基于响应面法结合总评归一法优化泽泻趁鲜切制加工工艺.pdf

天然产物研究与开发NatProdResDev2023,35:1755-1765基于响应面法结合总评归一法优化泽泻趁鲜切制加工工艺林龙,先蕊，赵璐璐，王艺娱，兰志琼”，潘晓丽，李敏成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验室，成都6 11137摘要：基于响应面法结合总评归一法优选泽泻趁鲜切制加工工艺。以外观性状和加工能耗为评价指标,采用单因素实验筛选出影响泽泻趁鲜切制加工工艺因素的中心点。在单因素实验基础上，以醇溶性浸出物、总三、总多糖、23-乙酰泽泻醇B、2 3-乙酰泽泻醇C、2 4-乙酰泽泻醇A和泽泻醇B含量的总评归一值为评价指标，以水分含量（30%、40%、50%）、切片厚度（3、4、5mm）、干燥温度（40.50.6 0）为考察因素，根据响应面实验原理，设计三因素三水平响应面实验优化泽泻趁鲜切制加工工艺。最终获得泽泻趁鲜切制加工最佳工艺条件为水分含量40%，切片厚度4mm，干燥温度50。响应面法优选泽泻趁鲜切制加工工艺切实可行，具有较强的实际意义，优选的趁鲜切制加工工艺简便、稳定，为泽泻趁鲜切制加工生产提供了科学依据。关键词：泽泻；趁鲜切制;加工工艺；响应面法；总评归一法中图分类号：R283.3D0I:10.16333/j.1001-6880.2023.10.012Optimization of fresh cutting processing technology of AlismatisRhizoma by Box-Behnken response surface methodology文献标识码：Acombined with overall desirability文章编号：10 0 1-6 8 8 0(2 0 2 3)10-17 55-11LIN Long,XIAN Rui,ZHAO Lu-lu,WANG Yi-yu,LAN Zhi-qiong*,PAN Xiao-li,LI MinState Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources,School of Pharmacy,Chengdu University of Traditional Chinese Medicine,Chengdu 611137,ChinaAbstract:To optimize the fresh cutting processing technology for Alismatis Rhizoma by response surface methodology com-bined with the overall desirability.By considering the appearance character and processing energy consumption as the evalua-tion indicators,the center point affecting the processing factors of fresh cutting was selected after conducting the single factorexperiment.According to the experimental principles of the response surface,three factors and three horizontal response sur-face experiment based on the single factor experiment was designed to optimize the fresh cutting processing process by takingthe alcohol-soluble extract,total triterpenoids,total polysaccharides,alisol B 23-acetate,alisol C 23-acetate,alisol A 24-acetateand alisol B content,the overall desirability of this content as evaluation indicators,and taking the moisture content(30%,40%,50%),slice thickness(3,4,5 mm),and drying temperature(40,50,60 C)as investigation factors.Finally,the opti-mum fresh cutting processing technological conditions for Alismatis Rhizoma were obtained as follows:moisture content of40%,slice thickness of 4 mm,and drying temperature of 50.T h e f r e s h c u t t i n g p r o c e s s i n g t e c h n o l o g y s e l e c t e d i n t h i s s t u d ywas practicable and has a strong practical significance.The optimized fresh cutting processing technology is simple and sta-ble,which provides a scientific basis for the production and processing of fresh cutting.Key words:Alismatis Rhizoma;fresh cutting;processing technology;response surface methodology;overall desirability中药泽泻为泽泻科植物东方泽泻Alisma orien-收稿日期:2 0 2 3-0 2-17基金项目：四川省药品监督管理局中药（民族药）标准提升项目（510 2 0 12 0 2 10 2 30 5）；2 0 19年国家中医药管理局全国名老中医药专家传承工作室建设项目（国中医药人函201941号）；成都中医药大学“杏林学者”学科人才科研提升计划(XCZX2022006)*通信作者Tel:86-28-61800231;E-mail:接受日期:2 0 2 3-0 6-0 8tale（Sa m.）Ju z e p.或泽泻 Alisma plantago-aquaticaLinn.的干燥块茎,收载于中华人民共和国药典2020年版（以下简称中国药典），具有利水渗湿，泄热，化浊降脂的功效，主要用于小便不利,水肿胀满,泄泻尿少,痰饮眩晕,热淋涩痛,高脂血症等1。1756泽泻药材及饮片传统加工过程包括净制、干燥、除杂、反复干燥后加工为药材,然后经浸润,润透,切厚片,再干燥为饮片。整个过程须反复浸润、两次干燥,步骤繁琐,耗时费力,且多以人工传统经验为主，主观性强,机械化程度低，不易控制，不利于产业化发展。国家药监局综合司关于中药饮片生产企业采购产地加工（趁鲜切制）中药材有关问题的复函（药监综药管函2 0 2 1 36 7 号）中明确指出“趁鲜切制是产地加工的方式之一,将采收的新鲜中药材切制成片、段、块、瓣等,虽然改变了中药材形态，但未改变中药材性质，且减少了中药材经干燥、浸润、切制、再干燥的加工环节，一定程度上有利于保障中药材质量。可见,针对泽泻进行趁鲜切制加工工艺研究并进一步将其应用于工业化生产,高度符合中药产业高质量发展趋势，但目前尚未见相关研究报道。中药质量的影响因素众多,化学成分复杂,通过检测其中一两种活性成分不能够全面反映其质量及整体疗效2 。除现行中国药典收载的2 3-乙酰泽泻醇B(alisolB23-acetate,23-AB）及2 3-乙酰泽泻醇C（a lis o l C 2 3-a c e t a t e,2 3-A C）以外,2 4-乙酰泽泻醇A3（a l i s o l A 2 4-a c e t a t e,2 4-A A）、泽泻醇 B4（a l i s o lB,AB）泽泻多糖5 等也是中药泽泻重要的活性成分。故本研究在中国药典泽泻项下规定的性状、醇溶性浸出物（ASE）、2 3-A B和2 3-AC总含量等质量评价指标的基础上，首次将泽泻总三（AlismatisRhizoma triterpenoids，A RT）、泽泻总多糖（AlismatisRhizoma polysaccharides,ARP）2 4-A A、A B等含量也纳人考核指标，旨在更全面地反映泽泻药材的质量。因此,本文在前期明确泽泻加工工艺主要影响因素的基础上,通过单因素实验确定各因素参数范围,运用响应面法结合总评归一法6-10 进一步优化泽泻趁鲜切制加工工艺,并与其传统加工方法进行比较,以期获得一种更好的泽泻产地加工方法,为泽泻加工产业的规范化、规模化发展，提高泽泻相关产品质量提供参考依据。1材料与方法1.1材料泽泻药材商品按产地分建泽泻和川泽泻，目前川泽泻产销量占全国8 0%以上。故实验以川泽泻为研究对象。样品于2 0 2 2 年1月采自四川省眉山市彭山区谢家街道，经成都中医药大学药学院兰志琼副教授鉴定为泽泻科植物泽泻Alisma plantago-天然产物研究与开发aquatica Linn.的新鲜块茎。1.2仪器与试剂DHS-10A快速水分测定仪（邦西仪器科技上海有限公司）；SP-754P型紫外分光光度计（上海光谱仪器有限公司）；ThermoUltimate3000高效液相色谱仪（赛默飞世尔科技中国有限公司）。95%乙醇、冰醋酸、浓硫酸、高氯酸、苯酚、香草醛为分析纯；乙腈为色谱纯；对照品2 3-AB（批号：MUST-21030408，纯度98.0%）、2 3-AC（批号：MUST-21032311,纯度98.0%）、2 4-AA（批号：MUST-21052104,纯度98.0%）、AB（批号：MUST-21062305,纯度98.0%）、D-无水葡萄糖（批号：MUST-22030214,纯度98.0%）均购于成都曼斯特生物科技有限公司。1.3单因素实验课题组前期已基本确定水分含量、切片厚度、干燥温度为泽泻趁鲜切制加工工艺的主要影响因素。故采用控制变量法，在不改变其他条件下，分别考察不同水分含量（2 0%、30%、40%、50%、6 0%）、不同切片厚度（2.3、4、5、6 mm）、不同干燥温度（30、40、50.60.70)对趁鲜切制泽泻性状及能耗的影响，以确定后期工艺优化实验的考察范围。结果显示，当水分含量为6 0%时，切面有白色汁液渗出（见图1A）；水分含量为2 0%时，外表面较硬,不易切片，在切制过程易产生缺口、碎屑（见图1B）。切片厚度为2 mm时，极易产生翘片（见图1C);切片厚度为6 mm时,干燥后厚度 4 mm,不符合药典泽泻饮片（厚片）规定。干燥温度为30 时，干燥耗时长达7 2 h,能耗高,且极易因干燥不及时引起泽泻霉变甚至腐烂；干燥温度为7 0 时,泽泻切片表面快速失水，结构急剧收缩，极易导致翘片,切片颜色变深（见图1D）。故后期工艺优化实验考察范围分别为：水分含量30%50%，切片厚度3 5mm,干燥温度40 6 0。1.4响应面法优化加工工艺1.4.1实验设计基于单因素实验结果,以水分含量、切片厚度、干燥温度为考察因素，以ASE、A RT、A RP、2 3-A B、23-AC、2 4-A A、A B 的总评归一值（overall desirabili-ty,OD)为泽泻内在质量评价指标,进行三因素三水平响应面实验设计。因素水平设计见表1。每个实验组取5kg大小均匀的新鲜泽泻。Vol.35Vol.35林龙等：基于响应面法结合总评归一法优化泽泻趁鲜切制加工工艺A1757BCD图1单因素实验不合格条件样品图Fig.1 Sample plots of the unqualified conditions in the single factor experiment表1响应面实验设计的因素水平Table 1IFactors and levels of the response surfaceexperimental design因素 Factor水平X水分含量LevelMoisture content(%）-1300401501.4.2OD值计算方法采用Hassan 法1 对泽泻ASE、A RT、A RP、2 3-AB、2 3-A C、2 4-A A、A B含量进行归一化处理,按照公式(1）、(2)计算OD值。d;=(M,-Mmin)/(Mmax-Mmin)OD=(d+d,+d,+d4+ds+d+d,)/7(2)式中：M；为每一指标的原始值,Mmax、M mi n 为每一指标在所有实验组中的最大值和最小值。di、d、d3、d 4、d s、d o、d,分别为泽泻ASE、A RT、A RP、2 3-AB、2 3-A C、2 4-A A、A B含量的归一化处理后的值。1.4.3验证实验与工艺比较按照响应面法优化的实验结果，综合考虑实际生产需求,确定泽泻趁鲜切制工艺参数。取大小均匀的新鲜泽泻块茎30 kg，等分为6 组,3组按照确定的趁鲜切制工艺加工,3组按照传统加工工艺加工,测定各组泽泻内在质量指标并计算各组归一值(OD)。1.5ASE测定参照中国药典四部通则2 2 0 1浸出物测定法（热浸法）及一部泽泻项下规定方法。X2切片厚度X3干燥温度Slice thicknessDrying temperature(mm)()340450560(1)1.6ART含量测定1.6.1供试品溶液制备通过考察,取泽泻样品粉末（过四号筛）约0.5g,精密称定,置于10 0 mL具塞锥形瓶中,精密加人无水乙醇2 0 mL,密塞,称定重量,超声提取15min，冷却至室温,无水乙醇补足失重,摇匀,过滤,即得。1.6.2标准曲线绘制23-AB标准曲线绘制：精密称取2 3-AB对照品5.00mg,用无水乙醇定容至2 5mL容量瓶中，精密量取1.0、2.0.3.0.4.0、5.0、6.0 mL,置于10 mL容量瓶中,加无水乙醇定容，得不同质量浓度的对照品溶液，按香草醛-高氯酸显色法12 ,精密量取各浓度对照品溶液0.3mL,加人5%香草醛冰乙酸溶液（新鲜配制)0.3mL,高氯酸0.8 mL,50水浴5min，冷水浴至室温，加入5mL冰乙酸，在555nm波长测定吸光度,以浓度c(mg/mL)为横坐标,吸光度A为纵坐标,绘制标准曲线，得线性方程,A=0.5823c-0.0576,R=0.9991,线性范围为0.0 10 0.2 0 0mg/mL。1.7ARP含量测定1.7.1供试品溶液制备取泽泻样品粉末（过四号筛）约1.0 g,精密称1758定,置于2 50 mL具塞锥形瓶中,精密加人蒸馏水100 mL,加热回流2 h,离心(10 0 0 0 r/min)5min,过滤,精密量取滤液2 mL,置于50 mL离心管中,精密加人无水乙醇10 mL,置于4冰箱冷藏12 h,离心(10 000r/min)5min,过滤,沉淀加人5 mL蒸馏水溶解,溶液转移至10 mL容量瓶中,加蒸馏水定容，摇匀，即得供试品溶液。1.7.2标准曲线绘制D-无水葡萄糖标准曲线绘制：精密称取D-无水葡萄糖对照品113.0 0 mg，用蒸馏水定容至50 mL容量瓶中，精密量取D-无水葡萄糖对照品溶液1.0、2.0.3.0、4.0、5.0.6.0 m L,置于10 mL容量瓶中,加水定容,得不同质量浓度的对照品溶液，按苯酚-硫酸显色法13,精密量取各浓度对照品溶液2 mL,分A天然产物研究与开发别置于具塞试管中,加人5%苯酚溶液1mL,摇匀，再加人浓硫酸5mL,60水浴加热2 0 min,取出后冷却至室温，溶液转移至2 0 mL容量瓶中,加水定容,在490 nm波长处测定吸光度，以浓度c（m g/mL)为横坐标,吸光度A为纵坐标,绘制标准曲线，得线性方程,A=0.7313c-0.0482,R=0.9994,线性范围为0.2 6 6 1.356 mg/mL。1.8#指标成分含量测定1.8.1色谱条件色谱柱：Agilengt ZORBAX SB-Cis（2 50 mm4.6mm,5m）;流动相：水（A）-乙腈（B）,梯度洗脱(0 40 min,45%100%B);流速:1 mL/min;柱温：35；检测波长：2 0 8、2 46 nm；进样量：2 0 L。对照品、供试品溶液HPLC色谱图见图2。BVol.3501020时间Time（mi n）3040010时间Time（mi n）203040CD220注：A、C:对照品；B、D：样品。1:2 3-乙酰泽泻醇C;2:24-乙酰泽泻醇A;3：泽泻醇B;4:23-乙酰泽泻醇B。No t e:A，C:Re f e r e n c e s u b s t a n c e s；1.8.2供试品溶液制备取泽泻样品粉末（过四号筛）约1.0 g,精密称定,置于150 mL具塞锥形瓶中,精密加入乙腈2 5mL,称定重量，超声提取30 min（40 k H z,2 50 W）,冷却,再次称定重量,用乙腈补足失重,摇匀,滤过,取续滤液过0.45m微孔滤膜，即得供试品溶液。10B,D:Samples.1:Alisol C 23-acetate;2:Alisol A 24-acetate;3:Alisol B;4:Alisol B 23-acetate。20时间Time（mi n）Fig.2 Chromatogram of controls and samples3040图2 对照品及样品色谱图1.8.3混合对照品溶液制备精密称取2 3-AB对照品2.2 0 mg、2 3-A C对照品2.60mg、2 4-A A 对照品1.6 0 mg、A B对照品3.0 0mg,分别置于10 mL容量瓶中,加乙腈超声溶解、定容，得到各对照品贮备液。精密吸取各对照品贮备液1mL,置于10 mL容量瓶中,加人乙腈定容,摇01020时间Time.（mi n)3040Vol.35匀,得到每1mL含有2 3-AB22.0g,23-AC26.0g，2 4-A A 16.0 g，A B30.0 g的混合对照品溶液。1.8.4方法学考察1.8.4.1线性关系考察Table 2 Linear regression equation and correlation coefficient成分Component23-AB23-AC24-AAAB林龙等：基于响应面法结合总评归一法优化泽泻趁鲜切制加工工艺表2 线性回归方程及相关系数线性回归方程Linear regression equationY=49.810X-0.008 0Y=63.432X-0.037 2Y=40.336X+0.022 5Y=58.019X-0.021 31759精密量取“1.8.3”项下制备的混合对照品溶液分别梯度稀释为6 个不同的质量浓度，按“1.8.1”项下色谱条件进样检测,记录峰面积。以各待测成分浓度（X,g/mL）为横坐标，峰面积（Y,mAU*min)为纵坐标进行线性回归,结果见表2。线性范围R2Linear range(g/mL)0.999 31.1 22.00.999 71.3 26.00.999 60.8 16.00.999 41.530.01.8.4.2精密度实验取“1.8.3”项下制备的混合对照品溶液，按“1.8.1项下色谱条件连续进样测定6 次，记录各待测成分的峰面积，计算2 3-AB、2 3-A C、2 4-A A 和AB峰面积RSD分别为2.93%、0.0 5%、0.7 1%、0.54%，表明仪器精密度良好。1.8.4.3重复性实验取泽泻样品粉末（过四号筛）约1.0 g,共6 份，精密称定，按“1.8.2”项下方法制备供试品溶液，再按“1.8.1”项下色谱条件进样测定,计算各待测成分的质量分数均值分别为1.8 45、0.17 0、1.6 16、2.158mg/g,RSD分别为0.34%、1.30%、0.56%、0.37%，表明方法的重复性良好。1.8.4.4稳定性实验取泽泻样品粉末（过四号筛）约1.0 g,精密称称样量成分SampleComponentweight(mg)23-AB0.500 00.500 00.500 00.500 00.500 00.500 023-AC0.500 00.500 0定，按“1.8.2 项下方法制备供试品溶液，按“1.8.1 项下色谱条件分别于室温下放置0、2、4、8、16、2 4h时进样测定，记录各待测成分的峰面积，计算2 3-AB、23-AC、2 4-A A 和AB峰面积的RSD分别为0.8 8%、1.20%、1.7 7%、1.2 3%，表明供试品溶液在2 4h内稳定性良好。1.8.4.5加样回收率实验取已知含量的泽泻样品粉末（T1,过四号筛），每份约0.5g,共6 份，精密称定，分别加入等量的对照品，按“1.8.2”项下方法制备供试品溶液，按“1.8.1项下色谱条件进样测定，记录各待测成分的峰面积并计算加样回收率及RSD。结果2 3-AB、2 3-AC、2 4-A A 和AB的平均加样回收率分别为10 0.2 2%、98.04%、97.6 4%、98.43%,RSD 分别为1.0 6%、2.38%、1.99%、0.6 7%。具体结果见表3。表3加样回收率测定结果(n=6)Table3Determination results of sample recovery rate(n=6)样品含量Sample content(mg)0.9230.9230.9230.9230.9230.9230.0850.085加入量Addingamount(mg)0.9210.9200.9310.9330.9250.9290.0850.086检出量Detectionquantity(mg)1.8581.8451.8471.8521.8621.8450.1680.168回收率Recoveryrate(%)100.2298.04RSD(%）1.062.381760续表 3(Continued Tab.3)成分Component23-AC24-AAAB天然产物研究与开发称样量样品含量SampleSample contentweight(mg)(mg)0.500 00.0850.500 00.0850.500 00.0850.500 00.0850.500 00.8100.500 00.8110.500 00.8110.500 00.8110.500 00.8110.500 00.8110.500 01.0810.500 01.0810.500 01.0810.500 01.0810.500 01.0810.500 01.081Vol.35加人量检出量AddingDetectionamount(mg)quantity(mg)0.0840.1710.0830.1650.0850.1670.0850.1690.7921.6210.8011.5820.8211.5990.8071.6050.8031.5960.7991.5811.0832.1551.0912.1481.0852.1551.0882.1421.0922.1591.078回收率Recoveryrate(%)97.6498.432.142RSD(%）1.990.672结果与分析2.1响应面法优化工艺实验结果响应面法实验设计和17 个实验组的泽泻内在质量测定结果及相应OD值见表4。2.2模型拟合及显著性分析运用Design-Expert8.0.6软件,将表4中各实验组指标成分的OD值数据进行多元回归拟合和二Table 4 Response surface methodology for optimizing experimental designand results of Alismatis Rhizoma of the fresh cutting process(n=2)编号X2Xi(%)No.T1T2T3T4T5T6T7T8T9项式分析14,建立泽泻趁鲜切制加工工艺OD值对水分含量（X）、切片厚度（X,）、干燥温度（X,)的二次回归模拟方程：0D=0.64-0.087X,+0.085X,-0.019X,+5.000 103 X,X,+0.020X,X,+0.022X,X,-0.26X-0.039Xz-0.14 X表4泽泻鲜切制工艺响应面法优化实验设计及实验结果（n=2)X3ASE(mm)()405505404303404503304304504ART(%）(mg/g)4016.285016.105017.475016.395017.855016.096016.794016.164016.19ARP(mg/g)11.272308.1899.083301.45611.928312.67110.821300.35611.179316.37010.547297.78712.069297.51011.243295.0279.291312.28823-AB(mg/g)1.4470.9491.1441.1111.0220.7140.9280.9340.27123-AC(mg/g)0.1700.1160.1190.0770.1100.0280.0440.4510.01524-AA(mg/g)1.6201.2791.5781.0191.6850.7590.7190.7150.415AB(mg/g)1.6731.1561.6011.3331.5660.5121.0300.9790.274OD0.563 30.334 40.617 00.361 40.648 00.170 20.298 80.361 60.153 7Vol.35续表 4(Continued Tab.4)编号Xi(%)No.T10T11T12T13T14T15T16T17林龙等：基于响应面法结合总评归一法优化泽泻趁鲜切制加工工艺X2X3(mm)()4034044034045044043054051761ASEART(%）(mg/g)4017.055017.276015.645017.006016.355016.435016.976017.30ARP(mg/g)10.190294.94111.577308.3499.669301.32612.497304.9589.464297.4019.860313.11911.371307.7119.819303.97423-AB(mg/g)1.1471.5381.1731.4920.5381.4661.1741.26323-AC(mg/g)0.1880.1600.0790.1680.0490.1760.0800.08124-AA(mg/g)1.2381.7031.2021.9590.7931.7361.3291.752AB(mg/g)1.5992.0311.2771.8670.6291.7901.5131.766OD0.423 60.675 60.326 30.653 90.171 70.614 10.505 60.554 4回归模型的方差分析结果见表5。由表5可知:拟合模型P0.05,无显著性差异，说明模型拟合良好,预测值与实验结果相吻合。调整系数Ra,=0.9837,变异系数（CV)为5.2 7%，即该模型可解释98.37%响应值的变化，模型拟合度较高，说明此模型可对不同条件下泽泻趁鲜切制工艺进行预测。表5方差分析结果Table 5ANOVA results偏差平方和自由度方差来源Deviation sumSource of varianceof squares模型Model0.520X0.061X20.057X32.849 10-3X,X21.000 10 4X,X1.634 10-3X2X31.954 10-30.280X6.463 10-30.077残差Residual3.716 10-3失拟项Lack of fit1.006 10-3误差Error2.710 10-3总离差Cor total0.520注：*差异显著(P0.05)；*差异极显著(P0.01)。Note:*Significant difference(P 0.05);*Highly significant difference(P 0.01).2.3最优趁鲜切制工艺的确定以OD值最高为目标，根据DesignExpert8.0.6实验设计软件得泽泻趁鲜切制加工最佳工艺参数响应面实验结果见图3。根据回归方程所绘制出各因素交互作用的响应面图,等高线图是其投影图，等高线图的形状能够反映交互作用的强弱15.16 ,其中，椭圆表示两因素交互作用较强，而圆形则表示交互作用较弱；同时,响应面的陡峭程度能够反映出交互作用的强弱。在图3中,X,X2、X,X;的等高线为椭圆，说明水分含量与切片厚度，切片厚度与干燥温度间的交互作用均明显。均方Degrees ofMean Squarefreedom0.05810.06110.05712.849 10*311.000 10 411.634 10-311.954 10-310.28016.463 10-310.07775.309 10 433.355 10 446.774 10 416一显著性FP108.4800.000 1114.5400.0001107.6700.000 15.3700.05370.1900.677 33.0800.122 83.6800.096 6534.6800.000 112.1800.010 1145.9200.000 1一0.500一一为：水分含量37.0 1%，切制厚度4.50 mm，干燥温度49.36，预测0 D值为0.6 7 6 8。结合实际生产需要，将最佳工艺参数调整确定为：水分含量40%，Significance*一*0.704 9一一一1762天然产物研究与开发Vol.35BA0.80.70.60.5480.40.30.20.15.00X切片厚度Slicethickness（mm）0.80.70.60.580.40.30.20.150.0060.004.5045.004.0040.003.5035.003.0030.00X：水分含量Moisturecontent(%)C0.80.70.60.50.30.20.150.0055.0045.0050.0040.0045.0035.00X,干燥温度Drying temperature(c)40.0030.00：水分含量Moisturecontent(%)60.0055.00X;干燥温度Drying temperature(%)图3各因素交互作用的响应面图Fig.3Response surface diagram of the interaction of various factors切片厚度4mm，干燥温度50。2.4验证实验与工艺比较按照响应面法优选得到的趁鲜切制工艺即水分含量40%，切片厚度4mm，干燥温度50 制备泽泻趁鲜切制片（FP），与传统工艺加工的泽泻片(TP)进行内在质量比较,结果见表6。结果显示泽编号ASENo.(%)FP-117.440FP-217.290FP-317.610均值Mean value17.447RSD(%)0.75TP-116.380TP-216.440TP-316.480均值Mean value16.433RSD(%)0.255.004.5050.004.0045.003.50泻趁鲜切制片平均OD值为0.6 6 7 8 与预测OD值0.6768偏差为0.0 13（RSD为2.0 0%），可见，采用响应面优选出的泽泻最佳趁鲜切制工艺具有可靠性与稳定性。同时趁鲜切制加工组泽泻片OD值高于传统加工组泽泻饮片，说明从内在质量角度，该泽泻趁鲜切制片优于传统加工泽泻片。表6 响应面法验证实验(n=2)Table 6Response surface methodology validation experiments(n=2)ART(mg/g)11.03711.09411.67611.2692.5610.64510.34110.47210.4861.19ARP(mg/g)303.923306.475302.991304.4630.48298.193297.274301.604299.0240.6223-AB(mg/g)1.4531.4831.4531.4631.031.3091.3161.3401.3221.0023-AC(mg/g)0.1460.1490.1430.1461.680.1250.1260.1220.1241.3724-AA(mg/g)1.5541.5461.5551.5520.261.5061.5961.5021.5352.83AB(mg/g)1.6761.6381.6941.6691.401.3391.2471.3371.3083.28OD0.653 60.664 00.685 60.667 82.000.475 50.462 50.499 40.479 13.19Vol.353结论与讨论产地加工和饮片加工直接影响中药质量，并进一步影响中成药生产和临床应用。就目前川泽泻药材产地加工而言，虽每年产量占全国泽泻药材8 0%以上,但却存在加工场地分散、规模小、机械化、规范化程度低等诸多问题,泽泻短时间内大规模加工需求与传统效能有限的作坊式加工模式产生极大矛盾,导致川泽泻质量参差不齐，影响临床用药17 。因此课题组前期初步开展了泽泻趁鲜切制加工的可行性研究。通过研究发现：与传统切制的饮片质量相比较,泽泻趁鲜切制片质量具有一致性,且在某些指标上质量更优：性状上，泽泻趁鲜切制药材横切面较传统切制饮片颜色更白，切片更均匀，翘片、碎片等败片率更低；从药用物质基础来看，ASE、2 3-A B和2 3-AC等药典质控指标的含量均高于传统加工饮片，且更为稳定，此结果在本文“2.4验证实验与工艺比较研究”中也再次得到验证。同时，根据课题组前期实地调研与分析,泽泻趁鲜切制加工工艺相比传统药材及饮片加工，不仅减少了传统工艺的二次浸润和干燥环节,省时省力,还可引人现代自动化加工设备进行规模化生产，有效降低燃料和人力成本，提高生产效能17 。泽泻趁鲜切制加工还可进一步实现集约化、标准化生产，也为建立泽泻药材溯源系统，保障泽泻药材及饮片质量稳定性提供了有利条件，更加符合我国中药全产业链高质量发展需求。而且,泽泻属于大宗药材品种、四川著名道地药材,每年8 0%以上的产量均集中在四川眉山市、乐山市等岷江流域,产地集中性也已经为泽泻发展规模化趁鲜切制加工产业提供了强有力的先天条件。综上，从提高泽泻产品质量、简化生产工艺、降低生产成本、发展集约化、标准化、规模化加工产业，建立泽泻质量溯源系统等综合分析，泽泻趁鲜切制加工具有可行性，应大力发展。值得注意的是，干燥过程中，物料会随着水分的脱除,因细胞失去水分的填充、支撑作用,宏观上表现为材料的体积缩小、表面皱缩等18 。但不同物料,因自身性质以及多种影响因素,其结构变化差异较大。故为保证不同水分含量的泽泻样品进人优化试验时具有较为一致的初始状态,基于前期预实验观测结果,将样品干燥预处理在40 低温条件下进行。在该温度条件下干燥的泽泻块茎细胞失水缓林龙等：基于响应面法结合总评归一法优化泽泻趁鲜切制加工工艺1763慢,结构上整体变化缓慢，短时间内未出现明显变化。同时,单因素实验结果表明水分含量为30%50%的泽泻块茎从外观和结构上整体较为均一，故将优化试验的泽泻块茎水分含量考察范围定为30%50%。因为当水分含量为6 0%时，切面有白色汁液渗出；当水分含量为2 0%时，外表面较硬，不易切片，易产生缺口、碎屑。干燥温度