
（三）血浆酶异常
1．肝脏合成酶类:胆碱脂酶、凝血因子、铜蓝蛋白；2. 肝细胞内酶: ALT、AST
3．肝脏阻塞性疾病酶活性改变：ALP、GGT；4．肝硬化疾病酶活性改变：单胺氧化酶（MAO）
（四）血浆蛋白异常
第二节 肝功能试验
n 血清（浆）蛋白
n 血清酶测定
n 血清胆红素测定
n 血清胆汁酸测定
n 血氨测定
一、血清（浆）蛋白测定
（一）总蛋白、白蛋白、及白蛋白/球蛋白（A/G）比值测定
1．总蛋白测定：化学法(双缩脲法 )、物理法、染料结合法、电泳法
2.白蛋白测定 ：染料结合法(BCG、BCP）、沉淀法
3．A/G比值
【参考范围】
总蛋白 60～80g/L 白蛋白 35～55g/L
球蛋白：15～32g/L A/G比值:1.5～2.0/1
临床意义：血中白蛋白（总蛋白浓度）减少: 见于严重肝病、肾病；
A/G比值减少与A/G比值倒置：表示肝功能损害严重。
（二）纤维蛋白原测定 （凝血因子Ⅰ）
测定方法：分为三大类
①根据纤维蛋白原的生物学特性测定方
②根据纤维蛋白原理化性质而建立的测定方法。
③根据纤维蛋白原免疫学特点而建立的测定方法。
【参考范围】　　2.22～4.22g/L(热沉淀比浊法)
【临床意义】 (1) 纤维蛋白原增加：①感染；②无菌炎症；③其它。
(2) 纤维蛋白原减少: ①严重的肝脏疾病；②其它疾病引起纤维蛋白原减少的疾病。
（三）甲胎蛋白（α1-fetoprotein，AFP）测定
测定方法：酶联免疫吸附法、放射免疫分析法、斑点免疫结合法、火箭电泳放射自显影法、酶联火箭电泳法等
【参考范围】成人10～30g/L 、>400g/L作为肝癌诊断标准
【临床意义】 (1) 原发性肝细胞肝癌的诊断标：400g/L(400ng/ml) ；
(2)活动性急、慢性肝炎、肝硬化或其它肝病病人的诊断．
（四）其它
1.铜蓝蛋白测定
【原　　理】　铜蓝蛋白具有氧化酶活性
【参考范围】 52.9～167.7 IU/L
【临床意义】　肝豆状核变性（Wilson病）和遗传性色素沉积症．
2．转铁蛋白
【原　　理】　双联吡啶法
【参考范围】 TIBC 男 50～77μmol/L 女54～77μmol/L , 转铁蛋白饱和度为33.0%～35.0%
【临床意义】 遗传性血色素沉积症铁沉积
二、血清酶测定
§ （2）方法评价
§ ①赖氏法的实验结果需与卡门分光法的结果对比后求出；
§ ②NaOH的浓度对显色有影响；
§ ③该法的重复性差。
【参考范围】 5～25卡门氏单位
【临床意义】(1) 肝细胞损伤的灵敏指标；(2) 慢性活动性肝炎或脂肪肝：ALT轻度增高(100～200IU),或属正常范围.
ALT测定连续监测法（速率法）
（２） 方法评价：
①存在着两个副反应，会使测定结果偏高；
A、血清中存在的α-酮酸(如丙酮酸)能消耗NADH。
B、血清中谷氨酸脱氢酶(GLDH)增高时，在有氨存在条件下，亦能消耗NADH。
②双试剂法，因温育期长，能有效地消除干扰反应，测定准确性高，是ALT测定的首选方法；③血清不宜反复冰冻保存，以免影响酶活性；避免使用溶血标本。
3.赖氏法测定AST
（１）原理与方法评价（类似ALT测定）　
【参考范围】 8～28卡门氏单位
【临床意义】
增高见于：心肌梗死、肌炎、胸膜炎、肾炎及肺炎和各种肝病病人
4．连续监测法测定AST
（２）方法评价
误差来源
内源性干扰:主要来自血清中高浓度丙酮酸和L-谷氨酸脱氢酶(GLDH)。
外源性:干扰来自试剂中污染的GLDH和AST。
【参考范围】 5～40 IU/L(连续监测法测定)　
【临床意义】 见赖氏法
ALP测定：化学法：金氏法、皮氏法、连续监测法：
１、金氏法测定ALP
(2) 方法评价：磷酸苯二钠比色法与更早的β-甘油磷酸钠法相比具有较大的优点，如水解速度快，保温时间较短、灵敏度较高、显色稳定、不需去蛋白、操作简单、快速。但与磷酸对硝基酚连续监测法相比，准确度、精密度较低；操作比较繁琐,，灵敏度低。
【参考范围成人：3～13 单位,儿童：5～28单位
【临床意义】 ：ALP主要用于诊断肝胆和骨骼疾病
2.连续监测法测定ALP
（１）方法评价： 线性范围可达500U/L，批内CV为2.06%～2.36%，批间CV为2.74%。
【参考范围】
　男性：1～12岁 <500U/L, 女性：1～12岁 <500U/L
　　　　12～15岁 <750U/L，
>15岁 40 ～150U/L，>25岁 40～150U/L。
【临床意义】 见金氏法
(三)GGT测定法
化学法（重氮反应比色法）和连续监测法。
1. 重氮反应比色法测定GGT
【参考范围】 男性 3 ～17 U/L； 女性 2 ～13 U/L
§ 连续监测法测定GGT
【参考范围】
男性：11～50 U/L；(以γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺为底物)
女性：7～32 U/L
男性： ≤40U/L；女性：≤30U/L(以γ-谷氨酰-4-硝基苯胺为底物)
(四)MAO测定
(2) 方法评价
【参考范围】 12～40 U/ml
【临床意义】：肝硬化时，肝纤维化现象十分活跃，MAO活性明显升高。
三、血清胆红素测定
测定方法：重氮盐法、胆红素氧化酶(BOD)法、高效液相色谱法(HPLC)、导数分光光度法
直接分光光度计法
四、血清胆汁酸测定
测定方法：比色分析测定法 、酶免疫分析法、放射免疫分析法、高效液相色谱法;酶比色法
(2) 酶比色测定法评价：
优点: 快速、简便、准确、可靠和适用
缺点:试剂价贵、不易保存。对酶量的要求严格，易产生误差。此外，标准品的制备非常重要。常采用甘氨胆酸溶入小牛血清中制成冻干品。
【参考范围】 1 ～7 µmol/L　(成人空腹)
【临床意义】 1、 任何引起肝细胞损伤的病理过程都可能引起血中胆汁酸升高.
2、各种类型的肝病、肝硬化、脂肪肝，及急慢性胆道阻塞。
3、空腹胆汁酸测定:敏感、特异性强; 最敏感的肝功能试验之一。特别适用于可疑有肝病，但其它生化试验正常或轻度异常的病人的诊断。

生物化学检验质量控制复习题 A 型题
B 1、由二级参考测量程序定值，用于校正校准试剂盒厂家选定测量程序的物质：
A．一级标准品　 　B．一级校准物 　　 C．二级标准品　 　
D．控制物　 　 E．优级标准品
B 2、应用于评价鉴定常规方法，可作为评价商品试剂盒或为质控血清定值的实验方法是:
A．决定性方法 B．参考方法 C．推荐方法
D．己知偏差法 E．未知偏差法
D 3、由于分析人员的操作习惯而造成的误差属于以下哪种误差（ ）
A、系统误差 B、粗大误差 C、方法误差 D、随机误差
A 4、偏差和偏差系数一般用来表示（ ）
A、准确度 B、特异度 C、精密度 D、灵敏度
B 5、EA表示（ ）的允许误差限度
A、90% B、95% C、5% D、85%
D 6、医学决定水平：为对临床病人的诊疗具有医学 作用的临界分析物浓度。
A．分析 B．观察 C．比对 D．判断 E．研究
A 7、建立一个实验方法时，常做回收率试验。其主要目的是验证实验方法的（ ）
 　 A、准确度     B、灵敏度    C、精密度     D、特异性    
B 8、哪种评价试验可用来检测侯选方法的恒定系统误差（ ）
A、回收试验 B、干扰试验 C、对比试验 D、重复性试验
B 9、回收率好,说明该定量方法：
A 精密度高 B 准确度高 C 灵敏度好 D 实用 E 属于参考方法
D 10、Levy-Jennings质控图中用来控制界限的是（ ）
A、标准差 B、误差 C、变异系数 D、平均值和标准差
B 11、在室内1，3X质控规则中，若质控血清的检测结果超出X±3s，则判为（ ）
A、在控 B、失控 C、警告 D、难以确定
A 12、系统误差在平均值质控图中常表现为
A．测定值在上下波动 B。测定值有两天连续在均值以上或以下
C．测定值有一次越限,次日又回到限内 D。测定值有三天连续在均值以上或以下
E．测定值有五天连续在均值以上或以下
B 型题
A．OCV B．RCVK C．RCVU D．CCV E．VI
D 1、选定变异系数 B 2、常规条件下已知值的变异 E 3、变异指数
X 型题：ABCD 1、下列哪些可能是室内质控图发生向上或向下倾向性变化的原因？
A、试剂过期 B、分光光度计光源衰老 C、更换了校准品或操作者 D、光电管老化
ABCDE 2、常规方法的选择在可靠性方面应具有：
A．较高的检测精密度    B．较大的检测能力    C．较低的检测费用
D．较快的检测速度    E．较好的检测准确度
ABD 3、准确度与精密度的关系为：
A 测量的精密度并不能说明测量值与真值的关系
B 精密的测量值不一定是准确的 C 准确度高,一般说来精密度也较好
D 系统误差会使准确度降低,但其对精密度的影响要根据它在一系列测定中是否保持不变
BC 4、质控物的作用是：
A 监测测定结果的准确度 B 改进测定方法的准确度
C 观察测定结果的精密度 E 提高测定结果的精密度

内容总结

（1）第十三章 肝功能检验
掌握:黄疸的发生机理、类型及实验室鉴别诊断要点
（2）（三）甲胎蛋白（α1-fetoprotein，AFP）测定
测定方法：酶联免疫吸附法、放射免疫分析法、斑点免疫结合法、火箭电泳放射自显影法、酶联火箭电泳法等
【参考范围】成人10～30g/L 、>400g/L作为肝癌诊断标准
【临床意义】 (1) 原发性肝细胞肝癌的诊断标：400g/L(400ng/ml)