免疫增强剂在鱼类养殖中的作用及研究进展_李健.pdf

文章编号：1673-887X(2023)06-0146-03免疫增强剂在鱼类养殖中的作用及研究进展李健，曲焕韬，赵煜，朱健（四川省屏山县老君山国家级自然保护区保护中心，四川屏山645350）摘要免疫增强剂能增强鱼类抵抗外界病原体的能力，减轻环境胁迫对鱼类的免疫抑制作用，通过调高鱼类自身免疫力实现鱼类疾病预防。适量使用免疫增强剂能够提高鱼苗成活率、促进鱼类生长、增强其自身的免疫力和抗病力。免疫增强剂具有效果好、安全性高、成本低、无污染等特点，近年来在鱼类养殖中得以广泛应用。文章对鱼类养殖常用免疫增强剂的作用及研究进展进行了综述，探究了其使用前景。关键词免疫增强剂；鱼类养殖；疾病预防中图分类号S965文献标志码Adoi:10.3969/j.issn.1673-887X.2023.06.052The Role and Research Progress of Immune Enhancers in Fish CultureLi Jian,Qu Huantao,Zhao Yu,Zhu Jian(Pingshan Laojunshan National Nature Reserve Protection Center,Pingshan 645350,Sichuan,China)AbstractAbstract：Immune enhancers can enhance the ability of fish to resist external pathogens,reduce the immunosuppressive effect of environmental stress on fish,and realize the prevention of fish diseases by improving the immunity of fish.Appropriate use of immuneenhancers can improve the survival rate of fish fry,promote fish growth,enhance their own immunity and disease resistance.Immune enhancers have been widely used in fish culture in recent years because of their good effect,high safety,low cost and no pollution.In this paper,the effects and research progress of common immune enhancers in fish culture were reviewed,and their application prospect was explored.Key words：immune enhancer,fish farming,disease prevention随着大规模集约化养殖的发展，高密度养殖和日趋恶化的水域环境影响着鱼类的健康，为预防养殖鱼类各种疾病的发生，提高免疫力成为鱼类养殖者关注的焦点。鱼类人工养殖中适量使用免疫增强剂，可以提高其成活率和抗病能力，减轻环境胁迫对其自身免疫力影响，且免疫增强剂高效、安全、无污染，日渐受到鱼类科研工作者和养殖生产者的青睐。1鱼用免疫增强剂的含义及其作用机制1.1免疫增强剂的含义鱼用免疫增强剂是一类通过促进或诱导鱼类机体防御反应，提高鱼类机体自身非特异性免疫防御能力，增强鱼类机体对病原体或者抗原微生物特异反应的物质。1.2免疫增强剂的作用机制免疫器官、组织、免疫细胞和体液免疫因子组成了鱼类免疫系统。免疫器官主要包括胸腺（随着生长逐渐退化，时间因种而异）、肾脏、脾脏、肝脏等。组织主要指黏膜淋巴组织，作为重要的免疫屏障，黏膜淋巴组织不具备完整的淋巴结构，如鳃、皮肤、肠黏膜等。免疫细胞主要包括吞噬细胞和淋巴细胞，鱼类吞噬细胞主要有巨噬细胞、单核细胞、粒细胞和自然杀伤细胞等，淋巴细胞主要包括B细胞和T细胞。鱼类的体液免疫因子主要包括非特异性免疫因子（干扰素、微生物生长抑制物、凝集素、补体、溶菌酶、急性期蛋白等）和特异性免疫因子（免疫球蛋白），作为免疫应答的效应分子，在对鱼类病原防御中发挥着直接作用。免疫增强剂对于鱼类机体的免疫增强作用主要表现在激活抗菌溶菌活力，提高机体免疫效应以及激活补体。鱼用免疫增强剂发挥免疫增强作用的机制是激活鱼的吞噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用和杀伤能力，促使淋巴细胞增生并分泌淋巴因子，增强体液免疫和细胞免疫，刺激抗体的生成和补体的激活等。张振国1等在金樽鱼的基础饲料中添加了0.5%、1%和 2%这3种含量的复合免疫增强剂，通过测定其血清中超氧化物歧化酶（SOD）和溶菌酶活性变化及补体C3含量变化，证实该复合免疫增强剂使金樽鱼的抗菌能力得以显著提高。2鱼用免疫增强剂的常用种类及研究进展2.1微生物来源的免疫增强剂2.1.1肽聚糖肽聚糖在革兰氏阴性和阳性细菌中的细胞壁中均有存在，是许多细菌的细胞壁主要成分，是一种多层网状大分子。肽聚糖通过诱导鱼体产生多种免疫调节物质，从而激活鱼体免疫系统，增强鱼体的免疫防御功能。肽聚糖作为鱼类免疫增强剂，被鱼类科研工作者关注。许国焕2等向彭泽鲫的基础饲料中添加200 mg/kg的肽聚糖，经过60 d的饲养后发现收稿日期2023-02-02作者简介李健（1989-），男，四川人，工程师，研究方向：生物学。动物科学第6期（总第402期）146彭泽鲫的血清溶菌酶的活性得以提高，血清凝集抗体效价在短时间内显著提高，彭泽鲫的特异性免疫功能显著增强。张璐3等在鲈鱼配合饲料中添加3种不同剂量（0 mg/kg、100 mg/kg 和 500 mg/kg）的肽聚糖，进行了为期 8 周的摄食生长实验，通过测定鲈鱼血清溶菌酶活力、白细胞的吞噬指数和血清替代途径补体活力，证实了随着肽聚糖添加量的增加，鲈鱼的生长得到促进，非特异性免疫力增强。2.1.2壳聚糖天然多糖甲壳素脱除部分乙酰基便成为了壳聚糖，壳聚糖的代谢产物无毒，具有抗微生物活性、降脂、降胆固醇、激活淋巴细胞、增强免疫等多种生理功能。因此，壳聚糖作为一种鱼类免疫增强剂在鱼类养殖中得以广泛应用。金思4等在香鱼的基础饲料中添加0%、0.5%、1.0%、2.0%和4.0%这4种含量的壳聚糖，连续饲养35 d后，通过测定肝、脾、肾中溶菌酶活性以及免疫相关基因hsp70表达情况。结果发现添加1.0%壳聚糖的基础饲料下肝、脾、肾这3种组织中溶菌酶的活性与对照组相比均得以提高，分别是对照组的0.8 倍、3.1倍和5.2倍。荧光定量PCR 结果发现，添加1.0 壳聚糖的基础饲料使香鱼肝、脾、肾3种组织hsp70基因的表达量显著提高，与溶菌酶活性提高表现出一定的相关性，表明壳聚糖通过调节香鱼免疫相关基因 hsp70的表达来调节其免疫功能。肖燕翼5等的研究表明适量壳聚糖（2.5 g/kg）的添加能促进俄罗斯鲟幼鱼的生长，增加血清超氧化物歧化酶、碱性磷酸酶活性和溶菌酶活性提高以及补体C3含量，增强了俄罗斯鲟幼鱼的免疫能力。2.1.3脂多糖脂多糖由脂质和多糖构成，是革兰氏阴性菌细胞壁主要成分之一。研究表明，脂多糖能增强鱼体的体液免疫和细胞免疫，提高其免疫功能。简纪常6等用 2 mg/mL、4 mg/mL、8mg/mL和16 mg/mL这4种浓度去毒的溶菌弧菌脂多糖腹腔注射石斑鱼，石斑鱼血清溶菌酶活性、超氧化物歧化酶（SOD）、酚氧化酶（PO）的活性提高、抗菌活力增强，表明石斑鱼的非特异免疫功能提高；石斑鱼血清抗体效价变化结果表明石斑鱼鱼体发生了良好的体液免疫应答。康洁7等将不同剂量的大肠杆菌脂多糖稀释液注射入草鱼胸鳍基部，试验结果发现受试草鱼血清抗体效价、白细胞数量显著提高，血清、脾、肝、肾过氧化酶活力水平增加，表明大肠杆菌脂多糖对草鱼有免疫促进作用。2.1.4葡聚糖葡聚糖是真菌细胞壁成分之一，有和两种，常用的是-葡聚糖。-葡聚糖作为鱼类免疫增强剂主要是增强鱼类非特性性免疫功能，通过激活颗粒细胞、吞噬细胞、自然杀伤细胞活性并分泌细胞因子来提高鱼类免疫功能。张辽8等探讨了齐口裂腹鱼基础日粮中添加不同剂量的-葡聚糖对其生产及免疫功能的影响，结果显示不同剂量的-葡聚糖对齐口裂腹鱼体质量增长影响各异，-葡聚糖能提高齐口裂腹鱼血液红细胞和白细胞的吞噬能力，提高补体C3含量和血浆溶菌酶活力。赵文婷9等通过巨噬细胞吞噬模型试验研究发现酵母-葡聚糖不但能促进斑马鱼巨噬细胞形成，还能提高其巨噬细胞吞噬能力。2.2植物多糖鱼类养殖中用作免疫增强剂的植物多糖常见的有黄芪多糖、枸杞多糖、牛蒡寡糖等。黄芪多糖能增强鱼体的非特异性免疫功能，姚嘉赟10等在黄颡鱼中连续投喂不同剂量（1 g/kg、2 g/kg 和 4 g/kg）的黄芪多糖药饵 42 d 后，黄颡鱼血清补体C3、溶菌酶、SOD、血清白蛋白含量均有所提高，表明黄芪多糖能促进黄颡鱼的非特异性免疫功能。白东清11等研究表明，用不同水平含量的枸杞多糖配合饲料连续投喂黄颡鱼，进行8周后，其头肾巨噬细胞的氧呼吸爆发活性和外周血白细胞的增殖能力均得以显著提高。郝林华12在大菱鲆的基础饲料中添加不同剂量（1.0、2.0、4.0、6.0）的牛蒡寡糖，经过 60 d的喂饲试验，鱼体血清中与免疫相关的 ACP、SOD等酶活力和血液中白细胞的吞噬活性均得以显著提高，牛蒡寡糖最适添加量为4.0，牛蒡寡糖能有效增强大菱鲆的非特异性免疫功能。2.2动植物来源的免疫增强剂2.2.1动物提取物牛磺酸即氨基乙磺酸，在动物机体的组织和器官中以小肽或游离态氨基酸形式存在，是一种条件性非必需氨基酸。已有报道发现牛磺酸在鱼类养殖中具有多种生物学功能。徐璐茜13等研究发现在草鱼幼鱼的基础饲料中添加适量的牛磺酸能显著提高其血清中溶菌酶、补体C3、C4含量，加强非特异性免疫功能。虾青素是一种酮式类胡萝卜素，广泛存在于鱼、虾、蟹、鸟等生物中，具有抗氧化、抗肿瘤、清除体内自由基、增强免疫力等多方面的作用。李美鑫14等的研究是在乌鳢的基础饲料中添加不同水平（50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg）的虾青素，经过连续56 d的投喂后，检测其血清和肝脏补体C3和溶菌酶的含量均显著提高，机体免疫能力增强。2.2.2植物提取物绿原酸是由咖啡酸与奎尼酸生成的缩酚酸，是一种苯丙素类化合物，广泛存在于金银花、杜仲等植物中，具有抗菌、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤、清除自由基和调节机体免疫力等作用，在鱼类养殖中，作为一种饲料添加剂被广泛应用。薛飞15等报道适量绿原酸的添加对异育银鲫血液中各非特异性免疫因子（血清溶菌酶、超氧化物歧化酶、碱性磷酸酶）具有不同程度的正效应。张纯16等的研究表明，在建鲤的饲料中添加200400 mg/kg的绿原酸能显著增强其机体抗氧化能力和非特异性免疫功能。2.3其他类免疫增强剂常见的鱼类免疫增强剂其他类型还有人工合成免疫增强剂（左旋咪唑、FK-565等）、营养元素（维生素A、C、E等）、激素（外源性生长激素、催乳素、-内啡呔）和其他细胞因子（IL-1、干扰素）17。动物科学第6期（总第402期）农业技术与装备1473鱼用免疫增强剂的发展趋势和展望免疫增强剂在鱼类养殖中具有广泛应用前景，通过对免疫增强剂的投喂方式、时间、剂量、周期以及免疫机制的作用机理研究的进一步深入，促使免疫增强剂逐渐成为鱼类养殖中疾病预防和增强鱼类免疫水平的新途径，促进鱼类养殖业更加健康发展。未来研究不同种类的免疫增强组合剂，开发研制速效、长效、高效、低毒的新型免疫增强剂将成为提高鱼体免疫力，控制鱼类疾病的有效途径。参考文献1张振国,钱红,刘克明,等.复合免疫增强剂对金鳟非特异性免疫力的影响J.水产学杂志,2020,33(1):8-12.2许国焕,吴月嫦,陶家发.两种多聚糖对彭泽鲫生长影响及免疫促进作用的初步研究J.水利渔业,2002(4):49-51.3张璐,艾庆辉,麦康森,等.肽聚糖对鲈鱼生长和非特异性免疫力的影响J.中国海洋大学学报:自然科学版,2008,38(4):6.4金思,龚一富,章丽,等.壳聚糖对香鱼溶菌酶活性和hsp70基因表达的影响J.生物学杂志,2012,29(5):11-14+10.5肖艳翼,夏永涛,刘腾飞,等.壳聚糖对俄罗斯鲟幼鱼生长性能及免疫功能的影响J.水生生物学报,2017,41(1):114-120.6简纪常,叶剑敏,吴灶和.溶藻弧菌脂多糖对石斑鱼免疫功能的影响J.水生生物学报,2004(1):103-105.7康洁.大肠杆菌脂多糖对草鱼的免疫调节作用J.江苏农业科学,2011,39(3):295-297.8张辽,温安祥.-葡聚糖对齐口裂腹鱼生长及免疫功能的影响J.动物营养学报,2009,21(5):688-694.9赵文婷,陈智仙,张小丽,等.酵母-葡聚糖调节免疫力的研究J.食品科技,2021,46(12):245-250+257.10姚嘉赟,徐洋,盛鹏程,等.3 种免疫增强剂对黄颡鱼非特异性免疫机能的影响J.安徽农业科学,2014,42(10):2921-2923.11白东清,吴旋,杨广,等.枸杞多糖对黄颡鱼免疫细胞活性的影响J.水产科技情报,2011,38(1):6-9.12郝林华,孙丕喜,石红旗,等.牛蒡寡糖对大菱鲆生长和免疫机能的影响J.海洋科学进展,2007(2):208-214.13徐璐茜,明建华,张易祥,等.牛磺酸对草鱼幼鱼生长、非特异性免疫与抗氧化能力以及消化酶活性的影响J.浙江海洋学院学报(自然科学版),2016,35(6):464-471.14李美鑫,刘曦澜,许世峰,等.虾青素对乌鳢生长、抗氧化和免疫功能的影响J.饲料工业,2021,42(16):51-57.15薛飞,刘涛,周维仁,等.绿原酸对异育银鲫血液非特异性免疫因子的影响J.江苏农业科学,2007(2):148-151.16张纯,温安祥.绿原酸对建鲤生长、非特异性免疫功能和抗氧化能力的影响J.四川农业大学学报,2012,30(1):92-97.17王玉堂.鱼类免疫增强剂的种类及研究进展(四)J.中国水产,2018(2):79-81.苷注射液等，注射频次为每日1次，35 d为1个疗程，持续23个疗程。如遇经产母猪便秘，可以采用内服磷酸氢钙咀嚼片的方式进行治疗。5结语综上所述，通过研究发现，不同阶段的母猪在便秘症状的表现方面存在明显的差异，这也说明对便秘的防治要做到全方位、综合性，以保证不同情况的母猪都能够得到有效的防治。就发病原因来看，母猪出现便秘疾病，主要是饲喂方式不合理、饲料配置不合理、摄入水分不足、运动量不足、胎儿压迫、药物刺激、应激反应等因素的影响。养殖主体要从日常管理加以防范，并对患病的母猪进行科学的治疗，以降低便秘对母猪生长和生产的影响，确保养殖的整体收益。参考文献1李发明.母猪便秘发生原因及改进措施J.中国畜禽种业,2022,18(7):82-83.2范荣香,徐晓菲,刘炜容,等.母猪便秘的危害及防治措施J.山东畜牧兽医,2022,43(7):26-27+29.3迟秀丽.母猪发生便秘的原因、临床症状和防治措施J.现代畜牧科技,2022(2):113-114.4余艳平,周铁坤,余五星.母猪便秘的原因及其防治方法J.养殖与饲料,2022,21(2):64-66.5杨福金,王君忠.防治妊娠母猪便秘的技术措施J.吉林畜牧兽医,2022,43(1):40-41.6张文静.母猪肠便秘的应对措施分析J.中国动物保健,2021,23(11):88-89.7李立金.母猪发生便秘原因与防控J.畜牧兽医科学(电子版),2021(17):119-120.8姜婷婷,邵文华,王连波.母猪发生便秘的原因与防控J.吉林畜牧兽医,2021,42(7):17-18.9昌捷,邢孔萍,卢秋咏.繁殖母猪便秘发生的综合防控措施J.猪业科学,2021,38(6):104-106.10张沐.母猪便秘的主要症状、类症鉴别和综合防治J.现代畜牧科技,2017(1):103.11马加峰.妊娠母猪便秘的综合防治J.农民致富之友,2016(24):235.12尹彦文,韦云嵩.母猪便秘的综合防治措施J.广西畜牧兽医,2010,26(5):289-290.（上接第145页）动物科学李健，曲焕韬，赵煜，等：免疫增强剂在鱼类养殖中的作用及研究进展第6期（总第402期）148