提高抗酸性染色检出率的经验谈.ppt

,按一下以編輯母片本文樣式,第二階層,第三階層,第四階層,第五階層,*,按一下以編輯母片標題樣式,提高抗酸性染色检出率的经验谈,结核病之诊断,病史、症状、医师之理学检查,结核菌素皮肤试验,在高感染率或卡介苗普及率之国家并不适用：台湾。,胸部,X,光检查,凭藉医师之专业及经验，一致性并不高。,结核菌学检查,较具科学且较为简易之方法，惟训练不足时，伪阳性或,伪阴性之发生会影响诊断之正确性。,病理学检查,属侵入性，不容易作。,其他,PCR,、血清学检查等。,Causes significant morbidity and mortality in the world,From,Talaro,Fundations,in Microbiology,4th ed.,2002.,morbidity,mortality,全球现况,全球每年约有,300,万人死于结核病,约,300,万人死于爱滋病，其中爱滋病人死于结核病约占,1/3,。,全球约有,1/3,人口已受结核菌感染,每年约有,800,万人新发生结核病，,其中台湾约占,15,000,人。,卫生署疾管局结核病组调查,台湾现况,台湾地区新发生的结核病人,每年大约有一万五千个新病例发生。,其中五千多人是有传染性的结核病人。,病人如不规则接受治疗，结核菌将产生抗药性，以致有效的药物越来越少，结核病的治疗越来越困难。,结核病的防治,迅速治愈病人，切断传染源，结核病的防治成效才会大幅度改善。,卫生署疾管局结核病组调查,台湾现况问题分析,痰液检体的品质,采取方式不正确，造成检验结果不正确或无法检验。,痰液检验套数不足,标准应连续采取三套，目前还是有只采取一套送检。,痰抹片制作品质不良,涂抹太厚太薄或涂抹范围不够。,痰液涂片、培养方法不一致,卫生署疾管局结核病组调查,台湾现况问题分析,医检师认知,医检人员认为结核菌检验的风险较高，大多数医院皆采用轮调方式，致操作技术不稳定，结果歧异性大。,结果报告发出时间过迟,无法提供医师适时的诊断进行妥适的治疗。,健保给付不敷成本，致医疗院所检验意愿低落,卫生署疾管局结核病组调查,结核菌检查时效性,美国疾病管制局,(CDC),公布,抗酸性染色抹片显微镜检查结果，应于,24,小时内报告给临床医师。,结核菌培养及鉴定结果，应于,1014,日内提供给临床医师。,结核菌药物敏感性试验结果，应于,1530,日内提供给临床医师。,分枝杆菌检查的种类和特性,代表方法,优点,缺点,涂片检查,Ziehl-Neelsen,法,萤光染色法,迅速,敏感度低,无法鉴定菌种,有伪阳性,培养检查,L-J,Madia,MGIT,法,敏感性高,可进行菌种鉴定和药物感受性试验,时间长,核酸增幅检查,PCR,法,MTD,迅速、敏感性高,菌种的确定,费用昂贵,提高结核病检验品质,检验流程标准化,编辑结核菌检验手册提供全国各实验室作为,检验参考指引。,检验流程统一标准化，制作,SOP,供实验参考执行。,办理操作训练及研讨会。,教育宣导,加强验痰普及率，提高痰液检体品质。,实验室品管辅导管理,实地访查辅导,卫生署疾管局结核病组调查,影响抗酸性抹片检查检出率,检体量,咳痰品质,口水或脓性痰液。,抹片制作方法,直接抹片法,(Direct smear),。,厚缩抹片法,(Concentration smear),。,抹片染色法,Ziehl-Neelsen,染色法,(,热染法,),。,Kinyoun,染色法,(,冷染法,),。,萤光染色法。,抗酸性抹片检查之检体量,痰液检体：,3mL,。,胃内容物：,510mL,。,脑脊髓液：最少,2mL,。,胸水、腹水、心包膜液：最少,20mL,。,支气管刷取液,(BALF,，,BW),：最少,5mL,。,血液：,35mL,。,其他检体：脓、组织,。,卫生署疾管局结核菌检验手册,痰液品质,痰液品质的好坏是为了确保抗酸性抹片检查的信赖度,采痰前的患者卫教,喀痰前尽可能除去口腔内常在菌的影响,(,刷牙、漱口,),。,尽量喀取深部的痰液。,必要时使用高张生理食盐水,(35%),喷雾器诱发咳痰。,痰液的品质管理,记录肉眼外观对咳出痰液的品质评价,Miller&Jones,分类法,M1,：只有口水和黏液性的痰液。,M2,：黏液性痰液中含少量的脓性痰。,P1,：脓性痰液约占,1/3,。,P2,：脓性痰液约占,2/3,。,P3,：脓性痰液占,2/3,以上。,Roelsgard,E,等人研究发现脓性部份的痰液比口水或黏液痰液检出率相差,19,倍,痰涂片检测分枝杆菌方法,防止感染,抹片制作过程一律在生物安全操作箱中进行。,标准抹片制作,涂抹范围：长,20mm,宽,15mm,。,直接抹片法,(Direct smear),制作方便、快速，急作时才使用。,敏感性低,(1,104/mL),。,厚缩抹片法,操作麻烦费时。,提高检出率。,影响抗酸性抹片检查检出率,抹片染色法,Ziehl-Neelsen,染色法,(,热染法,),及,Kinyoun,染色法,(,冷染法,),敏感性,5,00010,000 bacilli/,mL,。,萤光染色法敏感性,1001,000 bacilli/,mL,。,痰涂片结果判读,记录,/,报告,萤光法,(200 x),抗酸性染色法,(1,000 x),0/30,视野,0/300,视野,12/30,视野,13/300,视野,1+,220/10,视野,19/100,视野,2+,20/10,视野,10/100,视野,3+,100/1,视野,10/1,视野,分枝杆菌检查实验室品管,痰涂片内部品管,试剂品管,设备,(,施,),品管,操作步骤,检体收集报告工作流程,人员训练与再教育品管,品管月报表,外部品管,(EQA),医事检验学会,疾病管制局,国际组织,(CAP),提高抗酸性染色检出率的经验涂抹标本的评估,项目,判定法,容许范围,痰液品质,100,倍镜检时,每一视野,PMN,25,涂抹范围,肉眼,20mm 15mm,涂抹均一性,肉眼,涂抹面皆一致性,标本厚薄度,镜检时,单层细容易观察胞,染色性,镜检时,结核菌,(,红色,),，背景,(,蓝色,),标本的污染,肉眼、镜检时,有无染色液杂质沈着,提高痰液直接抹片检出率之经验,使用时机：急作时,适用单位：无法制作厚缩抹片法之检验室,制作注意事项：,使用尖端折断之竹棒。,挑取具有脓性部份的痰液制作抹片。,抹片制作范围：,20mm,15mm,。,使用热染法染色。,细心观察全部范围。,阴性抹片查核,(10%),。,提高液体性直接抹片检出率之经验,适用之检体：尿液、体液、胃内容物、支气管洗净液,离心机之使用：,3000 rpm,20,分钟,抹片制作范围：,20mm,15mm,染色法：同前,注意事项：,尿液检体：连续三天送验。,胸水检体：革兰氏染色检查若发现有许多杂菌时，应特别注意抗酸菌之观察,(2030%),。,提高,C.S.F,直接抹片检出率之经验,医师若强烈怀疑结核菌脑膜炎，建议细菌室可将,CSF,检体多分装一支静置,其中一支检体依照正常程序进行细菌学检查,另一支静置之检体观察是否有产生,fibrin,小心将,fibrin,倒在玻片上,(,千万不可使用接种环挑取,fibrin),。,使用无菌,drop,或无菌纱布吸取,fibrin,周围多余之液体。,静置抹片，使其乾燥固定。,进行染色及镜检。,提高组织检体直接抹片检出率之经验,将组织置入无菌研钵中，以无菌手术刀片切成细块。,以研钵棒将组织尽可能的磨碎磨细。,取已磨碎磨细之组织制作抹片及其他之微生物学检查。,采取肋膜组织制作抹片检查抗酸菌，将比一般只取肋膜积水的检出率高。,歇后语,-,经验谈,检验检查是良心事业！,医检工？医检师？,热爱医检工作？,谢谢大家！,