革兰阳性细菌感染致脓毒症患者血清免疫炎性指标水平检测临床价值分析.pdf

医学检验与临床2 0 2 4年第35卷第2 期doi:10.3969/j.issn.1673-5013.2024.02.008Medical Laboratory Science and Clinics,2024,Vol.35,No.233革兰阳性细菌感染致脓毒症患者血清免疫炎性指标水平检测临床价值分析张沙(单县东大医院检验科，山东菏泽2 7 430 0)摘要目的：分析革兰阳性细菌感染致脓毒症患者血清免疫炎性指标水平检测临床价值。方法：选取2 0 2 0 年12月-2 0 2 2 年12 月在单县东大医院收治的7 2 例革兰阳性细菌感染脓毒症患者作为研究组，另选取革兰阳性菌感染非脓毒症患者7 2 例为对照组。采集患者外周静脉血检测患者血清降钙原素(Procalcitonin，PCT)、C反应蛋白(C-reactive protein，CR P)、白介素（interleukin，IL)-6、IL-4、-千扰素（Interferon-，IFN），比较各组间差异。研究组患者根据治疗后30 天(Day，d）的预后分为死亡组和存活组，比较死亡组和存活组患者血清指标，ROC分析影响近期预后的指标。结果：研究组血清PCT、CR P、IL-6 水平均高于对照组，IFN-/IL-4比值低于对照组（P0.05)；经治疗后30 d，研究组患者有15例患者死亡，死亡率为2 0.8 3%。死亡组年龄、入院APACHEI评分和SOFA评分均大于存活组（P0.05)；经倾向匹配法进行匹配，共得到12 对患者，死亡组PCT、IL-6水平均高于存活组，IFN-/IL-4比值低于存活组（P0.05)。R O C曲线分析结果显示，血清PCT、IL-6 水平和IFN-/IL-4比值均具有预测革兰阳性菌感染的脓毒症患者短期预后的价值(P0.05)。结论：革兰阳性菌血流感染致脓毒症死亡患者炎症反应比存活患者更严重，且血清PCT、IL-6 水平和IFN-/IL-4比值可能具有预测革兰阳性菌感染脓毒症患者短期预后的价值。关键词】革兰阳性细菌；脓毒症；免疫炎性指标；临床价值Clinical detection value of serum immune inflammatory indexes in patients with sepsisinduced by Gram-positive bacteria infectionZHANGSha(Department of Laboratory Medicine,Shan County Dongda Hospital,Shandong Heze 274300)Abstract Objective:To analyze the clinical detection value of serum immune inflammatory indexes in patients with sepsis inducedby Gram-positive bacteria infection.Methods:A total of72 patients with sepsis induced by Gram-positive bacteria infection and 72 non-sepsis patients in the shan county dongda hospital were enrolled as study group and control group between December 2020 and December2022,respectively.The peripheral venous blood was collected to detect serum procalcitonin(PCT),C-reactive protein(CRP),interleukin(IL)-6,IL-4 and-interferon(IFN-),and the differences in different groups were compared.According to prognosis at30 d after treatment,patients in study group were divided into death group and survival group,and serum indexes in the two groups werecompared.The influencing factors of short-term prognosis were analyzed by ROC curves.Results:The levels of serum PCT,CRP andIL-6 in study group were higher than those in control group,while IFN-/IL-4 ratio was lower than that in control group(P0.05).At 30 d after treatment,there were 15 death cases in study group,with mortality rate of 20.83%.The age,APACHE II score at admission andSOFA score in death group were higher than those in survival group(P0.05).According to propensity matching method,there were 12pairs of patients.The levels of PCT and IL-6 in death group were higher than those in survival group,while IFN-/IL-4 ratio was lowerthan that in survival group(P0.05).The results of ROC curves analysis showed that serum PCT,IL-6 and IFN-/IL-4 ratio were ofpredictive value for short-term prognosis of patients with sepsis induced by Gram-positive bacteria infection(P0.05）。研究组患者根据治疗后30 d的预后分为死亡组和存活组。1.2病原菌鉴定及药敏试验方法参考临床检验标准流程9，无菌采集所有患者的血液进行血培养，菌种分离鉴定采用全自动微生物分析仪（VITEK-32，法国生物梅里埃有限公司）进行，同一患者送检样本检出同种细菌，分析时删除重复株。药敏试验以纸片琼脂扩散法，结果判读以美国临床实验室第31版标准。均通过重复试验至少3次，确定致病菌种，根据药敏结果排除多重耐药及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌等存在严重耐药菌患者。1.3治疗方法所有患者均经积极的抗感染（严格根据药敏结果选择抗生素）、补充体液容量、维持酸碱平衡、营养支持、呼吸支持等对症治疗。1.4观察指标1.4.1血清免疫炎性指标入院时抽取患者的外周静脉血，进行血清降钙原素（Procalcitonin,PCT）、C反应蛋白（C-reactive protein,CRP)、IL-6，IL-4、IFN-的检测。全自动血液分析仪（贝克曼DXH-600）检测血清PCT、C R P水平；EILSA法检测IL-6、I L-4、I FN-水平（试剂盒：江西艾博因生物科技有限公司）计算IFN-/IL-4比值。1.4.2一般资料收集以查阅电子病例的方式进行一般资料的收集，包括基础资料（年龄、性别、基础疾病）、病理资料（病原菌分布、感染部位）及病情相关资料人院急性生理和慢性健康状况（A-PACHEI）评分、器官衰竭（SOFA）评分)等。比较研究组与对照组间的血清免疫炎性指标；观察研究组患者接受治疗后30 天（d）内的死亡情况，分为死亡组和存活组，比较两组间的一般资料和血清学指标。1.5质量控制参与数据录人人员均经数据采集录人培训，数据录入采用双人背靠背录入双份，双人核对后进行统计学分析。1.6统计学处理构建数据库，将SPSS23.0统计学软件作为统计学软件工具，计量资料均经检验均符合正态分布，以（土s）表示，行t检验，计数资料以例（百分数）n（%）表示，行检验，利用倾向匹配法排医学检验与临床2 0 2 4年第35卷第2 期除混杂因子，1：1配对病例行存活组和死亡组血清学指标对照对比，ROC 曲线分析血清学指标预测患者短期预后的价值。当P0.05则提示有统计学意义。2结果2.1研究组与对照组的血清免疫炎性指标水平比较研究组 PCT、CR P、I L-6 水平均高于对照组，IFN-/L-4比值低于对照组（P0.05)。见表1。2.2存活组和死亡组一般资料比较经治疗后30 d，研究组患者有15例患者死亡，表1研究组与对照组的血清免疫炎性指标水平比较(xs)组别例数研究组72对照组72tP临床特征年龄(岁)性别基础疾病病原菌分布原发病灶部位入院 APACHE II评分(分)入院SOFA评分(分)组别例数死亡组12存活组12tPMedical Laboratory Science and Clinics,2024,Vol.35,No.2PCT(g/L)7.54 1.630.750.1635.1780.000表2 存活组和死亡组一般资料比较(s)，（n，%）死亡组(n=15)44.67 7.6553.29 10.11男37(64.91)女20(35.09)心脏病30(52.63)糖尿病21(36.84)肿瘤1(1.75)脑卒中5(8.77)金黄色葡萄球菌24(42.11)表皮葡萄球菌18(31.58)屎肠球菌6(10.53)肺炎链球菌8(14.04)甲种溶血性链球菌1(1.75)胸外科术后5(5.26)呼吸道系统9(15.79)泌尿生殖系统32(56.14)消化道系统11(19.30)12.47 2.1424.63 3.63表3存活组和死亡组血清免疫炎性指标水平比较（(s)PCT(g/L)IL-6(pg/mL)8.69 2.1685.73 12.656.23 1.1581.62 9.243.4820.9090.0020.37335死亡率为2 0.8 3%。死亡组年龄、人院APACHEI 评分和SOFA评分均大于存活组（P0.05)。见表2。2.3存活组和死亡组血清免疫炎性指标水平比较采用倾向匹配法，以“是否存活”为因变量，“年龄、性别、基础疾病、病原菌分布、感染部位、入院APACHEI评分、入院SOFA评分”为协变量，进行1：1配对病例，排除混杂因子，共得到12 对。结果显示，死亡组PCT、IL-6 水平均高于存活组，IFN-/IL-4比值低于存活组（P0.05)。见表3。2.4ROC分析ROC曲线分析结果显示，血清PCT、IL-6 水平CRP(mg/L)IL-6(pg/mL)85.65 10.1276.68 9.5463.248.5932.65 5.6514.32533.6960.0000.000存活组(n=57)11(73.33)4(26.67)6(40.00)4(26.67)1(6.67)4(26.67)5(33.33)3(20.00)5(33.33)1(6.67)1(6.67)2(6.67)4(26.67)7(46.67)2(13.33)14.24 2.9626.95 2.39CRP(mg/L)84.63 9.2670.96 8.623.7430.001IFN-/IL-40.53 0.121.24 0.4612.6730.000统计值P值3.6220.0010.3790.5384.8070.1876.3630.1741.4630.6912.6210.0112.3390.022IFN-/IL-40.98 0.261.32 0.432.2710.03336和IFN-/IL-4比值均具有预测革兰阳性菌感染的脓毒症患者短期预后的价值（P0.05）。见图1，表4。1.0曲线源PCTIL6IL-4/IFN-Y一参考线0.80.6敏感度0.40.2-0.00.03讨论脓毒症是目前因感染致死的最主要原因之一，其中血流感染致脓毒症病情往往发展较快，若不及时纠正，在一段时间内可快速发展至休克致多器官衰竭，加速死亡。革兰阳性菌是院内血流感染的重要病原菌，尤其是金黄色葡萄球菌感染的患者，可引起诸多感染并发症，增加死亡率。有研究叫显示脓毒症可引起脓毒症性心肌功能障碍，进而通过复杂的机制直接性或间接性的激活 IL-6、I L-1、T NF-和溶酶体等，进而加重患者病情，导致患者短期预后不良。目前，呕需寻找有效预测血流感染致脓毒症患者预后的高效、安全的有效生化指标。本研究显示，革兰阳性细菌感染脓毒症患者血清PCT、C R P、I L-6 水平均高于革兰阳性菌感染非脓毒症患者，IFN-/IL-4比值低于革兰阳性菌感染非脓毒症患者。PCT是降钙素一种前体蛋白质，当机体受到强烈刺激，尤其细菌感染，PCT含量明显上升，且其上升程度能反映病情的严重程度，若感染控制后很快下降至正常水平2。CRP是一种急性蛋白，临床上检测C反应蛋白用于一些疾病术后的并发症判断、感染鉴别。IL-6是一种多功能促炎因子，不仅指标AUCPCT0.875IL-60.826IFN-/IL-40.799Medical Laboratory Science and Clinics,2024,Vol.35,No.210.2图1ROC分析图95%CI0.7131.0000.6530.9990.6180.979医学检验与临床2 0 2 4年第35卷第2 期可促进CRP的生成，还能诱发胰岛素抵抗，且与机体能量代谢息息相关13。既往有研究显示14，较革兰ROC曲线阴性菌感染患者，革兰阳性菌感染患者的PCT和CRP水平较低，提示革兰阴性菌感染的患者病情更为严重，但尽管革兰阴性菌为脓毒症的主要致病菌，可造成严重的炎症反应，但本研究仍发现经革兰阳性菌血流感染而诱发脓毒症患者机体受到外界致病菌的入侵出现相应的应激反应，仍会使得患者生理功能储备急剧下降，增加机体各器官负荷，患者免疫系统功能降低，造成炎性因子水平失衡，本结果提示，免疫炎性因子（PCT、CR P、IL-6、IFN-、IL-4）可能参与着革兰阳性菌感染血流感染发展为脓毒症的过程。0.40.61-特异性0.81.0表4指标水平分析敏感度(%)特异度(%)83.3391.6783.3383.3383.3366.67脓毒症的发生发展与免疫炎性损害有关，而长期的免疫抑制和高水平炎性反应是诱发患者死亡的主要原因5。近年来，血流感染的发病率、死亡率有显著上升，有相关报道，脓毒症合并血流感染患者死亡率可高达36%50%，说明脓毒症患者发生血流感染后死亡风险可能增高。但在本研究中，革兰阳性菌血流感染脓毒症患者经治疗后 30 d 内有 15例患者死亡率，死亡率为2 0.8 3%，这与文献报道存在差异。分析其原因可能是本研究中纳入对象不一致有关，其次脓毒症患者合并革兰阳性菌血流感染对机体损伤程度小于革兰阴性菌血流感染对机体损伤程度，使得患者在短期内死亡病例相对较少。对于脓毒症患者感染革兰阳性菌是否能影响死亡率需进一步深人分析。SOFA评分是通过对机体主要器官功能损害程度进行评估来对患者预后情况进行判断的工具，对脓毒症预后具有一定的预测意义。本研究中死亡组患者SOFA评分明显高于存活组，表明死亡组患者的器官功能损害更严重，这与前人的研究结果基本一致8。本研究中还发现，死亡组患者年龄大于存活组。年龄较大患者多存在生理储备能力不足、应激能力下降、免疫力下降、营养不良以及伴有各种急、慢性疾病，造成患者革兰阳性菌血流感染脓毒症患者死亡风险增加。进一步分析死亡组和存活组患者血清免疫炎性指标，研究结果显示，死亡组患者血清PCT、I L-6 水平均高于存活组，IFN-/IL-4比值低P7.38 g/L0.00278.08 pg/mL0.0071.140.013截断值医学检验与临床2 0 2 4年第35卷第2 期于存活组，与既往研究部分相似19-2 0 。说明死亡组患者炎症反应更严重，更损害机体器官功能。ROC结果显示，PCT、I L-6 水平和IFN-/IL-4比值均具有预测革兰阳性菌感染的脓毒症患者短期预后的价值。临床或可通过检测患者血清炎性指标水平变化预测脓毒症患者短期预后情况，及时调整治疗方案，有利于改善患者预后。综上所述，革兰阳性菌血流感染致脓毒症死亡患者炎症反应比存活患者更严重，且血清PCT、I L-6水平和IFN-/IL-4比值可能对革兰阳性菌感染的脓毒症患者短期预后具有预测价值。本研究纳人样本量较小，且样本均来源于同一家研究中心，可能存在数据偏倚；今后扩大样本量联合多家研究中心深入分析研究论证。参考文献1崔巧珍,杨志宁,王春雨.院内血流感染常见病原菌耐药性监测).中国药物与临床,2 0 2 0,2 0(16):2 7 8 7 一2790.2李娜,余剑华,胡昌妹,等.ICU血流感染病原菌特征及混合血流感染的危险因素分析.中外医疗,2 0 16,35(27):110-112.3陈灏珠.实用内科学.第14版.北京：人民卫生出版社,2 0 13:318-2 32.4吴田田,姚咏明.自噬在脓毒症中的病理生理意义及临床展望.中华医学杂志，2 0 18,9 8(45):36 35-36 38.5 van der Poll T,Shankar-Hari M,et al.The immunol-ogy of sepsisDJ.Immunity.2021,54(11):2450-2464.6魏裕红,匡婧,陈余思.脓毒症患者病原菌感染情况、危险因素及相关免疫炎症指标检测分析.中国病原生物学杂志,2 0 19,14(1):8 8-9 1.7 Du K,Hao S,Luan H.Expression of peripheral blooddcs cd86,cd80,and th1/th2 in sepsis patients and theirvalue on survival predictionJj.Comput Math Metho-ds Med,2022,3(9):4672535.8中国医师协会急诊医师分会,中国研究型医院学会休克与脓毒症专业委员会.中国脓毒症/脓毒性休克急诊治疗指南(2 0 18).中国急救医学,2 0 18,38(9):741-756.9叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程(第二Medical Laboratory Science and Clinics,2024,Vol.35,No.237版)M.南京：东南大学出版社,2 0 0 6:7 36-8 8 3.10 Humphries R,Bobenchik AM,Hindler JA,et al.Ov-erview of changes to the clinical and laboratory stan-dards institute performance standards for antimicrobialsusceptibility testing,m100,31st editionlJ Clin Mic-robiol,2021,59(12):e0021321-e0021336.11李兴佳.小鼠心肌损伤中TLR4/JNK信号通路的化及不同药物的影响D.吉林大学,2 0 19.12 LI Y,MIN L,ZHANG X.Usefulness of procalcitonin(PCT),C-reactive protein(CRP),and white blood cell(WBC)levels in the differential diagnosis of acutebacterial,viral,and mycoplasmal respiratory tract in-fections in childrenJJ.BMC Pulm Med,2021,21(1):386.13 KAUR S,BANSAL Y,KUMAR R,et al.A panor-amic review of IL-6:structure,pathophysiologicalroles and inhibitorsJ.Bioorg Med Chem,2020,28(5):115327.14韩锦,高劲松,王青伟,等.血流细菌感染致脓毒症患者血清炎症因子与凝血指标的变化.全科医学临床与教育,2 0 2 0,18(1):57-6 0.15 BINNIE A,TSANG JLY,HU P,et al.Epigenetics ofsepsisDJ.Crit Care Med,2020,48(5):745-756.16 ADRIE C,GARROUSTE-ORGEA M,IBN ES-SAIED W,et al.Attributable mortality of icu-ac-quired bloodstream infections:impact of the source,causative micro-organism,resistance profile and an-timicrobial therapyJJ.The Journal ofinfecti on,2017,74(2):131-141.17吴彦坤,王联群,温志超,等.重症创伤评分系统的研究进展.中国急救医学,2 0 2 2,42(11):10 0 8-10 12.18钟敏林,周仙仕,李俊,等.血流感染脓毒症患者6 8 7例临床特征、中医证素分布及其与预后的相关性分析.陕西中医,2 0 2 2,43(10):139 2-139 5.19 汪俊,张德龙,张盛,等.脓毒症患者血清-干扰素、白细胞介素4表达水平及一干扰素/白细胞介素4对预后影响.创伤与急危重病医学,2 0 2 1,9(6):49 1-492,496.20 陈君,王妮,陈棚棚,等.ICU脓毒症患者血清 Pre-sepsin、内毒素、IL-6、PCT 水平与预后的相关性D.中华医院感染学杂志,2 0 2 2,32(3):356-359.