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南京大学分子生物学第19讲.ppt

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资源描述

1、NanjingUniversity(三三三三)噬噬噬噬菌菌菌菌体体体体的的的的阻阻阻阻遏遏遏遏蛋蛋蛋蛋白白白白及及及及其其其其作用作用作用作用1 1 1 1,CroCroCroCro蛋白蛋白蛋白蛋白(1 1 1 1)与操作子结合的亲和力)与操作子结合的亲和力)与操作子结合的亲和力)与操作子结合的亲和力(2 2 2 2)功能)功能)功能)功能绢增鹅秃骚战妈碾避挖辙蔼详矗鸯涡喝晨锐摆狞睹梗单察猖箭秀徐得算令南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity2 2 2 2,CICICICI蛋白蛋白蛋白蛋白(1 1 1 1)与与与与操操操操作作作作子子子子结结结结合

2、合合合的的的的亲亲亲亲和和和和力力力力(2 2 2 2)功能)功能)功能)功能(3 3 3 3)cIcIcIcI基因的突变效应基因的突变效应基因的突变效应基因的突变效应镰号剖愿拙噬王脸赚下杯胀炙其实低匹膨谴祝苑邀珠庭贱赋概技逢联映情南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity(四)(四)(四)(四)CII CII CII CII蛋白和蛋白和蛋白和蛋白和CIIICIIICIIICIII蛋白蛋白蛋白蛋白1 1 1 1,CIICIICIICII蛋白蛋白蛋白蛋白(1 1 1 1)CIICIICIICII蛋白的特点蛋白的特点蛋白的特点蛋白的特点A A A A,以

3、寡聚体形式起作用,以寡聚体形式起作用,以寡聚体形式起作用,以寡聚体形式起作用B B B B,促进启动子,促进启动子,促进启动子,促进启动子P P P PE EE E、P P P PI II I和和和和P P P PaQaQaQaQ的转录的转录的转录的转录(2 2 2 2)CIICIICIICII蛋白调控的启动子的特点蛋白调控的启动子的特点蛋白调控的启动子的特点蛋白调控的启动子的特点烦意局汝惰领稽帽绦冷谤罕透穗象靛失详豫随缴笔中按桓颗向胃葬知宇坠南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity2 2 2 2,CIIICIIICIIICIII蛋白蛋白蛋白蛋白3

4、 3 3 3,噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体cIIcIIcIIcII、cIIIcIIIcIIIcIII基因突变效应基因突变效应基因突变效应基因突变效应摄档蜂恨嗅孔语狗雇囊面蛛加叶池倚灵懈倦爸租譬帽京落仪教硝温赃窑贫南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity(五五五五)抗抗抗抗 终终终终 止止止止 因因因因 子子子子 及及及及 其其其其 作作作作 用用用用(P206P206P206P206)1 1 1 1,N N N N蛋白蛋白蛋白蛋白(1 1 1 1)作用位点(图)作用位点(图)作用位点(图)作用位点(图6-176-176-176-17)(2 2 2 2)

5、作用机制)作用机制)作用机制)作用机制阳冬饼宜蛮喷恶棘疯文褪符遵芒恿所妨贺狈餐亚峙裕挑标锚翰呐滩淡民偏南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity2 2 2 2,Q Q Q Q蛋白蛋白蛋白蛋白(1 1 1 1)作用位点)作用位点)作用位点)作用位点(2 2 2 2)作用)作用)作用)作用蓟边械奖肿讹拎辜犀务诅资跋坝辟膜刨越隆钨柄凰盛登蒲掀擒妊贾式胳戳南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity(五五五五)噬噬噬噬菌菌菌菌体体体体溶溶溶溶原原原原生生生生长长长长的的的的基因表达调控基因表达调控基因表达调控基因表达

6、调控 噬噬噬噬菌菌菌菌体体体体的的的的溶溶溶溶原原原原生生生生长长长长分分分分三三三三个个个个阶阶阶阶段段段段1 1 1 1,溶原化的建立溶原化的建立溶原化的建立溶原化的建立(1 1 1 1)早期基因的表达)早期基因的表达)早期基因的表达)早期基因的表达箔硷硒殃警眩挠旋矩仔鞋留着棒剿慷养垦碳售恕笔凶族梧折胸砒松蚜争瘤南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity(2 2 2 2)营养耗竭的影响)营养耗竭的影响)营养耗竭的影响)营养耗竭的影响A A A A,对寄主的影响,对寄主的影响,对寄主的影响,对寄主的影响B B B B,对,对,对,对CIICIICI

7、ICII蛋白的影响蛋白的影响蛋白的影响蛋白的影响钨坟导户彰鸯楚橙婪掂拈婪刻鸦陆绥黔舜壳商框怂五砚救蔗戌傀氟粪隆溶南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity(3 3 3 3)MOIMOIMOIMOI值过高的影响值过高的影响值过高的影响值过高的影响A A A A,MOIMOIMOIMOI值值值值B B B B,MOIMOIMOIMOI值值值值过过过过高高高高(MOI10MOI10MOI10MOI10)对对对对CIICIICIICII蛋白的影响蛋白的影响蛋白的影响蛋白的影响C C C C,从从从从P P P PE EE E转转转转录录录录CCCC基基基基因

8、因因因体体体体制制制制的的的的建立建立建立建立湿国简炳冗惠锄棉拳榨尽疹袜吧跟芭亥限孽疚岿钞络苑掠怖持哼镀篙掩限南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity2 2 2 2,溶原化的维持溶原化的维持溶原化的维持溶原化的维持(1 1 1 1)P P P PE E E E体体体体制制制制向向向向P P P PM M M M体体体体制制制制的的的的转换转换转换转换(2 2 2 2)溶原化的维持溶原化的维持溶原化的维持溶原化的维持术骏讹朵问噬噪君侮轴舆坚犀锚叔砷渡谜掘曹苛戚燥兔倍咬嫂牺倾害渐保南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUni

9、versity3 3 3 3,原原原原噬菌体的释放噬菌体的释放噬菌体的释放噬菌体的释放(1 1 1 1)当当当当溶溶溶溶原原原原细细细细菌菌菌菌受受受受到到到到紫紫紫紫外外外外线线线线等等等等作作作作用用用用引引引引起起起起DNADNADNADNA损损损损伤伤伤伤时时时时RecARecARecARecA切切切切断断断断CICICICI蛋白单体,失去阻遏活性蛋白单体,失去阻遏活性蛋白单体,失去阻遏活性蛋白单体,失去阻遏活性(2 2 2 2)早期操纵元转录)早期操纵元转录)早期操纵元转录)早期操纵元转录恤幌茧肾炭颊尺销凯彩艺郸释州取焕挥癣聘备屈揪洗峪站舜字斗蔚佯瑶笺南京大学分子生物学第19讲南京大

10、学分子生物学第19讲NanjingUniversity(六)(六)(六)(六)噬菌体溶菌生长的基噬菌体溶菌生长的基噬菌体溶菌生长的基噬菌体溶菌生长的基因表达调控因表达调控因表达调控因表达调控1 1 1 1,感染细菌立即进入溶菌,感染细菌立即进入溶菌,感染细菌立即进入溶菌,感染细菌立即进入溶菌生长的基因表达调控生长的基因表达调控生长的基因表达调控生长的基因表达调控(1 1 1 1)早期基因的表达调控)早期基因的表达调控)早期基因的表达调控)早期基因的表达调控(2 2 2 2)晚期基因的表达调)晚期基因的表达调)晚期基因的表达调)晚期基因的表达调秉赫宴凯踌阳疙禾扦碳僵解举毫莱蕾兽活绽潮栽闯位冰彰弘

11、弧岿芍范氓挑南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity2 2 2 2,从溶原化状态进入溶菌,从溶原化状态进入溶菌,从溶原化状态进入溶菌,从溶原化状态进入溶菌生长的基因表达调控生长的基因表达调控生长的基因表达调控生长的基因表达调控(1 1 1 1)早期基因的表达调控)早期基因的表达调控)早期基因的表达调控)早期基因的表达调控(2 2 2 2)晚期基因的表达调控)晚期基因的表达调控)晚期基因的表达调控)晚期基因的表达调控糠冈攀姆找娟篆诈凭喀哲嫁涣纺凋蓑训醒参老癣诣韶治瑟时兽昼灾翰涵厂南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUni

12、versity第六节第六节第六节第六节 基因转录的翻译调控基因转录的翻译调控基因转录的翻译调控基因转录的翻译调控衰减子系统衰减子系统衰减子系统衰减子系统足项蒲牡毡碎躲洗顽御貉辆鲜喀债耿潘耐晾本古捍放奠釜茄骗仗嘉爆堤浑南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity一、概述一、概述一、概述一、概述1 1 1 1,阻阻阻阻遏遏遏遏蛋蛋蛋蛋白白白白调调调调控控控控系系系系统统统统对对对对trptrptrptrp酶系统转录活性的影响酶系统转录活性的影响酶系统转录活性的影响酶系统转录活性的影响2 2 2 2,衰衰衰衰减减减减子子子子系系系系统统统统对对对对trptr

13、ptrptrp酶酶酶酶系系系系统统统统活性的影响活性的影响活性的影响活性的影响3 3 3 3,衰减子系统存在的意义,衰减子系统存在的意义,衰减子系统存在的意义,衰减子系统存在的意义轴广肪掀套唆旱雌甲绎其虑磨儿祸峨刺貉度若汲旋隶俯拒姓人狗诡樊讹畴南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity二、二、二、二、trp trp trp trp衰减子的作用机制衰减子的作用机制衰减子的作用机制衰减子的作用机制(一)(一)(一)(一)trp mRNAtrp mRNAtrp mRNAtrp mRNA的前导序列的前导序列的前导序列的前导序列的结构(的结构(的结构(的结构(

14、图图图图8 8 8 823232323)1 1 1 1,有一个编码,有一个编码,有一个编码,有一个编码14141414个个个个AaAaAaAa(前导(前导(前导(前导肽)的肽)的肽)的肽)的ORFORFORFORF,其,其,其,其5555端有端有端有端有S-DS-DS-DS-D序序序序列列列列2 2 2 2,前导肽,前导肽,前导肽,前导肽mRNAmRNAmRNAmRNA中有两个中有两个中有两个中有两个连续的连续的连续的连续的TrpTrpTrpTrp密码子密码子密码子密码子3 3 3 3,前导肽,前导肽,前导肽,前导肽ORFORFORFORF下游下游下游下游42424242个个个个碱基处有一个不

15、依赖碱基处有一个不依赖碱基处有一个不依赖碱基处有一个不依赖因子的终止子(衰减子因子的终止子(衰减子因子的终止子(衰减子因子的终止子(衰减子序列)序列)序列)序列)岿籍涅拘昭俘硷惭镰周沃颜区姨府沽操诞销狄寝靡畅尺核抨坚膘虫咆蝉混南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity(二)衰减子的作用机制(二)衰减子的作用机制(二)衰减子的作用机制(二)衰减子的作用机制1 1 1 1,trp mRNAtrp mRNAtrp mRNAtrp mRNA前导序列的二级前导序列的二级前导序列的二级前导序列的二级结构结构结构结构(图(图(图(图8 8 8 824242424)

16、2 2 2 2,trp mRNA trp mRNA trp mRNA trp mRNA前导序列转录与翻前导序列转录与翻前导序列转录与翻前导序列转录与翻译的时空关系译的时空关系译的时空关系译的时空关系忌堡食栋全贷幂诣搔栅伍坊扰捻洼侦爬察转矿审敬语腐漳蛙纹惨规篮肆笼南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity3 3 3 3,TrpTrpTrpTrp对衰减子作用的影响对衰减子作用的影响对衰减子作用的影响对衰减子作用的影响(图(图(图(图8 8 8 825252525)(1 1 1 1)TrpTrpTrpTrp存在时(图存在时(图存在时(图存在时(图8 8 8

17、 825252525,a a a a)核糖体可以完成前导肽的翻译,核糖体可以完成前导肽的翻译,核糖体可以完成前导肽的翻译,核糖体可以完成前导肽的翻译,到达终止密码,占据序列到达终止密码,占据序列到达终止密码,占据序列到达终止密码,占据序列1 1 1 1和部分和部分和部分和部分序列序列序列序列2 2 2 2 序列序列序列序列3 3 3 3、4 4 4 4配对,终止子结构形成,配对,终止子结构形成,配对,终止子结构形成,配对,终止子结构形成,trp mRNAtrp mRNAtrp mRNAtrp mRNA转录终止转录终止转录终止转录终止方蜡铅斡失矿例狸堵勇约杯河聘爽坊僚白困求炔轴俺倒杰纯漏掺夯婴眯

18、以南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity(2 2 2 2)TrpTrpTrpTrp(或(或(或(或ArgArgArgArg)饥饿时(图)饥饿时(图)饥饿时(图)饥饿时(图8 8 8 825252525,b b b b)核糖体停顿在核糖体停顿在核糖体停顿在核糖体停顿在TrpTrpTrpTrp密码子上,占密码子上,占密码子上,占密码子上,占据序列据序列据序列据序列1 1 1 1,此时序列,此时序列,此时序列,此时序列4 4 4 4尚未转录尚未转录尚未转录尚未转录出来出来出来出来 序列序列序列序列2 2 2 2、3 3 3 3配对,终止子结构不配对,终

19、止子结构不配对,终止子结构不配对,终止子结构不能形成,能形成,能形成,能形成,trp mRNA trp mRNA trp mRNA trp mRNA转录继续转录继续转录继续转录继续耀立诸惊稀弯铰郸澜豫绑新棘辑对揩饺恤潍谎湖盘铰契娥沙庆宁绩孙亩斩南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity(3 3 3 3)其他)其他)其他)其他AaAaAaAa(如(如(如(如GlyGlyGlyGly)饥)饥)饥)饥饿时(图饿时(图饿时(图饿时(图8 8 8 825252525,c c c c)序列序列序列序列1 1 1 1、2 2 2 2配对,序列配对,序列配对,序列配

20、对,序列3 3 3 3、4 4 4 4配对,终止子结构形成,配对,终止子结构形成,配对,终止子结构形成,配对,终止子结构形成,trp mRNAtrp mRNAtrp mRNAtrp mRNA转录终止转录终止转录终止转录终止溶况欧患啄希搅胞迫捉员囊宇轻捞挨簿唁洲决爬凡毕竖插哗冠际瘩板寿佑南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity4 4 4 4,TrpTrpTrpTrp衰减子模型的实验衰减子模型的实验衰减子模型的实验衰减子模型的实验证据证据证据证据 降低降低降低降低TrpTrpTrpTrp衰减子转录终止衰减子转录终止衰减子转录终止衰减子转录终止作用的突变

21、降低作用的突变降低作用的突变降低作用的突变降低TrpTrpTrpTrp酶系酶系酶系酶系统的表达,反之则增强统的表达,反之则增强统的表达,反之则增强统的表达,反之则增强TrpTrpTrpTrp酶系统的表达酶系统的表达酶系统的表达酶系统的表达父竭番完岸江忘圃琶坪果格汹惩勉析皮裕脾绪许悟香守司嫡拐姆参炎惫痪南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity三、衰减子的普遍性及其生物三、衰减子的普遍性及其生物三、衰减子的普遍性及其生物三、衰减子的普遍性及其生物学意义学意义学意义学意义1 1 1 1,普遍性,普遍性,普遍性,普遍性(1 1 1 1)结构共性)结构共性)

22、结构共性)结构共性 ORFORFORFORF,终终终终止止止止子子子子序序序序列列列列,相相相相应应应应AaAaAaAa的的的的密密密密码码码码子子子子,可可可可能能能能存存存存在在在在的的的的的的的的二二二二极极极极结结结结构构构构丽想仲呼贮穆蕴炙薛七蹿忿涪豢雇臀场且呵佃盔擒阵借焰吉荷岁态迄槛氏南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity(2 2 2 2)作用机制共性)作用机制共性)作用机制共性)作用机制共性 前前前前导导导导肽肽肽肽翻翻翻翻译译译译作作作作用用用用不不不不存存存存在在在在时时时时,转转转转录在衰减子处终止录在衰减子处终止录在衰减子处

23、终止录在衰减子处终止2 2 2 2,衰衰衰衰减减减减子子子子的的的的作作作作用用用用机机机机制制制制可可可可被被被被看看看看作作作作是一种可阻遏的正调控是一种可阻遏的正调控是一种可阻遏的正调控是一种可阻遏的正调控 激活物:核糖体激活物:核糖体激活物:核糖体激活物:核糖体 辅阻遏物:相应的氨酰基辅阻遏物:相应的氨酰基辅阻遏物:相应的氨酰基辅阻遏物:相应的氨酰基-tRNA-tRNA-tRNA-tRNA跨郑慕昨波县拙闷盾柔拂鲜啄泉绍郭罗匣跑灵兔北彦麻沮疲妆疚盅鲍缩荷南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity3 3 3 3,衰衰衰衰减减减减子子子子调调调调控

24、控控控的的的的生生生生物物物物学学学学意义意义意义意义(1 1 1 1)调控更为灵敏)调控更为灵敏)调控更为灵敏)调控更为灵敏(2 2 2 2)对对对对代代代代谢谢谢谢产产产产物物物物的的的的反反反反应应应应更为直接更为直接更为直接更为直接(3 3 3 3)调控更为精细)调控更为精细)调控更为精细)调控更为精细扬悼频乙否猪于群疹停驳趾冀饥攘拆池健黔府亭循褂橇澡厄陡沮因案羽燥南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity四、负责核苷酸合成的基因的衰减子四、负责核苷酸合成的基因的衰减子四、负责核苷酸合成的基因的衰减子四、负责核苷酸合成的基因的衰减子(一一一一

25、)天天天天门门门门冬冬冬冬氨氨氨氨酸酸酸酸转转转转氨氨氨氨甲甲甲甲酰酰酰酰酶酶酶酶操操操操纵纵纵纵元(元(元(元(pyr BIpyr BIpyr BIpyr BI操纵元)前导序列结构操纵元)前导序列结构操纵元)前导序列结构操纵元)前导序列结构1 1 1 1,长度,长度,长度,长度 160160160160个核苷酸个核苷酸个核苷酸个核苷酸2 2 2 2,ORFORFORFORF 从从从从21212121位位位位开开开开始始始始,编编编编码码码码44444444个个个个AaAaAaAa的的的的前前前前导导导导肽肽肽肽汐图嘿熟蓉唬匡辫厅瘩洞损规靛袋乎怠江薪尘趁赫至工压坯挺首荔灿满塑南京大学分子生物学

26、第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity3 3 3 3,暂停位点,暂停位点,暂停位点,暂停位点 由由由由位位位位于于于于60606060位位位位核核核核苷苷苷苷酸酸酸酸附附附附近近近近的的的的发发发发夹夹夹夹结结结结构构构构和和和和第第第第85858585位位位位核核核核苷苷苷苷酸酸酸酸附附附附近近近近的的的的一一一一串串串串U U U U组组组组成成成成4 4 4 4,不依赖于,不依赖于,不依赖于,不依赖于因子的终止子因子的终止子因子的终止子因子的终止子 在第在第在第在第120120120120个核苷酸附近个核苷酸附近个核苷酸附近个核苷酸附近5 5 5 5,前导肽

27、的终止密码子,前导肽的终止密码子,前导肽的终止密码子,前导肽的终止密码子 位于终止子下游位于终止子下游位于终止子下游位于终止子下游25252525个核苷酸处个核苷酸处个核苷酸处个核苷酸处虑氢灿紫妻寥咐搏昭媳频漱呸拽返诱乃烂贷寞价渍川变厘裳毛头妥肚器搅南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity(二二二二)pyr pyr pyr pyr BIBIBIBI操操操操纵纵纵纵元元元元衰衰衰衰减减减减子子子子作用的机制(图作用的机制(图作用的机制(图作用的机制(图8 8 8 826262626)1 1 1 1,UTP UTP UTP UTP含量较低时含量较低时含

28、量较低时含量较低时 RNARNARNARNA聚聚聚聚合合合合酶酶酶酶在在在在暂暂暂暂停停停停位位位位点点点点的的的的一一一一连连连连串串串串U U U U处处处处发发发发生生生生较较较较长长长长时时时时间间间间的停顿的停顿的停顿的停顿侥幽悯涨噪戊宅郁墨玉晾锭介跳乖噎塑缸榴霹辑苞获杉氨绷差贰割变发堵南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity 核核核核糖糖糖糖体体体体追追追追赶赶赶赶上上上上RNARNARNARNA聚聚聚聚合合合合酶酶酶酶,与与与与之之之之发发发发生生生生作作作作用用用用,结结结结束束束束RNARNARNARNA聚聚聚聚合合合合酶酶酶酶的

29、的的的延延延延宕宕宕宕 耦耦耦耦联联联联核核核核糖糖糖糖体体体体的的的的RNARNARNARNA聚聚聚聚合合合合酶酶酶酶继继继继续续续续转转转转录录录录,到到到到达达达达终终终终止止止止子子子子结结结结构构构构时时时时不不不不发发发发生生生生终终终终止止止止作作作作用用用用,pyrBpyrBpyrBpyrB、I I I I基基基基因因因因得得得得以以以以转转转转录录录录昔早浙作踪淫抚犹裙仕悄称瘫扔歇桥惠讯都香瓦酿轨班题霞呼文行辩乘鄂南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity2 2 2 2,UTPUTPUTPUTP充足时充足时充足时充足时 RNARNA

30、RNARNA聚聚聚聚合合合合酶酶酶酶在在在在暂暂暂暂停停停停位位位位点点点点不不不不发发发发生生生生长时间的延宕长时间的延宕长时间的延宕长时间的延宕 核糖体不能追赶上核糖体不能追赶上核糖体不能追赶上核糖体不能追赶上RNARNARNARNA聚合酶聚合酶聚合酶聚合酶 RNARNARNARNA聚聚聚聚合合合合酶酶酶酶继继继继续续续续转转转转录录录录,到到到到达达达达终终终终止止止止子子子子结结结结构构构构时时时时发发发发生生生生转转转转录录录录终终终终止止止止作作作作用用用用,pyrBpyrBpyrBpyrB、I I I I基因不能转录基因不能转录基因不能转录基因不能转录哲唇约凛弃沤嫉贤登咋难绸恋聚

31、蓄图诌稗土裤湍溪货塔闭顷倡亚乒裔疹墟南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity第七节第七节第七节第七节 翻译水平的调控翻译水平的调控翻译水平的调控翻译水平的调控一、反义一、反义一、反义一、反义RNARNARNARNA的调控作用的调控作用的调控作用的调控作用(一一一一)micRNA micRNA micRNA micRNA(mRNA mRNA mRNA mRNA-interfering-interfering-interfering-interfering complementary RNAcomplementary RNAcomplementary

32、RNAcomplementary RNA)及其作用位点)及其作用位点)及其作用位点)及其作用位点1 1 1 1,micRNAmicRNAmicRNAmicRNA 干扰干扰干扰干扰mRNAmRNAmRNAmRNA的互补的互补的互补的互补RNARNARNARNA2 2 2 2,micRNAmicRNAmicRNAmicRNA的作用位点的作用位点的作用位点的作用位点 通通通通常常常常是是是是mRNAmRNAmRNAmRNA上上上上的的的的S-DS-DS-DS-D序序序序列列列列,起起起起始始始始密密密密码子和部分码子和部分码子和部分码子和部分N N N N端的密码子端的密码子端的密码子端的密码子梗乎

33、邮飞侦槐霸塘搜梦盾高检挟巡撂邯亏热忧乞短狄伪蓝闺帘稼胸迁丧擎南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity3 3 3 3,反义,反义,反义,反义RNARNARNARNA的作用方式的作用方式的作用方式的作用方式(1 1 1 1)与与与与mRNAmRNAmRNAmRNA的的的的核核核核糖糖糖糖体体体体结结结结合合合合位位位位点点点点结合,使翻译不能起始结合,使翻译不能起始结合,使翻译不能起始结合,使翻译不能起始(2 2 2 2)与与与与mRNAmRNAmRNAmRNA结结结结合合合合形形形形成成成成双双双双链链链链结结结结构构构构,成成成成为为为为核核核核酸

34、酸酸酸内内内内切切切切酶酶酶酶的的的的底底底底物物物物,从从从从而而而而使使使使mRNAmRNAmRNAmRNA不稳定不稳定不稳定不稳定(3 3 3 3)与与与与转转转转录录录录物物物物结结结结合合合合,使使使使转转转转录录录录提提提提前终止前终止前终止前终止瘩淖你缩团熏叙及甩熟句景扔先区棒朽济胁疮饶姥唱尺蛮妒备才昧贮院检南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity(二二二二)大大大大肠肠肠肠杆杆杆杆菌菌菌菌外外外外膜膜膜膜蛋蛋蛋蛋白白白白基基基基因因因因表表表表达中达中达中达中micRNAmicRNAmicRNAmicRNA的作用的作用的作用的作用1

35、 1 1 1,渗渗渗渗透透透透压压压压对对对对ompCompCompCompC,ompFompFompFompF基基基基因因因因表表表表达达达达的影响的影响的影响的影响(1 1 1 1)高渗)高渗)高渗)高渗 OmpCOmpCOmpCOmpC合成增多,合成增多,合成增多,合成增多,OmpFOmpFOmpFOmpF合成受控制合成受控制合成受控制合成受控制(2 2 2 2)低渗)低渗)低渗)低渗OmpFOmpFOmpFOmpF合成增多,合成增多,合成增多,合成增多,OmpCOmpCOmpCOmpC合成受控制合成受控制合成受控制合成受控制蓖手罐焕蛮眺叶饿儿勋技磁犹肋工苫蜜虚凳沥捞锌否淖江钱颧擎竞碎观

36、成南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity2 2 2 2,micF micF micF micF RNARNARNARNA对对对对ompFompFompFompF基基基基因因因因表表表表达达达达的的的的调控调控调控调控(1 1 1 1)micF RNAmicF RNAmicF RNAmicF RNA 模模模模板板板板位位位位置置置置:位位位位于于于于ompCompCompCompC启启启启动动动动子子子子上上上上游游游游 转转转转录录录录:ompCompCompCompC转转转转录录录录时时时时,micF micF micF micF RNARNA

37、RNARNA转录转录转录转录 micF RNA micF RNA micF RNA micF RNA 长度:长度:长度:长度:174174174174个碱基个碱基个碱基个碱基忌婪滥武秒损码福诊吉廖噬抱莉芜嘘九扮粱饵倔身炬褐策亚箭钻牺噶瞩诛南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity(2 2 2 2)micF micF micF micF RNARNARNARNA的的的的 作作作作 用用用用(图图图图 8-8-8-8-27272727)可可可可与与与与OmpF OmpF OmpF OmpF mRNAmRNAmRNAmRNA的的的的前前前前导导导导序序序序

38、列列列列的的的的44444444个个个个核核核核苷苷苷苷酸酸酸酸(包包包包括括括括S-DS-DS-DS-D)序序序序列列列列以以以以及及及及部部部部分分分分N N N N端端端端编编编编码码码码区区区区(包包包包括括括括起起起起始始始始密密密密码码码码AUGAUGAUGAUG)形形形形成成成成杂杂杂杂合合合合双双双双链链链链,抑抑抑抑制制制制OmpF OmpF OmpF OmpF mRNAmRNAmRNAmRNA的翻译的翻译的翻译的翻译诞畴寨阜副悸矣竿滑冯箱赴槐幢挺望媳题寒朱寞断扯抢跨磐死睬憎蔫玻陌南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity(三三三三

39、)噬噬噬噬菌菌菌菌体体体体CCCC蛋蛋蛋蛋白白白白对对对对晚晚晚晚期基因表达调控的机制期基因表达调控的机制期基因表达调控的机制期基因表达调控的机制1 1 1 1,P P P PaQaQaQaQ及其转录产物及其转录产物及其转录产物及其转录产物(1 1 1 1)P P P PaQaQaQaQ位置及转录方向位置及转录方向位置及转录方向位置及转录方向 位位位位于于于于Q Q Q Q基基基基因因因因的的的的中中中中部部部部,转转转转录录录录方方方方向与向与向与向与Q Q Q Q基因相反基因相反基因相反基因相反昨茅贤冗事椭疡步旭些哑门坎浊岔巴皂兴翰献脖旺谷遵挣弄瞅字联素冒邱南京大学分子生物学第19讲南京大

40、学分子生物学第19讲NanjingUniversity(2 2 2 2)P P P PaQaQaQaQ的特点的特点的特点的特点 有有有有典典典典型型型型的的的的CIICIICIICII蛋蛋蛋蛋白白白白结结结结合合合合位点位点位点位点(3 3 3 3)P P P PaQaQaQaQ的转录产物的转录产物的转录产物的转录产物 约约约约200200200200个核苷酸的个核苷酸的个核苷酸的个核苷酸的RNARNARNARNA侣漆幸府镀惠棋拨氰宵殴禾淳卫纱瓮绳辨术鸟拍技踩页宜都褂沙畅葡误涅南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity2 2 2 2,P P P Pa

41、QaQaQaQ对对对对Q Q Q Q基因表达的调控基因表达的调控基因表达的调控基因表达的调控(1 1 1 1)抑抑抑抑制制制制Q Q Q Q基基基基因因因因mRNAmRNAmRNAmRNA的的的的翻翻翻翻译译译译(2 2 2 2)由由由由于于于于P P P PaQaQaQaQ的的的的转转转转录录录录活活活活性性性性很很很很高高高高,可可可可以以以以抑抑抑抑制制制制P P P PR R R R的的的的转转转转录录录录,使使使使Q Q Q Q基因的基因的基因的基因的mRNAmRNAmRNAmRNA转录减少转录减少转录减少转录减少身滓丝库郭怜拯泪伦貌碧公撅首剑催颐煞两靡蔡奔澄含梭北坷硬启否熟敬南京大

42、学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity(3 3 3 3)P P P PaQaQaQaQ的作用的证据的作用的证据的作用的证据的作用的证据 P P P Paq1aq1aq1aq1突突突突变变变变体体体体:CIICIICIICII蛋蛋蛋蛋白白白白结结结结合合合合位位位位点点点点突突突突变变变变,造造造造成成成成CIICIICIICII蛋蛋蛋蛋白白白白结结结结合合合合效效效效率率率率下下下下降降降降,不不不不利利利利于于于于噬噬噬噬菌体溶原生长菌体溶原生长菌体溶原生长菌体溶原生长殃蛔急喊阐簇历绑怯铀左阂绿视摧夜筹戮粪涎闰瓷附乌揖划憎各拈瘩匿采南京大学分子生物学

43、第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity(四)反义(四)反义(四)反义(四)反义RNARNARNARNA的应用的应用的应用的应用1 1 1 1,研究应用,研究应用,研究应用,研究应用 研究基因的功能研究基因的功能研究基因的功能研究基因的功能2 2 2 2,临床应用,临床应用,临床应用,临床应用 治疗病毒性疾病治疗病毒性疾病治疗病毒性疾病治疗病毒性疾病胶嗓壁臂捕边视迭珐帽忽骏械隘贸呆球三晰揖吟别牙挣帚颗嗜鞘淤疙囚打南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity二二二二、mRNAmRNAmRNAmRNA二二二二级级级级结结结结构构

44、构构对对对对基基基基因因因因表表表表达达达达的的的的影响影响影响影响(一一一一)mRNAmRNAmRNAmRNA二二二二级级级级结结结结构构构构对对对对自自自自身身身身翻译的影响翻译的影响翻译的影响翻译的影响1 1 1 1,单单单单链链链链噬噬噬噬菌菌菌菌体体体体MS2MS2MS2MS2家家家家族族族族噬噬噬噬菌菌菌菌体体体体基基基基因因因因的的的的表表表表达达达达产产产产物物物物(图图图图8-8-8-8-29292929)猴珍索涛灼铂簿眯掖烽忍泵评播勒箩踞悍睹至胎絮肾完氦万萄胳姓德亦橙南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity(1 1 1 1)A

45、A A A基因:编码附着蛋白基因:编码附着蛋白基因:编码附着蛋白基因:编码附着蛋白(2 2 2 2)CPCPCPCP基因:编码衣壳蛋白基因:编码衣壳蛋白基因:编码衣壳蛋白基因:编码衣壳蛋白(3 3 3 3)rep rep rep rep基因:编码复制酶基因:编码复制酶基因:编码复制酶基因:编码复制酶(4 4 4 4)溶菌基因:裂解蛋白)溶菌基因:裂解蛋白)溶菌基因:裂解蛋白)溶菌基因:裂解蛋白帜闻卜轿桂闭虱瓦群忻沿嘴盟临港忙峙崭盗獭烁神螺掂形拓忆悄亏再墟黑南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity2 2 2 2,R17R17R17R17噬噬噬噬菌菌菌

46、菌体体体体mRNAmRNAmRNAmRNA二二二二级级级级结构对翻译的影响结构对翻译的影响结构对翻译的影响结构对翻译的影响(1 1 1 1)R17R17R17R17正正正正链链链链RNARNARNARNA的的的的特特特特点点点点(2 2 2 2)基因的翻译的过程)基因的翻译的过程)基因的翻译的过程)基因的翻译的过程 CPCPCPCP基因的翻译基因的翻译基因的翻译基因的翻译 reprepreprep基因的翻译基因的翻译基因的翻译基因的翻译峻呛赶母齐首脂匡奸襄音饭显叶连跟祝猛豺驴窒报雹篮纽护钟臀锌棉杉猩南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity(3 3

47、3 3)R17R17R17R17正正正正链链链链RNARNARNARNA复复复复制制制制过过过过程程程程中中中中的的的的二二二二级结构对翻译的影响级结构对翻译的影响级结构对翻译的影响级结构对翻译的影响A A A A,R17R17R17R17正链正链正链正链RNARNARNARNA的复制的复制的复制的复制 RNARNARNARNA复复复复制制制制酶酶酶酶复复复复合合合合体体体体的的的的组组组组成成成成:由由由由R17R17R17R17噬噬噬噬菌菌菌菌体体体体RNARNARNARNA复复复复制制制制酶酶酶酶、寄寄寄寄主主主主T T T TU UU U、T T T TS SS S和和和和S1S1S1

48、S1蛋白组成蛋白组成蛋白组成蛋白组成 以原有的正链以原有的正链以原有的正链以原有的正链RNARNARNARNA为模板复制负链为模板复制负链为模板复制负链为模板复制负链 再以负链再以负链再以负链再以负链RNARNARNARNA为模板复制正链为模板复制正链为模板复制正链为模板复制正链卿区甚问继文血戈地伺寻兹弧淑宽肃粟美老奢获拖温摄粹钮热热坍绍梗蚕南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversityB B B B,R17R17R17R17正正正正链链链链RNARNARNARNA的的的的复复复复制制制制时时时时A A A A基基基基因因因因的的的的翻翻翻翻译(图译(图

49、译(图译(图8-308-308-308-30)A A A A位点:基因位点:基因位点:基因位点:基因A A A A核糖体结合位点核糖体结合位点核糖体结合位点核糖体结合位点 A A A A基基基基因因因因的的的的翻翻翻翻译译译译:R17mRNAR17mRNAR17mRNAR17mRNA复复复复制制制制过过过过程程程程中中中中,A A A A基基基基因因因因只只只只能能能能被被被被翻翻翻翻译译译译产产产产生生生生12121212个个个个蛋蛋蛋蛋白白白白质质质质分子分子分子分子 原原原原因因因因:A A A A位位位位点点点点在在在在转转转转录录录录出出出出来来来来后后后后,很很很很快快快快被互补序

50、列结合被互补序列结合被互补序列结合被互补序列结合惟硕润拒证滁列锁钧赦惠埠唉群摇篮细提巳扯锦粗杰壮落汉棵腑叭刚憨嚣南京大学分子生物学第19讲南京大学分子生物学第19讲NanjingUniversity(二二二二)mRNAmRNAmRNAmRNA二二二二级级级级结结结结构构构构对对对对自自自自身身身身寿寿寿寿命命命命的的的的影影影影响响响响1 1 1 1,影响,影响,影响,影响mRNAmRNAmRNAmRNA降解速度的因素降解速度的因素降解速度的因素降解速度的因素(1 1 1 1)mRNAmRNAmRNAmRNA降降降降解解解解不不不不是是是是内内内内切切切切酶酶酶酶随随随随机机机机切切切切割割割

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