非小细胞肺癌患者血清miR-873和miR-138-5p表达水平及其与免疫微环境及预后的相关性分析.pdf

23现代检验医学杂志第 39 卷第 1 期2024 年 1 月J Mod Lab Med,Vol.39,No.1,Jan.2024非小细胞肺癌患者血清 miR-873 和 miR-138-5p 表达水平及其与免疫微环境及预后的相关性分析刘捷1，杨玲玲1，程秋霞2，高瞻2（1.重庆医科大学附属巴南医院呼吸与危重症医学科，重庆 400054；2.陆军军医大学第二附属医院呼吸与危重症医学科，重庆 400037）摘要：目的探讨血清微小核糖核酸（micro RNA，miRNAs）-873 和微小核糖核酸-138-5p 表达与非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）患者肿瘤免疫微环境（tumor immune microenvironment，TIME）以及预后的关系。方法选择 2019 年 2 月 2021 年 2 月重庆医科大学附属巴南医院收治的 108 例 NSCLC 患者（NSCLC 组）和 65例门诊体检的健康志愿者（对照组）。实时荧光定量聚合酶链反应检测血清 miR-873 和 miR-138-5p 表达，多重免疫荧光染色法检测 TIME 指标，出院后定期随访。Pearson 分析血清 miR-873 和 miR-138-5p 表达与 TIME 指标的相关性，Kaplan-Meier 和 COX 比例风险回归分析 miR-873，miR-138-5p 与 NSCLC 患者预后的关系。结果与对照组比较，NSCLC 组血清 miR-873（1.020.23 vs 3.150.82）和 miR-138-5p（1.210.26 vs 3.540.92）表达降低，差异具有统计学意义（t=-25.426，-24.769，均 P 0.05）。TNM 分期期、低中度分化患者血清 miR-873 和 miR-138-5p 表达低于 TNM 分期期、高度分化患者（t=9.615，10.253；6.889，3.361，均 P 0.05）。血清 miR-873，miR-138-5p 表达与 PD-1，PD-L1，CD4 和 CD8 H 值呈负相关（r=-0.418 -0.673，均 P 0.05）。低表达 miR-873 和 miR-138-5p的NSCLC患者OS生存率低于高表达miR-873和miR-138-5p的NSCLC患者（Log-Rank2=4.724，5.607，P0.05）。TNM 分期期是 NSCLC 患者不良预后的危险因素（P 0.05），miR-873，miR-138-5p 是保护因素（P 0.05）。结论NSCLC 患者血清 miR-873 和 miR-138-5p 表达下调，且与 TIME 以及低生存率有关。关键词：非小细胞肺癌；肿瘤免疫微环境；微小核糖核酸-873；微小核糖核酸-138-5p中图分类号：R734.2；R730.43文献标识码：A文章编号：1671-7414（2024）01-023-06doi:10.3969/j.issn.1671-7414.2024.01.005Analysis of the Relationship between Serum miR-873 and miR-138-5p Expression and Immune Microenvironment and Prognosis in Patients with Non-small Cell Lung CancerLIU Jie1,YANG Lingling1,CHENG Qiuxia2,GAO Zhan2（1.Department of Respiratory and Critical Care Medicine,Banan Hospital Affiliated to Chongqing Medical University,Chongqing 400054，China;2.Department of Respiratory and Critical Care Medicine,the Second Affiliated Hospital of the Military Medical University,Chongqing 400037,China）Abstract:ObjectiveTo investigate the relationship between serum micro RNA（miRNAs）-873 and micro RNA-138-5p expression and tumor immune microenvironment(TIME)and prognosis in patients with non-small cell lung cancer(NSCLC).MethodsA total of 108 NSCLC patients(NSCLC group)and 65 healthy volunteers(control group)who were admitted to Banan Hospital Affiliated to Chongqing Medical University from February 2019 to February 2021 were selected.Real-time quantitative fluorescence polymeric chain reaction(qRT-PCR)was used to detect the expression of miR-873 and miR-138-5p in serum,and multiple immunofluorescence staining was used to detect tumor immune microenvironment indicators.Regular follow-up was conducted after discharge.Pearson analyzed the correlation between the expression of miR-873 and miR-138-5p in serum and the TIME index,and Kaplan-Meier and COX proportional risk regression analyzed the relationship between miR-873 and miR-138-5p and the prognosis of NSCLC patients.ResultsComparison with control group，the expressions of miR-873（1.020.23 vs 3.150.82）and miR-138-5p（1.210.26 vs 3.540.92）in serum of NSCLC group were decreased,and the differences were statistically significant(t=-25.426，-24.769，all P 0.05).The expressions of serum miR-873 and miR-138-5p of patients with low-to-moderate differentiation in TNM stages to were lower than those with highly differentiated patients in TNM stages to (t=9.615，10.253；6.889，3.361，all P 0.05).The expressions of miR-873 and miR-138-5p 基金项目：重庆市巴南区科学技术科研项目（2021-41）：IGS/LABA 直接转换为双支扩剂欧乐欣治疗 COPD 患者的有效性及安全性研究。作者简介：刘捷（1989-），男，硕士，主治医师，研究方向:肺部肿瘤治疗，E-mail：。通讯作者：杨玲玲（1985-），女，本科，主治医师，研究方向:肺癌诊治，E-mail：。24现代检验医学杂志第 39 卷第 1 期2024 年 1 月J Mod Lab Med,Vol.39,No.1,Jan.2024in serum were negatively correlated with the values of PD-1,PD-L1,CD4 and CD8 H(r=-0.418 -0.673，all P 0.05).The OS survival rate of NSCLC patients with low expression of miR-873 and miR-138-5p was lower than that of those with high expression of miR-873 and miR-138-5p(Log-Rank2=4.724，5.607，P 0.05).TNM stage was a risk factor for poor prognosis in patients with NSCLC(P 0.05),and miR-873 and miR-138-5p were protective factors(P 0.05).ConclusionThe expressions of miR-873 and miR-138-5p in serum of NSCLC patients are down-regulated,which is related to TIME and low survival rate.Keywords:non-small cell lung cancer；tumor immune microenvironment；micro RNA-873；micro RNA-138-5p非 小 细 胞 肺 癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）是全世界癌症相关死亡的主要原因，我国是 NSCLC 高负担国家，据 2020 年全球癌症统计我国有 82 万例肺癌新诊断病例和 71.5 万例肺癌相关死亡病例1-2。肿瘤免疫微环境（tumor immune mi-croenvironment，TIME）是肿瘤细胞赖以生存的周围微环境，利于肿瘤细胞生长、增殖和侵袭，并参与免疫抑制和促进治疗耐药性，在NSCLC的发生、侵袭和转移过程中起到作用3。微小核糖核酸（micro RNA，miRNAs）参与调控肿瘤细胞增殖、侵袭和免疫逃逸等生物学过程，可通过调节免疫细胞功能影响 TIME，进而影响肿瘤进展4。miR-873 是肿瘤诊断和预后的分子标志物，已被证实可通过调控其靶基因表达参与癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等过程，与肝细胞癌、结直肠癌、乳腺癌等恶性肿瘤密切相关5。miR-138-5p 在胰腺癌、鼻咽癌、乳腺癌等多种癌症中被发现充当肿瘤抑制基因，miR-138-5p 表达缺失与癌细胞增殖、侵袭和癌症不良预后有关6。miR-873 和 miR-138-5p 在 NSCLC 的报道十分少见，其在 NSCLC 的表达特点以及临床意义尚不清楚，鉴于此本研究拟探讨血清 miR-873 和miR-138-5p 表达与 NSCLC 患者免疫微环境以及预后的关系，以期为临床 NSCLC 治疗和预后分析提供参考。1材料与方法1.1研究对象选择 2019 年 2 月 2021 年 2 月重庆医科大学附属巴南医院收治的 108 例 NSCLC患者（NSCLC 组），男性 65 例，女性 43 例；年龄 60 岁 60 例，60 岁 48 例；肿瘤直径 3cm 57例，3cm 51 例；病理类型：鳞癌 82 例，腺癌 26例；分化程度：低中度分化 72 例，高度分化 36 例；TNM 分期：期 59 例，期 49 例。纳入标准：经穿刺活检或手术获得组织标本，病理学证实为 NSCLC；入组前未接受任何形式的化疗、放疗或靶向药物治疗；有完整的临床资料；标本的采集和处理符合临床试验的伦理规范和操作规程。排除标准：其它部位原发恶性肿瘤；血液肿瘤、血液疾病和免疫系统疾病。另选择同期于我院门诊体检中心体检的 65 例健康志愿者为对照组，男性 39 例，女性 26 例，年龄 60 岁 42 例，60 岁 23 例，两组性别和年龄分布比较差异无统计学意义（P 0.05），本研究已经获得我院伦理委员会批准。1.2仪器与试剂miRNeasy Serum/Plasma Kit 试剂（德国 QIAGEN 公司）；Primer Script RT 试剂盒，SYBR Green PCR Kit（日本 Takara 公司）；Veriti PCR 仪（美国赛默飞公司）；Vectra 全自动定量病理成像分析系统（美国 PerkinElmer）。1.3方法1.3.1实时荧光定量聚合酶链反应检测 miR-873，miR-138-5p 表达：所有患者入组次日清晨（对照组体检当日）采集静脉血 3ml 注入干燥试管，待血液凝固后离心（相对离心力 3 024g，时间 5min）获得血清，-80保存。取血清样本，miRNeasy Se-rum/Plasma Kit 试剂提取总 RNA，使用 Primer Script RT 试剂盒将总 RNA 反转录为 cDNA。SYBR Green PCR Kit 和 Veriti PCR 仪进行 qRT-PCR。反应条件：95初始变性 5 min，95 20s，56退火 30s，72延伸 1min，35 个循环，72最终延伸 5 min。反应 体 系：SYBR Premix Ex Taq II（2）12.5l，dNTP1.6l，Taq DNA 聚合酶 1l，上下游引物 10mol/L 各 1l，加反应缓冲液至 25l。引物序 列：miR-873 的正向引物为 5-GGGGCAGGAACTT GTG AG-3，反向引物为 5-GTGTGGTGTGGTATG GTGTG-3。miR-138-5p 的正向引物为：5-CTAGA GCTCAACTGAAGTGGCTAAACTG-3，反向引物为 5-GCTAGGCGTTGAAGTTCTGCCTAAATGC-3。-actin（内参），上游：5-TGCGTGACATTAAG GAGAA-3，下游：5-AAGGAA GGCTGGAAGAG T-3。2-Ct计算miR-873和miR-138-5p相对表达量。1.3.2多重免疫荧光染色法检测 TIME 指标：取肺癌组织石蜡标本，经脱蜡、水化，10 mmol/L 枸椽酸钠缓冲液孵育 10 min，微波 20 min，0.3g/dl H2O2处理抑制内源性过氧化物酶活性，5g/dl 脱脂奶粉孵育阻断非特异性结合，PBS 洗涤。加入一抗、二抗孵育、漂洗。多重免疫组织化学试剂盒进行荧光标记，DAPI 染料复染、封片，全自动定量病理成像分析系统进行分析，1+，2+，3+表示阳性程度，1+弱阳性，2+中等程度阳性，3+强阳性，采用组织化学评分（H 值）分析 TIME 中 CD3，CD4，CD8，25现代检验医学杂志第 39 卷第 1 期2024 年 1 月J Mod Lab Med,Vol.39,No.1,Jan.2024CD68 和 CD163，叉头状转录因子 3（forked head transcription factor 3，FOXP3）、淋巴细胞活化基因 3（lymphocyte activation gene 3，LAG3）、T 细胞免疫球蛋白黏蛋白分子 3（T-cell immunoglobulin mucin molecule 3，TIM3）、程序性细胞死亡受体 1（programmed cell death receptor 1，PD-1）和程序性细胞死亡配体 1（programmed cell death ligand 1，PD-L1）的蛋白表达情况，H 值=（3+）%3+（2+）%2+（1+）%11007。1.3.3随访：NSCLC 患者出院后定期电话随访和门诊复查，随访截止 2022 年 6 月。记录随访期间NSCLC 患者生存情况。总生存（overall survival，OS）时间定义为自术后至全因死亡或随访截止 时间。1.4统计学分析SPSS 25.00 进行数据录入和分析，经 K-S 法 检 验 miR-873,miR-138-5p 和 TIME指标符合正态分布以(xs)表示，采用 student-t 检验。Pearson 分 析 血 清 miR-873,miR-138-5p 表 达与 TIME 指标的相关性。Kaplan-Meier 法绘制不同miR-873 和 miR-138-5p 表达下 NSCLC 患者生存曲线，Log-Rank 检验生存率的差异。COX 比例风险回归模型分析影响 NSCLC 患者预后的危险因素。检验水准=0.05。2结果2.1NSCLC 组和对照组血清 miR 873,miR 138 5p 表达比较见表 1。NSCLC 组血清 miR-873 和 miR-138-5p 表达低于对照组，差异有统计学意义（均 P 0.05）。表 1 NSCLC 组和对照组血清 miR-873,miR-138-5p 表达比较（xs）指标NSCLC 组（n=108）对照组（n=65）t 值P 值miR-873（2-Ct）1.020.233.150.82-25.4260.001miR-138-5p（2-Ct）1.210.263.540.92-24.7690.0012.2NSCLC 血清 miR-873,miR-138-5p 表达与患者临床病理特征的关系见表 2。TNM 分期期、低中度分化患者血清 miR-873 和 miR-138-5p表达低于 TNM 分期期、高度分化患者（均P 0.05），不同性别、年龄分布、病理类型、肿瘤直径之间血清 miR-873 和 miR-138-5p 表达比较差异均无统计学意义（均 P 0.05）。表 2 不同 NSCLC 临床病理特征患者血清 miR-873,miR-138-5p 表达比较(xs)类 别nmiR-873（2-Ct）tPmiR-138-5p（2-Ct）tP性别男650.990.251.8600.0661.190.300.9490.345女431.070.161.240.21年龄（岁）60601.000.261.1320.2601.180.311.3880.168 60481.050.181.250.18肿瘤直径（cm）3570.980.251.9220.0571.170.251.9550.053 3511.060.171.250.16病理类型鳞癌821.010.230.7960.4281.200.210.8270.410腺癌261.050.201.240.23分化程度高度分化361.150.099.6150.0011.320.106.8890.001低中度分化720.960.101.160.12TNM 分期期591.100.1110.2530.0011.260.163.3610.001 A 期490.920.061.150.182.3miR-873，miR-138-5p 表 达 与 TIME 指 标 的相关性见表 3。NSCLC 患者 CD3，CD4，CD8，CD68，CD163，FOXP3，LAG3，TIM3，PD-1 和PD-L1 的 H 值分别为 5.21，4.02，13.02，2.02，1.32，1.16，3.35，16.02，17.43 和 15.32。血 清 miR-873和 miR-138-5p 表达与 PD-1，PD-L1，CD4，CD8 的H 值呈负相关（均 P 0.05），与 CD3，CD68，CD163，FOXP3，LAG3和TIM3的H值无相关性（均P 0.05）。2.4不同 miR-873,miR-138-5p 表达 NSCLC 患者生存比较中位随访 21（4 40）月，108 例患者中失访 5 例，余 103 例患者在随访期间死亡 56例，绘制 Kaplan-Meier 生存曲线，低表达 miR-873（1.02，n=52）和低表达 miR-138-5p（1.21，n=53）NSCLC 患者 OS 生存率为 34.62%（18/52），32.08%（17/53），低于高表达 miR-873（1.02，n=51）和 高 表 达 miR-138-5p（1.21，n=50）NSCLC 患者的 56.86%（29/51），60.00%（30/50），26现代检验医学杂志第 39 卷第 1 期2024 年 1 月J Mod Lab Med,Vol.39,No.1,Jan.2024差异有统计学意义（Log-Rank2=4.724，5.607，均P 0.05），见图 1。表 3miR-873，miR-138-5p 表达与 TIME 指标的相关性TIME 指标miR-873miR-138-5prPrPCD3-0.0830.965-0.1050.921CD4-0.5030.000-0.4250.000CD8-0.4650.000-0.4180.000CD68-0.1150.242-0.0850.365CD163-0.1360.096-0.1180.186FOXP3-0.1420.095-0.1200.105LAG3-0.1280.102-0.1320.098TIM3-0.1890.079-0.1920.086PD-1-0.5680.000-0.5510.000PD-L1-0.6730.000-0.6420.0002.5影响 NSCLC 生存的因素分析见表 4。以NSCLC患者生存情况为因变量（0=存活，1=死亡），纳入年龄（赋值：0=60岁，1=60岁），性别（赋值：0=女，1=男），肿瘤直径（赋值：0=3cm，1=3cm），病理类型（赋值：0=鳞癌，1=腺癌），分化程度（赋值：0=高度分化，1=低中度分化），TNM 分期（赋值：0=期，1=期），miR-873（赋值：0=高表达，1=低表达），miR-138-5p（赋值：0=高表达，1=低表达）为自变量。单因素COX比例风险回归分析结果显示分化程度、TNM 分 期、miR-873,miR-138-5p 与 NSCLC 患 者预后有关（P 0.05）。多因素 COX 比例风险回归模型（向后逐步法筛选变量），结果显示 TNM分期期是 NSCLC 患者不良预后的危险因素（P0.05），miR-873和miR-138-5p是保护因素（P 0.05）。图 1不同 miR-873，miR-138-5p 表达 NSCLC 患者生存曲线表 4 影响 NSCLC 生存的单因素和多因素 COX 比例风险回归类别单因素多因素HR(95%CI)P 值HR(95%CI)P 值年龄1.051（0.902 1.325）0.326-性别0.267（0.161 1.129）0.506-肿瘤直径0.250（0.302 1.216）0.653-病理类型0.886（0.741 1.377）0.426-分化程度1.365（1.121 1.823）0.0161.077（0.852 1.251）0.212TNM 分期1.504（1.322 4.503）0.0211.306（1.128 2.719）0.009miR-8730.658（0.512 0.905）0.0000.602（0.489 0.838）0.000miR-138-5p0.781（0.634 0.983）0.0000.736（0.602 0.921）0.0003讨论研究显示肿瘤往往与其赖以生存的微环境相依相行，肿瘤免疫微环境（TIME）是一个极其复杂的系统，包括细胞和非细胞成分，如血管、成纤维细胞、免疫细胞、骨髓来源的炎症细胞、信号化学物质和细胞外基质（extracellular matrix，ECM），上述细胞和非细胞成分均可与肿瘤细胞相互作用，促使恶性细胞表型和行为，如增殖、侵袭、上皮间充质转化、血管生成和耐药等，并影响免疫治疗应答，与肿瘤进展和预后密切相关8-9。TIME 中含有大量的免疫细胞，部分具有抑癌作用，比如 CD8+T 细胞和自然杀伤细胞，部分抑制免疫功能发挥促瘤作用，如调节性 T 细胞和髓源性抑制细胞。miRNAs 是一种小型非编码 RNA，能通过抑制信使 RNA 翻译或促进信使 RNA 降解在转录后水平调节基因表达，包括癌症、心血管和代谢疾病在内的27现代检验医学杂志第 39 卷第 1 期2024 年 1 月J Mod Lab Med,Vol.39,No.1,Jan.2024无数生理过程和病理过程高度依赖于 miRNAs 的调节，miRNAs 在 TIME 肿瘤细胞与其周围免疫细胞相互作用过程中发挥关键作用，miRNA 可控制肿瘤细胞产生趋化因子或细胞因子，影响免疫细胞的迁移和扩张，直接调节TIME的成分，促进效应功能、抗原呈递、表型极化和不同程度的免疫抑制，还可通过外泌体运输到免疫细胞，影响免疫微环境10。miR-873 位于染色体 9p21.1 上，包括 miR-873-5p 和 miR-873-3p 两个主要成员，miR-873 具有多种靶基因以及独特的催化活性、转录调控、结合等分子功能，miR-873 可通过磷脂酰肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白、Wnt/-Catenin，核因子-和丝裂原细胞外信号调节激酶/细胞外信号调节激酶等信号通路，参与癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭、细胞周期、细胞干性和化疗反应等过程，影响癌症发展11。研究显示miR-873 在胃癌中表达下调，通过靶向含 THUMP结构域蛋白 1 抑制胃癌细胞增殖、侵袭，并促使化疗敏感12。在结肠癌发病机制中，miR-873 通过靶向调节肿瘤抑制候选基因 3，抑制癌细胞的增殖、集落形成和侵袭，抑制癌细胞转移13。miR-873-5p在乳头状甲状腺癌组织和细胞系中表达下调，通过靶向 CXC 趋化因子配体 16 抑制 p65 和 Rel-B 磷酸化，降低基质金属蛋白酶 1，9 和 13mRNA 和蛋白表达，抑制甲状腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭，发挥抑瘤作用14。本研究发现 NSCLC 患者血清 miR-873 表达降低，且与高 TNM 分期、中低分化程度、不良预后有关。研究显示 miR-873 可能通过调节叉头框蛋白 M1 抑制癌细胞增殖、迁移和侵袭，并增加癌细胞凋亡15。进一步分析 miR-873 与 TIME指 标 PD-1，PD-L1，CD4，CD8 的 H 值 呈 负 相关，表明 miR-873 可能参与 TIME 调控过程，抑制NSCLC 进展。分析原因：首先，miR-873 通过直接结合 PD-L1 的 3-未翻译区抑制 PD-L1 的表达以及PD-L1 下游磷脂酰肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B 信号通路，减弱乳腺癌细胞的干性和化疗耐药性16；其次，单核细胞通过诱导肿瘤细胞毒性，抑制转移，吞噬肿瘤物质和负调控Treg细胞，能够抑制肿瘤的进展，静息树突状细胞（又称未成熟树突状细胞）能有效地捕获抗原，通过调节 T 细胞的活化，参与维持自我耐受性，抑制肺癌进展17，miR-873 可能通过降低单核细胞和静息树突状细胞相对比例参与 TIME调控过程，抑制 NSCLC 进展18。因此 miR-873 表达降低，其抑癌作用减弱，导致 NSCLC 恶性进展和不良预后的发生。miR-138-5p 在多癌症类型表达下调，被称为肿瘤抑制因子，现有报道显示 miR-138-5p 通过外泌体从乳腺癌细胞传递到肿瘤相关巨噬细胞，下调赖氨酸特异性去甲基化酶 6B 的表达，抑制巨噬细胞M1 极化，刺激 M2 极化，抑制肿瘤进展19。miR-138-5p 通过抑制靶向叉头盒 C1 表达，抑制前列腺癌细胞增殖、集落形成、细胞迁移和侵袭，发挥肿瘤抑制基因作用20。miR-138-5p 还可通过靶向抑制 DEK 表达，抑制胃癌细胞增殖和肿瘤生长21。miR-138-5p 在胶质瘤中下调，miR-138-5p 过表达可通过靶向抑制其靶基因高迁移率盒蛋白 13，下调脊椎蛋白 2 的表达，抑制胶质瘤血管生成22。本研究发现 NSCLC 患者血清 miR-138-5p 表达下调，且与高 TNM 分期、中低分化程度、NSCLC 患者低生存率有关。分析 miR-138-5p 参与 NSCLC 的机制为：miR-138-5p 可能通过靶向 smad 核相互作用蛋白 1抑制肺癌细胞增殖和迁移23，miR-138-5p 可直接结合到 CDK8 的 3 未翻译区抑制细胞周期 G0/G1 期阻滞，减缓癌细胞生长，增加癌细胞凋亡24。本研究发现 miR-138-5p 与 TIME 指标 PD-1，PD-L1，CD4，CD8 的 H 值呈负相关，miR-138-5p 可能还参与 NSCLC 的免疫应答，与 TIME 有关。miR-138-5p 作为一种靶向 PD-L1 的强肿瘤抑制因子25，可直接下调树突细胞和 T 细胞上 PD-L1 和 PD-1 的表达，激活免疫系统，降低肿瘤细胞中 Ki67 和微小染色体维持蛋白 2 的表达，抑制肿瘤生长26。可见miR-138-5p 在 NSCLC 发病机制中发挥抑癌基因作用，miR-138-5p 低表达可能促使 NSCLC 恶性进展，与不良预后有关。综上，NSCLC 患者血清 miR-873 和 miR-138-5p 表达均较健康对照组下调，miR-873 和 miR-138-5p 表达缺失与 NSCLC 恶性病理特征以及低生存率有关。miR-873 和 miR-138-5p 可能通过调控 TIME参与 NSCLC 发病过程。本研究创新性地为证实miR-873，miR-138-5p 与 NSCLC 病理特征、TIME以及预后的关系，为 NSCLC 临床治疗提供了新的靶点，为预后分析提供了新的标志物。不足之处在于尚不能直接证实 miR-873，miR-138-5p 与 TIME的关系，仍需开展体外细胞培养或构建动物模型来进一步探讨。参考文献：1 马彦娥,苏虎艳,王倩如,等.非小细胞肺癌组织中miR-30a 和 CD73 的表达水平与预后相关性分析 J.现代检验医学杂志,2022,37(3):73-78.MA Yane,SU Huyan,WANG Qianru,et al.Correlation analysis of tissue miR-30a and 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