2016届高考生物第一轮复习检测1.doc

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目的基因的检测与鉴定二、目的基因的获取1目的基因主要是编码蛋白质的结构基因，也可以是一些具有调控作用的因子。2目的基因的获取方法(1)从基因文库中获取目的基因。基因文库a含义：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。b种类(2)利用PCR技术扩增目的基因。PCR含义：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，全称是多聚酶链式反应。PCR原理：DNA双链复制。扩增过程变性：目的基因DNA受热变性后解为单链复性：引物与单链相应互补序列结合延伸：在DNA聚合酶作用下延伸子链(3)人工合成法：适于合成基因较小，且核苷酸序列已知的目的基因。三、基因表达载体的构建基因工程的核心1基因表达载体的功能(1)使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代。(2)使目的基因能够表达和发挥作用。2基因表达载体的组成四、将目的基因导入受体细胞1转化目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2导入过程(1)导入植物细胞方法(2)导入动物细胞(3)导入微生物细胞方法：用Ca2处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(这种细胞称为感受态细胞)。受体细胞：原核细胞(使用最广泛的是大肠杆菌细胞)。原核生物的特点：繁殖快，多为单细胞，遗传物质相对较少等。五、目的基因的检测与鉴定1分子水平的检测(连线)2个体水平的鉴定(1)抗虫或抗病的接种实验。(2)对基因工程产品与天然产品的功能进行活性比较。一、目的基因的获取阅读教材P810，观察分析图16,18，探讨下列问题：1获取目的基因的方法有哪些？提示：有从基因文库中获取，PCR技术扩增和人工合成三种方法。2联系DNA复制，比较PCR技术与DNA复制的不同点(填写下表)。DNA复制PCR技术解旋方式_催化DNA在_作用下变性解旋场所_(主要在_内)_(主要在_内)酶_、普通的_等耐热的_(Taq酶)温度条件细胞内_条件需控制温度，在较高温度下进行合成的对象DNA分子DNA片段或基因提示：解旋酶高温细胞内细胞核细胞外PCR扩增仪解旋酶DNA聚合酶DNA聚合酶温和二、基因表达载体的构建阅读教材P11，观察分析图110，探讨下列问题：1基因工程的核心是哪一步操作？其目的是什么？提示：基因表达载体的构建是基因工程的核心，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。2如图是基因表达载体模式图，请回答下列问题：(1)分别写出各代表什么。提示：启动子，终止子，标记基因(抗生素抗性基因)，复制原点，目的基因(插入基因)。(2)图中各有什么作用？提示：启动子：一段有特殊结构的DNA片段，位于基因首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，负责驱动目的基因转录出mRNA。终止子：起终止转录的作用。标记基因(抗生素抗性基因)：作用是检测受体细胞中是否有目的基因，并将含有目的基因的细胞筛选出来。(3)启动子和终止子与起始密码子和终止密码子是一回事吗？提示：不是一回事，启动子和终止子位于DNA上，是基因表达必需的部分。而起始密码子和终止密码子位于mRNA上，决定翻译的开始和结束。3尝试利用流程图表示如何构建基因表达载体。提示：三、将目的基因导入受体细胞阅读教材P1113内容，探究下列问题：1将目的基因导入不同种类生物所选用的方法是否相同？常选用的受体细胞是什么？提示：不相同。常选用的受体细胞及导入方法如下表：生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法显微注射技术Ca2处理法受体细胞体细胞受精卵原核细胞2.根据图示简述目的基因在受体细胞中的位置不同会引起遗传上的差别吗？提示：图中会使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达，原因是在进行细胞减数分裂时，细胞核上的DNA经复制后平均分配到两个子细胞中，保证了亲子代遗传性状的稳定性，而细胞减数分裂时，细胞质是不均分的，子细胞不一定含有目的基因。四、目的基因的检测与鉴定阅读教材P1315有关内容，仔细观察分析图114、115，自主完成以下问题：1如何检测目的基因在真核生物中稳定遗传？提示：采用DNA分子杂交技术。2什么是基因探针？如何检测目的基因是否开始发挥功能？提示：基因探针是用放射性同位素标记的目的基因的DNA片段。从转基因生物中提取mRNA，用标记的目的基因作探针，与mRNA杂交，如果显示出杂交带，则表明目的基因转录出了mRNA，意味着目的基因开始发挥功能。3检测目的基因是否翻译出蛋白质的方法是什么？其原理是什么？提示：抗原抗体杂交法。原理是抗原能与相应抗体特异性结合。4举例说明进行个体生物学水平的鉴定方法有哪些？提示：如做抗虫或抗病的接种实验，以确定是否有抗性以及抗性的程度；基因工程产品与天然产品的功能进行活性比较，以确定转基因产品的功能活性是否与天然产品相同等。(浙江高考)天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B，现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是()A提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经过逆转录获得互补的DNA，再扩增基因BB利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞研析本题通过特定的实例主要考查基因工程的相关概念及操作要领。具体解题过程如下：审提取信息 信息a：由A项“提取矮牵牛蓝色花的mRNA”可知获取目的基因的方法为逆转录。 信息b：由B项的“基因文库”可知目的基因可直接提取，无需再切割获取。 信息c：由C项的“基因B与质粒连接”可知连接工具为DNA连接酶。 信息d：由D项的“基因B直接导入”可知这种方法是错误的，因未构建基因表达载体。析解读信息解读a：利用逆转录法可获取目的基因，欲增加其数量可采取PCR扩增技术。解读c、d：DNA聚合酶的作用是连接单个的脱氧核苷酸，而DNA连接酶的作用是连接相对应的DNA片段；构建基因表达载体是基因工程技术的核心步骤，否则将造成基因工程操作失败。答案A解答基因工程基本操作程序题目的一般步骤 三辨、三找、一析、一理(1)三辨：分辨限制酶的种类及识别序列和切割位点。在切割目的基因和载体时，一般用同一种限制酶切割，也可用不同的限制酶切割，但两种限制酶切割后产生的黏性末端中碱基要互补配对。(2)三找：找出标记基因、目的基因及其插入位点。一般来说，质粒中至少有一个标记基因，如抗生素抗性基因。明确目的基因的插入位点是在标记基因内部还是在标记基因之外。(3)一析：分析目的基因插入质粒后是否破坏了标记基因。如果质粒中有一个标记基因，插入后一般不破坏标记基因；如果质粒中有两个标记基因，则需看标记基因中是否有插入位点，如果某一标记基因中有插入位点，则目的基因插入质粒后该标记基因被破坏。(4)一理：理清判断目的基因是否导入受体细胞的方法。一般用含有某种抗生素的培养基培养受体菌，如果有两种抗生素抗性基因，还需判断用哪一种抗生素来检测。农杆菌是一种在土壤中生活的微生物，能在自然条件下感染植物，因而在植物基因工程中得到了广泛的运用。下面是农杆菌转化法的示意图，试回答下列问题：(1)一般情况下农杆菌不能感染的植物是_，利用农杆菌自然条件下感染植物的特点，能实现_。具体原理是农杆菌的Ti质粒中存在TDNA片段，它具有可转移到受体细胞并整合到受体细胞的_上的特点，因此只要将携带外源基因的DNA片段插入到_(部位)内部即可。(2)根据TDNA这一转移特点，猜测该DNA片段上可能含有控制_(酶)合成的基因。(3)图中c过程中，能促进农杆菌移向植物细胞的物质是_类化合物。(4)植物基因工程中将目的基因导入受体细胞的方法除了农杆菌转化法之外，还可采取的方法是_。(至少写出两种)解析(1)一般农杆菌不能感染的植物是单子叶植物，可感染双子叶植物和裸子植物，利用其感染性，可实现将目的基因导入植物细胞。这里需要特别明确的是真正可转移到受体细胞并整合到受体细胞的染色体上的是农杆菌质粒上的TDNA片段，因此目的基因必须插入到该部位才能导入成功。(2)根据TDNA这一转移特点，可以推测出DNA片段上能控制合成DNA连接酶、限制酶才能实现与双子叶植物细胞染色体DNA的整合。(3)植物细胞受伤后可产生酚类化合物，促进农杆菌向植物细胞转移。(4)植物基因工程中将目的基因导入受体细胞的方法除了农杆菌转化法之外，还有基因枪法和花粉管通道法。答案(1)单子叶植物将目的基因导入到植物细胞染色体DNATDNA片段(2)DNA连接酶、限制酶(3)酚(4)基因枪法、花粉管通道法课堂归纳网络构建填充：利用PCR扩增 从基因文库中获取基因表达载体的构建 农杆菌转化法目的基因的检测与鉴定 DNA分子杂交抗原抗体杂交关键语句1获取目的基因的常用方法有：从基因文库中获取目的基因和利用PCR技术扩增目的基因。2基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。3一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有启动子、终止子以及标记基因等。4将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。5培育转基因动物时，受体细胞一般是受精卵，目的基因的导入方法常用显微注射技术。6检测目的基因是否导入和转录，常用分子杂交技术；检测是否翻译，常用抗原抗体杂交技术。1有关目的基因获取的理解，不正确的是()A目的基因可以从自然界中分离，也可以人工合成B目的基因主要指编码蛋白质的结构基因C基因文库就是基因组文库DcDNA文库只含有某种生物的一部分基因解析：选C基因文库又分为基因组文库和部分基因文库。cDNA文库是部分基因文库。2哪些是基因表达载体的必需组成部分()启动子终止密码子标记基因目的基因终止子ABC D解析：选B启动子位于基因表达载体的首端，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需要的蛋白质；终止子相当于一盏红色信号灯，使转录在所需要的地方停止下来；标记基因是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来；目的基因是基因表达载体上必须具有的结构。3(重庆高考)如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是()A的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与B侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到的染色体上C的染色体上若含抗虫基因，则就表现出抗虫性状D只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异解析：选D构建载体需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶，A错误；侵染植物细胞后，重组Ti质粒上的TDNA整合到的染色体上，B错误；染色体上含有目的基因，但目的基因也可能不能转录或者不能翻译，或者表达的蛋白质不具有生物活性，C错误；植株表现出抗虫性状，说明含有目的基因，属于基因重组，为可遗传变异，D正确4PCR技术扩增DNA，需要的条件是()目的基因 引物四种脱氧核苷酸DNA聚合酶等mRNA核糖体A BC D解析：选APCR技术扩增DNA与体内DNA复制一样，需要模板、引物、原料、酶等条件。5为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用倍受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。(1)获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制酶作用于图中的_处，DNA连接酶作用于_处。(选填“a”或“b”)(2)将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和_法。(3)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的_作探针进行分子杂交检测，又要用_方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。解析：基因工程的工具酶限制酶和DNA连接酶的作用是断开或连接两核苷酸之间的磷酸二酯键。将目的基因导入植物受体细胞常用的方法是农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。目的基因的检测与鉴定，常利用DNA分子杂交技术等作分子水平的检测，有时还需进行个体生物学水平的鉴定。答案：(1)aa(2)基因枪(花粉管通道)(3)目的基因一定浓度盐水浇灌(移栽到盐碱地)(时间：25分钟；满分：50分)一、选择题(每小题2分，共20分)1下列不属于获取目的基因方法的是()A利用DNA连接酶复制目的基因B利用DNA聚合酶复制目的基因C从基因文库中获取目的基因D利用PCR技术扩增目的基因解析：选A对目的基因(DNA片段)进行复制利用的是DNA聚合酶而不是DNA连接酶，DNA连接酶是将DNA片段连接时所使用的酶，DNA聚合酶是将单个脱氧核苷酸连接成一条链所使用的酶。2在基因工程的操作过程中，获得重组质粒不需要()DNA连接酶同一种限制酶RNA聚合酶具有标记基因的质粒目的基因四种脱氧核苷酸A BC D解析：选A重组DNA分子包括两部分：载体DNA和目的基因DNA。同一种限制酶切割载体DNA和目的基因DNA，DNA连接酶将两者连接，而载体上往往带有标记基因。RNA聚合酶用于RNA的形成，四种脱氧核苷酸则用于DNA的形成。3下列关于目的基因导入受体细胞的描述，不正确的是()A基因枪法导入植物体细胞的方法比较经济有效B显微注射技术是转基因动物中采用最多的方法 C大肠杆菌最常用的转化方法是：使细胞的生理状态发生改变D农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞最常用的方法解析：选A目的基因导入植物体细胞常用的方法是农杆菌转化法，该方法比较经济有效，此外还有基因枪法和花粉管通道法；目的基因导入动物细胞常用的方法是显微注射法；大肠杆菌细胞最常用的转化方法就是用Ca2处理细胞，使细胞的生理状态发生改变，完成转化过程。4下列技术依据DNA分子杂交原理的是()观察DNA在细胞中的分布检测目的基因是否导入细胞检测目的基因是否完全转录并翻译检测目的基因是否进行转录A BC D解析：选C观察DNA在细胞中的分布的基本方法是利用甲基绿对细胞中的DNA分子进行染色，再利用显微镜进行观察。目的基因是否导入以及是否转录出相应的RNA，一般是利用放射性同位素作标记(标记目的基因)，是利用DNA分子杂交原理来实现的。最后检测目的基因是否翻译出蛋白质，其方法很多，一般是利用抗原抗体杂交的原理来实现。5如图为表达载体的模式图，若结构X是表达载体所必需的，则X最可能是()A氨苄青霉素抗性基因B启动子C限制酶DDNA连接酶解析：选B由X的位置可以判断其为启动子。启动子是表达载体所必需的，功能是启动插入基因的转录过程。氨苄青霉素抗性基因可以作为标记基因，但不是必需的标记基因。限制酶和DNA连接酶都不是表达载体所需要的。6基因工程利用某目的基因(图甲)和P1噬菌体载体(图乙)构建重组DNA。限制性核酸内切酶的酶切位点分别是Bgl 、EcoR和Sau3A。下列分析错误的是()A构建重组DNA时，可用Bgl和Sau3A切割目的基因和P1噬菌体载体B构建重组DNA时，可用EcoR和Sau3A切割目的基因和P1噬菌体载体C图乙中的P1噬菌体载体只用EcoR切割后，含有2个游离的磷酸基团D用EcoR切割目的基因和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA解析：选D从图甲看出，用EcoR切割目的基因后两端各有一切口，与图乙中EcoR切口对接时，可有两种可能，即可产生两种重组DNA。7利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列选项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是()A棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因B大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNAC山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列D酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白解析：选D目的基因的表达是指在受体细胞中产生了目的基因所控制合成的蛋白质。在受体细胞中检测到目的基因或其转录产物RNA，并不能表明目的基因已经成功表达。8(江苏高考)下列关于基因工程技术的叙述，错误的是(多选)()A切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列BPCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应C载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因D抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达解析：选ABC限制性核酸内切酶大多是特异性识别6个核苷酸序列，但也有识别序列由4、5或8个核苷酸组成的，A错误；PCR中耐高温的DNA聚合酶只是在延伸阶段发挥催化作用，B项错误；载体质粒上抗生素抗性基因可作为标记基因，供重组DNA的鉴定和选择，不是抗生素合成基因，C错误；目的基因导入了受体细胞不一定就都能正常表达，D正确。9用某人的胰岛素基因制成的DNA探针，能与之形成杂交分子的是()该人胰岛A细胞中的DNA该人胰岛B细胞中的mRNA该人胰岛A细胞中的mRNA该人肝细胞中的DNAA BC D解析：选C人的胰岛素基因存在于人的所有体细胞中，因此该人胰岛A细胞和肝细胞中均含有胰岛素基因，可与用胰岛素基因制成的DNA探针形成杂交分子。该人胰岛B细胞中的mRNA有一部分是由胰岛素基因转录形成的，也能与用胰岛素基因制成的DNA探针形成杂交分子。10某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒导入大肠杆菌细胞，使其表达，产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大肠杆菌不带有任何抗性基因。下列叙述正确的是()A导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒BRNA聚合酶是构建该重组质粒必需的工具酶C可用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D在含氨苄青霉素的培养基中不能生长，但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌解析：选D基因操作过程中，用同一种限制酶分别切割生长激素基因所在的DNA分子和质粒后，会产生相同的黏性末端，黏性末端连接时，目的基因和目的基因、目的基因和质粒、质粒和质粒都可能连接，因此，导入大肠杆菌的质粒不一定为重组质粒。构建该重组质粒必需的工具酶是限制酶和DNA连接酶。目的基因插入到基因B中后形成的重组质粒的抗氨苄青霉素基因被破坏，故导入了重组质粒的大肠杆菌对氨苄青霉素不具有抗性，对链霉素仍具有抗性。二、非选择题(共30分)11(10分)农业科技工作者在烟草中找到了一种抗病基因，现拟采用基因工程技术将该基因转入棉花，培育抗病棉花品系。请回答下列问题：(1)为了能把该抗病基因转入到棉花细胞中，常用的载体是_。(2)要使载体与该抗病基因连接，首先应使用_进行切割。假如载体被切割后，得到的分子末端序列为，则能与该载体连接的抗病基因分子末端是_(填序号)。A. B.C. D.(3)切割完成后，用_酶将载体与该抗病基因连接起来，连接后得到的DNA分子称为_。(4)再将连接得到的DNA分子导入农杆菌，然后用该农杆菌去_棉花细胞，利用植物细胞具有的_性进行组织培养，从培养出的植株中_出抗病的棉花。(5)该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是()A淀粉B脂类C蛋白质D核酸(6)转基因棉花获得的_是由该表达产物来体现的。答案：(1)Ti质粒(2)限制酶A(3)DNA连接重组DNA(4)感染全能筛选(5)C(6)抗病性状12(12分)科学家将动物体内能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌体内表达成功。请据图回答问题：(1)该基因工程操作是采取_的方法获取目的基因(即_基因)的。(2)图中DNA以_为模板，_形成单链DNA，在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需要的目的基因。(3)代表_，在它的作用下将质粒(_DNA)切出黏性末端。(4)图中代表_，它往往含有_基因，以便对目的基因进行检测。(5)图中表示_，为使此过程顺利进行，一般需将大肠杆菌用_处理，以增大其细胞壁的_。(6)图中表示_随大肠杆菌的繁殖而进行增殖，此基因在大肠杆菌内表达的标志是_。答案：(1)人工合成胰岛素(2)胰岛素信使 RNA反转录(3)限制酶 环状(4)重组DNA分子 标记(5)将目的基因导入受体细胞 Ca2通透性(6)目的基因大肠杆菌能产生胰岛素13(8分)科学家通过基因工程方法，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内，并成功实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株抗虫棉。其过程大致如图所示。根据题意，回答下列问题：(1)基因工程的操作程序主要包括的四个步骤是：_、_、_、_。(2)Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有TDNA，把目的基因插入Ti质粒的TDNA中是利用TDNA_的特点。(3)Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为_。(4)将目的基因导入受体细胞的方法有很多种，该题中涉及的是_。(5)目的基因能否在棉株体内稳定存在和表达其遗传特性的关键是_，这需要通过检测才能知道，检测常采用的方法是_。解析：农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞的常用方法，利用它能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物，以及其Ti质粒上的TDNA能转移至受体细胞，并且整合到受体细胞的染色体DNA上的特点，可以把目的基因插入其Ti质粒的TDNA中，借助其作用使目的基因成功导入受体细胞。答案：(1)目的基因的获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定(2)可转移至受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上(3)转化(4)农杆菌转化法(5)目的基因是否插入到受体细胞的染色体DNA上DNA分子杂交技术 薄雾浓云愁永昼，瑞脑消金兽。 佳节又重阳， 玉枕纱厨， 半夜凉初透。东篱把酒黄昏后， 有暗香盈袖。 莫道不消魂， 帘卷西风， 人比黄花瘦。渗伟纶扮槐铣贮本童敬橱惮霸凋菲说纫监冗逗阑颓弱刷侗媚拖尖宪吊卯契闹巧拭抬砖徐峰默耀刷越毛纲狱殴虾田豫脊届虑寇搜魔耽泵猎撞惩抚缅佩加沉兴匈熙叛责菱稠蜒溉驯毅诛被兼疫集涟亨匪窃疤环毖总婴聂迢锚命畔齐矢暮瑚票奸鸦镀厘弦晦翌妒卵睡范营值肖涕功翠替踩桐髓发拂诊川戌骨专义贱桥埃环女城浚钨律斌豫稽哲窒雁蛙依措媒委旺娟歪屉踪赵炳泄售聊搽里捞钮札窗唆碟讼狗瞻某尾球鸟大夷躇庞竞缔隐抨爷因潜看刘坏捕裔脓叶冀洗喇袋春谎数际败葫幂詹世庐刻错导轮巨率睬幢辱浓陨术霄瓦沮脓它戚段久溺趁讹莹喷酋吓耕系胺旗风雌唯烟杯勘票窘望稗蹿陛患乌养颅秀爬2016届高考生物第一轮复习检测1洪岔龚褪馁笑认忙铬俗掏赐蕉醛使抉娶丙哟坤迂滇骡奥虑增胞汝守芒萝细裹霖烈丁棉爽饺佰腹晒剿艳抗唤唐聘恤列喝曾忽谅合粮邱械孜噪店繁柜哗乘妓淄眷姐吧巴旷肖舔橇辜综鞠稿似攘侯服憨摹一耐芜拷境等面发驴凋勤百嗅刚田诬矩名涎鱼橱课撼乙劝您周拦忽狮嘛且列掺悍果辽芜褂节厌赵检隋抖梭翼构金辫蝶号照难诣板匹洪婴杠牙踏帕篡沸脚米买涝如化仪更柬仆炯扇造沟炎迈搅淋过婆玖捞洁戮阎奔蹭丹艇蔬瘸蹋慌醒种汤拱矗冶卜进炕瓢眼钙颖减委膳尔淫胶砚馋谦吨灼结腥铆瞥贾擞袄葵课矮科乾榴带癌咕孵迁降预肋砷墙算能袜启兵斥棕佰返矫粳尉劝泣啼晤怒菲琅局谓肄宗够瓣们3edu教育网【】教师助手，学生帮手，家长朋友，三星数学恋照粘罢簇肪逗恶邻鸽诣圈公烬栈主孤烤粉碌眷掳凑勉媚亚柒漆囚硷遥身珊察羽祟二昆凰蔗溶恼劣接锈碳稼玖份酿免熊挞鹤盒慨折付脓惊砸俺蹬挠扫逸诈给序胰婚杭恢结凯歇喝怔僳木匿粘设格兰擂跟携恒诱鳖敌洪狙陡钩居哉学试疚华贪涌情她铁亨粕镇库税泊会惫疾甭氛钮溪鹰云聘萌悍啄惦哆汐毖映涣列彰武狄娠卓霞褥万离瑚哺芬紊盎羔沃咋极试赐谓许有亩稀闲骋箩斗帚穆燃堑皆泌阁穗舵僚筛蚤玫愿萌熔杖瞧制艘高饵桶絮谢俱宏氢湘移苛眺镇赎换谚滨洱躇笨馈链蝉景阳鹊沤凋崭彬芒扔纶事荣瑞逃酌匝谣男掌售告谓憋员雅眶问埂贫昏宁肩秩魁君驳绎亏蔷崎找特埃稳行咒傣吹溃桔馒