富血小板血浆治疗卵巢早衰的研究进展.pdf

.1434生殖医学杂志2 0 2 3年9 月第32 卷第9 期DO1:10.3969/j.issn.1004-3845.2023.09.023综述富血小板血浆治疗卵巢早衰的研究进展胡倩瑜，王卓敏，吴唯，顾颖，孙涛，徐键*（浙江大学医学院附属第四医院生殖医学中心，义乌32 2 0 0 0）【摘要】卵巢早衰是一种在40 岁之前出现卵巢功能衰竭的生殖内分泌疾病。富血小板血浆是将动物或人的全血经过离心后去除红细胞及白细胞得到的富含高浓度血小板的血浆。近年来，许多研究表明富血小板血浆对卵巢具有保护作用。本文就卵巢早衰机制，富血小板血浆在氧化应激、卵泡发育、信号通路等层面对卵巢的作用等最新研究作一综述，探究富血小板血浆治疗卵巢早衰研究进展。【关键词】卵巢早衰；富血小板血浆；氧化应激；卵巢微环境【中图分类号】R711.6Research progress of platelet-rich plasma in treatment of premature ovarian failureHUQian-yu,WANG Zhuo-min,WU Wei,GUYing,SUNTao,XUJian*Reproductive Medicine Center,the Fourth Af filiated Hospital,Zhejiang University School of Medicine,Yiwu322000Abstract)Premature ovarian failure(POF)is a reproductive endocrine disease occurs before the ageof 40.Platelet-rich plasma is a plasma rich in high concentrations of platelets obtained by centrifugingwhole blood of animals or humans to remove red blood cells and white blood cells.In recent years,manystudies have shown that platelet-rich plasma has a protective effect on the ovary.This paper reviews themechanism of premature ovarian failure,the effect of platelet-rich plasma in oxidative stress,follicledevelopment,signaling pathways and other aspects of ovarian function,and explores the research progressof platelet-rich plasma in the treatment of premature ovarian failure.Key words Premature ovarian failure;Platelet rich plasma;Oxidative stress;Ovarian microenvironment(JReprodMed2023,32(09):1434-1438)卵巢早衰（premature ovarian failure,POF）是一、卵巢早衰的发病机制研究进展指在40 岁之前出现卵巢功能衰竭的一种生殖内分卵巢作为女性的性腺，其主要作用为分泌生殖泌疾病，以原发或继发性闭经为主要特征，伴随血清激素和产生卵母细胞。卵巢总卵泡数量有限且不可卵泡刺激素水平升高和雌激素水平降低，表现为潮补充 3。随着女性年龄的增长，卵泡数量逐年减少，热多汗、面部潮红、性欲低下等。其全球发病率约从胚胎时期的6 0 0 万7 0 0 万个生殖细胞消减至围1%2%,在我国发病率可达3%1。近年来，卵巢绝经期几千枚卵泡数量。若卵泡数量减少过快，可早衰的发病率逐年上升，发病年龄逐年提前，而女性能会导致卵巢早衰，但这个过程复杂，病因繁多，发的生育年龄逐年推后，生育问题成了国家社会难题，病机理不详。待解决。然而,卵巢早衰是一个递进过程。在早1.氧化应激与卵巢早衰：卵巢早衰与氧化应激期，患者体内仍残存一定数量的卵泡，若在此时及早进行干预，也许可以挽救其生育能力。有研究表明，富血小板血浆(platelet richplasma,PRP)具有保护卵巢功能的作用 2 。本文针对PRP的功能来探讨PRP治疗卵巢早衰的可能作用机制。【文献标识码】A业，（*通讯作者）【收稿日期】2022-12-14；【修回日期】2 0 2 3-0 3-0 7【基金项目】浙江省自然科学基金（LBD23H040001)【作者简介】胡倩瑜，女，浙江宁波人，硕士，医师，妇产科学专生殖医学杂志2 0 2 3年9 月第32 卷第9 期息息相关。氧化应激可引起异常卵泡闭锁，损害卵母细胞减数分裂，缩短端粒酶寿命，影响线粒体功能 4。线粒体功能障碍是衰老的标志之一，在线粒体中,存在一种蛋白酶可以去除错误折叠和聚集的蛋白质来维持蛋白质稳态和线粒体质量。若小鼠中线粒体蛋白酶缺失，将会导致卵巢卵泡数量减少和抗缪勒管激素降低，表现为卵巢早衰的临床症状。线粒体DNA是衡量线粒体功能的另一个指标，单个卵母细胞包含数十万个线粒体DNA，这些线粒体DNA可以提供足够的ATP来保证精卵结合并支持胚胎发育。线粒体DNA拷贝数会随着年龄的增长在各种组织中持续下降 5，但在卵巢早衰期间，线粒体DNA拷贝数下降速度会更快。2.卵巢周围环境的衰老：卵巢早衰不仅仅是卵母细胞的衰老，还包括周围环境的衰老 6 ，包括颗粒细胞及细胞外基质。颗粒细胞是组成卵泡的最大细胞群，是雌孕激素的主要来源 7。颗粒细胞可以分为两组：一组是紧邻基膜的壁层颗粒细胞，排卵后壁层颗粒细胞就变成黄体细胞的一部分，产生支持胚胎植入子宫内膜的孕激素；另一组是环绕在卵母细胞周围的卵丘细胞,它能够促使卵母细胞成熟 8 。在卵巢衰老过程中,颗粒细胞调亡坏死,影响miRNA功能作用，减少雌激素的分泌，最终导致卵泡闭锁。Jiang等 9 发现颗粒细胞中的m6AmRNA去甲基化酶可延缓卵巢衰老的进展，这也侧面说明颗粒细胞可影响卵巢功能。卵巢的细胞外基质（extracellular matrix,ECM)包含基底层、卵丘-卵母细胞复合体和基质。卵泡最初被卵巢基质包围，后从卵巢皮层移动到柔韧的髓质中发育生长，最终回到卵巢皮层排卵 10。卵巢基质中含有丰富的免疫细胞，其中最丰富的细胞是巨噬细胞。巨噬细胞可以经典地活化成M1，交替活化成M2表型。Zhang等 11发现随着年龄的增长，巨噬细胞的总数不会改变，M1/M2的比例却会改变，主要表现为M2巨噬细胞增加，M1巨噬细胞减少。前者在感染后期活跃，重塑ECM和促进组织修复,导致卵巢纤维化,是衰老的表现之一。后者存在于炎症的急性期,产生促炎细胞因子，如IL-6 和TNF-，在衰老卵巢中含量丰富。此外,除了M1和M2细胞外,在老年卵巢中还发现了独特的多核巨噬细胞群 12 。这些都暗示衰老卵巢周围微环境与免疫应答息息相关。3目前涉及卵巢早衰的信号通路：卵巢功能的:1435平衡往往由卵巢储备功能的消耗及原始卵泡的激活来决定 13。在原始卵泡的激活过程中，存在两条重要信号通路：PTEN/PI3K/Akt信号通路和FOXO3a的磷酸化L14。PT EN/PI3K/A k t 信号通路是控制原始卵泡募集和生长的信号通路之一，其主要作用是使细胞生长、分化和新陈代谢，以及维持基因组完整性。该信号通路加速，可能导致原始卵泡过度激活 15。非磷酸化的FOXO3a维持原始卵泡处于静止状态 5。反之，FOXO3a的过度磷酸化会导致原始卵泡的整体激活，进而卵巢早衰 10 。在这个过程中,颗粒细胞的雷帕霉素复合物1（mammalian targetof rapamycin,mTOR）可促进KIT配体产生，在卵母细胞中激活KIT和PI3K/Akt信号传导通路和FOXO3a磷酸化，不可逆地启动原始卵泡发育，从而导致卵巢早衰的发生。二、目前治疗卵巢早衰的策略目前POF的治疗手段繁多,在临床上常以激素补充治疗为主，辅以促排卵、生育力保存（胚胎、卵母细胞、卵巢组织冻存等)治疗等 16 。在基础研究中常有免疫疗法、干细胞疗法、体外活化、线粒体活化、干细胞和外泌体治疗、PRP等等 17-18 。三、PRP治疗卵巢早衰的机制正常人体的血小板计数在1.510 12 3.51012/L之间，主要起止血功能。富血小板血浆是将动物或人的全血经过离心后去除红细胞及白细胞得到的富含高浓度血小板的血浆，其血小板计数可达10101/L以上 19。血小板主要含颗粒及致密颗粒。颗粒的激活可释放30 0 种以上与再生相关的生物活性因子，比如：成纤维细胞生长因子（fibroblastgrowth factor,FGF）、血管内皮生长因子（vascularendothelial growth factor，V EG F)、血小板衍生生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)、转化生长因子(transforming growth factor,TGF)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、胰岛素样生长因子-1（insulin-likegrowthfactorl，IGF-I)、表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF)等 2 0 。这些生长因子具有促进血管生成 2 1，抗免疫炎症 2 2 等作用，这在一定程度上能恢复卵巢的组织形态、弹性和韧性，减少卵巢组织纤维化 2 3(表1)。1.PRP调控血管生成减少卵巢内氧化应激而保护卵巢组织：卵巢组织具有丰富的血管条件，其血供主要来自卵巢动脉以及子宫动脉的输卵管支，调.1436：控氧供平衡,为卵巢中窦卵泡的发育提供能量 2 4-2 5，而血管的生成与PDGF受体有关。在卵母细胞和颗粒细胞中均有PDGF受体的表达，大鼠卵巢中PDGF受体的抑制常导致卵泡闭锁增加，初级卵泡形成减少，以及卵巢内血管生成减少，最终导致卵巢早衰。同时,在一项卵巢老化的横断面研究中,卵巢早衰患者卵泡液中的PDGF的含量远较正常组低 2 6 。而PRP中的颗粒包含PDGF。A h ma d i a n等 2 1发现将PRP注射至卵巢组织中，可增加-平滑肌动蛋白血管单位，从而诱导卵巢组织血管形成，恢复卵巢早衰大鼠的排卵率，促进其恢复活力。Bakacak等 2 2 研究发现PRP对大鼠卵巢缺血和再灌注损伤具有保护作用，主要通过血管生成维持卵巢灌注,增加卵巢活力，减少白细胞聚集，防止由白细胞引起的自由基损伤从而达到抗氧化应激的作用。这些研究表明PRP具有调控血管生成的能力，可以减少卵巢内氧化应激，从而保护卵巢组织，延缓卵巢早衰进程。2.PRP可稳定卵巢微环境，为卵泡发育成熟提供条件：PRP中的致密颗粒可释放稳定组织内环境所必需的钙离子、血清素、组胺、多巴胺、二磷酸腺苷和三磷酸腺苷等 2 0。有研究表明：PRP可作为卵母细胞体外培养的胎牛血清替代品，具体而言，添加PRP的培养基支持卵母细胞中卵丘扩展、体外胚胎发育和囊胚冷冻存活，保护卵母细胞免受如线粒体活性PRP中的成分血管内皮生长VEGF是一种同源二聚糖蛋白的细胞因子,在几因子(VEGF)种组织中以各种类型表达，分子量约为45kDE37血小板衍生生PDGF是一系列30 kDa的二硫键聚合物或异源长因子(PDGF)二聚体，包括经典和丰富的A或B聚合物链。PDGF亚型与结构相似的跨膜糖蛋白结合，和蛋白酪氨酸激酶受体（PDGFR-和-），它们分别由10 8 9和110 6 个氨基酸残基组成 39转化生长因子活化的TGF-配体通常是由一个分子间二硫键(TGF)共价连接的二聚体，其特征是“半胱氨酸结”结构基序，其由三个分子内二硫键组成 41胰岛素样生长胰岛素样生长因子（IGF)系统包括IGF、I G F受因子-1(IGF-1)体和多种结合蛋白 42 生殖医学杂志2 0 2 3年9 月第32 卷第9 期降低及胞质内脂质的额外累积等的应激影响 2 7。另外，卵泡的发育需要多种因子的共同调节，其中许多因子都是PRP中所包含的。TGF-在卵泡发育中起关键性作用，包括募集原始卵泡，调控颗粒细胞和卵泡膜细胞增殖或者闭锁,生成类固醇,表达促性腺激素受体，促进卵母细胞成熟、排卵、黄体化等 2 8 。TGF-超家族中另含有生长分化因子9。生长分化因子9基因表达也被认为是卵母细胞成熟电位的生物标志物，其突变与卵巢早衰有关 2 9。PDGF可通过增加卵巢的血供延缓卵巢早衰的进展 2 1.30 1，而PDGF 靶基因的突变可影响卵巢功能和子宫形态等。IGF-1能与多种生物活性因子起协同作用,以外源性GnRH为例,IGF-1 能放大其在颗粒细胞和卵泡膜细胞上的作用，促进卵泡生长发育 31。3.PRP通过PI3K/Akt/PKB信号通路促进卵泡发育成熟：富血小板血浆中的多种因子可以通过PI3K/Akt/PKB信号通路促进卵泡发育成熟。较早可追溯至2 0 0 0 年，Taylor321研究发现，PRP中的PDGF可刺激PDGF-R的酪氨酸磷酸化,激活体内信号通路，包括PI3K/Akt/PKB和Ras/Raf/MEK/ERK等途径，使细胞生长加速和类固醇发生抑制，对体内卵泡发育和生长起重要作用。VEGF可结合并激活VEGF受体，从而激活PI3K/AKT/mTOR通路，PI3K/AKT通过磷酸化GSK3-信号使GSK3-失活，启表1PRP中的成分及机制结构特点VEGF及其受体在哺乳动物的卵巢中表达，例如卵巢卵泡、黄体、子宫内膜血管和胚胎植入部位。对细胞存活、增殖和卵泡发育产生积极影响，同时刺激一些类固醇激素（例如黄体酮)的分泌 38)促进血管生成,参与原始卵泡激活 40 通过旁分泌和自分泌途径调节细胞功能，包括增殖、细胞凋亡、分化、类固醇生成 L1IGF-1通过内分泌、自分泌或旁分泌机制对血管系统发挥多种生理作用。通过调节促调亡蛋白BimEL来抑制颗粒细胞的调亡。同时与其他因子起协同作用 43作用生殖医学杂志2 0 2 3年9 月第32 卷第9 期动内源性VEGF信号传导的激活，导致卵巢血管的血管重塑，并最终使卵泡生长发育33。有研究发现PRP可与酪氨酸激酶膜结合受体（receptortyrosinekinase,RTK)结合来调节细胞生长和增殖 34。RTK激活需要整合素受体能力 35，生长因子受体激活导致RTK亚群增强 36 。来自生长因子的信号与mTOR结合，激活下游丝氨酸、苏氨酸激酶p70S6k以激活休眠卵泡，促进卵泡生长发育。四、总结及展望目前临床上对于富血小板血浆的应用主要聚焦于皮肤学、整形外科和美容外科等，它的原理与再生医学息息相关 44，在生殖医学具有广泛的应用前景。PRP在卵巢早衰的应用，国内最早可追溯于2019年广州中医药大学的临床对照研究 45，但后续基础研究国内并未报导，并且对于PRP的来源、制备、激活国内外均无统一的标准。在来源上，富血小板血浆来源可简单分为成人外周血及脐带血。有研究证明,相同浓度下由脐带血制备的富血小板血浆中含有更多的生长因子，例如PDGF-AB,PDGF-BB和FGF-2,VEGF和趋化因子RANTES等 46 。这可能会使由脐带血制备的PRP治疗卵巢早衰具有更好的疗效。在制备上，低浓度PRP（约较正常血小板增加3倍)往往比高浓度的PRP（约较正常血小板增加7 倍)具有更好的治疗效果，这可能跟高浓度血小板存在负反馈机制相关 2 1。在激活方面，使用凝血酶或钙离子激活可使生长因子的组成改变。有些研究使用静止状态的富血小板血浆 47 ，有些研究使用活化后的富血小板血浆,对卵巢早衰的治疗都有益处，但缺乏深入的比较。目前大多数文献聚焦于卵巢早衰的治疗，但卵巢早衰是一个由量变引起质变的过程，防范于未然可能是更好的方式，富血小板血浆对卵巢的预防作用可能成为卵巢早衰的一个新兴研究方向。【参考文献】1张兵，刘金星，卵巢早衰的中西医临床研究及治疗进展 J.现代中西医结合杂志，2 0 2 0，2 9：36 43-36 48.2 Budak O,Bostanci MS,Toprak V,et al.Protective effects ofplatelet-rich plasma for in vitro fertilization of rats withovarian failure induced by cyclophosphamideJJ.Rev BrasGinecol Obstet,2022,44:161-168.3Fan X,Bialecka M,Moustakas I,et al.Single-cellreconstruction of follicular remodeling in the human adultovaryLJJ.Nat Commun,2019,10:3164.:14374 Wang L,Tang J,Wang L,et al.Oxidative stress in oocyteaging and female reproductionLJJ.J Cell Physiol,2021,236:7966-7983.5Chiang JL,Shukla P,Pagidas K,et al.Mitochondria inovarian aging and reproductive longevityJ.Ageing ResRev,2020,63:101168.6Camaioni A,Ucci MA,Campagnolo L,et al.The process ofovarian aging:it is not just about oocytes and granulosa cellsJ.JAssist Reprod Genet,2022,39:783-792.7He Y,Chen Q,Dai J,et al.Single-cell RNA-Seq reveals ahighly coordinated transcriptional program in mouse germcells during primordial follicle formation J.Aging Cell,2021,20:e13424.8 Zhang J,Xu Y,Liu H,et al.MicroRNAs in ovarian follicularatresia and granulosa cell apoptosis J.Reprod BiolEndocrinol,2019,17:9.9 Jiang ZX,Wang YN,Li ZY,et al.The m6A mRNAdemethylase FTO in granulosa cells retards FOS-dependentovarian agingLJJ.Cell Death Dis,2021,12:744.1o Fabregues F,Ferreri J,Mendez M,et al.In Vitro follicularactivation and stem cell therapy as a novel treatment strategies indiminished ovarian reserve and primary ovarian insufficiencyJ.Front Endocrinol(Lausanne),2020,11:617704.112Zhang Z,Schlamp F,Huang L,et al.Inflammaging is associatedwith shifted macrophage ontogeny and polarization in the agingmouse ovaryLJJ.Reproduction,2020,159:325-337.12 Ewald CY.The matrisome during aging and longevity:Asystems-level approach toward defining matreotypespromoting healthy agingJ.Gerontology,2020,66:266-274.13 Zhang T,He M,Zhao L,et al.HDAC6 regulates primordialfollicle activation through mTOR signaling pathwayLJJ.CellDeathDis,2021,12:559.14Estienne A,Bongrani A,Rame C,et al.Energy sensors andreproductive hypothalamo-pituitary ovarian axis（H PO)i nfemale mammals:Role of mTOR（m a m m a li a n t a r g e t o frapamycin),AMPK(AMP-activated protein kinase)and SIRT1(Sirtuin 1)J.Mol Cell Endocrinol,2021,521:111113.15Maidarti M,Anderson RA,Telfer EE.Crosstalk betweenPTEN/PI3K/Akt signalling and DNA damage in the oocyte:Implications for primordial follicle activation,oocyte qualityand ageingJ.Cells,2020,9:200.16王丽媛，甄秀梅，王丽娜，等，卵巢储备功能减退患者辅助生殖技术前预处理的研究进展 J.生殖医学杂志，2 0 2 2，31：1601-1606.17 1Huang QY,Chen SR,Chen JM,et al.Therapeutic options forpremature ovarian insufficiency:an updated review J.Reprod Biol Endocrinol,2022,20:28.18Ghahremani-Nasab M,Ghanbari E,Jahanbani Y,et al.Premature ovarian failure and tissue engineeringJJ.J CellPhysiol,2020,235:4217-4226.19 Atkinson L,Martin F,Sturmey RG.Intraovarian injection of1438：platelet-rich plasma in assisted reproduction:too much toosoon?J.HumReprod,2021,36:1737-1750.201Hajipour H,Farzadi L,Latifi Z,et al.An update on platelet-rich plasma(PRP)therapy in endometrium and ovary relatedinfertilities:clinical and molecular aspects J.Syst BiolReprod Med,2021,67:177-188.21Ahmadian S,Sheshpari S,Pazhang M,et al.Intra-ovarianinjection of platelet-rich plasma into ovarian tissue promotedrejuvenation in the rat model of premature ovarianinsufficiency and restored ovulation rate via angiogenesismodulationJJ.Reprod Biol Endocrinol,2020,18:78.22Bakacak M,Bostanci MS,inanc F,et al.Protective effect ofplatelet rich plasma on experimental is chemia/reperfusion injuryin rat ovaryLJJ.Gynecol Obstet Invest,2016,81:225-231.231Dehghani F,Aboutalebi H,Esmaeilpour T,et al.Effect ofplatelet-rich plasma（PRP）o n o v a r i a n s t r u c t u r e s i ncyclophosphamide-induced ovarian failure in female rats:astereological studyLJJ.Toxicol Mech Methods,2018,28:653-659.24Timmerman S,Van Calster B,Froyman W.Lesions of theovary and fallopian tubeJJ.N Engl J Med,2022,387:1723.25McKey J,Anbarci DN,Bunce C,et al.Integration of mouse ovarymorphogenesis with developmental dynamics of the oviduct,ovarian ligaments,and rete ovariLJJ.Elife,2022,11:e81088.26Bouet PE,Boueilh T,de la Barca J,et al.The cytokine profileof follicular fluid changes during ovarian ageingLJ.J GynecolObstet Hum Reprod,2020,49:101704.271Moulavi F,Akram RT,Khorshid Sokhangouy S,et al.Platelet rich plasma efficiently substitutes the beneficialeffects of serum during in vitro oocyte maturation and helpsmaintain the mitochondrial activity of maturing oocytesJJ.GrowthFactors,2020,38:152-166.28Li Q,Huo Y,Wang S,et al.TGF-l regulates the lncRNAtranscriptome of ovarian granulosa cells in a transcriptionactivity-dependent mannerJ.Cell Prolif,2023,56:el3336.29Otsuka F,McTavish KJ,Shimasaki S.Integral role of GDF-9and BMP-15 in ovarian functionJ.Mol Reprod Dev,2011,78:9-21.30Park H,Seok J,You JH,et al.Increased phosphataseregenerating liver-1 trigger vascular remodeling in injuredovary via platelet-derived growth factor signaling pathwayJJ.Stem Cell Res Ther,2022,13:95.31Valsamakis G,Valtetsiotis K,Charmandari E,et al.GnRHanalogues as a co-treatment to therapy in women of reproductiveage with cancer and fertility preservationJ.Int J Mol Sci,2022,23:2287.32Taylor CC.Platelet-derived growth factor activates porcinethecal cell phosphatidylinositol-3-kinase-Akt/PKB and ras-extracellular signal-regulated kinase-1/2 kinase signalingpathways via the platelet-derived growth factor-beta receptorJJ.Endocrinology,2000,141:1545-1553.33Cho J,Kim TH,Seok J,et al.Vascular remodeling by生殖医学杂志2 0 2 3年9月第32 卷第9期placenta-derived mesenchymal stem cells restores ovarianfunction in ovariectomized rat model via the VEGF pathwayJ.LabInvest,2021,101:304-317.34El Bakly W,Medhat M,Shafei M,et al.Optimized plateletrich plasma releasate(O-rPRP)repairs galactosemia-inducedovarian follicular loss in rats by activating mTOR signalingand inhibiting apoptosisLJJ.Heliyon,2020,6:e05006.35Shi Z,Li X,Wei M,et al.Receptor tyrosine kinases-instructed release of its inhibitor from hydrogel to delayovarian agingLJJ.Biomaterials,2021,269:120536.361Ivaska J,Heino J.Interplay between cell adhesion andgrowth factor receptors:from the plasma membrane to theendosomesJJ.Cell Tissue Res,2010,339:111-120.37Apte RS,Chen DS,Ferrara N.VEGF in signaling anddisease:beyond discovery and developmentJJ.Cell,2019,176:1248-1264.38 Araujo VR,Duarte AB,Bruno JB,et al.Importance ofvascular endothelial growth factor（VEG F）i n o v a r i a nphysiology of mammalsJ.Zygote,2013,21:295-304.392Zou X,Tang XY,Qu ZY,et al.Targeting the PDGF/PDGFRsignaling pathway for cancer therapy:A reviewJJ.Int J BiolMacromol,2022,202:539-557.4o Pascuali N,Scotti L,Abramovich D,et al.Inhibition ofplatelet-derived growth factor（PD G F）r e c e p t o r a f f e c t sfollicular development and ovarian proliferation,apoptosis andangiogenesis in prepubertal eCG-treated rats JJ.Mol CellEndocrinol,2015,412:148-158.41Tzavlaki K,Moustakas A.TGF-signaling JJ.Biomolecules,2020,10:487.42Han Y,Wang S,Wang Y,et al.IGF-1 inhibits apoptosis ofporcine primary granulosa cell by targeting degradation ofBimELJJ.Int JMolSci,2019,20:5356.43Silva JR,Figueiredo JR,van den Hurk R.Involvement ofgrowth hormone(GH)and insulin-like growth factor(IGF)system in ovarian folliculogenesisJJ.Theriogenology,2009,71:1193-1208.44Chamata ES,Bartlett EL,Weir D,et al.Platelet-rich plasma:evolving role in plastic surgeryJ.Plast Reconstr Surg,2021,147:219-230.45陈琪琦，曾丽华，林伟龙，等。富含血小板血浆治疗卵巢早衰的疗效研究 J.广东药科大学学报，2 0 19，35：448-450.46Baba K,Yamazaki Y,Sone Y,et al.An in vitro long-termstudy of cryopreserved umbilical cord blood-derived platelet-rich plasma containing growth factors-PDGF-BB,TGF-,andVEGFLJJ.JCraniomaxillofac Surg,2019,47:668-675.47Pantos K,Simopoulou M,Pantou A,et al.A case series onnatural conceptions resulting in ongoing pregnancies in menopausaland prematurely menopausal women following platelet-rich plasmatreatmentJJ.Cell Transplant,2019,28:1333-1340.编辑：张蔚