实验五-酶的特性.doc

实验五 酶的特性
实验目的
1. 巩固对酶的性质的认识
2. 了解研究酶的性质的一些实验方法
温度对酶活力的影响
实验原理
温度对酶的催化活力有很大的影响。在最适温度下，酶的反应速度最高。在高温情况下，酶因变性而失活，在低温情况下，降低或抑制了酶活力，但酶未失活。
实验试剂及配制
1.0.2%淀粉的0.3%氯化钠溶液150ml
2.稀释50倍的唾液
3.碘化钾-碘溶液50ml
实验器材
试管及试管架；恒温水浴锅；冰块
实验操作
按下表加入试剂
管号 1 2 3
0.2%淀粉（ml） 1.5 1.5 1.5
稀释唾液（ml） 1 1 --
煮沸后的稀释唾液 -- -- 1
（ml）
摇匀
水浴温度 37℃ 0℃ 37℃

各管水浴10min后，各管加碘化钾-碘溶液1滴，观察现象。
PH对酶活力的影响
实验原理
大部分酶的活力受环境PH影响极为显著。不同酶的最适PH值不同。在最适PH下酶活力最高。
实验试剂及配制
1. 新配制的溶于0.3%氯化钠的0.5%淀粉溶液250ml
2. 稀释50倍的新鲜唾液
3. 0.2M磷酸氢二钠溶液600ml
4. 碘化钾-碘溶液50ml
5. PH=5,PH=5.8,PH=6.8,PH=8四种缓冲溶液
实验器材
试管及试管架；吸管；滴管；50ml锥形瓶；恒温水浴锅；点滴板
实验操作
1. 配制四种不同PH的缓冲溶液
锥形瓶编号 0.2M磷酸氢二钠（ml） 0.1M柠檬酸（ml） PH
1 5.15 4.85 5.0
2 6.05 3.95 5.8
3 7.72 2.28 6.8
4 9.72 0.28 8.0
从4个锥形瓶中各取缓冲液3ml，分别注入4支带有号码的试管中，然后于每个试管中添加0.5%淀粉溶液2ml，和稀释50倍的唾液2ml。置于37℃恒温水浴锅中保温，每隔1min由第3号管中取出1滴混合液于点滴板上，加1滴碘化钾-碘溶液，检验淀粉的水解程度。待溶液变为棕黄色时，把所有试管从水浴锅中取出，向各管中加入1-2滴碘化钾-碘溶液，观察各管颜色，分析PH值对酶活力的影响。
唾液淀粉酶的活化和抑制
实验原理
凡能提高酶活力的物质称为酶的活化剂；凡使酶活力下降，但并不引起酶蛋白变性的作用称为酶的抑制剂。
实验试剂及配制
1.0.1%淀粉溶液150ml
2.稀释50倍的唾液
3.1%氯化钠溶液50ml
4.1%硫酸铜溶液50ml
5.1%硫酸钠溶液50m
6.碘化钾-碘溶液100ml
实验器材
恒温水浴锅；试管及试管架
实验操作
按下表加试剂
管号 1 2 3 4
0.1%淀粉溶液（ml） 1.5 1.5 1.5 1.5
稀释唾液（ml） 0.5 0.5 0.5 0.5
1%硫酸铜溶液（ml） 0.5
1%氯化钠溶液（ml） 0.5
1%硫酸钠溶液（ml） 0.5
双蒸水（ml） 0.5
37℃水浴，保温10min
碘化钾-碘溶液（滴） 2-3 2-3 2-3 2-3
现象
思考题
解释第三组实验中4支管的意义。