基于血液代谢组学分析缺血性心脏病患者疾病进程的代谢紊乱特征.pdf

第45卷第2 期2024年3月质谱学报Journal of Chinese Mass Spectrometry SocietyVol.45No.2Mar.2024基于血液代谢组学分析缺血性心脏病患者疾病进程的代谢紊乱特征杨柱林1，田林云，吴壮可?,赵燕，张宏2 4，易伦朝1.3（1.昆明理工大学食品科学与工程学院，云南昆明6 50 50 0；2.昆明理工大学附属医院，云南省第一人民医院心血管内科，云南昆明6 50 0 32；3.昆明理工大学化学工程学院，云南昆明6 50 50 0；4.昆明理工大学生命科学学院，云南昆明6 50 50 0）昊2 3,李慧敏1,顾颖，任达兵，摘要：本研究以47 例心绞痛患者、51例心肌梗死患者和8 0 例心力衰竭患者的血浆作为样本，结合超高效液相色谱-高分辨质谱(UPLC-HRMS)技术和化学计量学方法，分析缺血性心脏病患者疾病进程的代谢紊乱特征。实验共定性、定量鉴定9 7 种内源性代谢物，基于t检验、主成分分析、偏最小二乘-判别分析、变量重要性投影等方法，分别筛选出2 8 种和32 种可区分心绞痛与心肌梗死患者，心肌梗死与心力衰竭患者的差异性特征代谢物。代谢通路分析结果表明，从心绞痛到心肌梗死，以及从心肌梗死到心力衰竭的疾病进程中，氨基酸代谢和三羧酸循环等能量代谢均发生了紊乱；从心肌梗死到心力衰竭的疾病进程中，以甘油磷脂代谢和脂肪酸生物合成为代表的脂质代谢显著紊乱；通过分析受试者工作曲线(ROC)，糖胆酸、富马酸、棕榈酸、肌钙蛋白、高密度脂蛋白、谷丙转氨酶和谷草转氨酶等联合指标可提高心肌梗死诊断精度，ROC曲线下面积（AUC)值达到1.0 0 0 O；瓜氨酸、柠檬酸、硬脂酸、甘油磷酸胆碱和NT-proBNP联合指标可提高心力衰竭诊断精度，AUC值达到0.957 0。本研究可为缺血性心脏病患者的精准诊断和疾病发展过程中的药物、营养干预提供重要的代谢靶标。关键词：超高效液相色谱-高分辨质谱（UPLC-HRMS)；代谢组学；心绞痛；心肌梗死；心力衰竭；化学计量学中图分类号：0 6 57.6 3doi:10.7538/zpxb.2023.0068文献标志码：A文章编号：10 0 4-2 997(2 0 2 4)0 2-0 2 56-13Blood Metabolomics Reveals the Metabolic Disorder in DiseaseProgression for Patients with Ischemic Heart DiseaseYANG Zhu-lin,TIAN Lin-yun?,WU Hao2,LI Hui-min,GU Ying,REN Da-bing,ZHUANG Ke,ZHAO Yan,ZHANG Hong-,YI Lun-zhaol.3(1.Faculty of Food Science and Engineering,Kunming University of Science and Technology,Kunming 650500,China;2.Department of Cardiovascular Medicine,The First Peoples Hospital of Yunnan Province,Affiliated Hospital of Kunming University of Science and Technology,Kunming 650032,China;3.Faculty of Chemical Engineering,Kunming Universityof Science and Technology,Kunming 650500,China;国家自然科学基金（2 2 17 40 45，2 17 7 50 58）本文通信作者易伦朝，张宏第2 期Abstract:Ischemic heart disease is one of the main causes of death worldwide.In thisstudy,the plasma samples of 47 patients with angina,51 patients with myocardialinfarction,and 80 patients with heart failure were collected.Ultra-performance liquidchromatography-high resolution mass spectrometry(UPLC-HRMS)and chemometricswere used to analyze the plasma metabolic disorder in disease progression for patientswith ischemic heart disease.Chromatographic separation was performed on an ACE3C18 column(150 mmX3.0 mmX3 m),and MS analysis was carried out by electros-pray ionization(ESI)source at positive and negative modes combined with full scan-ning.In total,97 endogenous metabolites were identified and quantitative analyzed.Principal component analysis and partial least square-discriminant analysis were appliedin combination with variable importance projection(VIP)and t-test to screen differenti-ally characteristic metabolites.Metabolite concentration was analyzed using SPSS andthe metabolites with significant differences(P1 were selected using Variable Importance in Projection screening.Finally,disease-specific metabolites were identified using VIP1 and t-test P135 ng/L18。本研究排除了既往存在风湿性心脏病、重度肺动脉高压及先天性心脏病、缩窄性心包炎、严重肾功能不全、合并恶性肿瘤、存在严重的创伤性疾病及严重血液系统疾病的患者，以及处于妊娠期及哺乳期的妇女。清晨从空腹8 h的志愿者肘静脉采血，经肝素锂抗凝4静置3h后，以30 0 0 r/min离心2 0 min，取上清液，置于一8 0 冷冻保存。本研究通过了云南省第一人民医院伦理审查委员会的批准，获得了所有参与者的知情同意。第2 期谷丙转氨酶(ALT)/(U/L)谷草转氨酶(AST)/(U/L)AST:ALT肌酐/(mg/dL)尿酸/(mol/L)肾小球滤过率/（mL/（m i n 1.732)空腹血糖/(mmol/L)总胆固醇(TC)/(mmol/L)甘油三酯(TG)/(mmol/L)高密度脂蛋白(HDL-C)/(mmol/L)低密度脂蛋白(LDL-C)/(mmol/L)N-末端前体B型钠尿肽/（ng/L)肌钙蛋白T/(ng/L)游离三碘甲腺原氨酸/（pmol/L)游离甲状腺素/(pmol/L)促甲状腺激素（mIU/L)三碘甲状腺原氨酸/g/L）四碘甲状腺原氨酸/（g/dL)室间隔厚度/cm左心房内径/cm左室舒张末期内径/cm肺动脉收缩压/mmHg射血分数/%注：a.心梗组与心绞痛组的比较P值 0.0 5;b.心衰组与心梗组的比较P值 0.0 5；*表示人数分布1.3.2血浆样本前处理将血浆样本缓慢解冻后涡旋1min，准确吸取2 0 L，加人2 0 L1g/LL-苯丙氨酸-3,3-d和L-亮氨酸-5,5,5-d内标溶液、50 0 L冷甲醇，涡旋1min,室温静置10 min，在4下以130 0 0 r/min离心10min；收集上清液，室温下用氮气吹干，2 50 L冷甲醇复溶，涡旋1min，过0.2 2 m滤膜，转移至进样瓶，待测。同时制备质量控制（QC)样本，用于评价实验过程中仪器的精密度和样本的稳定性。各取杨柱林等：基于血液代谢组学分析缺血性心脏病患者疾病进程的代谢紊乱特征参数Parameter年龄岁BMI性别（男/女）*高血压（是/否）*糖尿病（是/否）*血红蛋白数/(g/L)259表1血浆样本患者信息Table 1 Information of plasma samples心绞痛患者Angina64.6412.1924.682.9225/2238/912/35141.7420.2722.1612.3220.6610.041.00(0.47,1.79)74.8923.75362.26102.4786.6822.765.872.244.111.161.741.731.10 0.272.21 0.83511.241463.545.1014.5116.12 2.144.270.672.711.8594.4316.891.610.301.00 0.143.480.454.720.5230.0210.4561.859.65心肌梗死患者Myocardial infarction(MI)61.8411.1524.222.3937/1431/2011/40143.0818.2228.3218.0264.6579.78a1.66(0.41,14.52)84.5570.71364.4385.6389.9223.526.552.374.551.00a1.941.690.970.21a2.800.89a1164.521830.95a762.341182.69a14.924.373.801.01a2.843.3387.6623.041.530.381.03 0.163.530.464.880.6228.328.2357.328.54a2L所有样本，混匀,加人10 0 0 L冷甲醇，其余操作步骤与上述样本相同。进样过程中，每隔6 个血浆样本插人1个QC样本，共采集30个QC样本数据。1.3.3色谱条件Thermo Scientific HypersilACE3 C18色谱柱(150 mmX3.0 mmX3 m);流动相：A为乙腈，B为0.1%甲酸水溶液；梯度洗脱程序：2 9 min(5%38%A),9 14min(38%68%A),1422 min(68%100%A),2230 m i n(10 0%5%A);每次进样的分析心力衰竭患者Heart failure(HF)69.8413.15b22.852.91653/2753/2731/49131.5619.99b95.01559.21127.57828.451.31(0.52,7.95)105.2759.31432.89123.79b68.34 27.91b6.242.643.791.11b1.47 1.310.96 0.272.140.88b4983.375205.66b20.9150.34b9.316.36b11.77 10.11b3.152.5338.3539.92b49.6443.86b10.182.30b41.26 6.97b54.778.82b40.0916.26h43.2915.27b260时间30 min，流速0.2 0 mL/min，柱温40，进样量1L。1.3.4质谱条件电喷雾电离源(ESI);喷雾电压40 0 0 V(ESI+）、350 0 V（ESI-）；雾化温度30 0；鞘气压强4.5MPaESI+）、4.0 M Pa(ESI-）；辅助气压强 1.5 MPa（ESI+）、1.0MPa(ESI-）；传输毛细管温度350（ESI+）、320（ESI-）；全扫描（fullMS）模式分辨率35000；源内诱导裂解电压0 eV；数据依赖二级扫描（ddMS）分辨率17 50 0；高能碰撞诱导电压分别为15、2 5、35eV。1.3.5数据处理1）代谢物的定性定量分析。首先,将测定出的代谢物与2 7 种代谢物标准品的保留时间以及一级、二级质谱信息进行对比；结合HMDB、M a s s b a n k 等数据库以及参考文献对其他无标准品的代谢物进行定性分析。根据定性结果，采用Xcalibur软件提取各代谢物的峰面积，并用内标法进行定量分析。最后，使用SPSS软件对代谢物进行t检验分析,筛选疾病不同进程中含量有显著性差异(P1的变量。最后，结合VIP1与t检验P0.05,筛选疾病不同进程的特征代谢物。3）代谢通路分析。为进一步研究患者血浆中内源性代谢物之间的关系,将筛选出的疾病不同进程特征代谢物的人类代谢组学数据库中的代谢物编号（HMDB-ID)导人MetaboAnalyst软件进行代谢通路分析。在代谢通路图中，横坐标表示代谢通路的影响值（pathwayimpact），纵坐标表示富集分析（enrichment analysis）的P值。基于P 0.1筛选差异代谢通路，并结合筛选出的含量具有显著变化的特征代谢物进行代谢通路分析。4）受试者工作曲线（ROC）分析。使用质谱学报第45卷SPSS软件，采用Logistic回归分析及ROC评估临床生化指标和所筛选代谢指标对缺血性心脏病患者的精准诊断能力。首先，以单个指标为变量进行ROC分析，评估单个指标的诊断能力；再联合临床生化指标和代谢指标，以Logistic回归分析所构建的联合变量进行多变量ROC分析。P0.05表明具有统计学意义。2结果与讨论2.1代谢物定性定量分析本研究共定性鉴定97 个代谢物，其中，与标准品比对定性2 7 个代谢物，与HMDB、Massbank数据库以及参考文献比对定性7 0 个代谢物。提取代谢物峰面积，以L-苯丙氨酸-3,3-d2和L-亮氨酸-5,5,5-d3为内标物进行定量分析。以溶血磷脂酰胆碱(LPC)LPC(20：5)和溶血磷脂酰乙醇胺（LPE)LPE(16：0)的同分异构体定性分析为例，说明代谢物定性过程，结果示于图1。由图1a和1b可见，LPC(20：5）和LPE(16：0)的提取离子流图中均有2 个色谱峰。由图1c和1d可见，LPC(20：5)的2个色谱峰的二级质谱均含有溶血磷脂酰胆碱类的特征碎片离子m/184.0733、10 4.10 7 0和8 6.0 9 6 4;LPE(16：0）的2 个色谱峰的二级质谱均含有溶血磷脂酰乙醇胺类的特征中性丢失m/z141.0199。因此，推断图1c、1d 中的2个峰分别为LPC（2 0：5）、LPE（16：0）的同分异构体。有文献19 报道，在反相色谱洗脱脂类代谢物时，碳链位于Snl 的LPCs和LPEs的代谢物比碳链位于Sn2的LPCs和LPEs更早洗脱。此外,碳链位于Sn2的代谢物响应强度高于碳链位于Snl的代谢物2 0 1。因此，将图1a中的峰1和峰2 分别定性为LPC（2 0：5）(Snl)和LPC(20：5)(Sn 2)，图1b中的峰1和峰2 分别定性为 LPE（16：0）（Sn 1）和 LPE(16:0)(Sn2)。2.2分类模型建立及特征代谢物筛选使用SPSS软件对心绞痛、心肌梗死和心力衰竭患者中9 7 个代谢物的含量差异进行t检验分析，从心绞痛到心肌梗死的疾病进程中共筛选出37 个含量有显著性差异的代谢物，从心肌梗死到心力衰竭的疾病进程中共筛选出41个含量有显著性差异的代谢物，结果列于表2。第2 期杨柱林等:基于血液代谢组学分析缺血性心脏病患者疾病进程的代谢紊乱特征2617.0108a5.0F3.0CioH271.0020.021.022.023.024.025.0f/minC184.0729100CHN-CHCH5086.09690104.10710100200300400500600100184.0729104.10715086.09690100200300400 500600ml/z注：a.LPC(20：5)的提取离子流图；b.LPE(16：0)的提取离子流图；c.LPC(20：5)峰1和峰2 的二级质谱图；d.LPE(16：0)峰1和峰2 的二级质谱图图1代谢物LPC(20：5)和LPE(16：0)的定性分析Fig.1Qualitative analysis of LPC(20:5)and LPE(16:0)表2 不同疾病进程t检验具有显著性差异的代谢物(P0.05)Table2Metabolites with significant differences in t-tests for angina,MI and HF(P1结合t检验P1结合t检验P1的变量，示于图2 b、2 e，并结合t检验分析筛选含量有显著性差异(P0.05)的代谢物，最终在心绞痛到杨柱林等：基于血液代谢组学分析缺血性心脏病患者疾病进程的代谢紊乱特征263心肌梗死的进程中筛选出2 8 种特征代谢物，在心肌梗死到心力衰竭的进程中筛选出32 种特征代谢物。上述代谢物的具体信息列于表2。2.3代谢通路分析代谢通路分析结果表明，在心绞痛到心肌梗死的进程中,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成代谢,苯丙氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢，三羧酸循环代谢发生了显著改变，示于图3a；在心肌梗死到心力衰竭的进程中，精氨酸的生物合成，甘油磷脂代谢，脂肪酸生物合成，三羧酸循环发生了显著改变，示于图3b。在心绞痛向心肌梗死的进程中，苯丙氨酸和谷氨酰胺含量显著升高。苯丙氨酸是一种必HighbaMIoAngina505-10-505Component 1(17.3%)C20100Permutation test statistics15d1050-5-105-10-50Component 1(13.1%)MIAnginaHMDB0036195HMDB0000715IIMDB0059805HMDB0030637HMDB0000206HMDB0000641HMDB0013624HMDB0010395IIMDB0000159HMDB0000192HMDB0011517(SnI)HMDB0000267HMDB0002107HMDB0010397(Sn2)IIMDB0000567HMDB0000452HMDB0000094HMDB0000182HMDB0000220HMDB0000277IIMDB0011635HMDB0000134HMDB0036565HMDB0000168HMDB0000484HMDB0000187ObservedIIMDB0000177statisticHMDB0033971HMDB0010382P0.01(0/100)HMDB00006870.800.90MIHF5Low1.52.01.00VIPscoreseHMDB0030637HMDBOO11517(Sml)HMDB0036195HMDB0000484HMDB0011526(Sm)HMDB0000220HMDB0011526(Sm2)HMDB0000206HMDB0010395HMDB0000277BOC1503B00621700800094HMDI(SnlHIMD2.57（SMIHFHighLow25f155Permutation test statistics图2 心绞痛与心肌梗死患者的PLS-DA投影图(a)、VIP值(b)以及置换检验直方图(c)，心肌梗死与心力衰竭患者的PLS-DA投影图(d)、VI P值(e)以及置换检验直方图(f)Fig.2 PLS-DA scores plot(a),VIP scores(b)and permutation test histogram(c)of angina and MI,PLS-DA scores plot(d),VIP scores(e)and permutation test histogram(f)of MI and HF0806ObservedstatisticP0.01(0/100)0.800.9040891V00824HMDB0000204HMDB0000904HMDB0010397(SnI)1.001.01.5VIPscores2.02.5264图3心绞痛与心肌梗死(a)、心肌梗死与心力衰竭(b)组别血浆内源性代谢物的代谢通路分析结果Fig.3Metabolic pathway analysis results of plasma endogenous metabolites需氨基酸，是酪氨酸的前体2 2 。Murr等2 3 研究表明，心肌梗死患者血液中苯丙氨酸和酪氨酸水平变化可能与免疫激活和炎症反应有关。心肌梗死引起的心肌组织坏死会导致肌钙蛋白I进入血液循环2 4。谷氨酰胺可通过向心肌细胞提供细胞内能量供应来减少缺血引起的肌钙蛋白I的损失，谷氨酰胺还可以提高心肌三磷酸腺苷/二磷酸腺苷比值，降低心肌乳酸积累2 5，从而减少缺血期间的心肌损伤。此外，犬尿酸的含量显著升高，其是色氨酸分解代谢为犬尿氨酸途径中的代谢产物，犬尿氨酸通过激活心肌缺血损伤后的Sirt3-acSOD2/IL-1途径来诱导巨噬细胞炎症和氧化应激，从而加快心肌梗死的进程2 6 。心肌梗死的发病机制与心肌细胞凋亡和纤维化、炎症细胞浸润等多种因素有关2 7-2 8 ，同时还会诱导坏死组织释放和水解蛋白质，因此，在心肌梗死发生前、后观察到氨基酸代谢差异2 9。在心肌梗死到心力衰竭的过程中，瓜氨酸含量升高，其是精氨酸的天然前体30，精氨酸在细胞质中通过一氧化氮合酶（NOS)代谢为一氧化氮(NO)和瓜氨酸。NO是一种重要的活性氧自由基，低水平的NO可能导致动脉粥样硬化和心力衰竭。精氨酸可以通过恢复NO合成和减少产生与NO相互作用的活性氧来预防心血管功能障碍31。甘油磷酸胆碱和LPC(20：4)的含量呈上调趋势，甘油磷脂参与膜蛋白的分泌和代谢，以及内质网、线粒体的功能等32 ，其代谢紊乱会引起内质网应激、胰岛素抵质谱学报第45卷2.5aAlanine,aspartate andglutamate metabolism43Citratecycle(ICAcycle)2Phenylalanime metabolism180.00.10.2 0.3 0.4 0.5Pathway impactin angina and MI(a),MI and HF(b)groupsb2.0(d)030-1.5Fallyacid biosynthesisPhenylalanine,tyrosine andtryptophan biosynthesisArgininebiosynthesisGlycerophospholipidmetabolism21.0Citratccycle(TCAcycle)40.50.000.050.100.150.20Pathway impact抗、血脂异常等代谢异常3-34。内质网应激会诱导 GRP78促使 IRE1-XBP1、CH O P、Ca s p a s e-12等通路活化35，最终导致心肌肥大凋亡而发生心力衰竭；胰岛素抵抗可引起心肌能量代谢能力降低和底物代谢乱、钙信号通路异常、心肌细胞-内皮细胞NO信号通路受损，导致心力衰竭的发生发展36 。此外,棕榈酸和硬脂酸的含量发生显著变化，脂肪酸的生物合成原料为乙酰CoA,是人体能源物质代谢的重要中间代谢产物，脂肪酸生物合成代谢紊乱会影响糖酵解、三羧酸循环等能量代谢37 。本研究中，脂肪酸的生物合成紊乱导致心力衰竭患者血浆脂肪酸总量上升，心脏中脂质的过度积累会导致细胞调亡、心脏肥大和心功能障碍，从而导致心力衰竭38 。在心绞痛到心肌梗死和心肌梗死到心力衰竭的疾病进程中，柠檬酸和富马酸的含量均发生显著变化，三羧酸循环代谢紊乱。研究表明39-40 1,三羧酸循环的中间代谢物与心肌梗死、心力衰竭的患病率有关。在发生心肌缺血和心脏损伤时，缺氧会导致三羧酸循环紊乱，减少ATP的产生,使中间代谢物在细胞内积累41三羧酸循环是主要的供能代谢途径，是葡萄糖和脂质代谢的最终途径，当其发生异常代谢时，将造成心肌细胞能量不足，导致心力衰竭。有研究表明42 ，缺血后左冠状动脉中琥珀酸盐、富马酸盐、苹果酸盐、柠檬酸盐和乳酸的水平显著升高，与心肌梗死的发生显著相关。结合临床生化指标和筛选出的特征代谢物第2 期进行ROC分析。结果表明，在心绞痛和心肌梗死之间，糖胆酸、富马酸和棕榈酸对心肌梗死具有诊断意义（P0.05）,A U C 值分别为0.7 37 6、0.8319、0.8 2 7 7,示于图4a；临床指标中肌钙蛋白、谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、AST：A LT、H D L-C 对心肌梗死具有诊断意义（P 0.0 5），A U C 值分别为0.9 38 7、0.7 0 45、0.7589、0.7 36 30.6 46 0,示于图4b；将这些指标进行联合诊断分析后，AUC值提升至1.0 0 0 0，示于图4c。在心肌梗死和心力衰竭之间，32 种代谢物中的瓜氨酸、柠檬酸、硬脂酸和甘油磷酸100a806040200020Specificity/%100d80604020OF02004060080100Specificity/%注：a,b,c.心绞痛与心肌梗死的ROC分析结果；d,e,f.心肌梗死与心力衰竭的ROC分析结果图4联合临床生化指标和特征代谢物的ROC分析结果Fig.4 ROC analysis results of clinical biochemical indicators combined characteristic metabolites3结论本研究采用高灵敏度、高分辨率的UPLC-HRMS技术，基于代谢组学分析方法探究缺血性心脏病患者从心绞痛到心肌梗死、心肌梗死到心力衰竭过程的代谢紊乱特征。在定性定量97种血浆内源性代谢物的基础上,结合t检验、PCA、PLS-D A、变量重要性投影等方法，分别筛选出2 8 和32 种可区分心绞痛与心肌梗死患者，心肌梗死与心力衰竭患者的差异性特征代谢物。代谢通路分析结果表明，从心绞痛到心肌梗死，以及心肌梗死到心力衰竭的疾病进程中，氨基酸代谢和三羧酸循环等能量代谢均杨柱林等：基于血液代谢组学分析缺血性心脏病患者疾病进程的代谢紊乱特征预提供重要的生物学靶点。100100b8060PalmiticacidAUC:0.827720FumaricacidAUC:0.8319GlycocholicacidAUC:0.73764060T80100GlycerophosphocholineAUC:0.6360StearicacidAUC:0.8784CitricacidAUC:0.7487CitrllineAUC:0.6194265胆碱对心力衰竭具有诊断意义（P0.05），A U C值分别为0.6 19 4、0.7 48 7、0.8 7 8 4、0.6 36 0,示于图4d;临床指标中NT-proBNP对心力衰竭具有诊断意义（P0.05），A U C 值为0.8 12 1，示于图4e；将这些指标进行联合诊断分析后，AUC值提升至0.9 57 0，示于图4f，诊断的灵敏度和特异度均得到提升。临床生化指标与特征代谢物的结合可提高心肌梗死和心力衰竭诊断的准确性，对缺血性心脏病的精准诊断具有重要意义，也可为相关疾病的精准干C8060HDL-CAUC:0.646040AST:ALTAUC:0.7363ALTAUC:0.7589ASTAUC:0.70450cTnTAUC:0.9387020406080100Specificity/%100e80604020日T0F020406080100Specificity/%发生紊乱；从心肌梗死到心力衰竭的疾病进程中,以甘油磷脂代谢和脂肪酸生物合成为代表的脂质代谢紊乱显著。ROC分析结果表明，在心绞痛到心肌梗死过程中，糖胆酸、富马酸、棕榈酸、肌钙蛋白、高密度脂蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶对心肌梗死具有诊断意义，AUC值分别为0.7 37 6、0.8 319、0.8 2 7 7、0.9 38 7、0.6 46 0、0.7045、0.7 58 9,联合指标的AUC值为1.0 0 0 0；在心肌梗死到心力衰竭过程中，瓜氨酸、柠檬酸、硬脂酸、甘油磷酸胆碱、NT-proBNP对心力衰竭具有诊断意义，AUC值分别为0.6 194、0.7 48 7、0.8784、0.6 3 6 0、0.8 12 1，联合指标的AUC20F020406080100Specificity/%10080604020FNT-proBNPAUC:0.8121OF020406080100Specificity/%Combined variableAUC:1.0000CombinedvariableAUC:0.9570T266值为0.957 0。本研究可为缺血性心脏病患者的精准诊断和疾病发展过程中的药物、营养干预提供重要的代谢靶标。参考文献：1HARTLEY A,MARSHALL D C,SALCICCI-OLI J D,SIKKEL M B,MARUTHAPPU M,SHALHOUB J.Trends in mortality from ische-mic heart disease and cerebrovascular disease inEurope:1980 to 2009J.Circulation,2016,133(20)：19 16-19 2 6.2SACCARO L F,AIMO A,EMDIN 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