高考生物复习专题十一生物技术实践考点32酶的应用DNA的粗提取与鉴定全国公开课一等奖百校联赛示范课赛.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,考点,32,酶应用、,DNA,粗提取与判定,第一篇,专题十一生物技术实践,第1页,静悟提要,酶应用,探讨加酶洗衣粉洗涤效果,酶和酵母细胞固定化,第2页,1.,构建酶应用网络,关键点拨,第3页,易错警示,(1),直接使用酶、固定化酶和固定化细胞比较,项目,直接使用酶,固定化酶,固定化细胞,适用方法,物理吸附法或化学结正当,包埋法,营养,不需要,不需要,需要,缺点,酶易失活，难以回收，影响产品质量,只能催化一个化学反应,反应物不易于接触，反应效率下降,优点,催化效率高，低能耗，低污染,能够回收利用，提升产品质量,成本低，操作轻易,实例,果胶酶,固定化葡萄糖异构酶,固定化酵母菌细胞,第4页,(2),制备固定化酵母菌细胞,2,点说明,试验注意事项,a.,海藻酸钠溶化时要用小火或间断加热，防止海藻酸钠发生焦糊。,b.,将溶化好海藻酸钠溶液先冷却至室温，再与酵母菌细胞混合，防止高温杀死酵母菌细胞。,c.,制备固定化酵母菌细胞时，应将配制好混合液用注射器迟缓滴加到,CaC1,2,溶液中，而不是注射，以免影响凝胶珠形成。,海藻酸钠溶液浓度对包埋酵母菌细胞数量影响,a.,浓度过高，将极难形成凝胶珠。,b.,浓度过低，形成凝胶珠所包埋酵母菌细胞数量少。,第5页,2.DNA,粗提取与判定操作流程,材料选取：选取,DNA,含量相对较高生物组织,破碎细胞,(,以鸡血为例,),：鸡血细胞,加蒸馏水,用玻璃棒,搅拌,用纱布过滤,搜集滤液,去除杂质：利用,DNA,在不一样浓度,NaCl,溶液中溶解度不一样，经过控制,NaCl,溶液浓度去除杂质,第6页,DNA,析出：将处理后溶液过滤，加入与滤液体积相等、冷却体,积分数为,95%,酒精溶液,DNA,判定：在溶有,DNA,溶液中加入二苯胺试剂，混合均匀后将试管,置于沸水中加热,5 min,，溶液变成蓝色,第7页,易错警示,DNA,粗提取与判定试验中,“,2,、,4,、,4,”,加蒸馏,水,2,次,加到鸡血细胞液中，使血细胞吸水涨破；加到含DNA2 mol/LNaCl溶液中，使NaCl溶液物质量浓度稀释到0.14 mol/L，使DNA析出,第8页,用纱布,过滤,4,次,过滤血细胞破裂液，得到含细胞核物质滤液；过滤用2 mol/LNaCl充分溶解DNA，滤去溶液中杂质；滤取0.14 mol/LNaCl溶液中析出DNA(黏稠物)；过滤溶有DNA2 mol/LNaCl溶液,用,NaCl,溶液,4,次,加2 mol/LNaCl溶液，溶解提取细胞核物质；用0.14 mol/LNaCl溶液使DNA析出；用2 mol/LNaCl溶液，溶解滤取DNA黏稠物；用2 mol/LNaCl溶液，溶解丝状物用于判定DNA,第9页,题组特训,题组一酶应用,1,2,3,4,5,1.(,江苏七市三模,),下表是某校兴趣小组以某品牌洗衣粉为材料进行试验探究，相关叙述正确是,(,多项选择,),试验组,洗涤物,(,等量,),洗涤温度,洗衣粉,(,等量,),水量,洗净污渍所需时间,1,油污布,30,加酶,2 L,4 min,2,油污布,30,普通,2 L,7 min,3,油污布,5,加酶,2 L,9 min,4,油污布,5,普通,2 L,8 min,第10页,A.,各组试验中洗涤物、水量相同可预防无关变量差异影响试验结果,B.,本研究课题之一是探究某品牌加酶洗衣粉最适洗涤温度,C.,在观察污渍是否洗净时，要先将洗涤物用清水漂洗几次，晾干后再观察,D.,试验结果表明添加酶制剂和适当升高洗涤温度有利于提升去污效果,解析,1,2,3,4,5,答案,第11页,解析,分析表格信息可知，该试验自变量为洗涤温度、加酶洗衣粉和普通洗衣粉，其它变量如水量、洗涤物等为无关变量，无关变量改变会影响试验结果，,A,正确，,B,错误；,洗涤物用清水漂洗后可洗去附着在洗涤物上污渍，晾干后更易观察比较，,C,正确；,从表中信息可知添加酶制剂和适当升高洗涤温度有利于提升去污效果，,D,正确。,1,2,3,4,5,第12页,1,2,3,4,5,2.(,江苏苏、锡、常、镇三模,),以下关于酶制剂和固定化酵母细胞叙述，正确是,A.,从酶固定方式看，吸附法比交联法对酶活性影响大,B.,可用海藻酸钠包埋消化酶制成多酶片用于缓解消化不良症状,C.,将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，主要目标是预防杂菌污染,D.,探究不一样加酶洗衣粉洗涤效果试验中，水温和浸泡时间都属于无关,变量,解析,答案,第13页,解析,交联法是将酶相互连接起来，而吸附法是将酶吸附在载体表面上，可见交联法对酶活性影响较大，,A,错误；,消化酶分子较小，易从包埋材料中漏出，所以普通不用包埋法固定消化酶，,B,错误；,将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，主要目标是洗去,CaCl,2,，,C,错误；,探究不一样加酶洗衣粉洗涤效果试验中，不一样加酶洗衣粉是试验自变量，而水温和浸泡时间等都属于无关变量，,D,正确。,1,2,3,4,5,第14页,3.(,南通考前卷,),某科研小组采取,80,水浴溶化海藻酸钠，固定黑曲霉孢子,(,含,-,葡萄糖苷酶,),，并进行相关催化试验，请分析回答下列问题：,(1),此试验过程中采取,80,水浴代替小火或者间断加热法溶化海藻酸钠，其优点是,_,_,。溶化海藻酸钠加入黑曲霉孢子悬浮液前一定要进行,_,处理，海藻酸钠最终质量分数需控制在,3%,，原因是,_,_,。,1,2,3,4,5,答案,解析,80,水浴加热能准确控制温度，溶化过程不会出现焦糊，且溶化时间短,冷却,海藻酸钠浓度太高,不易形成凝胶珠，浓度太低包埋黑曲霉孢子少,第15页,解析,此试验过程中采取,80,水浴代替小火或者间断加热法溶化海藻酸钠，其优点是,80,水浴加热能准确控制温度，溶化过程不会出现焦糊，且溶化时间短。溶化海藻酸钠加入黑曲霉孢子悬浮液前一定要进行冷却处理，以免杀死黑曲霉孢子。海藻酸钠最终质量分数需控制在,3%,原因是海藻酸钠浓度太高不易形成凝胶珠，浓度太低包埋黑曲霉孢子少。,1,2,3,4,5,第16页,(2),试验过程中，初形成凝胶珠放在,CaCl,2,溶液中静置,30 min,，目标是,_,。,形成稳定网状凝胶结构,解析,试验过程中，初形成凝胶珠放在,CaCl,2,溶液中静置,30 min,目标是形成稳定网状凝胶结构。,答案,解析,1,2,3,4,5,第17页,(3)-,葡萄糖苷酶能催化大豆苷水解为大豆苷元，,pH,和温度对游离孢子和固定化凝胶珠中,-,葡萄糖苷酶活性影响结果如图表所表示，由图表可知：研究,pH,和温度对葡萄糖苷酶活性影响时，温度和,pH,应分别控制为,_,、,_,；与游离孢子相比，固定化凝胶珠中,-,葡萄糖苷酶,pH,适宜范围,_,，热稳定性,_,。,30,4.8,增大,提升,答案,1,2,3,4,5,第18页,处理温度,/,转化率,游离孢子,固定化凝胶珠,30,100,100,40,99,100,50,98,99,60,65,98,70,29,92,80,5,50,90,0,10,解析,1,2,3,4,5,第19页,解析,分析表格可知，当处理温度为,30,时，游离孢子和固定化凝胶珠转化率均最高，随温度升高，游离孢子转化率降低幅度较固定化凝胶珠转化率降低幅度大；分析曲线图可知，当,pH,为,4.8,时，游离孢子和固定化凝胶珠转化率均最高，,pH,高于或低于,4.8,时，游离孢子转化率降低幅度较固定化凝胶珠转化率降低幅度大。可见，研究,pH,和温度对葡萄糖苷酶活性影响时，温度和,pH,应分别控制为,30,、,4.8,。与游离孢子相比，固定化凝胶珠中,-,葡萄糖苷酶,pH,适宜范围增大，热稳定性提升。,1,2,3,4,5,第20页,题组二,DNA,技术,4.,某同学用洋葱进行,DNA,粗提取和判定试验，以下操作错误是,A.,加入洗涤剂后用力进行快速、充分研磨,B.,用蛋白酶纯化过滤后研磨液中,DNA,C.,加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌,D.,加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热,1,2,3,4,5,解析,破碎植物细胞时，加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和，不然轻易产生大量泡沫，不利于后续步骤操作，,A,错误。,解析,答案,第21页,5.,某生物兴趣小组开展,DNA,粗提取相关探究活动，详细步骤以下。,材料处理：称取新鲜花菜、辣椒和蒜黄各,2,份，每份,10 g,。剪碎后分成两组，一组置于,20,、另一组置于,20,条件下保留,24 h,。,DNA,粗提取：第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入,15 mL,研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤，取滤液备用。,第二步：先向,6,只小烧杯中分别注入,10 mL,滤液，再加入,20 mL,体积分数为,95%,冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。,1,2,3,4,5,第22页,第三步：取,6,支试管，分别加入等量质量浓度为,2 molL,1,NaCl,溶液溶解上述絮状物。,DNA,检测：在上述试管中各加入,4 mL,二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸水浴中加热,5 min,，待试管冷却后比较溶液颜色深浅，结果,(,如表,),。,材料保留温度,花菜,辣椒,蒜黄,20,20,注：,“,”,越多表示颜色越深。,1,2,3,4,5,第23页,分析上述试验过程，回答下面问题：,(1),该探究性试验课题名称是：,_,_,。,探究不一样材料和不一样保留温度对,DNA,提取量影响,解析,由表格可知，该试验自变量是不一样材料和不一样保留温度，所以该探究性试验课题名称是探究不一样材料和不一样保留温度对,DNA,提取量影响。,解析,答案,1,2,3,4,5,第24页,(2),第二步中,“,缓缓地,”,搅拌，这是为了降低,_,。,DNA,断裂,解析,第二步中,“,缓缓地,”,搅拌，这是为了降低,DNA,断裂。,解析,答案,1,2,3,4,5,第25页,(3),表中颜色为,_,色，颜色深浅代表了,_,。,蓝,DNA,含量多少,解析,在沸水浴条件下，,DNA,遇二苯胺会被染成蓝色。所以，表中颜色应该为蓝色，颜色深浅代表,DNA,含量多少。,解析,答案,1,2,3,4,5,第26页,(4)DNA,检测时需在沸水浴中加热目标是,_,，同时说明,DNA,对高温有较强,_,。,加速颜色反应,耐受性,解析,DNA,检测时需在沸水浴中加热目标是加速颜色反应，同时说明,DNA,对高温有较强耐受性。,解析,答案,1,2,3,4,5,第27页,(5),依据试验结果，得出结论并分析。,结论,1,：与,20,相比，相同试验材料在,20,条件下保留，,DNA,提取量较多。,结论,2,：,_,_,。,等质量不一样试验材料，在相同保留温度下，从蒜黄中提取,DNA,量最多,解析,依据试验结果可知：等质量不一样试验材料，在相同保留温度下，从蒜黄中提取,DNA,量最多。,解析,答案,1,2,3,4,5,第28页,针对结论,1,，请提出合理解释：,_,_,。,低温抑制了相关酶活性，,DNA,降,解速度较慢,解析,因为低温抑制了相关酶活性，使,DNA,降解速度减慢，所以与,20,相比，相同试验材料在,20,条件下保留，,DNA,提取量较多。,解析,答案,1,2,3,4,5,第29页,(6),氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和,DNA,均不相溶，且对,DNA,影响极小。为了深入提升,DNA,纯度，依据氯仿特征，在,DNA,粗提取第三步基础上继续操作步骤是：,_,_,，然后用体积分数为,95%,冷酒精溶液使,DNA,析出。,将第三步取得溶液与等量氯仿充分混合，静置一段时间，吸收上清液,解析,氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和,DNA,均不相溶，且对,DNA,影响极小，所认为了深入提升,DNA,纯度，可将第三步取得溶液与等量氯仿充分混合，静置一段时间，吸收上清液，然后用体积分数为,95%,冷酒精溶液使,DNA,析出。,解析,答案,1,2,3,4,5,第30页,