基于网络药理学及分子对接探讨当归补血汤治疗动脉粥样硬化的机制.pdf

本文引用:王 晨,朱爱松.基于网络药理学及分子对接探讨当归补血汤治疗动脉粥样硬化的机制J.中国动脉硬化杂志,2023,31(9):754-761,778.DOI:10.20039/ki.1007-3949.2023.09.003.收稿日期 2023-05-13修回日期 2023-08-09基金项目 国家自然科学基金面上项目(81874417)作者简介 王晨,博士研究生,研究方向为中医基础理论,E-mail:wangchen315318 。通信作者朱爱松,博士,教授,博士研究生导师,研究方向为中医基础理论,E-mail:liaoningzhongyi 。实验研究文章编号 1007-3949(2023)31-09-0754-09基于网络药理学及分子对接探讨当归补血汤治疗动脉粥样硬化的机制王 晨1,朱爱松1,2(1.辽宁中医药大学,辽宁省沈阳市 110847;2.浙江中医药大学,浙江省杭州市 310053)摘 要 目的 利用网络药理学及分子对接技术探讨当归补血汤治疗动脉粥样硬化(As)的作用机制。方法 借助 TCMSP 数据库获得当归补血汤的活性成分,使用 Swiss Target Prediction 平台预测其潜在作用靶点。应用 GeneCards 及 DisGeNET 数据库筛选 As 靶点,并将活性成分预测靶点与疾病靶点取交集获得关键交集靶点。采用 STRING 平台构建交集靶点 PPI 互作网络,Cytoscape 软件网络拓扑分析筛选潜在关键靶点。再次使用 Cytoscape软件构建药物-成分-靶点,并找到核心活性成分。通过 Metascape 数据库进行 GO 功能富集分析和 KEGG 通路富集分析,最后通过分子对接,进一步明确其发挥治疗效用的成分与靶点作用机制。结果 筛选当归补血汤活性成分共 19 个,预测靶点 204 个,疾病靶点 5 213 个,筛选得到治疗 As 的交集靶点 176 个,排名前 5 位的核心靶点为Akt1、JUN、TP53、TNF、IL-6。GO 和 KEGG 富集分析主要指向氧化应激反应、转录调节复合物等功能,参与的信号转导主要包括 FoxO 信号通路、JAK-STAT 信号通路、IL-17 信号通路等。分子对接结果显示 5 个活性成分及 5 个重要核心靶点对接结合能均小于-5 kJ/mol,提示其受体蛋白与配体小分子之间结合稳定,数值越低,结合稳定性越高,且结合能排名前 5 位的包含 谷固醇与槲皮素两种活性成分,其中活性成分 谷固醇与 TNF 结合能最低,为-10.52 kJ/mol,说明 谷固醇与槲皮素两种中药有效成分可能在治疗动脉粥样硬化性疾病中起重要作用。结论 当归补血汤中槲皮素、谷固醇等核心活性成分可能通过作用于 Akt1、JUN、TP53、TNF、IL-6 等核心靶点,调节炎症反应、脂质代谢和其他相关通路,从而发挥治疗 As 的作用。关键词 网络药理学;分子对接;当归补血汤;动脉粥样硬化中图分类号 R5文献标识码 AMechanism of Danggui Buxuetang in treating atherosclerosis based on network phar-macology and molecular dockingWANG Chen1,ZHU Aisong1,2(1.Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Shenyang,Liaoning 110847,China;2.Zhejiang Chinese MedicalUniversity,Hangzhou,Zhejiang 310053,China)ABSTRACT Aim To investigate the mechanism of Danggui Buxuetang in treating atherosclerosis(As)by usingnetwork pharmacology and molecular docking technology.Methods The active ingredients of Danggui Buxuetang wereobtained with the help of TCMSP database,and their potential targets were predicted using the Swiss Target Prediction plat-form.GeneCards and DisGeNET databases were used to screen As targets,and the intersection of active ingredient pre-diction targets and disease targets was used to obtain key intersection targets.The STRING platform was used to constructthe intersection target PPI interaction network,and the Cytoscape software network topology analysis screened potential keytargets.Cytoscape software was used to construct drug-ingredient-target and find the core active ingredient.GO functionenrichment analysis and KEGG pathway enrichment analysis were carried out through the Metascape database,and finally,through molecular docking,the components and target mechanism of its therapeutic effect were further clarified.Re-sults A total of 19 active ingredients of Danggui Buxue tang were screened,204 predicted targets,5 213 disease targets,457ISSN 1007-3949 Chin J Arterioscler,Vol.31,No.9,2023and 176 intersection targets for the treatment of As were screened.The top five core targets were Akt1,JUN,TP53,TNF,IL-6.GO and KEGG enrichment analysis mainly pointed to functions such as oxidative stress response and tran-scriptional regulatory complex,and the signal transduction involved mainly included FoxO signaling pathway,JAK-STATsignaling pathway and IL-17 signaling pathway,etc.Molecular docking results showed that the docking binding energiesof the five active ingredients and five important core targets were all less than-5 kJ/mol,suggesting that the binding be-tween the receptor protein and the ligand small molecule was stable,and the lower the value,the higher the binding stabili-ty,and the top five active ingredients in terms of binding energy included-sitosterol and quercetin,among which the ac-tive ingredient-sitosterol had the lowest binding energy to TNF,which was-10.52 kJ/mol,indicating that-sitosterolalcohol and quercetin,two active ingredients of traditional Chinese medicine,may play an important role in the treatment ofatherosclerotic diseases.Conclusion The core active ingredients such as quercetin and-sitosterol in Danggui Buxu-etang may regulate inflammatory response,lipid metabolism and other related pathways by acting on core targets such asAkt1,JUN,TP53,TNF and IL-6,thereby exerting role in the treatment of atherosclerosis.KEY WORDS network pharmacology;molecular docking;Danggui Buxuetang;atherosclerosis 随着当今社会经济文化的快速发展,人口老龄化增长迅速,据 中国心血管健康与疾病报告20221统计指出,心血管疾病已逐年成为我国严重危害人类健康的疾病之一。其中,动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)更是作为心血管疾病的病理学基础被广泛研究。当归补血汤源自金元四家之“补土派”李杲的内外伤辨惑论,重用黄芪以补脾肺之气,以滋养生血之源,同时气为血帅,配以当归以补血活血之功效。据研究表明,当归补血汤治疗 As的效果显著2-4,其中黄芪具有抗肿瘤、扩张心血管、抗炎、提高机体免疫力的作用5,当归主要有抗炎、抗肿瘤、提高免疫功能、调节心血管等作用6,但当归补血汤抗 As 的药理学作用机制尚未阐明。因此,本研究借助网络药理学及分子对接的方法综合分析其治疗 As 的活性成分、作用核心靶点及分子对接机制,为临床治疗及进一步的科学研究提供参考和依据。1 资料和方法1.1 筛选当归补血汤潜在有效活性成分将当归补血汤中的“黄芪”、“当归”作为关键词在 TCMSP 数据库中进行检索,根据 ADME 参数类药性(drug like,DL)0.18 及口服生物利用度(bio-availability,OB)30%筛选有效活性成分。1.2 活性成分靶点的预测PubChem 数据库(https:/pubchem.ncbi.nlm.nih.gov)得到当归补血汤的有效活性成分分子结构以“Canonical SMILES”格式导入到 Swiss Target Pre-diction 数据库(http:/www.swisstargetprediction.ch),查询预测其活性成分靶点,对预测靶点的可靠性进行筛选,筛选条件 Probability 0.1,并删除重复靶点。1.3 获取动脉粥样硬化性疾病相关靶点在 GeneCards(https:/www.genecards.org)及DisGeNET(https:/www.disgenet.org)平台疾病数据库以“atherosclerosis”为关键词进行检索得到 As靶点基因,删除重复靶点基因。1.4 构建蛋白互作网络将当归补血汤中的潜在靶点与 As 相关疾病靶点基因进行一一映射,采用韦恩 2.1 软件(https:/b.csic.es/tools/venny/)进行韦恩图绘制获取潜在交集靶点。并将交集得到的靶点基因录入 STRING 数据库平台(https:/string-db.org/Version11.5),生物种类选择“Homo Sapiens”作为分析对象,置信度得分设置为得分0.7,之后构建蛋白互作网络(protein-protein interaction,PPI)关系,以Cytoscape 3.9.1 软件对其进行网络可视化并通过Tools-analyze network 插件功能进行 PPI 拓扑结构分析,并以“度值(Degree)”及“紧密度(closeness cen-trality,CC)值”作为筛选条件,选取当归补血汤治疗As 的排名前 5 的作为关键作用靶点。1.5 中药-成分-交集靶点网络构建将筛选得到的当归补血汤的药物有效活性成分及交集靶点导入到 Cytoscape 软件中构建可视化药物-成 分-靶 点 网 络 关 系,并 再 次 使 用 Analyzenetwork 插件对网络进行分析,根据 Degree 及 CC值,筛选得到当归补血汤排名前 5 的治疗动脉粥样硬化性疾病的关键成分。1.6 分子对接分子对接技术是通过计算机模拟预测配体与受体之间蛋白结构亲和力程度的操作过程,从而模拟判断主要药效成分及其对应的核心靶点。将筛选得到的 5 个核心靶点基因分别导入 Uniprot(ht-557CN 43-1262/R 中国动脉硬化杂志 2023 年第 31 卷第 9 期tps:/www.uniprot.org)及 PDB 数据库(https:/www.rcsb.org),基于文献研究筛选获取分辨率较高的受体蛋白 3D 结构,并保存为“PDB”格式文件。另将筛选得到的核心成分,利用 Pubchem 数据库制备以“mol2”为格式的配体小分子文件。将已下载好的受体蛋白结构分别导入到 PyMOL 及 AutoDock-Tools 软件,对其进行去水、溶剂分子及加氢处理,并导出以“pdbqt”格式设置为分子对接受体。然后将“mol2”格式配体输入 AutoDockTools 软件,经过扭转加氢(torsion hydrogenation)处理后以“pdbqt”格式输出为配体小分子。最后,根据所选点位设置对接盒子,应用 Autogrid 及 AutoDock 软件进行分子对接并计算结合能,依据结合能大小评估对接结果并验证网络药理学,使用 Pymol 软件对对接结果进行可视化。1.7 GO 生物功能及 KEGG 通路富集分析采用 Metascape 数据库(https:/metascape.org)对上述得到的交集基因进行 GO 功能与 KEGG 信号通路的富集分析,分别从生物过程(biological process,BP)、细胞成分(cellular component,CC)、分子功能(molecular function,MF)及信号通路方面进行系统分析,并使用微生信平台(https:/ 结 果2.1 当归补血汤活性成分及靶点预测利用 TCMSP 数据库收集整理当归有效成分 2个,黄芪有效成分 17 个(图 1),预测潜在靶点 204个(去重复靶点)。图 1.当归(DG)、黄芪(HQ)药物-成分-靶点网络图粉色圆形代表当归、黄芪,黄色三角形及蓝色正方形代表有效成分,菱形代表潜在靶点。Figure 1.Drug-component-target network diagram of Danggui and Huangqi2.2当归补血汤治疗动脉粥样硬化性疾病潜在靶点利用 GeneCards 及 DisGeNET 数据库分别获得靶点 4 739 个、2 044 个,去重后共得到5 213 个疾病靶点。2.3 PPI 互作网络构建及关键靶点筛选利用 Venny 2.1 将药物成分预测靶点与动脉粥样硬化性疾病靶点取交集,获得交集靶点 176 个,即治疗 As 的关键靶点(图 2)。将交集靶点录入STRING 平台得到网络图(图 3),该网络相互作用靶点 176 个节点,平均节点度为 13.2,平均聚类系数为 0.503,蛋白互作富集 P1.0E-16。并把蛋白互作数据导入 Cytoscape 3.9.1 进行网络拓扑参数分析,根据 Degree 及 CC 值排名前 5 名的基因分别是Akt1、JUN、TP53、TNF、IL-6(图 4)。图 2.当归补血汤与 As 的交集靶点Figure 2.Intersection targets of DangguiBuxuetang and As657ISSN 1007-3949 Chin J Arterioscler,Vol.31,No.9,2023图 3.当归补血汤治疗 As 的关键蛋白靶点互作网络图Figure 3.Diagram of antiatherogenic protein-proteininteraction network of Danggui Buxuetang图 4.当归补血汤与 As 的交集靶点可视化图圆形为不同靶点,节点大小及颜色由红色至蓝色随 Degree 及 CC 值由高至低排序。Figure 4.Visualization of intersection targets ofDanggui Buxuetang and As2.4 当归补血汤中药-成分-交集靶点网络分析通过网络拓扑分析构建当归补血汤-有效成分-交集靶点,根据 Degree 及 CC 值筛选得到同时满足上述条件的有效活性成分排名前 5 位的分别是槲皮素(quercetin)、山奈酚(kaempferol)、7-O-甲基异木糖醇(7-O-methylisomucronulatol)、谷固醇(-sitos-terol)、芒柄花黄素(formononetin),是当归补血汤治疗 As 的关键成分。2.5 核心靶点与药物核心成分对接结果选择蛋白互作网络中根据 Degree 及 CC 值排名前 5 的核心靶点 Akt1、JUN、TP53、TNF、IL-6,参考文献内容并在 PDB 数据库依次检索并下载受体蛋白结构 ID:4GV1、6Y3V、7DHZ、2E7A、1ALU。与其对应的配体小分子选取网络拓扑分析排名前 5 的活性成分,分别是槲皮素、山奈酚、7-O-甲基异木糖醇、谷固醇、芒柄花黄素。分别依次进行受体与配体间的分子对接并对其结果进行可视化处理。分子对接结合能结果小于-5 kJ/mol,说明配体与受体之间结合程度稳定,结合能值越低,说明结合程度越高。其中 谷固醇与 TNF 受体蛋白 2E7A 结合能最低,为-10.52 kJ/mol,且以下 25 组对接结合能均小于-5 kJ/mol(表 1),因此可以推测 谷固醇、槲皮素等活性成分可能是当归补血汤治疗 As 的主要活性成分,Akt1、JUN、TP53、TNF、IL-6 可能是当归补血汤治疗 As 的关键靶点(图 5)。表 1.分子对接结果Table 1.Molecular docking results序号药物成分ID 号药物成分靶点受体UniprotID 号靶点名称PDB(ID)结合能/(kcal/mol)1MOL000358 谷固醇P01375TNF2E7A-10.522MOL000358 谷固醇P05231IL-61ALU-8.573MOL000358 谷固醇P31749 AKT1 4GV1-8.574MOL000358 谷固醇P04637 TP53 7DHZ-8.355MOL000098槲皮素P31749 AKT1 4GV1-7.596MOL000392芒柄花黄素P31749 AKT1 4GV1-7.577MOL000378 7-O-甲基异木糖醇 P31749 AKT1 4GV1-7.248MOL000378 7-O-甲基异木糖醇 P01375TNF2E7A-7.229MOL000392芒柄花黄素P01375TNF2E7A-7.1410MOL000392芒柄花黄素P04637 TP53 7DHZ-7.0811MOL000422山奈酚P04637 TP53 7DHZ-7.0812MOL000422山奈酚P01375TNF2E7A-7.0613MOL000098槲皮素P01375TNF2E7A-6.9714MOL000422山奈酚P31749 AKT1 4GV1-6.7415MOL000358 谷固醇P05412JUN6Y3V-6.6916MOL000098槲皮素P04637 TP53 7DHZ-6.5517MOL000392芒柄花黄素P05231IL61ALU-6.418MOL000378 7-O-甲基异木糖醇 P05231IL61ALU-6.2619MOL000422山奈酚P05231IL61ALU-6.2620MOL000392芒柄花黄素P05412JUN6Y3V-6.2421MOL000098槲皮素P05231IL61ALU-6.222MOL000422山奈酚P05412JUN6Y3V-6.123MOL000378 7-O-甲基异木糖醇 P05412JUN6Y3V-5.8524MOL000378 7-O-甲基异木糖醇 P04637 TP53 7DHZ-5.825MOL000098槲皮素P05412JUN6Y3V-5.71757CN 43-1262/R 中国动脉硬化杂志 2023 年第 31 卷第 9 期图 5.分子对接模式图A、B 为 谷固醇_IL-6 分子对接;C、D 为 谷固醇_TNF 分子对接;E、F 为 谷固醇_Akt1 分子对接;G、H 为 谷固醇_TP53 分子对接;I、J 为槲皮素_Akt1 分子对接。Figure 5.Map of docking patterns2.6 GO 生物功能与 KEGG 通路富集分析将交集靶点上传 Metascape 数据库进行 GO 功能分析,得到 BP、CC、MF 三组结果,将这 3 组数据以 P0.05 的条件分别进行筛选,各取前 15 个条目,并将组成的 45 个条目在“微生信”平台中进行可视化。富集结果显示当归补血汤治疗 As 主要涉及以下方面。BP 前 10 名分别是:对无机物质的反应、对活性氧的反应、氧化应激反应、细胞对化学应激的反应、细胞对活性氧的反应、细胞对外源性刺激的反应、对激素的反应等。CC 前 10 名分别是:薄膜筏、转录调节复合物、RNA 聚合酶转录调节复合物、质膜信号受体复合物、跨膜转运蛋白复合体、离子通道复合体等。MF 前 10 名包括:DNA 结合转录因子结合、RNA 聚合酶特异性 DNA 结合转录因子结合、核受体活性、转录协同调节因子结合、DNA 结合转录激活剂活性、RNA 聚合酶特异性、细胞因子受体结合、信号受体调节器活性、信号受体激活剂活性等。857ISSN 1007-3949 Chin J Arterioscler,Vol.31,No.9,2023交集靶点载入 Metascape 数据库进行 KEGG 富集分析,得到相关性最高的前 45 条信号通路(P0.05),富集通路结果以 P 值从小到大为序排列。结果包括癌症通路、脂质与动脉粥样硬化、AGE-RAGE 信号通路在糖尿病并发症中的作用、流体剪切应力和动脉粥样硬化、化学致癌作用-受体激活、乙型肝炎、卡波西肉瘤相关疱疹病毒感染、IL-17 信号通路、前列腺癌、人类巨细胞病毒感染、肿瘤坏死因子信号通路、PI3K/Akt 信号通路等,说明交集靶点主要参与炎症反应、经典脂质代谢和 PI3K/Akt 通路对改善动脉粥样硬化的调节(图 6)。图 6.GO 与 KEGG 富集分析左图为 GO 生物过程分析结果,从上至下依次为 BP、CC、MF 结果,x 轴代表被 GO 富集相关基因数目,y 轴代表着 GO 的功能。右图代表 KEGG 通路富集结果,x 轴表示被 KEGG 富集基因的数目,y 轴表示 KEGG 的功能。图中圆圈面积大小表示靶点数量,渐变色从绿到红表示矫正后的 P 值,P0.05 作为显著富集阈值。偏绿说明富集程度低,偏红则富集程度越高。Figure 6.GO and KEGG enrichment analysis3 讨 论As 是一种发生于血管内壁的慢性炎症性病理变化,以内皮细胞受损、脂质类沉积及免疫细胞浸润为特征的病理演变过程7。本研究通过网络药理学分析结果可知,当归补血汤中含有多种活性成分,Degree 排名前 5 名的分别是槲皮素、山奈酚、7-O-甲基异木糖醇、谷固醇、芒柄花黄素。其中,槲皮素作为一种黄酮类化合物其来源广泛,据相关实验研究表明8-10,槲皮素对动脉粥样硬化性疾病的发生发展具有抑制作用,包括降低斑块形成和抗炎、修复血管内皮细胞等功能11-12。山奈酚通过抗炎、抑制过氧化及调节血管紧张度来改善 As13-14。据报道,含有 谷固醇的中药 可 以 有 效 降 低 载 脂 蛋 白 E 基 因 敲 除(apolipoprotein E knocked-out,ApoE-/-)小鼠总胆固醇的血浆浓度15,同时缓解脂质代谢及炎症反应,并提高抗氧化能力16。另外,在研究芒柄花黄素治957CN 43-1262/R 中国动脉硬化杂志 2023 年第 31 卷第 9 期疗 As 的实验17中发现,芒柄花黄素在一定程度上抑制炎性病变、介导降低氧化应激与凋亡,有效改善和延缓 As 的发生发展进程。通过以上研究证实,当归补血汤中多种活性成分如槲皮素等在一定程度上可以治疗 As。当归补血汤与 As 二者共同靶点有176 个,蛋白互作网络分析主要包括 Akt1、JUN、TP53、TNF、IL-6等5 个潜在重要核心靶点基因。首先,Akt1 是 PI3K通路中重要的下游效应蛋白,参与调节内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)及一氧化氮(nitric oxide,NO)生成18,具有稳定 As 斑块的作用,同时它也具有不同的亚型,分别通过调控炎性反应和凋亡等作用机制预防和治疗 As19。其次 TNF、IL-6 为促炎细胞因子,IL-6 也是上游调节因子,在介导下游炎症反应中发挥核心作用20,TNF 是通过介导肿瘤坏死因子/核因子 B(tumornecrosis factor-,TNF-/nuclear factor B,NF-B)信号通路形成炎症反应,影响 As 的病理发展过程21,故有效抑制 IL6、TNF-的表达,可能会减缓 As 的形成。另外,TP53 调节巨噬细胞的脂质代谢以参与As 发生,Guevara 等22研究证实缺乏 TP53 与 As 病变、脂蛋白的大小负相关,通过抑制 TP53 的表达可有效改善 As。c-Jun 氨基末端激酶也同时在心血管调控及炎症反应中起到关键作用,在 Ji 等23的实验研究中发现敲除 ApoE-/-小鼠的 TRIM7 基因有效抑制了血管平滑肌细胞的增殖和迁移,并干扰 c-Jun/AP-1 炎症信号通路,从而缓解 As 病变。基于上述结果发现核心靶点主要涉及在炎症反应、细胞增殖分化、凋亡等方面,也体现了当归补血汤治疗 As 的多靶点、多途径协同的优势。分子对接结果显示 5 个活性成分及 5 个重要核心靶点对接结合能均小于-5 kJ/mol,提示其受体蛋白与配体小分子之间结合稳定,数值越低,结合稳定性越高,说明其相互作用力越强24,其中活性成分 谷固醇与 TNF 结合能最低,为-10.52 kJ/mol,次之分别与 IL-6 及 Akt1,排在结合能前 5 位的 谷固醇占前4 位,槲皮素在第5 位,说明 谷固醇与槲皮素两种中药有效成分在治疗动脉粥样硬化性疾病中起重要主导作用。另外,Akt1 在分子对接排名前 5 位中占 2 位,说明其核心靶点的重要性,同时Akt 又是 PI3K/Akt 炎症通路中重要的下游蛋白,为后续炎性通路研究治疗 As 提供思路。从 GO 功能富集结果分析显示核心靶点主要参与的生物过程包括对活性氧的反应、氧化应激反应、细胞对化学应激的反应、细胞对活性氧的反应等,细胞组成主要包括转录调节复合物、RNA 聚合酶转录调节复合物等,分子过程包括 DNA 结合转录因子结合、核受体活性、转录协同调节因子结合等。KEGG 富集通路分析发现,当归补血汤治疗 As主要作用通路包括癌症通路、FoxO 信号通路、JAK-STAT 信号通路、脂质代谢、IL-17 信号通路、TNF 信号通路、PI3K/Akt、细胞凋亡、Toll 样受体信号通路、NF-B 信号通路等。FoxO 家族,其中包括 FoxO4,可以调节内皮细胞稳态25。据文献研究报道,FoxO4 可通过影响血管平滑肌、骨髓来源细胞或NF-B 激活的炎性细胞因子的表达来调节 As。实验结果也证实 FoxO4 通过影响内皮细胞功能以促进 As 的进展26。JAK/STAT 信号通路从血管平滑肌细胞增殖及迁移、炎症细胞浸润等诸多方面介导As 形成27。此外,富集得到的脂质与动脉粥样硬化信号通路也验证了重要核心靶点可能通过脂质代谢影响动脉粥样硬化性疾病的发生发展过程。IL-17 信号通路当中的 IL-17A 在炎症部位介导巨噬细胞,促使斑块的形成与破裂,这可能是炎症的双重机制28。临床试验也表明,与其他炎症因子比较,IL-17A 与斑块的产生和心血管疾病的关系更加紧密29-30。另外,董国华等31实验研究表明 mi-croRNA-21 抑 制 剂(antagomiR-21)可 借 助 上 调SIRT1 基因表达并激活 PI3K/Akt/eNOS 通路,从而改善大鼠冠状动脉内皮的舒张性。TNF 信号通路、NF-B 信号通路均是经典的炎症信号通路,伏江龙等32的实验研究表明抑制 NF-B 通路具有调节其脂质代谢、抑制炎症发生、减少细胞增殖与迁移等作用。综上所述,本研究借助网络药理学及分子对接分析当归补血汤治疗 As 的潜在核心靶点,发现其主要活性成分为槲皮素及 谷固醇等,潜在核心靶点是 Akt1、JUN、TP53、TNF、IL-6,并包括 JAK-STAT、PI3K/Akt 信号通路、脂质代谢、IL-17 信号通路,体现了其通过多成分、多靶点、多通路协同机制,对治疗 As 做出了整体性预测,为当归补血汤的作用机制提供依据和参考方向。但本研究尚存在局限性,如仅通过相关生物信息技术解释其机制,未考虑用药的君臣佐使、药物配比以及煎煮方法的影响,因此,值得在后续研究中围绕上述问题进一步地深入开展动物实验及临床研究。参考文献1 马丽媛,王增武,樊 静,等.中国心血管健康与疾病报告2022要点解读J.中国全科医学,2023,26(32):3975-3994.067ISSN 1007-3949 Chin J Arterioscler,Vol.31,No.9,2023MA L Y,WANG Z W,FAN J,et al.Interpretation of report oncardiovascular health and diseases in China 2022 J.Chin GenPract,2023,26(32):3975-3994.2 陈 苑,黎宝留,许二巾,等.基于血流剪切力与炎性反应探讨当归补血汤治疗动脉粥样硬化的作用机制J.中药新药与临床药理,2022,33(6):786-793.CHEN Y,LI B L,XU E J,et al.Exploration on the mechanism ofDanggui Buxue Decoction in the treatment of atherosclerosis basedon fluid shear stress and inflammatory response J.Trad ChinDrug Res Clin Pharmacol,2022,33(6):786-793.3 李秋芳,王文恺,龚 曼,等.当归补血汤及其活性成分通过NLRP3/ASC/caspase-1 通路调控糖尿病大鼠动脉粥样硬化及网络药理学研究J.中成药,2022,44(6):1987-1992.LI Q F,WANG W K,GONG M,et al.Danggui Buxue decoctionand its active ingredients regulate atherosclerosis and network phar-macology in diabetic rats through NLRP3/ASC/caspase-1 pathwayJ.Chin Trad Patent Med,2022,44(6):1987-1992.4 许二巾.当归补血汤抗 ApoE 基因敲除小鼠动脉粥样硬化的作用及机制的研究D.广州:广州中医药大学,2019.XU E J.The study on the protective effect of Danggui Buxue Tang inApoE knockout mice atherosclerosis and its mechanismD.Guang-zhou:Guangzhou University of Chinese Medicine,2019.5 邵长鑫,林欢欢,靳晓杰,等.黄芪的炮制历史沿革及现代研究进展J.中草药,2023,54(15):5057-5074.SHAO C X,LIN H H,JIN X J,et al.Historical evolution andmodern research progress of Astragali Radix processing J.ChinTrad Herbal Drugs,2023,54(15):5057-5074.6 马 燕,张育贵,石露萍,等.当归炮制品及其化学成分和药理作用研究进展J/OL.中国中药杂志,2023:1-102023-07-19.https:/doi.org/10.19540/ki.cjcmm.20230717.301.MA Y,ZHANG Y G,SHI L P,et al.Research progress on pharmaco-logical effects of Angelica sinensis prepared products and their chemicalconstituents J.Chin J Chin Mater Med,2023:1-102023-07-19.https:/doi.org/10.19540/ki.cjcmm.20230717.301.7 POLLER W C,NAHRENDORF M,SWIRSKI F K.Hematopoiesis andcardiovascular disease J.Circ Res,2020,126(8):1061-1085.8 罗 纲,向 露,姚 平,等.槲皮素调控巨噬细胞胆固醇稳态改善载脂蛋白 E 敲除小鼠动脉粥样硬化J.中国药理学通报,2022,38(9):1395-1400.LUO G,XIANG L,YAO P,et al.Quercetin attenuates atheroscle-rosis in ApoE KO mice by regulating macrophage cholesterol homeo-stasisJ.Chin Pharmacol Bull,2022,38(9):1395-1400.9 ZHANG F W,FENG J,ZHANG J Y,et al.Quercetin modulatesAMPK/SIRT1/NF-B signaling to inhibit inflammatory/oxidativ