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,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2021/4/22,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,1,生物:,2.1,微生物的实验室培养,(,新人教版选修,第,1,页,/,共,20,页,粉状硫,10g,K,2,HPO,4,4g,FeSO,4,0.5g,蔗糖,10g,(,NH,),2,SO,4,0.4g,H,2,O,100mL,MgSO,4,9.25g,CaCI,2,0.5g,+,+,+,+,-,+,+,+,+,+,+,-,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,2,巩固检测,巩固检测,巩固检测,1,、甲、乙、丙是三种微生物,下表、是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在中正常生长繁殖;甲能在中正常生长繁殖,而乙和丙都不能;乙能在中正常生长繁殖,甲、丙都不能。下列说法正确的是:,A,、甲乙丙都是异养微生物,B,、甲乙都是自养微生物、丙是异养微生物,C,、甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物,D,、甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物,第,2,页,/,共,20,页,3,巩固检测,巩固检测,巩固检测,2,、培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是:,化学消毒 灼烧灭菌 干热灭菌 紫外线灭菌,高压蒸汽灭菌 巴氏消毒法,A,、,B,、,C,、,D,、,第,3,页,/,共,20,页,4,新课:,新课:,三、纯化大肠杆菌,实验目的:,接种大肠杆菌于培养基上,经过培养使其形成由单个细胞繁殖形成的子细胞群体,即菌落。,实验过程:,(,知识网络),配制培养基,接种大肠杆菌,恒温培养箱中培养(,1224h,),结果分析与评价,计算 称量 溶化 灭菌 倒平板,调,PH,分装 包扎,菌种保藏,平板划线,稀释涂布平板,未接种的培养(对照组),接种的培养(实验组),培养基配制成功与否?,接种操作成功与否?,第,4,页,/,共,20,页,配制培养基,在火焰旁右手拿锥形瓶,左手拔出棉塞;,右手拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰;,左手将培养皿打开一条缝隙,右手将培养基倒入培养皿,立刻盖上皿盖。,待平板冷却凝固后,将平板倒过来放置。,5,倒平板过程总结:,第,5,页,/,共,20,页,配制培养基,6,分析:,1,、培养基高压蒸汽灭菌后,需冷却到,_,左右时,才能倒平板。用什么办法来估计培养基的温度?,_,2,、操作时锥形瓶口通过酒精灯火焰的目的是:,_,3,、将平板倒置的目的是:,_,4,、在倒平板过程中,将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?,_,50,感觉锥形瓶的温度刚刚不烫手,就可以倒平板了,防止瓶口微生物污染培养基,既可以使培养基表面冷凝的水分更好的挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染,不能,因为空气中的微生物可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生。,第,6,页,/,共,20,页,平板划线接种,原理,通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。,7,第,7,页,/,共,20,页,_,问题3:划线结束后灼烧接种环的目的:,_,甲能在中正常生长繁殖,而乙和丙都不能;,纯化大肠杆菌(重点内容),3、将平板倒置的目的是:,1、培养基制备成功的标准,用什么办法来估计培养基的温度?_,2、甘油冷冻管保藏:适用于需长期保存的菌种。,答案:杀死上次划线结束后残留的菌种,高压蒸汽灭菌 巴氏消毒法,待平板冷却凝固后,将平板倒过来放置。,恒温培养箱中培养(1224h),如果未接种的培养基在恒温箱中保温12天后无菌落生长,说明培养基配制是成功的,否则实验失败,需重新配制。,右手拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰;,如果未接种的培养基在恒温箱中保温12天后无菌落生长,说明培养基配制是成功的,否则实验失败,需重新配制。,3、将平板倒置的目的是:,平板划线接种,8,灼烧接种环,冷却,划线,(第一区域),蘸取菌液,灼烧接种环,冷却,划线,(第二区域),灼烧接种环,冷却,划线,(第三区域),灼烧接种环,冷却,划线,(第四区域),灼烧接种环,冷却,划线,(第五区域),灼烧接种环,平板倒置放置培养,第,8,页,/,共,20,页,9,平板划线接种,第一区域,第二区域,第三区域,第四区域,第五区域,第,9,页,/,共,20,页,平板划线接种,10,问题,2,:每次划线前灼烧接种环的目的:,问题,3,:划线结束后灼烧接种环的目的:,答案:避免接种环上可能存在的微生物污染培养基,答案:杀死上次划线结束后残留的菌种,答案:及时杀死接种环上残留的菌种,避免污染环境和操作者。,问题,1,:第一步灼烧接种环的目的:,第,10,页,/,共,20,页,稀释涂布平板接种,原理:,将菌液进行一系列梯度稀释,并将不同稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养。当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成的,标准菌落,。,11,第,11,页,/,共,20,页,稀释涂布平板接种,12,1,、梯度稀释,2,、涂布平板,第,12,页,/,共,20,页,结果分析与评价,1,、培养基制备成功的标准,13,2,、接种操作成功的标准,如果未接种的培养基在恒温箱中保温,12,天后无菌落生长,说明培养基配制是成功的,否则实验失败,需重新配制。,如果培养基上生长的菌落颜色、性状、大小基本一致,并符合大肠杆菌菌落的特点,则说明操作是否和要求的。如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中,无菌操作还未达到要求,实验失败,需分析原因,再次实验。,第,13,页,/,共,20,页,菌种的保藏(了解),1,、,临时保藏,:适用于频繁使用的菌种。将菌种接种到固体斜面培养基,在适宜的温度下培养。当菌落长成后,将试管置于,4,的冰箱中保藏,2,、,甘油冷冻管保藏:,适用于需长期保存的菌种。在,3mL,甘油瓶中,装入,1mL,甘油灭菌。将,1mL,培养的菌液转移到甘油瓶中,与甘油充分混匀,放,-20,的冷冻箱中保藏,14,第,14,页,/,共,20,页,A、B、,既可以使培养基表面冷凝的水分更好的挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染,纯化大肠杆菌(重点内容),高压蒸汽灭菌 巴氏消毒法,_,2、培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是:,纯化大肠杆菌(重点内容),防止瓶口微生物污染培养基,1、培养基制备成功的标准,如果培养基上生长的菌落颜色、性状、大小基本一致,并符合大肠杆菌菌落的特点,则说明操作是否和要求的。,本节内容结束 下节再见!,15,第,15,页,/,共,20,页,纯化大肠杆菌,(重点内容),16,第,16,页,/,共,20,页,微生物实验室培养,(知识点总结),17,第,17,页,/,共,20,页,李大霄最新股市评论,第,18,页,/,共,20,页,19,巩固检测,巩固检测,巩固检测,2,、培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是:,化学消毒 灼烧灭菌 干热灭菌 紫外线灭菌,高压蒸汽灭菌 巴氏消毒法,A,、,B,、,C,、,D,、,第,19,页,/,共,20,页,平板划线接种,原理,通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。,20,第,20,页,/,共,20,页,
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