地中海贫血产前诊断在出缺陷防控中的作用.pdf

临床研究282024,14(2)医师在线 第 14 卷 第 2 期地中海贫血产前诊断在出生缺陷防控中的作用张兰兰，黄芬芳，黄艳华，龚菲菲，胡雪梅，梁佩（钦州市妇幼保健院医学遗传与产前诊断科，广西钦州 535000）【摘要】目的 探讨地中海贫血产前诊断在出生缺陷防控中的作用。方法 对在孕早期（11 14 周）超声引导下经腹绒毛穿刺取材 247例，在孕中期（16 26 周）超声引导下羊膜腔穿刺取材 903 例，在孕中、晚期（23 37 周）超声引导下脐静脉穿刺取材 73 例，总共1 223 例单胎妊娠且有生育重型或中间型地贫患儿高风险的孕妇进行地中海贫血产前诊断。结果 经腹行绒毛穿刺 247 例，一次穿刺成功率99.59%，2 例穿刺术后 2 周内流产，诊断胎儿中间型、重型地贫共 62 例，其中重型地贫 32 例，通过咨询后 49 例胎儿中间型、重型地贫选择引产。羊水穿刺取材 903 例，一次穿刺成功率 99.89%，有 3 例病例在术后 2 周内流产，诊断胎儿中间型、重型地贫共 202 例，其中重型地贫 68 例，通过咨询后 112 例胎儿中间型、重型地贫选择引产。脐血穿刺取材 73 例，一次穿刺成功率 98.63%，术后 2 周内流产 0 例，诊断胎儿中间型、重型地贫共 20 例，其中重型地贫 7 例，通过咨询后 1 例重型地贫未引产，9 例胎儿中间型、重型地贫选择引产。结论 侵入性产前诊断技术能安全有效地应用到地中海贫血产前诊断中，有效防止中间型和重型地中海贫血患儿出生，达到优生优育的目的。【关键词】地中海贫血；产前诊断；出生缺陷防控The role of prenatal diagnosis of thalassemia in the prevention and control of birth defectsZHANG Lan-lan,HUANG Fen-fang,HUANG Yan-hua,et al.Department of Medical Genetics and Prenatal Diagnosis,Qinzhou Maternal and Child Health Hospital,Qinzhou 535000,China.【Abstract】Objective To explore the role of prenatal diagnosis of thalassemia in the prevention and control of birth defects.Methods Prenatal diagnosis of thalassemia was performed in 247 cases sampled by ultrasound-guided transabdominal chorionic villius in the first trimester(11 14 weeks),903 cases sampled by ultrasound-guided amniotic fluid puncture in the second trimester(16 26 weeks),and 73 cases sampled by umbilical vein puncture in the second and third trimester(23 37 weeks).A total of 1 223 pregnant women with singleton pregnancy and high risk of giving birth to children with severe or intermediate thalassemia were diagnosed.Results There were 247 cases of transabdominal chorionic villus puncture,and the success rate of one puncture was 99.59%.2 cases were aborted within 2 weeks after puncture.62 cases of fetal intermediate and severe thalassemia were diagnosed,32 of which were severe thalassemia,and 49 cases of fetal intermediate and severe thalassemia were induced after consultation.Amniotic fluid puncture in 903 cases,and the success rate of one puncture was 99.89%.There were 3 cases of abortion within 2 weeks after operation.A total of 202 cases of fetal intermediate and severe thalassemia were diagnosed,including 68 cases of severe thalassemia.112 cases of fetal intermediate and severe thalassemia were induced after consultation.Umbilical vein puncture was performed in 73 cases,and the success rate of one puncture was 98.63%.There were 0 cases of abortion occurred within 2 weeks after operation.A total of 20 cases of fetal intermediate and severe thalassemia were diagnosed,including 7 cases of severe thalassemia.1 case of severe thalassemia was not induced after consultation,and 9 cases of fetal intermediate and severe thalassemia were induced.Conclusion Invasive prenatal diagnosis technology can be safely and effectively applied to the prenatal diagnosis of thalassemia,effectively prevent the birth of intermediate and severe thalassemia children,and achieve the purpose of eugenics.【Key words】Thalassemia；Prenatal diagnosis；Birth defects prevention and control地中海贫血（Thalassemia），简称“地贫”，是世界范围内最常见的单基因遗传病，全世界约 7%的人群为地贫基因携带者，以-地贫和-地贫两大类最常见1-4。在中国，地中海贫血高发区主要分布在长江沿岸及以南的地区，其中以广西、广东、海南发病率最高5-6。重型-地贫通常以孕晚期胎儿宫内死亡或刚出生后死亡为特征7；重型-地贫血患儿多在出生后 3 6 个月开始出现症状，表现为慢性进行性溶血性贫血，如不治疗，大多数患者在 9 岁之前死亡8。广西地区人群地贫基因携带者较多，地贫患者对家庭及社会影响很大，产前诊断在地贫的防治上尤为重要，目前防止重型地贫患儿出生是公认的地贫防控策略。因此，本研究对广西地区夫妇双方为同型地贫基因携带者并有生育重型或中间型地贫患儿高风险的孕妇进行产前诊断，避免中间型、重型地贫儿出生，为达到优生优育的目的提供进一步的指导作用。现将结果报告如下 。1 资料和方法 1.1 基本资料 基金项目：钦州市科学研究与技术开发计划项目（20221904）2024医师在线杂志 第2期-输出稿.indd 282024医师在线杂志 第2期-输出稿.indd 282024/2/20 10:25:372024/2/20 10:25:37临床研究292024,14(2)医师在线 第 14 卷 第 2 期2021 年 1 月 2022 年 12 月，在钦州市妇幼保健院医学遗传与产前诊断科选取夫妇双方均为同型地贫基因携带者，有生育重型或中间型地贫患儿高风险的单胎妊娠并排除合并其他疾病的孕妇作为研究对象，共 1 223 例。早孕期（11 14 周）孕妇行经腹绒毛活检术，纳入绒毛穿刺组；中孕期（1626周）孕妇行羊膜腔穿刺术，纳入羊水穿刺组；中、晚孕期（23 37周）孕妇行脐静脉穿刺术，纳入脐血穿刺组。绒毛穿刺组年龄 17 42 岁，平均（26.465.08）岁；羊水穿刺组年龄 15 45 岁，平均（28.015.94）岁；脐血穿刺组年龄 14 41 岁，平均（27.367.62）岁。三组孕妇年龄比较，差异无统计学意义（P 0.05）。手术操作者均为主治及以上经过专业培训考核,并具有丰富手术经验的临床医生。1.2 方法 绒毛穿刺组取样时间在妊娠 11 14 周期间。孕妇排空膀胱，取仰卧位，采用经腹 B 超引导下定位，常规消毒后用 19 G活检针经穿刺架沿穿刺架指示角度快速穿刺至胎盘绒毛部分，连接含24 ml氯化钠溶液（内含少许肝素）的20 ml注射器，使负压维持在 10 12 ml 左右，抽取绒毛组织 10 18 mg，放置无菌采集瓶内送实验室检测。羊水穿刺组取样时间在妊娠 16 26 周期间。孕妇排空膀胱，取仰卧位，在B超引导下定位，常规消毒后用AN-S 0.790 mm 一次性麻醉针快速穿刺到达羊膜腔，抽取羊水 1 2 ml丢弃以减少羊水母血污染发生，再抽取约 20 ml 羊水，放置无菌采集瓶内送实验室检测。脐血穿刺组取样时间在妊娠 23 37 周期间。孕妇排空膀胱，取仰卧位，在 B 超引导下定位，常规消毒后用 PA22/15 22 G150 mm 一次性穿刺活检针经穿刺架沿穿刺架指示角度针刺入脐带，拔出针芯，接 5 ml 注射器，抽取 1.5 2.5 ml脐血，放置无菌采集瓶内送实验室检测。提取送检样本的胎儿脱氧核糖核酸（DNA），采用差距聚合酶链反应（Gap-PCR）检测地贫基因缺失型突变；聚合酶链反应-反向点杂交法（PCR-RDB）检测地贫基因点突变，对胎儿是否患地贫做出诊断。中间型、重型-地贫的诊断指标：基因型为纯合子或复合杂合子；中间型-地贫的诊断指标：-基因中有 3 个发生了缺陷，基因型为-/-或-/T；重型-地贫的诊断指标：-基因中有 4 个发生了缺失，基因型为-/-。1.3 统计学方法 采用 SPSS 26.0 软件包处理数据，计量资料用均数 标准差（s）表示，组间比较采用t检验；计数资料用 例（%）表示，组间比较采用2检验，P 0.05 为差异有统计学意义。2 结果 2.1 绒毛穿刺产前诊断结果共 247 例孕妇纳入绒毛穿刺组行胎儿地贫基因产前诊断，其中 246 例手术穿刺一次成功，1 例穿刺两次成功，一次穿刺成功率99.59%（246/247）。手术历时12 min，术程均顺利，未出现胎盘血肿、宫内感染等并发症。2例穿刺术后2周内流产，流产率 0.80%（2/247）。样本检查结果发现胎儿中间型、重型地贫共62例，其中重型地贫32例，阳性率25.10%（62/247）。通过咨询后 49 例胎儿中间型、重型地贫选择引产。2.2 羊水穿刺产前诊断结果共 903 例孕妇纳入羊水穿刺组行胎儿地贫基因产前诊断，其中 902 例手术穿刺一次成功，1 例穿刺两次成功，一次穿刺成功率 99.89%（902/903）。手术历时均在 1 2 min，术程均顺利。89 例因前壁胎盘，穿刺针经过胎盘，术中发现有 1 例胎盘渗血，于 10 s 后自停，无宫内感染、胎心改变等现象。3例术后 2 周内流产，流产率 0.33%（3/903）。样本检查结果发现胎儿中间型、重型地贫共 202 例，其中重型地贫 68 例，阳性率 22.37%（202/903）。通过咨询后 112 例胎儿中间型、重型地贫选择引产。2.3 脐血穿刺产前诊断结果共 73 例孕妇纳入脐血穿刺组行胎儿地贫基因产前诊断，其中 72 例手术穿刺一次成功，1 例穿刺两次成功，一次穿刺成功率 98.63%（72/73）。手术历时均在 1 2 min，术程均顺利。16 例因前壁胎盘，穿刺针经过胎盘，术中发现有 1 例胎心变慢，经予左侧卧位、吸氧、静滴能量合剂等处理后胎心恢复正常，未发现有宫内感染等现象，术后 2 周内流产 0 例。样本检查结果发现胎儿中间型、重型地贫共 20 例，其中重型地贫 7例，阳性率27.39%（20/73）。通过咨询后1例重型地贫未引产，9 例胎儿中、重型地贫选择引产。2.4 三种侵入性穿刺技术比较2021 年 1 月 2022 年 12 月进行绒毛穿刺、羊水穿刺、脐血穿刺术三种手术总共 1 223 例，一次穿刺成功率 99.75%（1 220/1 223），总流产率 0.41%（5/1 223）。三种侵入性穿刺技术的穿刺成功率、术后流产率相差不大，差异无统计学意义（P 0.05），均能安全、有效地运用于产前诊断，详见表 1。三组样本检查结果共发现胎儿中间型、重型地贫共284例，其中重型地贫 107 例，阳性率 23.22%（284/1 223）。通过咨询后胎儿中间型、重型地贫引产共 170 例，1 例重型地贫孕妇夫妇未同意引产，已分娩。未发现实验室诊断与临床诊断不相符情况。2024医师在线杂志 第2期-输出稿.indd 292024医师在线杂志 第2期-输出稿.indd 292024/2/20 10:25:382024/2/20 10:25:38临床研究302024,14(2)医师在线 第 14 卷 第 2 期3 讨论 广西是地贫的高发区，夫妇双方均为同型地贫基因携带者，每次妊娠胎儿有 1/4 的几率为地贫患儿9-10。中间型、重型地贫患者均有不同程度的贫血，给家庭和社会带来沉重的负担。侵入性产前诊断存在一定的手术风险，但目前地贫无创产前诊断技术尚未能成熟应用于所有常见地贫的产前诊断。在地贫基因治疗尚未能常规普及的情况下，对夫妇为同型地贫基因携带者且可能生育中间型、重型地贫儿的孕妇进行产前基因诊断，是目前预防地贫的有效手段，同时可减少孕产妇合并症的发生11-12。广西地区人群地贫防治成为公共卫生问题，地贫产前诊断在重型地贫干预上就显得更为重要。绒毛穿刺能够在孕早期进行胎儿地贫诊断，但绒毛穿刺手术难度大，手术风险高，因而限制了其在产前诊断的应用；羊水穿刺是临床应用时间最长的侵入性产前诊断技术，具有手术并发症发生率低的特点，应用相对广泛；脐血穿刺属于手术风险相对偏高的侵入性产前诊断技术，但由于其取材时间范围较广，可以弥补绒毛穿刺与羊水穿刺在取材时间上的不足，还可以诊断胎儿贫血等，故在产前诊断取中亦有着重要的作用。在本研究中，三组穿刺手术地贫产前诊断总共 1 223 例，绒毛穿刺及羊水穿刺流产率相差不大，总流产率 0.41%，说明了三种侵入性产前诊断技术的流产发生率低，李娇等13 也在报告中指出绒毛穿刺和羊水穿刺的风险没有差别，流产发生率低，与本研究结论也基本一致。三组穿刺手术均未发现有宫内感染等并发症发生，1 例脐血穿刺术中出现胎心改变，经处理后胎心恢复正常，说明手术安全性较高。三组穿刺手术产前诊断结果胎儿中间型及重型地贫发生率 23.22%，1 223 例产前诊断检查结果未发现实验室诊断与临床诊断不相符情况，说明产前诊断结果准确性高。本研究说明，在正确的操作下，绒毛穿刺、羊水穿刺、脐血穿刺三种侵入性穿刺技术均可安全、有效地运用于地贫产前诊断14，在出生缺陷防控中起着决定性作用。绒毛穿刺对地贫产前诊断可做到早发现、早诊断，并能实施早干预，其在时间上更具有优越性，并且能有效减少大孕周引产的并发症，减轻产妇的心理创伤15-16。在临床工作中应根据产前诊断指征、孕妇孕周合理选择最佳的手术方式，以达到优生优育的目。参考文献1Taher AT,Weatherall DJ,Cappellini 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