GBT14926.12-2001实验动物嗜肺巴斯德杆菌检测方法国家标准规范.pdf

I C S 6 5.0 2 0.3 0B 4 4荡暴中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准G B/T 1 4 9 2 6G B/T 1 4 9 2 6G B/T 1 4 9 2 6G B/T 1 4 9 2 61 一1 4 9 2 6.6-2 0 0 18-1 4 9 2 6-1 7-2 0 0 1.4 1-2 0 0 1.4 4 一1 4 9 2 6.4 9-2 0 0 1实验动物微生物学检测方法(2)L a b o r a t o r y a n i ma l-Mi c r o b i o l o g i c a l e x a mi n a t i o n me t h o d s2 0 0 1 一 0 8 一 2 9发 布2 0 0 2 一 0 5 一 0 1实施中华人民共和国国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 局发布目录G B/T 1 4 9 2 6.1-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.2-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.3-2 0 0 1 实验 动物G B/T 1 4 9 2 6.4-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.5-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.6-2 0 0 1 实 验动物GB/T 1 4 9 2 6.8-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.9-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 0-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 1-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 2-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 3-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 4-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 5-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 6-2 0 0 1 实验动物G B/T 1 4 9 2 6.1 7-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.4 1-2 0 0 1 实验动物G B/T 1 4 9 2 6.4 4-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.4 5-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.4 6-2 0 0 1 实验动物G B/T 1 4 9 2 6.4 7-2 0 0 1 实验动物G B/T 1 4 9 2 6.4 8-2 0 0 1 实验动物G B/T 1 4 9 2 6.4，一2 0 0 1 实验动物沙门菌检测方法 ，1单核细胞增生性李斯特杆菌检测方法 甲 ，4，5耶尔森菌检测方法 .9皮肤病原真菌检测方法 ，。1 3多杀巴斯德杆菌检测方法.1 7支气管鲍特杆菌检测方法 ，2 1支原体检测方法 。，一2 5鼠棒状杆菌检测方法 “3 0 泰泽病原体检测方法 。3 4大肠埃希菌0 1 1 5 a,c:K(B)检测方法 3 9嗜肺巴斯德杆菌检测方法 4 2肺炎克雷伯杆菌检测方法 ，。，4 6金黄色葡萄球菌检测方法 .5 0肺炎链球菌检测方法 ，5 4乙型溶血性链球菌检测方法 ，甲，1 一，“5 8绿脓杆菌检测方法 6 2无菌动物生活环境及粪便标本的检测方法 ，一6 6念珠状链杆菌检测方法 ，6 9布鲁杆菌检测方法 .7 3钩端螺旋体检测方法.，一 7 8志贺菌检测方 法 ，8 3一结核分枝杆菌检测方法空肠弯曲杆 菌检测 方法GB/T 1 4 9 2 61 2-2 0 0 1前言 本标准是对G B/T 1 4 9 2 6.1 2-1 9 9 4 实验动物 嗜肺巴氏 杆菌检验方 法 的 修订。本标准根据近年来对嗜肺巴斯德杆菌研究结果，对其生物学特性作了部分修改，增加了乙酸铅纸条法检测硫化氢的产生以及血清玻片凝集试验。本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:李红。本标准于1 9 9 4 年 1 月首次发布。中 华 人 民 共 和 国 国 家 标准实验动物嗜肺 巴斯德杆菌检测方法GB/T 1 4 9 2 61 2-2 0 0 1La b o r a t o r y a n i ma l-Me t h o d f o r e x a mi n a t i o n o f Pa s t e u r e l l a p n e u mo t r o p i c a代 替 G B/T 1 4 9 2 6.1 2-1 9 9 4范 围本标准规定了实验动物嗜肺巴斯德杆菌的检测方法。本标准适用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠和兔嗜肺巴斯德杆菌的检测2 引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。G B/T 1 4 9 2 6.4 2-2 0 0 1 实 验动物 细菌学检测 标本采集 G B/T 1 4 9 2 6.4 3-2 0 0 1 实验动物细菌学检测染色法、培养基和试剂3原理 嗜肺巴氏杆菌为革兰阴性小杆菌，主要寄居于啮齿类和兔类的上呼吸道，该菌具有特殊的生化反应，菌体可与相应的免疫血清在玻片上形成肉眼可见的凝集反应，据此可进行该菌的分离培养和检测。4主要设备和材料4.1 普通恒温培养箱。4.2 生 物显微 镜。5 培养基和试剂5 门血琼脂平皿。5-2 双糖铁或三糖铁琼脂。5.3 D H L琼脂平皿。5.4 硝酸盐还原试验培养基。5.5 西蒙氏柠檬酸盐琼脂。5.6 蛋白陈水、靛基质试剂。5.了 尿素培养基。5.8乙酸铅纸条。5.9 氧化酶试剂。5.1 0 过氧化氢酶试剂。5.1 1 嗜肺 巴斯 德杆菌诊断血清。中华人 民共和 国国家质 f监督检验检疫总局 2 0 0 1一 0 8-2 9批准2 0 0 2 一 0 5 一0 1实施GB/T 1 4 9 2 6.1 2-2 0 0 16 检 测程序标本血 琼 脂平 皿菌 落观 察(3 6 士 )1 8 -2 4 h 革兰染色镜检可 疑 菌 落可疑菌体血 琼脂 平 皿(3 6 士1)1 8 -2 4 h纯培养玻片凝集试验口国L琼脂平皿生长情况半固体动力试验生化反应乙或韶1培养基氧化酶过氧化氢酶试验报告7操作步骤了 1 采样 采取呼吸道分泌物或病灶组织或脓汁。7.2 分离培养 将接种的血平皿置(3 6 f1)C 培养 1 8 2 4 h,7.3鉴定7.3.1 菌落特征 血琼脂平皿上(3 6 士1)C培养 1 8 2 4 h可形成 1-2 mm、光滑露滴样或灰白色、不溶血或轻微 a 溶血的菌落纯培养物堆集时呈现黄色，质地似奶油。了3.2 菌体特征 革兰阴性小杆菌，两端钝圆并浓染，在生长初期也可见较细长的杆菌。7.3.3 双糖铁或三糖铁培养基上(3 6 士1)培养 1 8.2 4 h，斜面产酸，底层产酸或不变色，不产气，乙酸铅纸 条法显示硫化氢 阳性。GB/T 1 4 9 2 61 2-2 0 0 17.3.4生化反应 大量接种情况下多数菌株产生靛基质。明胶液化试验阴性。硝酸盐还原试验阳性、尿素酶阳性、过氧化氢酶阳性、氧化酶弱阳性7.3.5 纯培养物接种 D H工 _ 培养基(3 6 士1)培养 2 4 h不生长，延长培养时间在大量接种区可长出极小菌落。半固体动力试验阴性。7.3.6 本菌与多杀巴斯德杆菌和支气管鲍特菌的鉴别见GB/T 1 4 9 2 6.5-2 0 0 1中表 t o7.3.7 血 清玻片凝集试验 阳性。8 结果 报告凡符合上述各项 检测 结果者作出阳性报告，不符合者作出 阴性报告。